鸡球虫虫株的分离技术及其适用范围

鸡球虫虫株的分离技术及其适用范围徐卫东（吉林省兽医科学研究所１３００６２）林瑛（吉林省动物卫生监督检验所１３００６２）鸡球虫病自然感染鸡多为两种以上球虫混合感染，已分离的纯种在继代或其它工作中有时也会不慎被其它种球虫污染，带来许多麻烦。研究与寻找出方...     

青岛地区球虫虫株的分离及其鉴定

为获得纯种的球虫虫株,取病料镜检,经过离心,用饱和食盐水漂浮法收集鸡球虫卵囊,培养48h后得到混合的孢子化卵囊.用玻璃纸法进行单卵囊分离,并接种雏鸡,获得两株纯种球虫虫株,试验感染率为20%,经鉴定均为柔嫩艾美耳球虫属虫株.     

鸡球虫广东清远分离株对七种药物的抗药性试验

为了了解广东清远某鸡场球虫抗药性的产生程度,并制定出合理的用药方案,给延长药物的使用周期提供科学的依据,我们从该鸡场现场采集了新鲜粪便,实验室分离和繁殖卵囊,并在实验室进行球虫的抗药性研究.经检测粪中含堆型艾美耳球虫(E.acervulina)和变位艾美耳球虫(E.mtvati)共81.3%,柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)18.7%.试验选择目前常用的7种抗球虫药物,分别为球佳(地克珠利Diclazuril)、杜球(马杜拉霉素Madu-ramicin)、欲可胖(莫能菌素Monensin)、球安(拉沙里霉素Lasalocid)、氨丙啉(Amprolian)、球克(海南霉素Hainan-mycm)、氯苯胍(Robenidine).试验设7个药物组和感染不用药、不感染不用药2个对照组,每组10只鸡.在15日龄,除不感染不用药组外,每组接种孢子化卵囊12×104个.以抗球虫指数(ACI)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)、最适抗球虫活性百分率(POAA)为试验指标,进行综合评定.结果显示鸡球虫广东清远株对球佳为轻度抗药,对杜球、欲可胖、球安、氨丙啉为完全抗药,对球克、氯苯胍为中度抗药.     

鸡及鸡胚性别鉴别方法

家畜的性别控制技术对提高畜牧业生产水平和经济效益具有重要意义,也是畜牧界数十年来研究的热点之一。然而,家禽的性别控制和性别鉴别远比家畜复杂,在家禽生产中伴性遗传和泄殖腔鉴别法仍然是性别鉴定的主要方法。随着性别控制理论和试验研究的进展,目前产生了多种方法对家禽胚胎的进行性别鉴别。如何尽早的鉴别出鸡胚的性别是研究的重点之一。本文就近年来产生的鸡胚性别鉴别的主要方法作一综述。     

五种鸡球虫卵囊的同工酶研究

采用聚丙烯酰胺凝胶管状电泳，研究柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、变位艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫卵囊的乳酸脱氢酶、葡萄糖磷酸异构酶、葡萄糖－６－磷酸脱氢酶、碱性磷酸酶、６－磷酸葡萄糖酸脱氢酶的同工酶。结果显示５种球虫卵囊的５种同工酶酶谱能反映出虫种差异。作者认为同工酶技术有助于球虫种的分类。     

鸡球虫卵囊分离纯化与单卵囊制备技术的改进

鸡球虫病是严重危害和制约养鸡业发展的寄生虫病之一,凡是有养鸡的地方就有不同程度的鸡球虫病发生,特别是在集约化养鸡场,其发病率可达到50%～70%,死亡率也达20%～30%,严重时高达80%.对鸡球虫卵囊的分离纯化及单卵囊的制备工作是进行球虫病研究分析的主要工作,也是必备的工作.同时,球虫卵囊的分离技术是鉴别球虫的种类和建立球虫的纯种体系、调查某地区内球虫种类和获得球虫的纯种体系的重要手段,对进一步研究球虫的致病性、药物效应、产生的耐药性和禽体对球虫的免疫性、以及对抗球虫药的开发和球虫疫苗研制有重要意义.在结合科研实践的基础上对鸡球虫卵囊的分离纯化及单卵囊制备的操作方法进行改进,改进后提高了虫卵的回收率及单卵囊制备成功率,减化了工作流程.     

鸡球虫单卵囊的分离与雏鸡感染试验

用饱和盐水漂浮法收集鸡球虫卵囊,放入平皿,加入适量的2.5%重铬酸钾溶液,置于室温或20℃恒温箱中培养。待球虫卵囊孢子化后取出5滴,加10～15ml 生理盐水稀释,然后在载玻片上先后各加1滴于事先加温到60～70℃的2%琼脂溶液,将稀释后的球虫卵囊溶液包埋,待完全凝固后,在低倍显微镜观察下用分离针、刀片分割琼脂球虫块,直至分离为单个球虫卵囊为止。用分离的球虫单卵囊感染雏鸡,感染率为50～70%。     

鸡球虫中山分离株对7种抗球虫药的药敏试验

试验比较7种离子载体类抗球虫药对鸡球虫中山野外分离株的敏感性。试验分为9组,包括拉沙洛西钠(90mg/kg)、盐霉素(60mg/kg)、马杜霉素(5mg/kg)、莫能霉素(100mg/kg)、那拉霉素(70mg/kg)、敌球素(30mg/kg)和赛杜霉素(25mg/kg)7个用药组,感染不用药及不感染不用药2个对照组。每组选用15只2周龄本地黄鸡,从感染前1d开始喂药直到试验结束(感染后7d)。攻毒剂量为6万孢子化球虫卵囊。结果为拉沙洛西钠、敌球素、莫能霉素、那拉霉素、盐霉素、赛杜霉素和马杜霉素的抗球虫指数(ACI)分别是199、186、185、146、135.3、135和125;病变记分减少率(RLS)依次是拉沙洛西钠(100%)、敌球素(100%)、莫能霉素(80%)、那拉霉素(15%)、赛杜霉素(15%)、盐霉素(10%)和马杜拉霉素(5%)。结果表明:拉沙洛西钠、敌球素和莫能霉素对鸡球虫中山分离株属于敏感药物,盐霉素、国产马杜霉素、那拉霉素和赛杜霉素对鸡球虫中山分离株均不敏感。     

鸡球虫虫苗的使用技术

鸡球虫虫苗的使用技术张家峥毛建辉牛林山（河南省许昌市畜牧兽医站许昌４６１０００）徐梅花王永生（河南省许昌市魏都区畜牧中心许昌４６１０００）秦建军（河南省许昌市种禽场许昌４６１０００鸡球虫病是危害养鸡业的重要疾病之一，全世界凡是养鸡的地方都有鸡球虫病的...     

鸡艾美耳球虫单卵囊分离技术的建立

以玻璃纸做材料,用毛细吸管分离单卵囊,通过显微镜"重复"鉴定法,对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)进行分离.单卵囊感染20只鸡,在感染后5 d～15 d,用饱和盐水漂浮集卵法进行检测.结果显示,有15只鸡粪便中检出卵囊,经鉴定均为所要分离的虫种(E. tenella),感染成功率为75%,准确率达100%.另外,应用改进后的玻璃纸单卵囊分离技术还成功分离到毒害、巨型、堆型、布氏、和缓和早熟艾美耳球虫的单一虫种.结果表明,改进后的单卵囊分离技术简单易行,感染方便,成功率和准确率都较高,而且所用材料易于获得,消毒方便.     

影响鸡球虫单卵囊分离纯化的因素分析

单卵囊分离技术是获得品种单一、基因型纯净的卵囊,以便更有效的鉴别球虫种类和建立球虫纯种体系的重要手段.论文主要从雏鸡日龄、卵囊侵袭力、分离方法和材料的选择三个方面来分析其对鸡球虫单卵囊分离纯化的影响,从而为单卵囊分离技术的改进提供指导,进一步为球虫的各项研究提供基础.     

《鸡球虫虫种收集和同工酶研究》通过鉴定

由中国农科院上海家畜寄生虫病研究所青年科研人员黄兵同志主持的《鸡球虫虫种收集和同工酶的研究》，于2月初通过了由上海市科委组织的鉴定。     

3种药物对河北秦皇岛鸡球虫分离株的疗效试验

85只海兰褐蛋公雏随机均分为5组,每组17只,于14日龄,除白对照组外,每只鸡接种1.2×105个河北秦皇岛柔嫩艾美耳球虫卵囊,同时选择球敌(0.2 mL/L)、力克球(0.5 g/L)和氨丙啉(0.6 g/L)3种常用抗球虫药,通过饮水给药的方式,观察了其对球虫的疗效,试验期为9 d。结果表明,球敌和氨丙啉的抗球虫指数(AC I)分别为186.63和181.62,属高效抗球虫药,其中球敌促生长作用显著,整个试验期内的增重分别比红对照组、白对照组、力克球组和氨丙啉组提高65.16%(P<0.01)、6.63%(P>0.05)、28.59%(P<0.01)和13.31%(P>0.05)。而氨丙啉抑制卵囊繁殖和减轻肠道病变的效果明显,但连续应用,对后期鸡的增重有抑制作用。力克球的AC I为157.77,判为低效抗球虫药。3种药物对Hb含量和脾脏、胸腺及法氏囊相对质量无显著影响。     

感染鸡日龄对球虫单卵囊分离的影响

选用5、8、11日龄的雏鸡进行鸡球虫单卵囊分离试验,研究不同感染日龄对鸡球虫单卵囊分离的影响。结果表明:在其他条件一致的情况下,从感染成功率、潜伏期、高峰期的出现时间及持续时间和从每只感染雏鸡收集到的球虫卵囊数量等指标进行综合判定,发现感染11日龄的雏鸡单卵囊分离成功率最高。     

特异PCR方法用于鸡的3种艾美耳球虫混合感染鉴别的研究

用单卵囊分离法获得的鸡的3种艾美耳球虫（每种各2株）卵囊：柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）、巨型艾美耳球虫（E．maxima）、堆型艾美耳球虫（E．acervulina）。经纯化、提取基因组DNA后，用报道的种特异引物做PCR扩增分析，以确定是否为纯种。结果发现这3种球虫均存在混合感染的情况。该结果为进一步研究这3种球虫奠定了基础，并说明特异PCR方法能够有效地、快速地鉴别球虫虫种。     

甜菜碱与鸡球素、球痢灵配伍对鸡球虫的疗效试验

采用均匀设计方法，按U5^4均设计表设计甜菜碱与鸡球素、甜菜碱与球痢灵的配伍剂量，研究甜菜碱与鸡球素、甜菜碱与球痢灵抗球虫的最适配伍剂量，并设鸡球素（500mg/kg），球痢灵（125mg/kg）和球佳（1mg/kg)药物对照线及感染不给药和不感染不给药对照组，试验结果表明：球佳的抗E.tenella的作用强，盲肠病变值仅为6．75，抗球虫指数（ACI）的高达180．75，而鸡球素、球痢灵的作用较差，其盲肠病变值分别为24．0、25．5、ACI为126．57、126．71；但甜菜碱与鸡球素、利痢灵配伍后，配伍各组的盲肠病变值降低，平均值增重和抗球虫指数升高，显示甜菜碱在一定程度上能提高鸡球素和球痢灵的抗E.tenella的疗效作用。     

球必治防治鸡柔嫩艾美尔球虫病试验

本试验观察了球必治饮水剂以３０００,５０００和７０００倍稀释,让鸡自然饮用的抗鸡柔嫩艾美尔球虫效力,结果发现将球必治饮水剂按５０００倍稀释分别于鸡感染球虫前２天和感染后１天给药的抗球虫指数均在２００以上,说明其对鸡柔嫩艾美尔球虫病有很好的预防和治疗作用,是较好的抗球虫药,值得推广。     

鸡球虫卵囊培养与培养液中含氧量关系的研究

一、材料与方法(一)球虫使用本教研室继代保存的毒害艾美球虫(E.necatrix)、堆形艾美球虫(E.acervulina)和巨型艾美球虫(E.maxima)。(二)雏鸡 1日龄来航,在消除球虫条件下饲养12天。     

鸡痘病毒的分离鉴定

利用鸡胚毛尿囊膜培养、透射电镜观察、包涵体检查及抗原检测，从某种鸡场发病鸡群的鸡冠部痘疹上分离鉴定出两株鸡痘病毒。两株病毒能在尿囊膜上形成痘斑和包涵体，病毒粒子大小为２５０×３５０ｎｍ，具有囊膜和血凝，对乙酰，氯仿和ＰＨ３敏感，５６℃３０ｍｉｎ可灭活，人工感染试验结果表明，两株病毒具有较强的致病性。     

四川部分地区鸡球虫分离株对11种抗球虫药物的耐药性调查

从四川省部分地区分离到6株鸡艾美耳球虫株,为了掌握这些虫株对11种常用抗球虫药物的耐药性情况,采用笼饲试验法(鸡体试验法),以最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标对结果进行综合判定。结果表明,6株鸡艾美耳球虫对癸氧喹酯、拉沙洛西钠、盐酸氯苯胍和莫能菌素为轻度耐药及以上;对尼卡巴嗪、二硝托铵、氯羟吡啶、马度米星铵和甲基盐霉素为中度耐药及以上;对复方磺胺氯达嗪钠均为重度耐药及以上。6株鸡艾美耳球虫四川株对11种受试药物均不敏感,且对大部分试验药物表现为中度或重度耐药。