大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的克隆、表达及性质

为探究大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)的性质,实验采用生物信息学方法对大黄鱼MBSP进行基因检索与筛选,通过分子克隆得到大黄鱼MBSP编码区全长cDNA并构建毕赤酵母表达系统得到重组蛋白质(Lc-rMBSP),分析Lc-rMBSP的酶学性质和二级结构并通过同源建模分析Lc-MBSP的三级结构。结果显示,大黄鱼肌原纤维蛋白中存在MBSP,在55°C下活性最高。大黄鱼基因组中注释为类胰蛋白酶的基因有16条,对这些基因与淡水鱼MBSP进行系统进化树分析和多序列比对,得到同源性较高的基因序列(Lc-MBSP)。Lc-MBSP编码区全长735 bp,共编码244个氨基酸残基。通过毕赤酵母重组表达,分离纯化得到分子量约28 ku的重组蛋白质Lc-rMBSP。表达蛋白的最适温度和pH分别为50°C和8.0。圆二色谱分析表明,温度对Lc-rMBSP二级结构具有较大的影响。Lc-rMBSP在较宽的温度范围内(40～60°C)对MHC具有较高的水解活性。Lc-rMBSP的最适底物为Boc-Leu-Lys-Arg-MCA,并且特异性切割羧基侧的精氨酸残基,而不分解赖氨酸残基。通过同源建模得到Lc...     

超低温冷冻对俄罗斯鲟精子形态结构的影响

选取6 ind健康的雄性俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti),经人工催产后获得成熟的精子,运用扫描电镜和透射电镜,观察了超低温冷冻前后精子的形态结构。结果显示,经过超低温冷冻后精子形态结构发生了较大变化,其中冻精顶体长度、头中部宽度及中段宽度与鲜精相比显著增加(P0.05);中段长度及后外侧延伸物与鲜精相比显著减少(P0.05)。冻后有38.6%的精子在形态结构上受到不同程度的损伤。精子的结构损伤主要表现在精子顶体不明显或与核发生糅合,后外侧延伸物消失,甚至顶体脱落;精子核膜皱褶,泡状化,膜与核之间空隙加大,有的部分甚至出现膜断裂,核内内切沟模糊;精子中段发生膨大和变形,线粒体外膜破损,线粒体条状嵴结构弥散,线粒体脱落;鞭毛外鳍褶与鞭毛脱离,鞭毛与中段脱离,少数鞭毛在中段断开。结果表明,超低温冷冻对精子的损伤主要集中在膜系统,中心粒等微管系统基本完好。     

稀土元素铈对大黄鱼胚胎发育的影响

试验结果表明:稀土元素铈的质量浓度为1.1～1.4 mg/L,最适宜大黄鱼孵化.铈质量浓度为1.1 mg/L时发育时间最短,为24.30 h;铈质量浓度为1.4 mg/L时,孵化率最高,平均达86.08%,比对照组提高18.60%.     

杭州市冷冻鲳鱼、带鱼价格走高两成

近日,杭州市市场上的带鱼和鲳鱼的价格贵了,带鱼的价格为16～25元/千克,鲳鱼的价格为30～40元/千克,相比以前贵了不少。据市场一水产老板表示,虽然每年夏季海产品     

盐度对大黄鱼成活、生长和耳石金属元素的影响

为解决大黄鱼（Larimichthys crocea）面临着海水养殖病虫害感染加剧、海岸带土地局限性和水环境污染等问题,最终实现内陆工厂化低盐养殖,采用缓慢降盐法,将大黄鱼在室内不同盐度中养殖,研究不同盐度对大黄鱼成活率与温度、生长性能和耳石金属元素组成的变化的影响。试验周期6个月（180 d）,每个试验组设置3个重复,每组2万尾;海水盐度由24直接降至8,再以日均2的幅度将盐度降至6和4,然后以日均1的幅度继续将盐度降至2,最终将大黄鱼养殖在盐度分别为2、4、6、8、24的环境中;每天投喂2次颗粒饲料,每次投喂量为鱼体重的2%～5%,并视摄食情况酌情调整。结果显示,大黄鱼室内养殖成活率随着水温的升高而降低,水温28℃时,盐度24的海水养殖组全部死亡,水温30℃时,盐度2养殖组成活率（68.8±2.89）%极显著高于其他养殖组（P<0.01）;低盐养殖组的质量绝对增加率、绝对增长率、增积量和肥满度等生长指标在后期均优于盐度24养殖组;耳石金属元素锰（Mn）、钙（Ca）和锶（Sr）及Sr/Ca与盐度呈现正相关关系（P<0.05）,而Fe、Co和Ba元素变化者没有规律性。     

共轭亚油酸对大黄鱼免疫功能的影响

1 500尾大黄鱼(Pseudosciaena crocea)随机分为5个处理,分别饲喂冰鲜鱼(D1组)、添加5%鱼油日粮(D2组)、共轭亚油酸(CLA)水平为1%(D3组)、2%(D4组)、4%(D5组)日粮.饲喂10周后,通过测定脾脏重、脾体指数、溶菌酶、补体C3、C4、免疫球蛋白IgM浓度等免疫指标,研究不同水平CLA日粮对大黄鱼免疫功能的影响.结果表明,在大黄鱼日粮中添加CLA可以影响其免疫器官-脾脏,添加CLA组使得大黄鱼脾体指数高于未添加CLA的对照组.虽然日粮中添加CLA对于补体C3、C4没有显著影响,但是对于溶菌酶和免疫球蛋白IgM有明显的影响.在大黄鱼日粮中添加CLA可以在一定程度上改善大黄鱼的免疫性能,对于其抗细菌、抗病毒能力有一定提高.     

三倍体大黄鱼的诱导及其对生长、性腺发育的影响

自20世纪50年代以来,采用染色体操作技术人工诱导多倍体在鱼类遗传育种领域已得到广泛的应用。国内外已先后在三棘刺鱼[1]、鲤[2]、水晶彩鲫[3]等30多种鱼类成功获得三倍体。在理论上,由于三倍体性腺发育受阻,其用于性腺发育的能量可全部用于生长。因此鱼类育种学家期望通过诱导三倍体,使经济鱼类生长更快,经济效益更高。但历经30余年的研究,诸家看法仍未统一。一些学者认为三倍体鱼比二倍体生长快[4,5],另一些学者则认为三倍体鱼并不比二倍体生长快[6,7]还有一些学者的研究表明三倍体鱼在性成熟以后比二倍体生长稍快[8,9]。对于三倍体…     

－18℃冷冻条件下中国对虾肌细胞线粒体超微结构的变化

通过对冷冻（－１８℃）条件下保存４００ｄ的中国对虾肌细胞线粒体超微结构变化的透射电镜观察，结果表明：内嵴肿胀，外膜破裂、溶解，线粒体变形膨胀，严重者解体，其中外膜破坏快于内嵴。肌细胞线粒体的变化可分为３个时期（初冻期、稳定期和解体期）。     

环境因子对大黄鱼精子活力的影响

通过观测精子的激活率、活动时间和寿命研究了几种环境因子的变化对养殖大黄鱼精子活力的影响。试验结果表明:精子平均密度为(1.17±0.09)×1010.ml-1,盐度对大黄鱼精子活力影响较大。当海水盐度适宜(19.61~24.87)时,精子的激活率≥90%,活动时间≥9.65 min,寿命≥13.50 min;在pH=4.0~10.0的海水中,精子都能被正常激活(≥70%),适宜的pH值为7.5~8.0;不同浓度的葡萄糖、NaCl和KCl溶液对精子活力的影响不同,不同浓度的EDTA-2Na溶液均不能激活精子;无Ca2 、Mg2 或HCO3-的人工海水对精子的激活率均高达90%,但精子的活动时间却有较大幅度的缩减。     

超低温冷冻保存对大黄鱼精子酶活性的影响

研究超低温(-196℃)冷冻保存对大黄鱼(Pseudosiaena crocea)精子内总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)等酶活性的影响。运用试剂盒分别测定了冷冻前后大黄鱼精子内酶活性的变化。结果表明,经过超低温冷冻保存后,大黄鱼精子的活力下降,精子内GR活性从(4.42±0.29)U·L-1增加到(58.93±2.26)U·L-1(P<0.05);其它几种酶的活性均显著下降(P<0.05),总ATP酶、CK、SDH的活性分别从冻前的(60.16±5.88)U·mL-1、(11.91±0.76)U·mL-1和(51±2.16)U·mL-1下降到(3.54±0.37)U·mL-1、(10.22±0.32)U·mL-1和(31.5±2.08)U·mL-1;LDH、SOD和CAT活性从冻前的(7 806.44±110.11)U·L-1、(42.65±1.56)U·mL-1和(119.91±8.10)U·mL-1下降到(2 654.13±70.06)U·L-1、(31.99±1.57)U·mL-1和(55.87±2.32)U·mL-1。超低温冷冻保存对大黄鱼精子活力和精子酶活性均有显著影响。     

超低温冷冻对西伯利亚鲟精子形态结构损伤的观察

为改进西伯利亚鲟精子超低温冷冻保存技术,探讨精子损伤机制,应用扫描和透射电子显微镜,观察了西伯利亚鲟鲜精与冷冻后精子的形态结构.结果显示,经过冷冻保存后精子的形态发生了很大变化.精子顶体长、精子头中部宽、头中部宽与前部宽比值及中段宽与鲜精相比显著增加(P<0.05);中段长度、后外侧延伸物长度比鲜精显著变短(P<0.05).精子经过冷冻后有30.5%的精子在形态、结构上受到不同程度损伤,受损精子显微结构表现为顶体后外侧延伸物与核糅合,顶体内容物丢失;核膜囊泡化、核膜断裂,核内出现空泡;线粒体内嵴弥散,线粒体脱落;鞭毛外膜松弛与鞭毛脱离等.部分受损伤精子出现顶体丢失,中段脱落,鞭毛自中段基部断裂的现象.精子损伤主要集中在膜系统,中心粒等微管系统基本完好.     

温度对海捕野生大黄鱼精子活力的影响

给7尾体质量325~520g的成熟海捕野生大黄鱼人工催产后采精液,在20℃(室温)和4℃(冰箱)下保存0、1、3、6、12、24、36h,以砂滤海水为激活剂,观察大黄鱼精子活力,以精子的激烈运动、摇尾运动、缓慢运动和寿命作为评价指标。试验结果表明,4℃和20℃下随保存时间的延长,精子活力逐渐减弱;4℃下保存24h、20℃下保存12h,精子仍具有激烈运动的能力;4℃下保存的3个运动阶段和寿命较20℃下均有所延长,4℃保存大黄鱼精子更佳。     

低盐度驯化对大黄鱼和黑鲷存活的影响

对大黄鱼和黑鲷在低盐度的海水中存活状态进行了观察和研究。结果表明:在盐度小于1%的试验组中大黄鱼刚开始反应比较激烈,而后趋于平静;各个盐度浓度组中黑鲷则没有明显的应激反应。盐度对大黄鱼和黑鲷的48 h LC50分别为0.25%和0.07%,说明低盐度对大黄鱼和黑鲷存活的影响并不明显。     

不同养殖模式对大黄鱼肉质的影响

对工厂化养殖模式、网箱养殖模式养殖的大黄鱼和野生大黄鱼进行了肌肉常规营养成分、氨基酸和脂肪酸的分析比较。研究结果表明,工厂化养殖模式和网箱养殖模式的大黄鱼粗蛋白含量均显著低于野生大黄鱼(P0.05),粗脂肪含量均显著高于野生大黄鱼(P0.05)。工厂化养殖模式的大黄鱼必需氨基酸总量、呈味氨基酸总量和氨基酸总量均显著高于网箱养殖大黄鱼,但显著低于野生大黄鱼(P0.05)。工厂化养殖模式的大黄鱼多不饱和脂肪酸以及二十碳五烯酸+二十二碳六烯酸均显著高于网箱养殖的而显著低于野生大黄鱼(P0.05)。工厂化养殖模式养殖大黄鱼可以生产出肉质营养结构和风味优于传统网箱养殖的大黄鱼。     

电解水预处理对冷藏大黄鱼品质变化的影响

为探究电解水预处理对冷藏大黄鱼品质变化的影响,实验利用有效氯浓度分别为50、100和200 mg/L的电解水和1%NaCl溶液浸泡处理新鲜大黄鱼,考察其在4°C冷藏过程中的菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)值、ATP关联化合物含量、pH值、硬度、色泽、滋味和气味的变化。结果显示,伴随冷藏时间的延长,对照组鱼肉的菌落总数、TVB-N值、HxR含量、Hx含量、K值和pH值逐渐增加,而电解水处理抑制了这些品质指标的增加,抑制效果与有效氯浓度成正比。在同一冷藏时间下,鱼肉的黄度b*值随有效氯浓度的增加而增加。贮藏过程中,对照组鱼肉的苦味、苦味回味和丰富性逐渐增加,鲜味、咸味和甜味逐渐降低,而电解水处理组鱼肉的苦味回味和咸味均高于对照组。有效氯浓度为200mg/L的电解水预处理能减少鱼肉在冷藏4～10 d期间的挥发性气味,但在冷藏16 d后反而高于对照组。研究表明,电解水处理能有效延缓冷藏大黄鱼的品质变化,但当电解水的有效氯浓度较高时会导致鱼肉色泽变黄和腐败后的挥发性气味增加。研究结果为电解水在大黄鱼保鲜中的应用及其有效氯浓度的选择提供了理论参考。     

核苷酸对大黄鱼生长性能、肠道形态和抗氧化能力的影响

为探究饲料中添加核苷酸对大黄鱼生长性能、肠道形态和抗氧化能力的影响,实验选取初始体质量为(7.71±0.02)g的大黄鱼幼鱼为研究对象,设置2个对照组,即高鱼粉对照组FM(鱼粉含量为45.0%)和低鱼粉对照组N0(鱼粉含量为31.5%),在低鱼粉对照组基础上分别添加0、75、150、300、600和1 000 mg/kg的核苷酸,共配制出7种等氮等脂饲料,在海水浮式网箱中进行为期63 d的养殖实验。结果表明:饲料中添加核苷酸对大黄鱼的存活率、饲料效率、摄食率、鱼体组成和形体指标没有显著影响(P0.05);但增重率随着核苷酸添加量的增加呈先升高后下降趋势,在添加量为300~600 mg/kg时显著高于其他处理组(P0.05)。随着核苷酸添加量的增加,血清中超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化力(T-AOC)的活力呈先升高后下降的趋势,并在300 mg/kg时显著高于低鱼粉对照组(P0.05)。核苷酸对大黄鱼肠道肌肉层厚度和微绒毛高度有显著影响(P0.05),分别在添加量为150和300mg/kg时出现最大值;而对肠道褶皱高度无显著影响(P0.05)。结果表明,饲料中添加核苷酸能促进大黄鱼生长,改善肠道形态结构和增强机体的抗氧化能力。以增重率为指标,利用折线模型计算得到大黄鱼幼鱼饲料中核苷酸的适宜添加量为194.91 mg/kg。     

饲料组成对中国对虾肌肉组织中胶原蛋白、肌原纤维和失水率的影响↑（*）

用不同饲料喂养中国对虾,结果表明,饲料成分是影响肌肉组织中胶原蛋白含量、肌原纤维耐折断力和失水率大小的重要因素。鲜活饲料和维生素Ｃ能促进胶原蛋白的形成,加强对虾运动,也可提高肌肉组织中胶原蛋白的含量,野生虾肌肉胶原蛋白的含量大于养殖虾。饲料成分对胶原蛋白含量的影响规律和对肌原纤维耐折断力的影响相同,而对失水率的影响相反。肌原纤维耐折断力和失水率与胶原蛋白含量分别是正相关和负相关关系,其回归直线分别为＾Ｙ＝－５６７＋３０６６Ｘ和＾Ｙ＝６７３６－１５９６８Ｘ。上述３者影响肌肉组织柔韧性,即胶原蛋白含量越高,肌原纤维耐折断力越好,失水率越小,肌肉组织的柔韧性越强。     

投喂中草药对大黄鱼几种免疫酶活性的影响

以不同中草药配制的药物饵料投喂大黄鱼,比较大黄鱼的白细胞吞噬活性、血清溶菌酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶等非特异性免疫指标及对致病性假单胞菌人工感染抵抗力的差异。试验结果表明,投喂不同中草药饲料28 d内,血清溶菌酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶均随饲料投喂时间的延长而升高;投喂28 d后,各试验组血清溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性均显著高于对照组（P＜0．05）,其中党参组大黄鱼超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性显著高于其他组（P＜0．05）;在假单胞菌人工感染中,黄芩组、黄芪组和党参组表现出一定水平的保护力,其他中药组没有明显保护效果。本研究提示,饲料中添加黄芪、黄芩和党参能有效提高大黄鱼非特异性免疫功能,但不足以保护免于特异性的感染。