黄花菜受精过程的研究

 利用常规石蜡切片技术对黄花菜受精过程进行了详细的研究, 获得如下结果: 1. 授粉后1～2 h花粉在柱头上萌发长出花粉管, 只有生殖细胞进入花粉管内。2. 花粉管在花柱道内生长历经20～22 h,生殖细胞分裂形成2个精子。3. 花粉管在子房室中轴胎座表面生长经历2～4 h。4. 授粉后26～28 h花粉管进入1个助细胞, 释放2个精子。5. 精卵融合经历4～6 h, 形成合子。6. 精核与次生核融合经历2～4 h, 形成初生胚乳核。7. 自花粉在柱头萌发至合子形成, 受精过程持续总时间为29～36 h。8. 合子分裂发生在授粉后39～48 h。9. 讨论了研究结果对黄花菜遗传育种与分子育种的意义。     

君子兰（Clivia miniata Regel）的贮藏花粉时间与受精过程

 利用花粉低温冷藏技术与常规石蜡制片技术研究了大花君子兰的贮藏花粉寿命以及受精过程，为其杂交育种提供基础资料。结果如下：新鲜花粉结籽率为35%；-21℃贮藏70 d的花粉结籽率为22%；贮藏140 d的花粉结籽率为4%；贮藏180 d的花粉结籽率为0。两个精细胞具有二型性。成熟胚囊里次生核位于反足细胞端。胚珠发育不同步，胚珠没有受精与胚珠败育成为结籽率低的内部原因。君子兰受精过程经历时间为：人工异花授粉2 h左右花粉萌发；花粉管在花柱中生长26 h左右；花粉管在子房腔内生长12 h左右；授粉后42～50 h雌雄性细胞融合；授粉后44～46 h初生胚乳核分裂；授粉后的第6～7 d，合子进行分裂，合子休眠期为4～5 d。     

大白菜受精过程及其各阶段持续时间的研究

 对3个大白菜(Brassica campestris ssp. pekinensis) 品种的受精过程及其各阶段持续的时间进行了研究。其结果如下: 1. 授粉后2～3 h, 花粉在柱头上萌发。2. 授粉后4～8 h, 花粉管在花柱中生长。3.授粉后8～14 h, 花粉管在子房中生长并通过珠孔进入胚珠。4. 授粉后16 h, 花粉管进入胚囊, 破坏1个助细胞, 并将内含物释放入该助细胞内。5. 授粉后16～18 h, 精核向卵细胞移动并进入卵细胞。授粉后18 h,精核附在卵核的核膜上。6. 授粉后20 h, 精核进入卵细胞核, 精核染色质逐渐松解; 授粉后24 h, 出现雄性核仁。受精卵核内有一明显大的雌性核仁和1个较小的雄性核仁, 此时形成合子。精核染色质在卵核内分散延续的时间长达4 h左右。7. 授粉后32～34 h, 合子进行第1次分裂。大白菜合子静止期8～10 h左右。8.受精前二极核合并成次生核或不合并, 位于卵细胞的合点端。9. 授粉后16～18 h精核向极核或次生核移动。授粉后18 h, 精核附在极核或次生核的核膜上。10. 授粉后20 h, 精核进入1个极核或次生核, 二者进行融合。精核与极核或次生核的融合过程同精核与卵核的融合过程相同, 只是精核与极核或次生核融合速度较快。精核染色质在极核或次生核里分散的时间大约为2 h。11. 授粉后22 h, 形成初生胚乳核, 在分裂前常常看到初生胚乳核内的雌雄性核仁仍未合并。12. 授粉后24 h, 初生胚乳核进行第1次有丝分裂。     

龙眼受精作用的研究

本文对龙眼的双受精过程进行了详细观察。一、龙眼的胚珠倒生,具两层珠被。在发育后期,还具有第三层珠被,并形成为假种皮。二、胚囊为8核。受精前两个极核合并为次生核。三、珠孔受精。花粉管经由一个助细胞进入胚囊,并在助细胞中释放两个精子。四、大多数情况下,授粉后约3至72小时,发生受精作用。少数雌雄性核融合发生在此前后。受精时,两个精子分别进入卵细胞核和次生核。当精子的染色质在卵核和次生核内逐渐松散后,露出雄性核仁。雌雄性核仁大小差异显著,大小核仁互相融合,完成性核的融合。五、授粉后约72小时,初生胚乳核第一次分裂,形成胚乳游离核。胚乳的发育为核型。六、龙眼的受精作用属有丝分裂前类型。     

‘无核世纪梨’授粉受精过程及种子败育的观察

 应用解剖学方法对‘无核世纪梨’授粉受精过程进行了系统观察,发现‘无核世纪梨’自花授粉花粉管不能进入胚囊,用‘雪青’梨异花授粉花粉管48 h 进入胚囊。异花授粉后在受精过程中,一个精子不能进入卵膜或进入卵膜后雌雄核不融合,另一个精子与极核也不能正常融合,不能形成胚乳,双受精失败,从而导致种子败育,最终形成无籽果实。     

西瓜受精作用的研究

西瓜的胚珠倒生具两层珠被，为厚珠心型．成熟胚囊为８核．极核在受精时融合，反足细胞持续时间较长．受精时，２个精子分别进入卵细胞和极核，当精核的染色质在卵核和极核内逐渐松散后，露出雄性核仁，分别与卵核核仁及极核核仁融合，完成性核的融合，形成合子和初生胚乳核．合子经休眠后第１次分裂为横向分裂，胚乳发育方式为核型，受精作用属有丝分裂前类型。     

黄花菜胚囊受精前后的超微结构观察

 应用透射电镜技术研究黄花菜（Hemerocallis citrine Baroni）助细胞、卵细胞、中央细胞、 合子与初生胚乳核的超微结构特征。结果如下：助细胞有高度发达的丝状器;一个助细胞在花粉管进入 后退化;宿存助细胞在合子期退化。受精前,卵细胞、助细胞合点端无壁,细胞膜完整;受精后,合子 被完整的细胞壁包围。受精前超微结构特征显示卵细胞代谢活动低,合子期的代谢活性被激活;中央细 胞、初生胚乳核代谢活性较高。卵细胞质中的精核由双层核膜包被,染色质高度凝聚,核孔数少。助细 胞、卵细胞、中央细胞缺乏中央大液泡是黄花菜成熟胚囊的显著特征。     

建阳桔柚花粉育性、授粉受精和胚胎早期发育的观察

以3年生枳砧建阳桔柚为试材,观察花器官结构、花粉育性、授粉后花粉管生长过程和早期胚胎发育情况。结果表明,建阳桔柚的花为完全花,花粉染色活力为66.42%,花粉萌发率为8.68%。自花和异花(沃柑花粉)授粉4h后花粉都开始萌发;授粉8h后异花授粉的花粉大量萌发,自花授粉萌发量比授粉4h时多,但低于异花授粉;异花授粉24h后少量花粉管伸入子房,异花授粉48h后大量花粉管进入子房中且部分完成受精;自花授粉48h后花粉管进入子房,但并没有受精成功,自花授粉72h后可观察到少量受精成功。自花授粉于授粉2周后观察到胚珠内部出现空腔、早期败育;异花授粉于授粉3周后观察到部分胚珠内部出现空腔、早期败育。     

新疆厚皮甜瓜受精过程的初步观察

新疆厚皮甜瓜受精类型为有丝分裂前型。胚乳为细胞型胚乳。授粉后半小时,可以看到花粉在柱头上萌芽,2小时后通过珠孔进入胚囊,8～9小时开始释放物质,24小时后精子开始进入次生核和卵细胞,48小时后大部分胚珠完成双受精过程;次生核核仁合并、产生于授粉24小时以后。受精作用在16℃～37℃条件下都能进行,适当高温能加快受精过程,但二者并非直线相关;蕾期授粉对受精进程有一定影响,但最终效果与花期无异。     

番木瓜胚胎发育与杂交种子败育的研究

在番木瓜夏威夷品种自交中,合子经过短暂休眠期后发育为原胚,在经历球形胚、鱼雷形胚和子叶形胚后发育为成熟胚;初生胚乳核无休眠期,其分裂先于合子,胚乳类型为细胞型。在以夏威夷品种为母本,岭南和穗中红品种分别为父本的2个杂交组合中,前者产生的种子严重败育,后者也具有相似现象。研究认为,败育的原因可以归结为雄配子与中央细胞受精...     

蝴蝶兰精细胞的分离和收集

 以蝴蝶兰（Phalaenopsis hybrid）为材料,观察授粉后花粉的萌发,并进行精细胞的分离和收集。观察发现,蝴蝶兰花粉管萌发后营养核退化,生殖细胞进入花粉管,授粉后5 d,生殖细胞尚处于分裂期。通过授粉使花粉管在子房内发育,再利用5% ~ 12%的甘露醇将花粉管直接爆破,成功分离出成对的蝴蝶兰精细胞,用显微操作仪30 min 可收集精细胞4 ~ 5 对。成对的两个精细胞在直径、荧光强度方面均有较大差异,预示两个精细胞具有不同的前途。蝴蝶兰精细胞分离的成功为进一步开展兰花离体受精研究打下了良好的基础。     

梨不同花龄自花与异花授粉的花柱内花粉管生长及坐果率的比较

对自交不亲和强度不同的梨品种丰水和菊水的不同花龄花进行自花授粉和丰水×菊水异花授粉后,用荧光显微镜观察花粉萌发及生长特性。结果表明,开花当天及以后的自花和异花授粉花粉在柱头上均有较高的萌发率;自花和异花花粉管在花柱内的生长速度及停止生长的位置不同,丰水自花授粉后花粉管生长的短且慢,菊水自花花粉管生长的长且快,而异花授粉的花粉管生长最快。自花授粉后,不同花龄对花粉管生长影响表现为:开花4d前的蕾期授粉以及开花4d后的延迟授粉,花粉管生长长度显著的长。开花6d前的各种授粉组合,花粉管生长均较差。这与田间授粉坐果率的高低基本一致,即整体表现为各个花龄的授粉都以异花授粉坐果率最高,其次为菊水自花授粉,丰水自花授粉坐果率最低。另外,自花授粉中,蕾期授粉和延迟授粉(开花2d后除外)坐果率都有提高,而异花授粉中蕾期授粉和延迟授粉的坐果率却有所下降。     

杏(Prunus armeniaca)自交不亲和强度及其授粉受精相关特性

为了解杏自交不亲和性强度与授粉受精相关特性的关系,以自交亲和(Self-compatibility:SC)品种凯特(Prunus armeniaca L．cv．Katy)和自交不亲和(Self-incompatibility:SI)品种新世纪(P.armeniaca L.cv．Xinshiji)及凯特×新世纪杂种群体为试材,荧光显微镜观察自交亲和与自交不亲和杏花粉管生长动态。结果表明,授粉后初期,自交亲和性与自交不亲和性的杏花粉都能正常萌发、生长,但是在花粉管生长延伸到花柱1／2以后,自交亲和性的花粉管能顺利进入子房,而自交不亲和性的花粉管多数顶端膨大呈球形,停止向下生长,只有极个别能正常生长到达子房;杂种后代的可溶性蛋白含量和RNA酶比活力,与亲本相比无明显的趋中变异表现,而且在自交亲和与自交不亲和杏之间无显著性差异。     

不同发育阶段甜樱桃花授粉后花粉萌发和花粉管生长的差异

选用自交不亲和性程度不同的2个甜樱桃品种莫利和拉宾斯为试材,分别在开花前、开花当天和开花后进行莫利自花、拉宾斯自花和莫利×拉宾斯异花授粉,并于授粉后12、24、48、72、96h切取花柱,用FAA固定,荧光染色后压片观察。结果表明,3个组合的花粉萌发率都以开花当天授粉的最佳,拉宾斯自交和莫利×拉宾斯的花粉管生长状况也以开花当天授粉的最佳,但莫利自交的花粉管生长状况却以花前第4天最佳,花后第4天次之,而当天授粉的最差。因此认为,甜樱桃自交不亲和程度与其雌蕊的发育状态密切相关,蕾期授粉和延迟授粉都能够在一定程度上克服甜樱桃的自交不亲和性,但蕾期授粉的作用更加明显。     

日光温室条件下甜樱桃授粉受精期间环境因子对花粉行为的影响

以甜樱桃(Prunus avium L.)红灯为试材,采用荧光显微技术研究了日光温室和露地条件下甜樱桃花粉行为的差异,并观察记载了授粉受精期间日光温室和露地环境因子的变化情况。结果表明,环境因子影响了甜樱桃的花粉行为,日光温室内花粉萌发和花粉管伸长速率明显落后于露地。日光温室条件下,授粉后6h花粉萌发,120h花粉管进入子房;而露地条件下,授粉后3h花粉萌发,72h花粉管进入子房。其中,气温是影响日光温室甜樱桃授粉受精进程延缓的主要环境因子。     

自交不亲和甘蓝亲和花粉授粉早期差异蛋白质分析

 为从蛋白质的角度揭示自交不亲和甘蓝亲和授粉早期花粉与柱头相互作用,将蛋白质组学方法应用于自交不亲和性甘蓝柱头与亲和花粉互作早期差异蛋白质的研究。结果表明,亲和授粉后3 ~ 5 min与1 h对比,有116个差异蛋白质点,而授粉后1 h与2 h差异不显著。按照特异表达与变化量大的蛋白质点优先原则,初步选取差异点中71个点做质谱分析,鉴定出31个可信差异蛋白质。与亲和授粉后3 ~ 5 min组相比,1 h组中特异表达蛋白质有19个,上调表达9个,下调表达3个。31种蛋白质的生物信息学分析表明,有两种蛋白与前人发现的与花粉管在柱头中生长发育相关蛋白相同,其他29种参与包括胁迫与防御应答在内多种生理过程。对早期差异蛋白中这种“既有促进花粉管发育的蛋白,也有与防御相关蛋白”现象分析表明,花粉管生长性侵入柱头的过程有可能伴随着柱头抗性的提高。