枇杷原生质体培养形成愈伤组织

把茂木、尾早生、解放钟、长红等枇杷品种的心脏形至完全成熟的胚,离体培养于分别附加一定浓度植物生长调节剂的B_5,MS和改良MS(大量元素减半,简称mMS)的培养基中,诱导产生胚性愈伤组织.这种愈伤组织在添加低浓度的2,4-D的mMS培养基上产生体细胞胚.以初代和继代培养若干代的愈伤组织作为分离原生质体的材料来源.酶解液的主要成分为纤维素酶、离析酶和崩溃酶,附加0.6 mol/L的山梨醇作为渗透压稳定剂,原生质体的最高得率为1.65±0.6×10~7/g.原生质体经液体浅层培养或半固体培养4—5d后,观察到第1次细胞分裂,2周后形成小细胞团.培养2个月后,获得了愈伤组织.     

小麦愈伤组织状态调控与原生质体培养

 愈伤组织及其细胞的状态可通过调整培养基成分来调控。一般情况下，生长素、还原态氮、KCl促进愈伤组织生长，细胞分裂素、硝态氮抑制愈伤组织生长。绝大多数易培养基因型诱导的愈伤组织往往表现为质地紧硬或外软内硬，不适于进行悬浮培养和原生质体培养。利用不同水平的2，4-D、NH#++#-4、谷氨酰胺、水解酪蛋白、KCl、KT、6-BA、NO#+-#-3等进行处理，可使不适的愈伤组织变成适宜的类型，也可使那些生长过旺而不分化的愈伤组织分化出植株。用这些方法，从6个小麦基因型的原生质体中培养出了再生植株。     

芸苔属两个种原生质体的分离和培养

由甘蓝(Brassica oleracea)和芜菁(Brassica rapa)黄化小苗子叶和下胚轴分离出大量有活力的原生质体,并成功地进行了培养。30小时后发生第一次分裂。下胚轴原生质体分裂频率明显高于子叶原生质体。除芜菁子叶原生质体外,其余材料的原生质体均能持续分裂,20天后形成肉眼可见的愈伤组织。在 MS 培养基上,来源于甘蓝子叶原生质体的愈伤组织分化出根,其余的未见分化现象。     

影响蕉柑胚性愈伤组织增殖的因素

柑橘胚性愈伤组织具有广泛的研究用途 ,是种质资源离体保存、外源基因转化的理想材料 .柑橘胚性愈伤组织的生长受培养基组成成分影响显著[1,2 ] ,探讨柑橘胚性愈伤组织生长的影响因素将为胚性愈伤组织的长期继代保存提供依据 ,而且生长状况良好的柑橘胚性愈伤组织的获得是进行原生质体融合、外源基因转化及相关生物技术研究的基础 .1　材料与方法　　材料 :华南农业大学生物物理实验室诱导的蕉柑 (Ｃｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔａｖａｒ.ｔａｎｋａｎＨａｙａｔａ)胚性愈伤组织 .培养基 :以ＭＴ为基本培养基 ,添加不同浓度的细胞分裂素 (…     

人参原生质体培养再生愈伤组织

以人参(Panax ginseng C.A.Meyer)愈伤组织为材料,经酶解获得大量生活的原生质体,用浅层液体静止培养法获得细胞团,最后在琼脂培养基上获得原生质体来源的愈伤组织。分化工作尚无结果。试验强调了材料状况及培养条件的重要性,讨论了综合技术在原生质体培养中的意义。     

栎叶枇杷原生质体的分离与培养

初步探讨了栎叶枇杷胚培养获得愈伤组织，从胚愈伤组织分离原生质体以及原生质体的早期培养方法，着重研究了酶混合液对栎叶枇杷原生质体分离和培养的效应．结果表明：以１％纤维素酶和２％果胶酶配合使用效果最好，得率和成活率分别为（９．８±０．０３）×１０￣６和９６．０％．作为酶混合液中渗透压稳定剂的甘露醇浓度则以１１％－１２％为好．从合适的酶混合液中得到的原生质体培养已获得愈伤组织．     

冰糖橙叶肉和愈伤组织原生质体分离期间 氧化胁迫的比较分析

通过测定原生质体分离过程中超氧阴离子自由基(O_2~(·-))产生速率、丙二醛含量、超氧物歧化酶活性、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、还原型谷胱甘肽含量以及抗坏血酸含量的变化,以探讨柑橘不同来源原生质体再生能力差异的机制。结果表明,在原生质体分离过程中,不能再生的冰糖橙叶片原生质体O_2~(·-)产生速率和MDA积累量在同一酶解时间均较愈伤组织高;愈伤组织原生质体酶解过程中SOD活性的变化趋势与O_2~(·-)产生速率趋势基本一致,即逐渐增加,而叶片原生质体在酶解12 h后SOD活性显著下降;在酶解后的同一时间点,愈伤组织原生质体CAT活性总是显著高于叶片原生质体,愈伤组织原生质体GSH和AsA含量也总是高于叶片。柑橘不同来源原生质体再生能力存在差异,其原因可能与原生质体分离过程中活性氧(AOS)、保护酶和抗氧化物质的代谢平衡有关,即与AOS产生与清除之间的平衡有关。     

胡萝卜悬浮细胞原生质体的培养及植株再生的研究

采用继代培养4～5 d 后的胡萝卜悬浮细胞,经酶解获得大量原生质体,并在不同的培养基上经培养,细胞进行分裂,形成愈伤组织,获得了完整的再生植株。探讨了影响原生质体培养及植株再生的多种因素,实验表明:①原生质体的培养密度在5×10~4/mL～5×10~5/mL 范围内均可,以2.5×10~5/mL 为佳。②对于细胞的分裂、细胞团的生长以及愈伤组织的形成,以改良的 B_5培养基最好,N_5培养基其次,MS 较差。③适当降低原生质体培养基中的甘露醇浓度,有利于细胞的分裂和生长。④在本实验所涉及的培养方法中,以液体浅层培养为优。⑤诱导愈伤组织分化,以 1mg/L KT 为佳。⑥不同培养基对愈伤组织的生长速度和分化频率产生一定影响,以 MS 培养基提高分化频率效果较好。     

人参原生质体的分离培养

以人参愈伤组织细胞悬浮系为材料,研究了人参原生质体的分离纯化方法及影响因素.结果表明:以人参愈伤组织细胞悬浮系为材料,在加入1%纤维素酶和0.5%果胶酶、甘露醇浓度0.7 mol/L的酶解液中酶解8 h分离得到的人参原生质体产量最高;采用人参与胡萝卜共培养培养基,进行看护培养成功地培养出愈伤组织.     

栎叶枇杷原生质体的分离与培养

初步探讨了栎叶枇杷胚培养获得愈伤组织，人胚愈伤组织分离原生质体以及原生质体的早期培养方法，着重研究了酶混合液对栎叶枇杷原生质体分离和培养的效应。结果表明：以１％纤维素酶和２％果胶酶配合使用效果最好，得率和成活率分别为（９．８±０．０３）×１０＾６和９６．０％。作为酶混合液中渗透压稳定剂的甘露醇浓度则以１１％－１２％为好，从合适的酶混合液中得到的原生质体培养已获得愈伤组织。