番茄温敏核不育系花药培养诱导愈伤组织的研究

[目的]探讨影响番茄温敏核不育系花药培养诱导愈伤组织的相关因子。[方法]研究不同灭菌处理、不同基本培养基、不同激素种类及浓度对番茄温敏核不育系花药培养诱导愈伤组织的影响。[结果]0．1％HgCl28min＋10％NaClO8min的灭菌处理效果最佳,菌污染率仅为1．95％,出愈率达71．73％;在MS、B5Miller3种基本培养基的比较试验中,以MS为基本培养基对花药愈伤组织的诱导效果最好;诱导愈伤组织的适宜浓度为2,4-D1mg／L、6-BA2mg／L、KT2mg／L。[结论]灭菌处理、基本培养基、激素种类及浓度可以影响番茄温敏核不育系花药培养诱导愈伤组织的效果。     

几个光温敏核不育水稻品种组织培养特性的研究

选用了两系杂交稻的母本光温敏核不育系籼稻品种培矮64S、粳稻品种农垦58S和7001S作为材料，对其在组织培养中愈伤组织诱导和植株再生进行了比较研究，结果表明，不同水稻品种和不同外植体状态在愈伤组织诱导上有较大的差异，对籼稻品种而言，幼胚愈伤组织诱导率明显高于成熟胚；而对粳稻品种而言，幼胚与成熟胚愈伤组织诱导率没明显差异．培养基种类对愈伤组织诱导影响不大，但对愈伤组织状态有显著影响．培矮7001S使用MB培养基较好；农垦58S和7001S使用NB培养基较佳．籼稻品种植株再生率明显低于粳稻品种．愈伤组织断代超过3个月，再生频率下降．     

广适应性籼稻愈伤组织诱导培养基的筛选

相比粳稻而言,籼稻愈伤组织诱导一直没有一种通用的诱导培养基。为了找到适用于籼稻愈伤诱导的通用培养基,以明恢63、IR64、RD23三个籼稻品种的成熟胚为材料,在固定成分(300 mg/L水解酪氨酸蛋白+500 mg/L脯氨酸+250 mg/L谷氨酰胺+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂)和相同的培养条件下,以基本培养基(MB、NB、N6和CC 4种基本培养基)、2,4-D(2.0,3.0,4.0、5.0 mg/L 4种浓度)、6-BA(0,0.2,0.4,0.5 mg/L 4种浓度)为影响因素,利用正交实验设计出16种培养基组合,通过评价愈伤质量和愈伤诱导率来筛选最适合的籼稻愈伤组织诱导培养基。结果表明,2,4-D能提高愈伤诱导率,不用6-BA时愈伤质量最好,基本培养基MB的愈伤诱导效果最好。筛选出的籼稻愈伤诱导通用培养基是MB+2,4-D 5.0 mg/L,在28℃黑暗条件下培养20 d。用筛选出来的通用培养基对不同来源的籼稻品种进行愈伤组织诱导,结果表明该通用培养基对多数籼稻品种具有稳定的愈伤诱导效果。     

提高籼稻愈伤组织诱导率和增殖率的研究

以秋桂矮11、华籼占、万籼占45等3个籼稻品种的种子为外植体,消毒后接种在不同培养基上,(25±1)℃下暗培养20~30天后比较不同品种愈伤组织的诱导率,再将愈伤组织继代培养20天后调查其增殖率。结果表明,在NMB培养基中添加2.5~3.0 mg/L 2,4-D有利于提高籼稻愈伤组织诱导率,添加脯氨酸、水解酪蛋白等营养物有利于提高万籼占45的愈伤诱导率,但对提高秋桂矮11、华籼占的愈伤诱导率影响不大;在NPCS培养基(NMB 0.5g/L脯氨酸 0.3 g/L水解酪蛋白 3~5 g/L山梨醇)继代培养1~2次,以30 g/L麦芽糖为碳源、2,4-D浓度为2.5 mg/L时,籼稻愈伤组织活性明显提高,其胚性愈伤组织的增殖率最大。     

番茄温敏核不育系花粉发育及其对愈伤组织诱导的效应

[目的]探讨番茄花蕾外观形态及花粉发育时期与花药培养愈伤组织诱导的相关性,筛选出番茄温敏核不育系花药培养的适宜花粉发育时期。[方法]采用形态学观测、细胞学鉴定和花药组织培养相结合的方法,对番茄2个温敏核不育系T7、T8和普通杂交种王蔬、红日2个品种,进行了花蕾外观形态分类、花粉发育时期鉴定与愈伤组织诱导效应的比较研究。[结果]番茄花蕾外观形态与花粉发育时期的关系为：花蕾长0.2~0.3 cm=花粉孢子期,花蕾长0.4~0.5 cm=花粉单核早期,花蕾长0.6~0.7 cm=花粉单核中晚期（单核靠边期）,花蕾长0.8~0.9 cm=花粉二核期、三核期,花蕾长≥1.0 cm=花粉三核期、成熟期;T7、T8、王蔬、红日的花药培养均以花粉发育在单核中晚期（单核靠边期）为最佳时期,此时愈伤组织诱导率达最高,分别为11.8%、13.7%、19.6%和18.1%。[结论]番茄花蕾外观形态及花粉发育时期与花药培养愈伤组织诱导有明显的相关性;番茄温敏核不育系花药培养的适宜花粉发育时期为单核中晚期（单核靠边期）。     

籼稻成熟胚愈伤组织诱导及不定芽分化

以不同籼稻品种的成熟胚为研究材料,通过对比实验,结果表明,采用DNB为诱导愈伤组织培养基,DMS与DNB培养基交替继代,籼稻愈伤组织诱导率高、质量较好;采用MSRc3(MS+casamino acids 500mg·L-1+gluttamine 300mg·L-1+proline 500mg·L-1+mannitol 36.4g·L-1+maltose 30g·L-1+TDZ 0.2mg·L-1+phytagel 5g·L-1pH 5.8)为分化培养基,愈伤组织不定芽分化率在90%以上,较对照MSR1提高300%～500%.     

不同激素组合对番茄温敏核不育系及其杂交组合花药愈伤组织诱导效应

【目的】研究不同激素组合与不同材料基因型互作对番茄温敏核不育系及其杂交组合花药愈伤组织诱导的效应。【方法】以番茄温敏核不育系大107、地D4及其杂交组合大107×牛番茄、地D4×红昆仑为材料,进行不同激素组合（CPPU、TDZ、KT与2,4-D＋6-BA）诱导花药愈伤组织诱导试验。【结果】以MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA为基本诱导培养基,分别与不同浓度CPPU、TDZ或KT组合,对不同基因型番茄花药愈伤组织诱导具有明显促进效果,CPPU、TDZ和KT的适宜浓度分别为0.4～0.6、0.03和1.5 mg/L。在相同激素条件下,番茄温敏核不育系的花药愈伤组织诱导效果明显优于其杂交组合,平均出愈率和平均愈伤组织直径大小均为:地D4＞大107＞地D4×红昆仑＞大107×牛番茄。【结论】不同基因型番茄花药对激素的敏感性不同;不同激素组合对番茄花药愈伤组织诱导的效应差异显著,以KT与2,4-D、6-BA配组对番茄温敏核不育系及其杂交组合花药愈伤组织的诱导具有显著调控作用。     

不同基本培养基和激素对籼稻成熟胚愈伤组织诱导的影响

以川香29B、中9B、金23B和Ⅱ-32B 4种籼稻的成熟胚为外植体,研究MS、N6、NB和NMB 4种基本培养基,2,4-D与KT或6-BA联合使用对籼稻愈伤组织诱导的影响.结果表明,4种籼稻在NMB基本培养基中愈伤组织的诱导率最高,平均诱导率为77.00％～96.00％,其中在NMB中的诱导效果最好,在4种不同基本培养基中愈伤组织总平均诱导率的高低顺序依次为川香29B、中9B、Ⅱ-32B、金23B.当3.0mg/L 2,4-D与不同浓度的KT或6-BA联合使用对,KT浓度为0.1 mg/L对,川香29B和中9B愈伤组织诱导率高;对于Ⅱ-32B,KT浓度为0.6 mg/L愈伤组织诱导率较高;6-BA浓度为0.4 mg/L时,川香29B愈伤组织诱导率最高;对于中9B和Ⅱ-32B,添加0.1 mg/L的6-BA最有利于愈伤组织的诱导;而对于金23B,无论是添加KT或6-BA都会抑制愈伤组织的诱导.     

不同激素组合对番茄温敏核不育系及其杂交组合花药愈伤组织诱导效应

【目的】研究不同激素组合与不同材料基因型互作对番茄温敏核不育系及其杂交组合花药愈伤组织诱导的效应。【方法】以番茄温敏核不育系大107、地D4及其杂交组合大107x牛番茄、地D4x红昆仑为材料,进行不同激素组合（CPPU、TDZ、KT与2,4-D＋6-BA）诱导花药愈伤组织诱导试验。【结果】以MS＋1．0mg／L2,4-D＋0．5mg／L6-BA为基本诱导培养基,分别与不同浓度CPPU、TDZ或KT组合,对不同基因型番茄花药愈伤组织诱导具有明显促进效果,CPPU、TDZ和KT的适宜浓度分别为0．4—0．6、0．03和1．5mg／L。在相同激素条件下,番茄温敏核不育系的花药愈伤组织诱导效果明显优于其杂交组合,平均出愈率和平均愈伤组织直径大小均为：地D4〉大107〉地D4x红昆仑〉大107x牛番茄。【结论】不同基因型番茄花药对激素的敏感性不同;不同激素组合对番茄花药愈伤组织诱导的效应差异显著,以KT与2,4-D、6-BA配组对番茄温敏核不育系及其杂交组合花药愈伤组织的诱导具有显著调控作用。     

籼稻粤泰B成熟胚愈伤组织诱导培养条件初探

对籼稻HL-CMS保持系粤泰B种子成熟胚的愈伤组织诱导培养条件进行了初步探讨.结果表明.将存储的成熟种子于50℃预处理2d,种子表面清洗消毒后,晾干2～3 h,在1 800 μmol·m-2·s-1光照12 h/黑暗12 h、温度为24～30℃的较大的组织培养室内,采用pH5.9～6.0、添加3.0 mg·L-12,4-D的N6培养基上,粤泰B种子的愈伤诱导率可达93%,且愈伤组织的生长状况很好,为不育基因向籼稻HL-CMS保持系粤泰B的遗传转化奠定了基础.     

连香树愈伤组织诱导研究

[目的]为珍稀濒危树种连香树寻求组培快繁方法。[方法]以1/4MS、1/2MS、MS添加不同浓度的NAA、KT、GA3为培养基,以连香树当年生带芽茎段为外植体进行愈伤组织诱导。[结果]以4月份采集的带芽茎段作为外植体愈伤组织诱导效果相对较好;在1/4MS+NAA 1.0 mg/L+KT 0.2 mg/L+GA31.00 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果相对较好,但总体而言愈伤组织诱导率较低。[结论]连香树愈伤组织诱导具有可行性,需进一步研究。     

长春花愈伤组织诱导

长春花(Catharanthus roseus (L.)G.Don.)是夹竹桃科植物,全草入药,据报道有抗癌作用,其主要抗癌成分为长春碱和长春新碱[1].由于含量甚微[2],价格昂贵,人工栽培远远满足不了人们的需要.诱导愈伤组织是组织培养的第一步,是进行工业化生产的基础.曾有人先后在B5[3]、White[4]、Wo-L[5]、WoNiKo5-L[6]培养基上诱导出长春花愈伤组织,且在其上的继代培养也获成功.笔者在MS培养基上对于是否能诱导出长春花茎的愈伤组织进行了的探索.     

脯氨酸与丙氨酸对光温敏核不育水稻花药愈伤组织诱导的影响

对处于不同育性时期的光温敏核不育水稻进行捕氨酸，丙氨处理的结果表明：光温敏核不育水稻的花药培养不会因为不育基因的表达而导致失败花培的出愈率在可育期显著高于不育期；在不育期附加５００ｍｇ／Ｌ的Ｐｒｏ对花培具有最大的促进作用，而Ａｌａ处理效应不显著，并且对Ｐｒｏ的促进作用无负效应。     

两个新籼稻光温敏核不育系的育性转换特性研究

为了研究新育成的水稻光温敏雄性不育系H61S、H69S的育性转换特性,于2005—2006年在湛江进行了分期播种试验和人工控制光温试验,结果表明:(1)温度是引起两个光温敏不育系育性转换的最主要的原因,光照时数对不育系育性影响不显著。(2)H61S、H69S的育性温度敏感期分别为抽穗前19￣10d和20￣10d,最敏感期均为抽穗前17￣13d,与对照培矮64相似。(3)当不育系由不育转为可育,可育花粉率达1%时,H61S、H69S和对照培矮64S的育性转换临界温度分别为24.2℃、25.3℃、26.1℃。(4)两个不育系在湛江自然播种条件下都有较长的稳定不育期和较高的自交结实率,育性转换期均比对照培矮64S短,可以安全制种,也可繁殖,但适宜繁殖的抽穗期范围窄。     

枸杞愈伤组织诱导因子的研究

以枸杞嫩茎为试验材料,研究不同的激素组合及浓度、消毒剂、培养基以及培养基中添加肌醇对枸杞愈伤组织诱导的影响,为枸杞的离体培养提供了依据。     

高粱不同外植体愈伤组织诱导的研究

取几种高粱类型的不同外植体在MS培养基上进行愈伤组织诱导培养,影响外植体愈伤组织形成和生长的因素很多,本试验结果表明:不同基因型间愈伤组织诱导率有差异.耐性(耐旱)品种形成愈伤组织能力较强.不同外植体间诱愈率差别较大,幼穗诱愈率最高88.O%,花药最低1%左右.另外,幼叶诱愈培养对盐反应敏感.在成熟胚培养过程中,其诱愈率为63.O%,并获得8棵成株.     

红栀子愈伤组织诱导研究

[目的]为了研究红栀子组织培养的最佳条件,为栀子黄色素的工业化生产提供理论依据。[方法]以红栀子茎尖、茎段和幼嫩叶片为外植体,在MS、1/2MS和1/4MS3种培养基上进行培养试验,研究不同外植体、培养基、激素浓度和消毒时间对诱导愈伤组织的影响。[结果]红栀子茎尖和幼嫩叶片的诱导效果明显优于茎段。在3种培养基中,MS培养基更有利于愈伤组织的产生和生长。在MS培养基中添加2,4-D时,2.0mg/L为诱导红栀子茎尖愈伤组织的最适浓度。用升汞消毒,茎尖、茎段和幼嫩叶片的最佳消毒时间分别为9、12和7min。[结论]MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L为红栀子幼嫩叶片愈伤组织的最佳培养基,且10d后形成愈伤组织。     

籼稻成熟胚愈伤组织培养影响因素研究

以 7种籼稻恢复系、保持系为材料 ,研究了影响成熟胚愈伤组织诱导的相关因素。结果表明 ,适当的低、高温预处理可以明显提高出愈率 ;CC培养基是适宜于多数籼稻愈伤组织诱导的培养基 ;不同的材料要求的 2 ,4 -D水平不一致 ,但 2mg/L的 2 ,4 -D能满足多数材料的需要 ;添加一定的脱落酸 (ABA)可以改善愈伤组织质量 ;继代时间因材料而异 ,但多数以 1 2d为宜 ;适当浓度的脯氨酸 (Pro)、二甲基亚砜 (DMSO)、谷氨酰胺 (Gln)能显著的降低褐化率 ,硝酸银的作用不明显 ;通过培养基轮换、2 ,4 -D和ABA的浓度调节以及对愈伤组织干燥培养、高渗培养等逆境调节 ,可以在一定程度上控制愈伤组织的状态 ,保持良好的胚性     

沙芥叶片愈伤组织诱导研究初报

以MS为基本培养基，确定5种组合对沙芥叶片进行愈伤组织诱导，结果显示：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L＋3．0％蔗糖＋0．5％琼脂（pH值5．8）可诱导出愈伤组织；以MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA2mg／L＋3．0％蔗糖＋0．5％琼脂（pH值5．8）作为愈伤组织增殖培养较理想。