HPLC-ESI-MS/MS法检测N-氨甲酰谷氨酸的含量

建立了检测样品中N-氨甲酰谷氨酸含量的HPLC-ESI-MS/MS分析方法。采用负离子多反应监测方法（MRM）测试,以碎片离子m/z 147.9和m/z 83.9进行定性,以碎片离子m/z 129.9进行定量。色谱柱为Agilent Zorbx SB-C18（4.6×150 mm,5μm）柱;流动相为乙腈—0.1%甲酸水溶液（5∶95,V/V）;柱温为20℃。结果表明,N-氨甲酰谷氨酸在20.0~500.0 g/L内呈良好的线性关系,相关系数为0.999 8;精密度和准确度等均符合样品检测的要求。建立的方法准确、灵敏、特异性强,适用于样品中N-氨甲酰谷氨酸的含量检测。     

补喂L-精氨酸或N-氨甲酰谷氨酸对伊犁马3600m速度赛赛前赛后血浆中代谢物的影响

本试验旨在探究补喂L-精氨酸或N-氨甲酰谷氨酸对伊犁马3 600 m速度赛赛前赛后血浆中代谢物的影响。选取15匹年龄为2岁、体重[(388.88±23.24) kg]相近、经过严格训练的速度赛用伊犁马,分为3组,每组5匹(3♂+2♀),每日进行等强度训练,对照组补喂123 g/(匹·d) L-丙氨酸,L-精氨酸组补喂60 g/(匹·d) L-精氨酸,N-氨甲酰谷氨酸组补喂12 g/(匹·d) N-氨甲酰谷氨酸和112 g/(匹·d) L-丙氨酸,在试验第28天进行3 600 m速度赛,采集赛前2 h、赛后即刻和赛后2 h血液样品,利用液相色谱-质谱(LC-MS)分析技术测定血浆中代谢物。结果显示:与对照组相比,L-精氨酸组伊犁马赛前2 h血浆柠檬酸、赛后即刻血浆α-酮己二酸、赛后2 h血浆D-葡萄糖-6-磷酸含量显著升高(P0.05),赛后即刻血浆乳酸含量显著降低(P0.05); N-氨甲酰谷氨酸组赛后即刻血浆乳酸含量显著降低(P0.05)。与对照组相比,L-精氨酸组赛前2 h血浆精氨酸、乙酰谷氨酸、谷氨酰脯氨酸含量显著升高(P0.05),血浆谷氨酰胺含量显著降低(P0.05),赛后即刻血浆鸟氨酸、乙酰谷氨酸和脯氨酰胺含量显著升高(P0.05); N-氨甲酰谷氨酸组赛前2 h血浆精氨酸含量显著升高(P0.05)。此外,与对照组相比,L-精氨酸组、N-氨甲酰谷氨酸组赛前2 h血浆亮氨酸、色氨酸、5-羟色氨酸含量显著升高(P0.05)。本试验应用非靶向代谢组学技术,筛选出了补喂L-精氨酸或N-氨甲酰谷氨酸后伊犁马3 600 m速度赛赛前赛后血浆中差异性表达代谢物,揭示出补喂L-精氨酸或N-氨甲酰谷氨酸能够促进伊犁马运动能量代谢,影响氨基酸代谢,促进精氨酸内源性合成和精氨酸向脯氨酸的代谢。     

反相高效液相色谱法测定饲料中喹乙醇的含量

建立了反相高效液相色谱法测定饲料级喹乙醇、预混合饲料和配合饲料中喹乙醇含量的方法。色谱柱为C1 8,1 5 0× 4.6mm ,5 μm ;流动相为甲醇 +水 ( 1 5∶85 ,V/V) ;检测波长为 2 60nm ;柱温为室温。结果表明 :在 0～ 1 83.2 6μg/mL之间呈现良好的线性关系 ,相关系数r2 =1 .0 ;3个不同浓度样品加样回收率分别为 96.1 4%、98.61 %和 99.42 %。本方法简便 ,快速 ,准确度和精密度较高 ,适用于饲料中喹乙醇含量的测定     

微波辅助蛋白质水解-反相高效液相色谱法测定饲料中的色氨酸

为建立微波辅助蛋白质水解-反相高效液相色谱测定饲料中色氨酸的方法 ,实验将样品经微波碱水解后,应用Syncronis C18色谱柱,以0.05 mol/L KH2PO4溶液-乙腈(90∶10,V/V)为流动相进行洗脱,DAD检测器在220 nm处进行检测,外标法定量。结果表明:色氨酸线性关系良好,相关系数为1.0000,回收率为93.0%~95.5%,相对标准偏差为1.26%~2.72%,检出限为0.025 mg/g。该方法操作简便、快速、灵敏度高、重现性好,适用于批量饲料样品中色氨酸含量的测定。     

气相色谱法测定混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量

目的建立气相色谱测定混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量的方法。方法样品采用乙醇提取,以毛细管色谱柱分离,采用氢火焰离子化检测器检测。结果薄荷脑在0.0356~1.780 mg/m L范围内具有良好的线性关系,线性方程为Y=139 286×X-3 452,相关系数R为0.9998,方法的定量限(LOQ)为0.1 g/kg。样品添加回收试验的平均回收率在98.2.8%~99.2%,相对标准偏差(RSD)为1.06%~1.96%(n=6)。结论本方法简便、快速,结果准确、可靠,适用于混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量的测定。     

高效液相色谱法测定饲料中那西肽A

为建立高效液相色谱测定饲料中那西肽A的方法 ,根据饲料样品多样性的特点,采用乙二胺四乙酸二钠溶液和N,N-二甲基甲酰胺超声提取饲料中的那西肽A。采用C18色谱柱,0.02%磷酸溶液+乙腈(60∶40,V/V)为流动相,流速为1.0 mL/min,荧光检测器激发波长为327 nm,发射波长为521 nm。那西肽A在浓度0.02~10μg/mL时线性良好,线性相关系数为0.9999。当添加浓度为0.5~500 mg/kg时,平均回收率为81.6%~95.6%,相对标准偏差(RSD)为1.6%~9.2%。方法的检测限为0.2 mg/kg,定量限为0.5 mg/kg。该方法操作简便、结果准确、稳定性好,应用于实际样品检测,结果满意,表明该方法适用于饲料中那西肽A的测定。     

分散固相萃取-气相色谱-质谱方法快速检测奶牛饲料中的3种除草剂残留

建立了奶牛饲料样品中甲草胺、乙草胺、莠去津3种除草剂的气相色谱-质谱(GC-MS)检测方法,样品经分散固相萃取法处理后,取上清液用安捷伦HP-5气相色谱毛细管柱分离,气相色谱-质谱联用仪进行测定。3 种除草剂在 5~500 μg/kg 内线性关系良好。平均添加回收率为94.5%~115.4%,相对标准偏差(RSD) 为4.4%~9.2%,最低检测限为1.5 μg/kg。本方法前处理操作快速简单,可重复性好,满足国内外对饲料中甲草胺、乙草胺和莠去津的快速、准确的检测要求,适合大量样品的准确定量和定性分析。     

超高效液相色谱―串联质谱法测定饲料中的万古霉素

试验旨在建立饲料中万古霉素的超高效液相色谱—串联质谱检测方法,以0.05 mol/L磷酸盐缓冲液—乙腈(85:15,V/V)提取样品中的万古霉素,提取液经过强阳离子交换固相萃取柱净化,采用液相色谱—串联质谱多反应监测模式进行测定,外标法定量。不同饲料基质中,万古霉素在25~1000 ng/mL浓度范围内呈良好的线性关系。本方法对万古霉素在饲料中的检测限为0.05 mg/kg,定量限为0.1 mg/kg。在不同饲料中添加浓度范围为0.1~100 mg/kg,其平均回收率为86.7%~117.1%,批内变异系数在1.0%~17.4%之间,批间变异系数在2.9%~10.1%之间。本方法分析速度快、灵敏度高、重现性好,各项技术指标均满足国内外相关法规要求,可用于饲料中万古霉素含量的测定。     

高效液相色谱法测定饲料中甲砜霉素含量

建立了测定饲料中甲砜霉素的含量的高效液相色谱检测方法。2g饲料样品,乙酸乙酯提取后蒸干,加入4%氯化钠,正己烷脱脂后乙酸乙酯反提,蒸干,流动相溶解后上机。色谱柱为C18,流动相为甲醇-水(25:75,V/V),检测波长225nm,流速1.2mL/min,柱温室温。在0.1～500μg/mL的质量浓度内甲砜霉素的峰面积与质量浓度呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率超过76%,RSD小于12%。     

N-氨甲酰谷氨酸对三黄鸡养分代谢率、屠宰性能和血清免疫球蛋白含量的影响

本试验旨在研究饲粮中添加N-氨甲酰谷氨酸对三黄鸡养分代谢率、屠宰性能和血清免疫球蛋白含量的影响。选取21日龄体重相近的三黄鸡180只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验1,2,3组分别饲喂N-氨甲酰谷氨酸添加量为0.4%、0.5%、0.6%的试验饲粮。试验期28 d。试验结果表明:(1)N-氨甲酰谷氨酸可以提高粗蛋白质、钙、磷代谢率,其中,添加0.4%、0.5%N-氨甲酰谷氨酸组粗蛋白质代谢率比对照组分别提高6.95%、7.04%(P0.05);添加0.4%、0.5%N-氨甲酰谷氨酸组磷代谢率比对照组分别提高5.38%、2.80%(P0.05)。(2)添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸可以显著提高全净膛重、胸肌率、腿肌率、肝脏和肾脏重量(P0.05)。添加0.4%、0.5%组屠宰重比对照组分别提高9.57%、8.82%(P0.05)。添加0.4%N-氨甲酰谷氨酸组胸肌率、腿肌率、肝脏重量比对照组分别提高13.46%、6.08%、9.81%(P0.05)。(3)添加0.4%、0.6%N-氨甲酰谷氨酸组免疫球蛋白A含量比对照组分别提高17.65%、5.88%(P0.05)。添加0.4%、0.5%N-氨甲酰谷氨酸组免疫球蛋白G含量分别比对照组提高33.96%、28.30%(P0.05)。添加0.4%、0.6%N-氨甲酰谷氨酸组免疫球蛋白M含量比对照组分别提高25%、12.5%(P0.05)。综合上述各项指标可知,N-氨甲酰谷氨酸添加的比例在0.4%时能很好的改善三黄鸡养分代谢率和屠宰性能,增加血清中免疫球蛋白的含量。     

N-氨甲酰谷氨酸对哺乳仔猪生产性能和脏器指标的影响

为了研究N-氨甲酰谷氨酸对哺乳仔猪生产性能和脏器指标的影响,选取6窝7日龄胎次相近、体重(2.63±0.38)kg的"杜×(长×大)"哺乳仔猪,每窝5头,随机分在5个处理组中,每组给予不同量的N-氨甲酰谷氨酸,分别为每千克体重每天添加0(对照组),100,150,200和250 mg。结果表明:灌服100和150 mg/kg的N-氨甲酰谷氨酸能显著提高仔猪体重10.5%和14.6%,提高日增重14.8%和20.1%(P<0.05);而且补充N-氨甲酰谷氨酸能够显著提高脏器指数(P<0.05)。     

高效液相色谱法测定饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量

本实验建立了高效液相色谱法测定饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量的方法。取2 g样品以0.1%盐酸-乙腈沉淀蛋白,8000 r/min高速离心3 min后合并上清液,50℃减压旋转蒸发至干。5 mL 0.1%盐酸-乙腈(90∶10,V/V)溶液溶解后通过混合型阳离子交换柱净化,收集洗脱液于50℃减压旋转蒸发至干,用1 mL 0.1%盐酸-乙腈(90∶10,V/V)溶液溶解后,过0.22μm尼龙过滤膜,上机测定。液相色谱条件为:流动相A为0.1%HCl(pH=2.0),流动相B为乙腈,进行梯度洗脱,色谱柱为十八烷基硅烷键合相,柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测器为二极管阵列检测器,检测波长为210 nm。实验结果表明,该方法在1~100 mg/kg线性关系良好(r0.999),在预混合饲料、浓缩饲料、配合饲料中添加量为1、10、100 mg/kg时方法的准确性(回收率70%)和重现性(RSD10%)好,可用于饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量的检测。     

HPLC法测玉米蛋白粉和乳猪教槽料中色氨酸的含量

试验采用高效液相色谱法测定饲料样品中色氨酸的含量。样品经过处理后,用Agilent C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离样品,以0.008 5 mol/l的乙酸钠+甲醇=95+5为流动相;检测波长280 nm,流动相流速1.0 ml/min。结果表明,色氨酸在4.656~298μg/ml范围内,峰面积与其浓度线性关系良好(r=0.999 9),最低检测限为0.033 5μg/ml,两种饲料中色氨酸含量均在国标允许的误差范围内。方法准确、简便、快速,适用于色氨酸的含量测定。     

饲料中炔雌醚的液相色谱—串联质谱检测方法研究

本研究旨在建立饲料中炔雌醚含量测定的液相色谱—串联质谱检测方法。饲料样品用乙腈提取,C_(18)SPE小柱净化,应用液相色谱—串联质谱仪,选择多反应监测(MRM)、正离子模式进行定性和定量分析。结果表明:炔雌醚在1~400μg/L范围内线性关系良好,检出限为0.01 mg/kg,定量限为0.05 mg/kg;炔雌醚浓度在0.05~20 mg/kg的回收率为67.3%~86.8%,变异系数为1.30%~8.04%。本方法样品前处理简便、可靠,适用于各种饲料中炔雌醚的检测。     

高效液相色谱法测定饲料中苯丙酸诺龙含量的研究

本实验建立了测定饲料中苯丙酸诺龙含量的高效液相色谱检测方法。5.0 g饲料样品经叔丁基甲醚提取后,旋转蒸发至干,5 mL甲醇复溶,冷冻净化除脂后进行HPLC检测分析。以乙腈-水为流动相,采用反相高效液相色谱-紫外检测法进行测定,检测波长为241 nm,流速为1.0 mL/min。结果表明:此条件下,苯丙酸诺龙的线性范围是0.1~25.0 mg/L,回收率为92.3%~101%,方法的检测限为0.1 mg/kg,定量限为0.5 mg/kg。     

正相液相色谱法测定饲料添加剂天然维生素E中的生育酚和生育三烯酚的含量

天然维生素E因具有促进动物生长、提高肉品质等功能,已被逐步用于宠物及畜禽饲养,但行业中尚无规范该类饲料及饲料添加剂产品的标准及检测方法。本研究旨在建立采用正相液相色谱-紫外检测器(NPLC-UV)测定饲料添加剂中8种天然维生素E含量的分析方法。样品经甲醇浸润后,以乙酸乙酯/正己烷(3∶97,V/V)为提取溶剂在室温下进行超声浸提。使用Kromasil 60-5 diol(4.6 mm×150 mm)色谱柱进行分离,正庚烷/四氢呋喃(100∶4,V/V)等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温40℃,紫外检测波长为292 nm。结果表明:生育酚和生育三烯酚含量在0.2～50.0μg/mL时线性关系良好(R2≥0.999 0),方法定量限为0.01%,加样平均回收率为81.3%～109.8%,相对标准偏差(RSD)小于7.9%。通过对实际样品测定,该方法操作简单,结果准确可靠,有助于规范天然维生素E饲料产品市场。     

饲料中抗球虫药物——沙咪珠利的高效液相色谱内标检测法研究

本实验建立了测定饲料中抗球虫新药沙咪珠利含量的高效液相色谱(HPLC)-内标法。以4-硝基邻甲酚为内标物,C18(4.6 nm×250 nm,5μm)柱为分析柱,乙腈-0.2%磷酸水溶液(V/V,40∶60)为流动相。饲料样品经乙腈提取,正己烷除脂,C18柱分离后,在251 nm波长下进行检测,内标法定量。结果表明,在所选择的色谱条件下,空白饲料对沙咪珠利无干扰,沙咪珠利和内标也得到良好的分离;沙咪珠利在1~50 mg/kg添加范围内具有很好的线性关系,定量限为1 mg/kg;此方法日内和日间精密度良好,日内RSD为0.57%~2.17%,日间RSD为0.32%~1.25%。相对回收率为99.43%~102.6%。本法样品前处理简单,方法简便可靠,可用于饲料中沙咪珠利的检测。     

QuEChERS-分散固相萃取-气相色谱-质谱法测定牛乳中喹氧灵残留

建立气相色谱-质谱联用技术测定牛乳中喹氧灵残留量的检测方法。以乙腈作为提取剂,借助分散固相萃取(填料为C18和N-丙基乙二胺)作为净化手段,经Agilent HP-5MS色谱柱分离,通过基质匹配外标法校正定量。结果表明:目标物在0.00~1.00μg/mL范围内线性关系良好,R2>0.998 7,样品基质在3个添加水平(5、10、20μg/kg)下的回收率为83.2%~100.8%,相对标准偏差为2.1%~4.3%,定量限为5μg/kg;该方法步骤简单、可靠、稳定,可以推广应用于牛乳中喹氧灵含量的测定;采用该方法对75个奶户牛乳中喹氧灵含量进行测定,结果均小于国家限量值。     

QuEChERS样品前处理-高效液相色谱法测定饲料中5种磺胺类药物

本实验建立了QuEChERS样品前处理一高效液相色谱法测定饲料中5种磺胺类药物的方法。饲料样品中5种磺胺类药物经乙腈提取,用PSA、C_(18)和无水硫酸钠分散固相萃取方法净化,氮气吹干复溶后,用高效液相色谱一紫外检测器测定。在10~500μg/L的线性范围内,5种磺胺类药物线性相关系数(r~2)均大于0.9990:检测限和定量限分别为0.05 mg/kg和0.1 mg/kg。在0.1~10 mg/kg添加浓度范围内,猪、鸡配合饲料中磺胺类药物平均回收率为76.0%~101%,批内相对标准偏差(RSD)为2.1%~10.1%。该方法条件易于控制,结果准确、重现性好,适用于饲料中5种磺胺类药物的测定。     

HPLC法测定猪体内双氯芬酸的血药浓度

建立猪血浆中双氯芬酸含量的HPLC测定法。猪血浆中双氯芬酸采用正己烷-异丙醇混合溶液(90∶10,V/V)提取,HPLC紫外检测器检测。色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-15g/L乙酸水溶液(80∶20,V/V),测定波长为276nm。外标法定量。结果表明,血浆中杂质不干扰双氯芬酸的测定,双氯芬酸血药浓度在0.025μg/mL~20.0μg/mL范围内线性关系良好(R2=1),最低定量限为0.05μg/mL,高、中、低空白血浆添加样品浓度的日内变异系数和日间变异系数分别小于4%和6%,回收率为85%~97%。结果表明,该方法适用于猪血浆中双氯芬酸含量的测定,可用于含双氯芬酸钠的制剂在猪体内的药物代谢动力学和生物利用度研究。