植物乳杆菌HEW-A401发酵工艺研究

为进一步提高1株源于泡菜中植物乳杆菌HEW-A401的发酵活性并降低其发酵成本,在MRS培养基的基础上对其发酵工艺进行优化研究。试验采用单因素试验与正交试验确定植物乳杆菌HEW-A401的优化培养基组成成分,并用该培养基进行发酵条件的优化试验,从而获得植物乳杆菌HEW-A401的优化发酵条件。优化后的培养基组成为玉米浆干粉4.00%、蔗糖2.00%、磷酸氢二钾0.50%、乙酸钠0.30%、柠檬酸二铵0.70%、氯化钙0.10%、硫酸镁0.058%、一水硫酸锰0.025%和吐温-80 0.10%,优化后的发酵条件为接种量4.00%、初始p H 7.0、摇床转速180 r/min、发酵温度37℃和发酵时间12 h。     

猪源益生枯草芽孢杆菌的分离鉴定及培养条件优化

采集健康仔猪肠道,从空肠黏膜分离到23株对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有拮抗作用的芽孢杆菌,复筛获得5株拮抗活性较高者;从中筛选出可耐受胆盐、人工胃液和肠液的菌株JN-16,分子生物学和部分生化试验鉴定结果表明:该菌为枯草芽孢杆菌。对菌株JN-16进行抑菌培养条件优化,结果表明,以葡萄糖为碳源、大豆蛋白胨为氮源、pH为6.5的培养基在33℃或37℃下,培养24 h时,发酵液的抑菌效果最强。该菌株可用作饲料添加剂,为微生态制剂的研发奠定了基础。     

猪源性益生芽孢杆菌的筛分与鉴定

饲用微生物作为一类新型饲料添加剂,由于其可以平衡动物的肠道菌群,提高机体免疫力,提高饲料的利用率,提高生产性能等优点开始被广泛接受。目前,常用的益生素主要有乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌和光合细菌4大类。市场上,芽孢杆菌因其具备可逆性强的生物特性成为研究和应用的热点。因此,从动物肠道分离筛选益生菌,开发研究     

猪源嗜酸乳杆菌的分离鉴定及益生特性研究

为丰富猪源益生菌资源,研制品质更好及效果更强的猪用微生态制剂,研究从健康仔猪粪便中分离获得9个菌株,通过对菌株形态及生理生化特征得到2株疑似嗜酸乳杆菌菌株,分别命名为L102和L106,通过16S rDNA分析表明,菌株L102和L106均为嗜酸乳杆菌;并对2株菌的益生特性进行研究,结果表明,2株菌均有较强的抑菌能力,菌株L102对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门菌的抑菌圈直径均超过22 mm,菌株L106的抑菌圈直径则超过15 mm。但2株菌对酸及胆盐的耐受性一般,用p H 3.0液体培养基处理2 h,菌株L102存活率为77.40%,菌株L106存活率为59.20%;胆盐质量分数为0.30%时,菌株L102存活率为28.20%,菌株L106存活率为18.70%。     

鸡源乳杆菌的分离鉴定及其益生特性研究

利用选择性培养、革兰氏染色、芽孢染色、糖发酵试验、经典生理生化试验、耐酸和耐胆盐试验等方法,成功地从健康鸡的肠道中分离、鉴定并筛选出1株耐酸和耐胆盐能力较强的乳杆菌,命名为乳杆菌L3株。采用雏鸡安全性试验和肠黏液糖蛋白黏附性试验对乳杆菌L3株的安全性和黏附能力进行检测,证明所筛选的乳杆菌不仅对酸和胆盐的耐受性较好,且具有良好的安全性和肠道黏附能力。     

一株猪源乳杆菌的分离鉴定

从猪小肠中分离得到一株乳杆菌,对其进行生理生化鉴定、16S r DNA基因测序和同源性分析。分析结果显示,该菌株的菌落有溶钙圈,白色圆形,边缘光滑,无鞭毛,无荚膜,无芽孢的革兰氏阳性杆菌,16SrDNA序列与NCBI公布的约氏乳杆菌Lactobacillus gasseri的同源性为98.7%,将该菌株鉴定为格氏乳杆菌。     

猪源益生芽孢杆菌的分离鉴定与生物学特性分析

本研究旨在从健康猪肠道正常菌群中筛选出性能良好的芽孢杆菌,以用于提高饲料利用率、减少猪消化道感染及减少感染后抗生素的使用。本研究精选重庆偏远山区从未添食配合饲料且生产性能优良的经产母猪,从其新鲜粪便中分离耐酸、耐胆盐的芽孢杆菌,进一步筛选能同时产淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶的菌株,最后进行生化鉴定和基于16S r DNA序列的分子鉴定。结果表明,试验共筛选出7株能同时分泌淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶的芽孢杆菌,它们在p H3.0条件下处理2 h存活率为30%~90%,在0.5%胆盐中处理2 h存活率为40%~100%。经生化鉴定与分子鉴定为1株嗜热脂肪芽孢杆菌,1株地衣芽孢杆菌,5株枯草芽孢杆菌。由结果可知,本研究筛选的7株芽孢杆菌能耐受低p H和高胆盐环境,且具备同时分泌淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶3种胞外酶的能力。     

植物乳杆菌FJR分离鉴定及益生特性研究

试验旨在从野生海鲈鱼肠道分离筛选具有益生功能的乳酸菌,重点考察其降糖益生特性。从野生海鲈鱼样品中共分离到15株乳酸菌,通过评价其产酸、抑菌和还原糖利用能力,筛选出1株植物乳杆菌FJR（保藏号CGMCC No.23798）。该菌株产酸能力强,对嗜水气单孢菌、副溶血弧菌等病原菌均有显著抑制效果,且可以快速利用还原糖。利用对糖特别敏感的大口黑鲈作为研究对象,评价植物乳杆菌FJR的降糖效果。试验选用150尾体重（150±5）g的大口黑鲈,随机分为2个处理,每个处理3个重复,每个重复25尾,对照组饲喂基础饲料,试验组在基础饲粮中添加1.0×106 CFU/g植物乳杆菌FJR。在投喂饲料后0、1、2、3 h,取肠道内容物和血液,测定还原糖和血糖含量。结果表明：饲喂植物乳杆菌FJR后,大口黑鲈肠道还原糖和血糖含量均低于对照组（P<0.05）,证明植物乳杆菌能够能调节大口黑鲈糖代谢。     

猪源罗伊氏乳杆菌GL001的分离与益生特性研究

为了给猪源益生菌制剂的研究与开发提供更多理论依据,从小型巴马猪粪便中分离获得罗伊氏乳杆菌GL001,对该分离菌株的生长特性、产酸性能、模拟胃肠道环境下的耐受能力、药物敏感性及动物安全性进行检测。结果显示：罗伊氏乳杆菌GL001能迅速进入对数生长期,在16 h达到最高生长点后,pH值也相应变平稳;罗伊氏乳杆菌GL001在模拟的胃液环境中,1.5 h的存活率为93.84%,3 h后为88.41%;对0.3%的胆盐环境耐受性强;罗伊氏乳杆菌GL001对阿莫西林、链霉素、多西环素、氧氟沙星敏感,但对青霉素不敏感;细菌的上清液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抑制作用;大鼠安全性试验表明,分离的罗伊氏乳杆菌GL001对雌鼠、雄鼠的生长和脏器指数均无影响,大鼠脏器没有细菌异位情况。研究表明,分离得到的罗伊氏乳杆菌GL001可作为潜在饲用益生菌进一步研究。     

四株猪源乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

本试验旨在筛选优质猪源乳杆菌,为养猪生产过程中微生态制剂的开发奠定基础。通过16S r RNA分析鉴定,本试验从健康成年猪粪中成功分离出四株猪源乳杆菌,并对这四株菌的生长性能、生理生化特性、耐酸、耐高温、耐胆盐和耐药性进行了综合测试。结果表明：ZLgz1227具有最优的综合性能,其耐胆盐性能最强,过胃存活率分别高于其他三种菌株110.56%、44.3%、4.98%。研究表明这四株菌都有制成益生菌制剂的潜能,为实际生产提供一些后备益生菌菌株参考。     

猪源益生芽孢杆菌抑制大肠杆菌的研究

采用平板纸片法、打孔法、菌落计数法对分离筛选的3株芽孢杆菌分别测定其菌体、代谢产物及培养菌液对不同血清型大肠杆菌的抑制作用。结果表明:含芽孢杆菌菌体及代谢产物的培养菌液抑菌作用更明显;大肠杆菌接种在不同浓度的芽孢杆菌培养菌液18 h后均被完全抑制不能生长,接种在代谢产物8 h内其生长数量逐渐减少,但至18 h后不受抑制其生长更旺盛;3株芽孢杆菌中以MA2株抑菌效果最好,不同血清型大肠杆菌中以K88株被抑制作用最明显。     

猪源枯草芽孢杆菌HEW-B113的鉴定及发酵工艺优化

研究从猪肠道中获得一株疑似枯草芽孢杆菌,通过形态特征、生理生化鉴定和16S r DNA分子鉴定确定其为枯草芽孢杆菌,并采用液体发酵法,以发酵液中活菌数和芽孢数为指标,通过单因素试验和正交试验对枯草芽孢杆菌HEW-B113的培养基和发酵条件进行优化。确定其最佳培养基配方为玉米淀粉2%、葡萄糖1%、豆粉1%、硫酸锰0.2%和硫酸铁0.15%;最佳发酵条件为初始p H 7.1、接种量0.8%、发酵摇瓶装液量100 m L/500 m L、转速200 r/min、发酵温度35℃及发酵时间40 h。采用枯草芽孢杆菌的最优发酵工艺可以降低成本,提高质量,为枯草芽孢杆菌的扩大化生产提供理论依据。     

唾液乳杆菌发酵条件的研究

为了获得活菌数高的唾液乳杆菌,使其在临床应用中更好地发挥功效,试验采用单因素试验及响应面法对来自中国微生物菌种保藏中心的一株唾液乳杆菌的培养基配方及发酵条件进行研究。结果表明:优化后的培养基配方为葡萄糖13.60 g/L、蛋白胨20.90 g/L、酵母粉6 g/L、磷酸氢二钾2.0 g/L、乙酸钠8.80 g/L、硫酸镁0.6 g/L、硫酸锰0.07 g/L;发酵条件为p H值6.5、接种量3%,于37℃条件下静置培养24 h;发酵条件优化后活菌数提高近4.0×109cfu/m L,且到达稳定期的时间提前3 h。说明发酵条件优化后得到的唾液乳杆菌不仅活菌数高,而且提高了生产效益和降低了生产成本。     

鸡源卷曲乳杆菌Y68的分离鉴定及其体外益生特性评估

本试验旨在筛选研制畜禽微生态制剂——乳酸菌,探究卷曲乳杆菌Y68的益生特性。通过抑菌能力筛查、生长曲线测定、产酸性能、药敏试验、体外模拟胃肠道条件耐受试验、自凝集试验以及疏水性试验,评估了其益生特性。结果表明：卷曲乳杆菌Y68对鸡白痢沙门氏菌ATCC19945、金黄色葡萄球菌USA300均有较强的抑制作用,抑菌圈直径分别为（21.64±0.31） mm、（15.13±0.23） mm;卷曲乳杆菌Y68对数生长期为6～24 h;经培养48 h后菌液pH稳定在3.89;卷曲乳杆菌Y68对红霉素、青霉素、头孢菌素、氯霉素、万古霉素、克林霉素较为敏感,对诺氟沙星、氧氟沙星、四环素、庆大霉素、呋喃唑酮表现出耐药;卷曲乳杆菌Y68在pH 2.0环境下孵育3 h存活率为52.61%,在人工胃液环境下3 h存活率为65.92%,在人工肠液环境下10 h时存活率仍为86.23%,能够耐受0.3%的胆盐环境;卷曲乳杆菌Y68自聚集率在2、24 h时分别为（29.71±0.40）%、（97.23±0.76）%,疏水率为（89.59±0.63）%。综上所述,卷曲乳杆菌Y68具有较强的产酸能力、抑菌能力,对模拟...     

自然发酵泡菜汁中植物乳杆菌的分离鉴定与体外益生特性研究

利用MRS固体培养基从自然发酵的泡菜汁中分离到1株优势乳酸菌,将其命名为菌株R1,经16S rRNA基因序列分析,并结合生理生化特性和糖发酵试验将其鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。菌株R1具有很强的产酸能力,24 h内可使MRS液体培养基p H从6.14降为3.59。菌株R1的发酵上清液对痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鸡肠炎沙门氏菌、大肠埃希氏菌均有很好的抑制作用。体外益生试验表明,菌株R1能耐受0.3%的胆盐、p H 3.0的酸度以及60℃、30 min的热处理,对人工胃液和人工肠液也有很好的耐受性。菌株R1对头孢类和青霉素类抗生素较敏感,对诺氟沙星、卡那霉素、链霉素等抗生素不敏感。     

一株鸡源植物乳杆菌益生性能的评价

为评价一株来源于鸡肠道内容物的植物乳杆菌DK106的益生性能,试验测定了该菌株的生长特点、抗逆性、药物敏感性、抗氧化能力和黏附性等。结果显示,该菌株在14?h进入生长稳定期|能耐受0.3%胆盐浓度|对氟苯尼考、头孢噻肟、头孢曲松和林可霉素敏感|DPPH自由基清除率高达90.79%|该菌株经二甲苯处理30?min后,其表面疏水率高达97.40%|自凝聚率在第5小时可达68.80%|与大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌的第2小时共凝聚率分别达到20.59%、16.37%和55.32%。综上所述,植物乳杆菌DK106具有良好的益生性能,可作为家禽微生物饲料添加剂的菌株来源。[关键词]鸡|植物乳杆菌|益生性能     

猪源空肠弯曲杆菌的分离及鉴定

为了研究更快、更加准确分离空肠弯曲杆菌的方法,试验同时采用常规生化法对由12份猪盲肠内容物中分离的可疑菌进行检测,得到了6个阳性样品,经特异性PCR检测,2个样品可定性为空肠弯曲杆菌,检测时间为7 d;而对所得菌株直接进行PCR检测,检测结果相同,检测时间为2 d。结果表明:PCR可以快速、特异性地检测空肠弯曲杆菌,与常规生化检测法相比是一种更有效的方法。     

猪源益生肠球菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为了找到益生优势菌,扩大微生态制剂菌群资源,试验以获得的猪源益生肠球菌为研究对象,采用微量发酵管进行生化鉴定,PCR扩增法进行分子生物学检测,琼脂扩散法进行药敏试验和体外抑制试验,饮水法进行动物保护试验,对猪源益生肠球菌进行了筛选。结果表明:分离出的6株菌ZDC1-80、Z2-80-R2、Z3-90-R1、Z2-90-R2、Z3-100-R1、Z3-100-R2均为有明显溶钙圈的革兰氏阳性球杆菌,除了棉籽糖,分离菌对大多数糖类都能发酵分解,1%马尿酸钠试验为阴性;分离菌在1 437 bp处出现目的条带,与肠球菌同源性最高,其中ZDC1-80、Z2-80-R2与希拉肠球菌同源性最高,Z3-90-R1、Z2-90-R2、Z3-100-R1、Z3-100-R2与粪肠球菌同源性最高;分离菌对阿莫西林等抗生素高度敏感,对诺氟沙星中等敏感,对链霉素等抗生素耐药;分离菌代谢物对病原指示菌均有抑制作用,对肠道病原菌抑制作用尤为显著;经过3周的观察,试验小鼠的生长状况良好。说明分离获得的猪源益生肠球菌具有广谱抗菌作用,其中Z3-100-R2的抑菌效果最强,可作为益生菌候选优势菌,与链霉素、克林霉素等配合用药,以减少抗生素的使用。     

狐源罗伊氏乳杆菌ZJF036益生特性研究

本试验旨在研究狐源罗伊氏乳杆菌ZJF036发酵特性、黏附能力及动物安全性,探究罗伊氏乳杆菌ZJF036的益生特性。试验检测了罗伊氏乳杆菌ZJF036的生长特性、产酸性能、药物敏感性,对人工胃液、人工肠液和胆盐的耐受性,细菌的疏水率和自凝聚率,对狐狸小肠上皮细胞的黏附能力以及对小鼠血液生理生化指标的影响。结果表明:罗伊氏乳杆菌ZJF036培养4～10 h进入对数生长期;培养菌液的最低pH为3.80;罗伊氏乳杆菌ZJF036对麦迪霉素、头孢曲松和素氯霉敏感,对万古霉素、环丙沙星、丁胺卡那和氨苄西林不敏感;细菌培养上清液对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌有良好的抑菌作用;罗伊氏乳杆菌ZJF036在人工胃液和人工肠液中3 h存活率可达90%以上,能够耐受0.4%的胆盐环境;罗伊氏乳杆菌ZJF036的疏水率为82.27%,在2和4 h自凝聚率分别为32.47%和41.70%;罗伊氏乳杆菌ZJF036对狐狸小肠上皮细胞的黏附数为(77.0±8.0) CFU/细胞,明显高于鸡源鼠李糖乳杆菌GG;此外,小鼠安全性试验表明,血液生理生化指标均未见异常。综上所述,罗伊氏乳杆菌ZJF036生长迅速,具有良好产酸性能和抑菌能力,可以耐受人工胃液、人工肠液和胆盐,对狐狸小肠上皮细胞具有很强的黏附能力,对小鼠安全可靠。罗伊氏乳杆菌ZJF036可作为犬科动物益生菌制剂的备选菌株。