淫羊藿苷对体外金黄色葡萄球菌感染小鼠巨噬细胞和淋巴细胞的免疫调节效应

为分析淫羊藿苷(ICA)对体外金黄色葡萄球菌感染小鼠巨噬细胞和淋巴细胞的免疫调节效应。制备腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞悬液,用含10%胎牛血清的RPMI-1640(培养基)培养,在培养液中分别加入不同浓度(终浓度为0、1.0、1.8、3.0、4.2和4.8μmol/L)的ICA。经不同时间培养后,感染金黄色葡萄球菌,再培养不同时间,MTT法检测巨噬细胞的吞噬和淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞白细胞介素-2和白细胞介素-10的分泌,流式细胞仪检测淋巴细胞周期。结果表明:ICA能够提高金黄色葡萄球菌感染的巨噬细胞的吞噬能力,促进淋巴细胞的增殖,提高淋巴细胞进入S期的百分率,促进淋巴细胞白细胞介素-2和白细胞介素-10的分泌。结果显示:ICA对金黄色葡萄球菌感染具有免疫调节效应。     

鸡脾水解液对鸡淋巴细胞和巨噬细胞免疫调节的影响

为了定量研究鸡脾水解液对鸡的免疫增强功能,将SPF鸡随机分为4组,按高、中、低剂量分别灌服鸡脾水解液,并设立空白对照组来测定不同剂量鸡脾水解液对鸡T淋巴细胞数量的影响;将SPF鸡随机分为两组,采用鸡脾水解液点眼滴鼻的方式考察其对鸡巨噬细胞吞噬功能的影响。结果表明:鸡脾水解液在持续用药第7天和第14天,所有接种组的T淋巴细胞百分率均显著高于空白对照组,其中高剂量组比对照组高约30百分点,差异极显著(P0.01);停服后第7天,高剂量组T淋巴细胞百分率仍高于对照组约10百分点,差异显著(P0.05)。通过碳廓清试验证实了鸡脾水解液还能明显提高巨噬细胞吞噬指数,试验组在点眼滴鼻鸡脾水解液后第2天和第5天巨噬细胞吞噬指数增长率比对照组分别高36.61百分点和29.54百分点。说明鸡脾水解液具有免疫增强的功能。     

桔梗皂苷D对小鼠巨噬细胞和脾淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

研究探讨桔梗皂苷D对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、腹腔巨噬细胞吞噬及诱导淋巴细胞分泌细胞因子的影响。采用MTT法检测桔梗皂苷D和桔梗皂苷D与脂多糖(LSP)组合对淋巴细胞增殖及金黄色葡萄球菌感染淋巴细胞增殖的影响;ELISA法检测桔梗皂苷D对诱导淋巴细胞γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-6(IL-6)的分泌的影响;MTT法检测桔梗皂苷D对诱导巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌功能的影响。结果显示,桔梗皂苷D在一定质量浓度范围内,均能诱导淋巴细胞的增殖,促进IFN-γ和IL-6的分泌,且呈双向调节;不能协同LSP诱导淋巴细胞的增殖;在金葡菌感染淋巴细胞时桔梗皂苷D能促进淋巴细胞的增殖,但效果低于桔梗皂苷D单药组;能提高巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的功能。桔梗皂苷D能有效促进脾淋巴细胞的增殖和巨噬细胞的吞噬功能,可通过淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-6发挥免疫增强作用。     

辣椒碱体外抗炎活性的研究

试验旨在体外应用脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞建立炎症模型基础上,探讨辣椒碱的体外抗炎活性.选取150只8周龄SPF级Balb/c小鼠,采用细胞增殖-毒性检测法(CCK-8法)检测15、30、60、120和240 mg/L辣椒碱对辣椒碱增殖活力的影响.测定巨噬细胞的吞噬率、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介...     

常山碱对小鼠巨噬细胞功能的影响

探讨常山碱对小鼠腹腔巨噬细胞免疫活性的影响。采用中性红试验和MTT法分别测定常山碱对巨噬细胞吞噬中性红作用及其代谢功能的影响。结果显示,常山碱浓度在0.01-5.00μg/mL对小鼠巨噬细胞吞噬中性红有较好的促进作用(P0.05),对巨噬细胞代谢有显著的促进作用(P0.05)。结果提示,常山碱可以提高小鼠的免疫功能。     

茶树菇多糖对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响

【目的】试验旨在揭示茶树菇多糖(Agrocybe aegerita polysaccharid, AAP)对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响,为阐明AAP的作用机制及其临床应用提供依据。【方法】以小鼠脾脏淋巴细胞为研究对象,用噻唑蓝(MTT)比色法测定AAP对淋巴细胞的安全浓度,以安全浓度进行后续试验;用MTT法检测不同浓度AAP对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响,同时设置细胞、脂多糖(LPS)和植物血凝素(PHA)3个对照组,筛选出对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力较强的浓度,用流式细胞仪检测其对T淋巴细胞亚型CD4⁺/CD3⁺和CD8⁺/CD3⁺比值的影响,利用ELISA法检测其对淋巴细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)含量的影响。【结果】低于1 000μg/mL AAP对小鼠脾脏淋巴细胞不产生毒性作用。与对照组相比,不同浓度AAP均可极显著协同LPS和PHA刺激淋巴细胞增殖(P<0.01);125和250μg/mL AAP可极显著提高...     

桦木酸对小鼠淋巴细胞及巨噬细胞的影响分析

为了研究桦木酸对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞的影响.从白桦树皮中提取桦木醇,经琼斯试剂氧化制备中间产物桦木酮酸后,用硼氢化钠还原合成桦木酸;取6周龄KM小鼠168只,随机分为4组,按0、0.25、0.5和1 mg·kg-1体质量连续灌胃14 d,检测桦木酸对淋巴细胞的增殖,脾和胸腺淋巴细胞亚群以及脾淋巴细胞的溶血空斑数和巨噬细胞的吞噬能力的影响.结果表明,桦木酸能提高小鼠的免疫器官指数,协同促进ConA或LPS诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞或B淋巴细胞的增殖活性,提高胸腺淋巴细胞CD4+百分率,脾淋巴细胞的CD19+百分率以及CD4+/CD8+的百分比;桦木酸增加SRBC免疫小鼠溶血空斑数,还能显著增强腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力.结果提示,桦木酸具有一定的免疫调节作用,对小鼠的细胞免疫、体液免疫功能和非特异免疫有明显的增强作用.     

淫羊藿苷对小鼠巨噬细胞和淋巴细胞免疫功能的影响

为探讨淫羊藿苷对小鼠巨噬细胞和淋巴细胞的免疫功能,体外分离小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞,以淫羊藿苷进行刺激,同时设空白对照组和阳性对照组,采用MTT法检测淫羊藿苷对巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测淫羊藿苷对淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10和IL-12的影响。结果显示,淫羊藿苷能够提高腹腔巨噬细胞的吞噬功能,促进脾淋巴细胞增殖,刺激淋巴细胞细胞因子的分泌。结果表明,淫羊藿苷能够提高小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞的免疫功能。     

林蛙油蛋白胰蛋白酶水解物对小鼠脾淋巴细胞和巨噬细胞功能的影响

用胰蛋白酶水解林蛙油蛋白,并制备不同浓度林蛙油蛋白胰蛋白酶水解物,通过小鼠脾淋巴细胞增殖试验、巨噬细胞吞噬中性红试验和巨噬细胞体外释放NO试验,观测林蛙油蛋白胰蛋白酶水解物对小鼠脾淋巴细胞和巨噬细胞功能的影响。结果显示,不同浓度林蛙油蛋白胰蛋白酶水解物对脾淋巴细胞和巨噬细胞具有明显的免疫促进作用,当该水解物浓度大于100μg/m L时,对淋巴细胞增殖和巨噬细胞杀伤功能的促进效果极显著(P<0.001);当该水解物浓度大于200μg/m L时,对巨噬细胞释放NO的促进效果极显著(P<0.001)。该试验表明林蛙油蛋白的胰蛋白酶水解物可显著提高脾淋巴细胞和巨噬细胞功能(P<0.001),且随着浓度的增加,其作用效果增强。     

体外弓形虫感染小鼠巨噬细胞对其极化的影响

为探索体外弓形虫感染小鼠巨噬细胞对其极化的影响,本研究采用M-CSF诱导分离的小鼠骨髓细胞分化为巨噬细胞,在体外以弓形虫感染骨髓来源的巨噬细胞,分别于感染后0 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h收集细胞和细胞培养液,利用Griess法和Arginase活性试验对i NOS和Arginase-1的酶活性进行检测。通过荧光定量PCR和western blot方法分别从m RNA水平和蛋白水平测定巨噬细胞中i NOS和Arginase-1的表达量。结果显示,弓形虫感染巨噬细胞后细胞中的Arginase-1的m RNA和蛋白含量均显著上调表达,i NOS的m RNA虽有短暂小幅度上调,但蛋白的含量无明显变化。本研究表明弓形虫感染巨噬细胞后能够明显诱导静息状态的巨噬细胞朝向M2型的方向极化,从而改变巨噬细胞的表型和功能。本研究为进一步阐明弓形虫与机体免疫系统相互作用提供了实验依据。     

松针多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫调节作用的研究

本试验旨在研究松针多糖对正常状态及脂多糖(LPS)刺激状态下小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。试验采用不同浓度的松针多糖作用于正常的和经LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞,设空白对照组(加入100μL RPMI-1640培养基)、阳性对照组(加入100μL终浓度为5μg/m L的LPS)、松针多糖组(分别加入100μL 25、50、100、200μg/m L的松针多糖)和LPS+松针多糖组(加入与松针多糖组相同浓度的松针多糖和终浓度为5μg/m L的LPS,液体终体积为200μL)。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,中性红吞噬试验检测巨噬细胞吞噬能力,Griess法检测一氧化氮(NO)的分泌量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测巨噬细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)的分泌量。结果表明:1)对空白对照组相比,各松针多糖组巨噬细胞相对增殖率均显著或极显著提高(P0.05或P0.01),50、100和200μg/m L松针多糖组巨噬细胞中性红吞噬率显著或极显著提高(P0.05或P0.01),各LPS+松针多糖组巨噬细胞中性红吞噬率均极显著提高(P0.01),200μg/m L松针多糖组巨噬细胞NO分泌量极显著提高(P0.01),50、100和200μg/m L松针多糖组巨噬细胞TNF-α和IL-1β分泌量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),50、100和200μg/m L松针多糖组巨噬细胞IL-10分泌量极显著降低(P0.01)。2)与阳性对照组相比,各松针多糖组巨噬细胞相对增殖率均极显著降低(P0.01),100和200μg/m L LPS+松针多糖组巨噬细胞中性红吞噬率极显著升高(P0.01),50、100和200μg/m L LPS+松针多糖组巨噬细胞NO分泌量极显著提高(P0.01),各LPS+松针多糖组巨噬细胞TNF-α分泌量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),50、100和200μg/m L LPS+松针多糖组巨噬细胞IL-1β分泌量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),100和200μg/m L LPS+松针多糖组巨噬细胞IL-10分泌量极显著降低(P0.01)。由此可见,松针多糖通过发挥其促炎作用调节巨噬细胞的免疫功能,进而增强机体抗疾病的能力。     

葎草乙醇提取物对小鼠淋巴细胞转化率和巨噬细胞吞噬功能的影响

为了研究不同剂量的葎草乙醇提取物对小鼠血液淋巴细胞转化率和腹腔巨噬细胞吞噬活性的影响,试验将48只健康昆明小鼠随机分为对照组(灌胃生理盐水),葎草提取物低剂量(100 mg/kg)组、中剂量(200 mg/kg)组及高剂量(300 mg/kg)组,每组3个重复,每个重复4只,低、中、高剂量组小鼠每天分别按体重灌胃葎草提取物100,200,300 mg/kg,每天1次,连续灌胃30 d。肌肉注射植物血细胞凝集素用以检测血液淋巴细胞转化率;腹腔注射鸡红细胞,取腹腔液,检测巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数。结果表明:葎草提取物中剂量组小鼠的淋巴细胞转化率和巨噬细胞吞噬百分率、吞噬指数均极显著高于低剂量组和高剂量组(P0.01)。说明葎草提取物能提高血液淋巴细胞转化率和巨噬细胞吞噬活性,提高机体免疫功能。     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬力和分泌活性的影响

研究灵芝多糖(GLP)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力和分泌活性的影响。40只SPF级ICR成年小鼠,随机分为5组,每组8只,公母各半。分别设为生理盐水组、环磷酰胺(Cy)组(80 mg/kg)、灵芝多糖(GLP)低剂量组(50 mg/kg)、中剂量组(100 mg/kg)、高剂量组(200 mg/kg)。连续灌胃给药7d后,通过称重检测小鼠免疫器官指数,镜检腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬能力,ELISA试剂盒检测血清和腹水中炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α的含量。与生理盐水组相比,Cy组免疫器官指数和小鼠巨噬细胞吞噬能力明显下降,腹水中IL-1、IL-6、TNF-α和血清中IL-6、TNF-α的含量均降低。GLP以浓度梯度依赖性方式促进免疫器官指数上升,增强腹腔巨噬细胞吞噬能力。GLP低、中、高剂量组均能增加腹腔液中IL-1、IL-6、TNF-α的含量,且随GLP浓度增加而逐渐上升。仅有GLP高剂量可增加血清中IL-1、IL-6、TNF-α的含量。GLP可明显促进小鼠免疫器官发育,增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力。此外,其促进小鼠体内炎性细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α的分泌。说明灵芝多糖可通过调节小鼠腹腔巨噬细胞活性,增强机体免疫力。     

甘草酸苷对体外小鼠单核巨噬细胞细胞因子分泌的影响

为研究甘草酸苷(GL)对小鼠单核巨噬细胞细胞因子分泌的影响,本实验以100μg/mL的GL溶液处理小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),培养后收集培养上清,采用ELISA法测定其水平。结果显示,GL能够显著提高培养上清中IFN-α(p<0.01)、IFN-β(p<0.05)和IFN-γ(p<0.01)水平,降低促炎因子IL-1β(p>0.05)、IL-6(p<0.05)、IL-12(p>0.05)和CXCL10(p<0.05)含量,并增加TGF-β的分泌(p>0.05)。这表明,GL可以通过诱导小鼠单核巨噬细胞产生IFN-α、IFN-β和IFN-γ而发挥抗病毒作用,同时能够抑制促炎因子IL-1β、IL-6、IL-12和CXCL10的产生,并促进抑炎因子TGF-β的分泌,从而增强细胞的抗炎能力。本研究为进一步明确GL免疫调控作用机制提供了实验依据。     

银杏叶提取物对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

为分析银杏叶提取物(EGB)对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A(Con A)或脂多糖(LPS)及8、16、32和64μg/m L不同质量浓度的EGB,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌IL-4和IL-12的水平,流式细胞仪检测淋巴细胞的细胞周期和细胞膜表面标志。结果表明:EGB能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,不能与Con A或LPS协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖;能增强IL-4和IL-12的分泌;能提高小鼠脾淋巴细胞CD4~+/CD8~+的比值;能提高脾淋巴细胞周期中细胞进入S期细胞的百分率。结果提示:EGB能增强小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性。     

具核梭杆菌体外对小鼠巨噬细胞超微形态和机能的影响

本研究对具核梭杆菌(F.nucleatum)感染鼠巨噬细胞进行共同培养之后,分别在10个时段采取上清液和巨噬细胞,用ELISA、qRT-PCR法和扫描电镜检测TNF-α、 IL-1α、 IL-6和IL-8细胞因子,并观察巨噬细胞的超微形态变化。结果显示,4种细胞因子均有高水平表达;IL-8在共培养6～72 h呈高水平表达;IL-6和TNF-α表达水平也较高;IL-1从3 h表达,12 h达最高值,48 h后无表达。qRT-PCR检测结果显示,TNF-α的RNA表达呈波浪式,分别于6,60 h各出现1个高峰值;IL-1α和IL-6呈现正态表达,从3 h开始明显表达至60 h达峰值,此后缓慢下降;IL-8从6 h逐渐上升,至72 h仍呈高水平表达。超微形态观察显示,在F.nucleatum感染的前24 h,巨噬细胞呈收缩状,其表面和周围有大量发育良好F.nucleatum,并呈团块状黏附,巨噬细胞逐渐伸出伪足。30 h后F.nucleatum逐渐发育不良,小而细,而巨噬细胞表面粗糙,有许多大小不一的结节,伪足变粗大。48 h巨噬细胞表面出现胞吐孔,少量细小的F.nucleatum仍然黏附于...     

九种中药成分对体外培养小鼠淋巴细胞功能的影响

为进一步探索黄芪多糖等9种中药成分免疫增强活性的作用机理并比较各成分之间免疫增强活性的强弱，在体内试验的基础上，用脾淋巴细胞增殖反应和抗体夹心酶联免疫吸附试验测定了它们对体外培养的小鼠淋巴细胞功能的影响。结果表明，人参皂甙、蜂胶黄酮、黄芪多糖、淫羊藿黄酮、淫羊藿多糖都能显著地直接或协同ConA刺激脾和外周血淋巴细胞增殖，也能显著增加LPS诱导的脾淋巴细胞增殖活性和显著升高体外培养的小鼠脾淋巴细胞产生的IgG水平；当归多糖能协同ConA和LPS的诱导活性，提高小鼠脾淋巴细胞体外培养系统的IgG水平；黄芪皂甙能直接和协同LPS刺激淋巴细胞增殖，板蓝根多糖则仅能促进LPS的诱导活性，蜂胶多糖的作用则均不明显。     

银杏叶复方对脾虚小鼠小肠淋巴细胞体外增殖的影响

为了探究不同浓度的银杏叶复方在脂多糖(LPS)或植物血凝集素(PHA)刺激下对脾虚小鼠小肠淋巴细胞体外增殖的影响,试验用不同浓度的银杏叶复方(200μg/mL、100μg/mL、10μg/mL、1μg/mL、0.1μg/mL)同LPS或PHA刺激小肠淋巴细胞分裂增殖的方法研究对小鼠淋巴细胞体外增殖的影响。结果表明:对于脾虚小鼠小肠B淋巴细胞,以200μg/mL、100μg/mL的浓度刺激效果最佳(P0.05);相比于1μg/mL、0.1μg/mL浓度,浓度为200μg/mL时更有利于正常小鼠小肠B淋巴细胞增殖(P0.05);对于脾虚小鼠小肠T淋巴细胞,以100μg/mL浓度最佳(P0.05),浓度为200μg/mL和100μg/mL时对正常小鼠小肠T淋巴细胞的刺激增殖效果显著(P0.05)。说明银杏叶复方浓度为200μg/mL、100μg/mL时能有效刺激正常和脾虚小鼠的小肠淋巴细胞分裂增殖。     

天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

本试验旨在研究天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响。从正常小鼠分离脾脏淋巴细胞体外培养,在细胞培养体系中分别加入终浓度为50、100、200、400 mg/L天门冬多糖或配合刀豆素(5 mg/L)作用24、487、2 h,以MTT法测定细胞的增殖程度。结果表明,天门冬多糖可显著促进体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞增殖,并与ConA有协同作用。     

黄芪多糖对小鼠脾淋巴细胞蛋白激酶C活性的影响

采用反相离子对高效液相色谱法测定脾淋巴细胞蛋白激酶C（PKC）活力，观察黄芪多糖（APS）体外对小鼠脾淋巴细胞蛋白激酶C活性的影响。结果表明：ASP（100μg/ml）能引起小鼠脾淋巴细胞PCK活性明显升高，提示APS的免疫增强作用与升高脾淋巴细胞蛋白激酶活性有关。