鸡肾型传染性支气管炎山西地方株的分离和初步鉴定

从山西省主要养鸡区分离疑患鸡肾型传支病鸡的气管,肾共３９份,经ＳＰＦ鸡胚传代,电镜观察,对ＮＤＶ的干扰试验,乙醚敏感性,耐热性试验以及动物回归试验,初步鉴定出１０株为明肾型传染性支气管炎毒株。     

鸡传染性法氏囊病病毒JSNJ株的分离鉴定及其部分特性研究

从江苏南京疑似传染性法氏囊病病毒感染的鸡场采集病料,通过临床症状、病理剖检变化、人工感染、SPF鸡胚接种、琼脂扩散试验和PCR扩增鉴定等,证实了该鸡场发生了鸡传染性法氏囊病,且从病料中分离到了纯净的传染性法氏囊病病毒.同时,证实该毒株的毒力较强,具有标准毒株的理化特性,免疫原性也比较好.     

鸡传染性囊病二价活疫苗攻击保护效果的观察

使用ＳＰＦ雏鸡进行了鸡传染性囊病二价活疫苗攻击保护效果的观察。１４日龄免疫２０００ＴＣＩＤ５０剂量的二阶苗或ＢＪ８３６苗价苗。免疫后１４ｄ（２８日龄）分别用不同剂量（１：１,１：１０,１：１００）的标准Ｉ型强毒株ＣＪ８０１株或标准变异株强毒１０８４Ａ株进行攻击,攻击后５ｄ剖杀观察。二价革免疫组能抵抗极高剂量（１：１）的ＣＪ８０１株及高剂量（１：１０）的１０８４Ａ株的攻击,但不能抵抗极高剂量（１：１     

鸡传染性囊病二价活疫苗攻击保护滴度的测定

使用ＳＰＦ雏鸡进行鸡传染性囊病二价活疫苗的攻击保护滴度的测定。ＳＰＦ雏鸡１４日龄免疫,于免疫后７ｄ、８ｄ、９ｄ、１０ｄ、１２ｄ、１４ｄ采血进行ＩＢＤ中和抗体的测定,同量分别进行标准Ｉ型强毒ＣＪ８０１株和标准变异株强毒１０８４Ａ株的攻击,建立抗体滴度与攻击保护率之间的直线回归方程。二价苗免疫后１４ｄＩＢＤ中和抗体滴度达到２９６８（ＧＭＴ）,其对ＣＪ８０１株和１０８４株的攻击保护率分别为８９．２１％和     

鸡传染性支气管炎病毒H120株细胞适应毒的培育研究

以IBH120鸡胚毒适应成纤维细胞（CEF）单层,培养出IBH120细胞弱毒株。电镜观察,可见典型的冠状病毒粒子。IBH120细胞弱毒株经细菌、霉菌、支原体、鸡白血病病毒检测均为阴性,且具有IB病毒特异性。CEF单层接毒后48h左右病毒增殖达到高峰。随着细胞传代次数的增加,C4～C10代H120株细胞毒的毒价（TCID50）逐步增高而趋于稳定,C4～C120代细胞毒的TCID50稳定在107^7.35-8.0mL之间,而C5～C10代IBH120细胞毒的EID50呈下降趋势,变动范围在10^7.3～10^6.5mL。以10^3.5 TCID50／只和10^4.5 TCID50／只的剂量,C4,C8,C10代毒分别滴鼻接种3日龄敏感鸡,免疫鸡的攻毒保护率为80％～100％,病毒分离回收率分别为20％和0。     

鸡传染性法氏囊病超强毒901株的分离和鉴定

从暴发鸡传染性法氏囊病死亡率６３．５１％的病死鸡中，分离出一株ＩＢＤ病毒９０１株，经检测，９０１株是一株ＩＢＤＶ超强毒株，可使３１日龄健康雏鸡７１．４％死亡，１０日龄ＳＰＦ鸡胚和３０日龄ＳＰＦ雏鸡１００％死亡。死亡鸡再现了自然暴发ＩＢＤ的典型病变。     

山西省鸡肾型传染性支气管炎的血清学鉴定

用鸡传染性支气管炎标准毒株Ｍ４１、Ｇｒａｙ、Ｈｏｌｔｅ、Ａｕｓｔ－Ｔ株以及ＭＡ５,通过气管环组织培养中和试验,采用病毒固定、血清变量法,对山西主要养鸡区１５个鸡场分离的１０个毒株进行了血清学鉴定。结果表明,待测毒株中１株属Ｍ４１血清型,５属Ａｕｓｔ－Ｔ型,２株属Ｇｒａｙ型,２株属Ｈｏｌｔｅ型,其中属Ｇｒａｙ、Ｈｏｌｔｅ型的４株待测毒均与ＭＡ５有相似的抗原性。     

华北半干旱区农田土壤肥力变化及培肥管理对策——以山西忻府区为例

为了揭示华北半干旱区农田养分丰缺状况和演变规律,和指导培肥地力管理措施,以忻府区为例,采用1963年、1980年、2006年和2010年4次土壤肥力监测及农业统计数据和农户调查资料,研究4个主要土壤肥力指标（有机质、全氮、有效磷和速效钾）的变化程度,并分析忻府区农田土壤肥力演变趋势及原因,提出未来培肥管理的相应对策。结果表明,自1963年以来,全区土壤养分平均含量总体处于逐年下降的趋势,1980年基本处于最低水平,之后养分开始缓慢回升,从2006年以后养分增加速度加快,到2010年,有机质、全氮、有效磷和速效钾含量分别达到15.3、0.79、15.6、149 mg/kg。导致这种变化的主要农田管理原因是,投入的严重不足和种植模式改变使前期肥力出现下降,1980年后化肥施用量大幅增加和灌溉条件的改善促进土壤肥力的回升,而秸秆还田加快了2006年以后土壤肥力回升。实施精准配方施肥,推行秸秆还田,有机无机相结合的施肥制度,并实行保护性耕作措施、改善灌溉条件和扩大灌溉面积的综合管理是所在区域加快土壤培肥的有效措施。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离鉴定

从四川某鸡场疑似肾型传染性支气管炎病死鸡的肾脏中分离到一株病毒,经SPF鸡胚连续传代、血凝试验、鸡胚矮小化试验、鸡新城疫干扰试验、RT-PCR鉴定和动物回归试验,初步确定该病毒为传染性支气管炎病毒,并命名为SC0911株。     

传染性法氏囊病毒安徽超强毒株的分离及分子鉴定

应用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种﹑琼脂扩散试验、电镜观察,从临床病鸡的法氏囊组织分别分离到3株传染性法氏囊病病毒（IBDV）CH03、JG04和QJ04株,对4周龄未免疫鸡的攻毒致死率分别为92%、83%、67%,对鸡胚的半数致死量（ELD50）分别为10-6.8/0.2ml、10-5.4/0.2ml、10-4.6/0.2ml;应用逆转录酶-聚合酶链式反应（RT-PCR）扩增的IBDV VP2基因高变区（vVP2）及其序列分析的结果表明,序列共有492个核苷酸,编码164个氨基酸。关键位点的氨基酸变化特征：第一亲水区P222A、疏水区的K249Q和S254G、N279D和T284A,与超强毒参考株UK661﹑HK46﹑OKYM和CH1-97极为相似,而与致弱株Cu-1）及变异毒株Var-E存在明显差异。研究结果表明,获得的3株IBDV分离株均属超强毒株。     

IBDV单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其应用

用经硫酸铵沉淀、高速离心并用蔗糖密度梯度离心提纯的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)免疫BALB/C小鼠.取免疫鼠脾细胞与NS—1小鼠骨髓瘤细胞触合,共获11株阳性杂交瘤细胞.经3次克隆化和ELISA检测,筛选出3个(1B_1、5D_6、6D_8)能持续分泌抗IBDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株.细胞上清液的ELISA效价为1B_1,3.2×10~(-2);5D_6,6.4×10~(-2);6D_8,3.2×10~(-2).腹水效价为1B_1,1.6×10~(-5);5D_6,8×10~(-4);6D_8,4×10~(-3).3株杂交瘤细胞的染色体数分别为105(1B_1),97(5D_6),85(6D_8).它们所产生的单抗皆为IgG1,所对抗的抗原决定簇不相同.3株McAb皆有沉淀特性.利用间接ELISA抑制试验,在诊断中进行了应用.     

火鸡传染性法氏囊病病毒YL株VP2基因的克隆和序列比较

参考GenBank发表的传染性法氏囊病毒(IBDV)基因组序列,设计并合成了一对特异扩增IB-DVVP2基因的引物。以广西玉林发病火鸡群分离的IBDV野毒YL株为材料,以其基因组为模板利用RT-PCR技术扩增出了1.5kb的cDNA产物,将VP2基因克隆于PUC119质粒上,得到重组PUC119质粒。并对VP2基因全序列测定、分析和聚类表明,YL株与欧洲超强毒株非常相似,而与经典强毒株、弱毒株和变异株相差较大。     

鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株HQ0806的分离与鉴定

通过对辽宁阜新近郊某鸡场数群 15 日龄左右的病鸡的临床症状、病理变化、病毒分离、纯化、动物回归、血清学检测、病毒形态观察等检测, 分离到一株鸡传染性法氏囊病病毒并命名为HQ0806。研究表明：该病毒效价达到10-5.8/ 0.2ml,在动物回归试验中其引起发病率为100％,死亡率达83％,剖检可见法氏囊呈“紫葡萄样”外观,胸腺萎缩,骨髓脂肪化等病变,表现了超强毒株的致病特点。     

鸡传染性支气管炎病毒HN104株的鉴定及S1基因的分子特征

2010年4月从河南省某疑似患鸡传染性支气管炎鸡场中分离到一株病毒。通过SPF鸡胚致侏儒实验,鸡红细胞凝集试验,干扰新城疫病毒增殖试验和RT-PCR试验确认该病毒为一变异的鸡传染性支气管炎病毒。该病毒尿囊液凝集鸡红细胞的HA价为0,经胰酶处理后为27;EID50（鸡胚半数感染量）为10－5.5/0.1 mL;能够显著干扰鸡新城疫病毒La Sota株在鸡胚中的增殖;动物回归试验结果显示该病毒可致SPF雏鸡出现肾脏肿大,呈花斑肾。其S1基因全长为1617 bp,经序列分析发现与鸡传染性支气管炎疫苗Massachusetts株、T株、4/91株亲缘关系较远低于78%。     

3种免疫植物多糖对法氏囊活疫苗的免疫效果的影响

将60只1日龄北京白鸡,饲养至14日龄,随机分组进行传染性法氏囊中等毒力疫苗的免疫,各组分别添加黄芪、岩藻和油菜3种植物提取的多糖成分,添加剂量为10 mg/只。26日龄进行二免,首免及二免都采用滴鼻点眼方式进行。二免后定期采血检测法氏囊中和抗体效价和外周血淋巴细胞体外转化率。结果表明:二免后2周,除了油菜多糖以外,其他2种多糖添加组的中和抗体滴度与对照组相比无显著差异;各组的淋巴细胞体外转化率显著高于对照组,表明3种植物多糖成分能促进淋巴细胞增殖,有待于进一步开发为传染性法氏囊病的免疫增强剂。     

鸡传染性法氏囊病病毒的分离鉴定与培养特性研究

为研究鸡传染性法氏囊病病毒在不同宿主上的培养特性,从河南省某疑似感染鸡传染性法氏囊病病毒的鸡场采集病料,通过琼脂免疫扩散试验初步筛选出IBDV毒株,并将毒株回归易感鸡,在SPF鸡胚及DF1细胞上培养。结果显示：培养出的病毒作为抗原与标准阳性血清之间均出现阳性沉淀线;回归SPF鸡试验显示发病率达100%,死亡达60%,病死鸡只出现法氏囊肿大、出血甚至出现紫葡萄样;该毒株能引起鸡胚CAM增厚、胚体出血,引起DF1细胞变圆脱落;ELD50与TCID50分别为10-4.6/0.1 mL、10-5.5/0.1 mL。试验证实IBDV分离株,属于超强毒株,该毒株可以在鸡胚和DF1细胞上适应增殖,将其命名为HN12号分离株。