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不同方法对甜菜不同组织中总DNA的提取效果 总被引:1,自引:0,他引:1
以甜菜的幼嫩叶片、幼嫩花序、萌动种子及糖分积累期块根为提取材料,分别采用高盐低p H法、改良十二烷基硫酸钠(SDS)法、改良十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法及碱裂解法4种不同方法进行总DNA提取,对比不同提取方法及提取部位对提取效果的影响。结果表明,CTAB法适宜于叶片的DNA提取;SDS法适于对花的提取,而且对根和种子的提取效果也优于其它3种方法 ;碱裂解法具有简便快速的优点,但得率低,杂质去除不彻底,有可能影响后续试验,适用于对产量与质量要求不高时的快速提取;高盐低p H法提取的DNA浓度及得率均较低,且产物纯度不高,不建议作为首选方法。甜菜4种组织中,叶片最适合作为提取材料,花次之;根和种子的提取难度较大,建议提取时增加纯化与浓缩步骤。 相似文献
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甜菜ISSR-PCR反应体系的优化 总被引:3,自引:0,他引:3
以甜菜基因组DNA为模板,研究了ISSR的主要影响因素,建立一套适宜于甜菜的ISSR优化反应体系及程序,并对该优化体系进行了验证.实验结果表明:①优化的ISSR扩增的反应体系为:20μL的反应体积中包括2.5mmol/L MgCl2,0.25mmol/L dNTPs,1.5U Taq DNA聚合酶,0.5μmol/L引物,10×PCR Buffer 2μL,100ng DNA模板.②优化的PCR扩增条件为:94℃预变性3min,然后94℃变性30s,45℃退火30s,72℃延伸1min,35个循环后,72℃延伸5min.③利用优化的反应体系仅用1条引物就能将10份甜菜材料区分开. 相似文献
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对2014年我国河北省和内蒙古两地甜菜种植区纸筒育苗苗期甜菜叶片上出现的新的叶部枯斑病害,利用马铃薯葡萄糖琼脂培养基分离、培养、保存病原菌。结合分离菌落形态,提取发病叶片或分离的菌株菌丝DNA,利用真菌检测的通用引物ITS1及ITS4检测结果得到长541 bp单一条带,并测序。无论是直接提取病叶DNA的PCR产物测序还是分离的病原菌提取菌落DNA测序得到的序列相同,NCBI比对结果为极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)。进一步利用组蛋白3基因引物H3-1a和H3-1b扩增分离物菌丝DNA结果得到600 bp左右单一条带,测序结果同真菌通用引物检测结果一致。采用甜菜叶片涂抹法接种进行致病性试验出现了相同的叶斑症状,并从接种后出现病害症状的叶片上分离检测确认了病菌。因此,从河北和内蒙采集的甜菜苗期叶部病害病原菌为极细链格孢菌,为有效控制此类病害、减轻甜菜损失提供了理论指导。 相似文献
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甜菜SSR-PCR反应体系的优化 总被引:3,自引:0,他引:3
为了建立适宜甜菜的SSR反应体系,笔者以甜菜不育系TB005A为试验材料,研究了甜菜SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响。对SSR反应体系中的DNA模板浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度、dNTPs浓度以及退火温度进行了探索,确立了适合甜菜的SSR反应体系为;在20μL反应体系中,模板DNA为60ng,引物(50ng/μL)1.2μL,Taq DNA聚合酶1.0U,dNTPs(2、5mM/L)0.6μL。并利用该反应体系对30个甜菜不同品系进行SSR反应,用6%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,不同品系间DNA谱带多态性丰富,证实该体系稳定可靠。 相似文献
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为了揭示丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)真菌与甜菜的共生关系,收集甜菜根系及根际土壤,采用湿筛倾析-蔗糖离心法分离甜菜根围土壤AM真菌孢子。利用形态学和分子生物学方法对分离得到的AM真菌孢子进行分类鉴定,并应用Nested-PCR技术检测甜菜根际土壤AM真菌侵染甜菜根系情况。依据AM真菌孢子形态特征及25S rDNA D1/D2区域序列分析,鉴定出甜菜根围土壤中具有摩西球囊霉(Glomus mosseae),并且应用Nested-PCR技术从甜菜根内检测到了G.mosseae,表明G.mosseae侵染甜菜根系。 相似文献
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RAPD分子标记技术及其在甜菜上的研究进展 总被引:6,自引:3,他引:6
RAPD技术自1990年由Williams等首先创立以来,由于该项技术具有快速、简便、通用性好、DNA用量少、标记的多态性高等优点,已被国内外学者广泛用于植物遗传资源的诸多研究领域中。近几年来,RAPD技术也被有效地应用到了甜菜的研究中。本文就该技术的原理、可靠性和应用以及在甜菜上的研究进展作一简要介绍。 相似文献
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本文对90年代中期以来国外甜菜种子在新疆进行的品种比较鉴定、区域试验以及大面积生产示范、种子繁殖及销售活动情况进行了详细分析和评价。外国甜菜品种在多方面表现出很强的优势,在有的方面优势不明显。还对外国甜菜种子在新疆的应用前景进行了分析,基于现实状况及未来发展趋势,外国甜菜品种大量进入中国是不可避免,应积极采取主动措施,合理应用引进的外国甜菜品种。 相似文献
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我国甜菜多倍体品种的RAPD分析 总被引:4,自引:2,他引:2
利用RAPD分子标记技术对15个甜菜多倍体品种进行了遗传分析。从以前在甜菜中使用过的14个随机引物中筛选出具有非常明显多态性的引物8个,它们在多倍体品种间共扩增出47条不同位置的带,平均5.9条,特异带32条,特异带比率为68%;两个“双引物”共扩增出10条带,公共带仅1条,多态性频率高达90%。15份材料的遗传相似系数在0.75 ̄0.99。经聚类分析,可将这些材料分成5个组。RAPD聚类结果基本与血缘、系谱及其在生产实践中的表现相吻合,但也有例外。从分子水平上进一步证明了我国糖甜菜育种中存在的遗传材料基础狭窄的问题。 相似文献
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甜菜块根农艺性状的遗传变异及相关性和主成分分析 总被引:1,自引:0,他引:1
以25个新疆甜菜品系(种)为材料,对块根8个主要农艺性状进行变异系数、相关性和主成分分析。结果表明:根头长度的变异系数较大为29.14%,根宽的变异系数最小为7.86%。在相关性上,糖甜菜根宽、根颈周长、根头长与根重呈极显著正相关;甜菜含糖率与根体长度呈极显著的正相关。主成分分析结果表明,前3个主成分对含糖率变异的累计贡献率达到85.21%,对根重变异的累计贡献率达到88.53%。首先对变异大的性状进行选择是非常重要的,在含糖率性状选择上,应注意选择根颈长度、根颈周长、根体长度大,根沟较深的品系(种)。在根重性状选择上,应注意选择根宽、根颈周长、根颈长度大,根沟较浅的品系(种)。 相似文献
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不同浓度NaCl对甜菜生长的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
研究了营养液中不同盐度(2~280mmol/L)对甜菜生长状况的影响,结果表明,NaCl浓度低于10mmol/L,对甜菜的各生长指标没有明显影响;而NaCl浓度在50mmol/L左右比较适合甜菜生长;超过100mmol/L的高浓度NaCl对甜菜的生长有胁迫作用,浓度越高胁迫作用越强。营养液中盐浓度在280mmol/L以内对甜菜光合作用影响不显著。 相似文献
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甜菜纸筒育苗移栽机械化技术 总被引:3,自引:0,他引:3
介绍了甜菜纸筒育苗机械化的主要设备及其工艺流程,阐述了甜菜纸筒育苗移栽的技术要求及甜菜移栽机的类型和工作原理.实现甜菜纸筒育苗移栽机械化不仅能够保证甜菜纸筒秧苗的移栽质量,而且能够提高劳动生产率,已成为甜菜生产的必然选择. 相似文献
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1992-2003年进行了模拟普施特和豆磺隆土壤残留对后莅作物甜菜的安全性试验。研究结果表明,普施特低剂量62.5mL/hm^2。即对甜菜有严重药害,甜菜苗鲜重降低90.9%;普施特125mL/hm^2以上各处理,甜菜苗全部死亡。豆磺隆低剂量0.25g/hm^2对甜菜的保苗株数、苗高、苗鲜重影响较小,但产量降低17.9%;高剂量2、4g/hm^5处理药害严重,甜菜死苗率90%以上,产量降低92%以上。广灭灵975-3000mL/hm^2各剂量处理施药后12个月,对甜菜均无明显药害。株鲜重和产量与不施药对照相近。金豆1000、1500mL/hm^2低剂量处理,施药后12个月对甜菜药害轻微,可以种植,24个月后可以安全种植甜菜;金豆2000、3000mL/hm^2高剂量,施药后12个月对甜菜有明显药害,不可以种植;24个月后药害轻微,可以种植甜菜。金普施特低剂量1250mL/hm^2和倍量2500mL/hm^2处理对甜菜均有药害。施药后12个月药害重于24个月和36个月。但36个月后高、低剂量下仍有药害,仍不能安全种植甜菜。阔草清60、120、180g/hm^2各处理,施药后12个月均有较重药害.不能种植;施药后24个月时,60g/hm^2低剂量处理药害虽然较轻,但仍与不施药对照有较大差异,也不能安全种植,高剂量处理药害仍很严重。 相似文献