抗生素对桑树外植体生长与分化的影响

试验比较了不同种类抗生素在不同浓度下对桑子叶、不定芽和新梢生长与分化的影响，结果显示：（１）培养基中卡那霉素浓度高于２０ｍｇ／Ｌ时．桑子叶不能形成不定芽；羧苄青霉素或头孢霉累大于４００ｍｇ／Ｌ时，子叶不定芽诱导率明显下降。（２）卡那霉素大于３０ｍｇ／Ｌ，羧苄青霉素或头孢霉累大于４００ｍｇ／Ｌ，不定芽抽茎受到明显抑制。（３）卡那霉素大于１０ｍｇ／Ｌ，羧苄青霉素或头孢霉素大于１００ｍｇ／Ｌ，桑树新梢难以形成根系。     

草麻黄的组织培养及植株再生

将草麻黄幼草节间幼茎部分作外植体,培养在附加ＫＴ０．０５４ｍｇ／ｌ＋２,４－Ｄ１．１１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中,可成功诱导出愈伤组织,愈伤组织分化出芽;同样的外本培养在附加ＢＡ３ｍｇ／ｌ＋ＩＡＡ０．２ｍｇ／ｌ的ＭＳ培养基中,诱导出大量不定芽;不同途径得到的芽转移到ＭＳ附加６－ＢＡ０．０５６ｍｇ／ｌ＋１．１１ｍｇ／ｌ２,４＋１１．１１ｍｇ／ｌ２,４－Ｄ的培养基后,可分化出不定根,从而形成完整植株。     

播娘蒿幼蕾和花序轴的组织培养和再生植株研究

播娘蒿幼小花蕾在附加有１５ｍｇ／ＬＮＡＡ、０５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０１ｍｇ／ＬＫＴ的ＭＳ培养基中,培养两周即形成０５ｃｍ２大小的愈伤组织块,出愈率达８３％。继续培养两周转至附加有２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、０５ｍｇ／ＬＫＴ和０２ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ分化培养基上,２～３周后出现绿色芽点,继续培养２周即可得到分化小芽。播娘蒿花序轴在附加有２～６ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、０５ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基中,培养５～６周也都能分化出芽,但最佳培养基为４ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、０５ｍｇ／ＬＮＡＡ。分化小芽转至附加０５ｍｇ／ＬＮＡＡ或０５ｍｇ／ＬＩＢＡ的１／２ＭＳ生根培养基上培养２～３周均能形成完整植株。     

热研二号柱花草组织培养研究

研究结果表明,利用热研二号柱花草无菌苗的子叶为外植体,在Ｍ２培养基（ＭＳ忝分＋０．８％琼脂＋３．０％蔗糖＋１．０ｍｇ／Ｌ萘乙酸＋４．０ｍｇ／Ｌ激动素,ｐＨ６．０）培养可诱导分化出愈伤组织和枝条。１月龄枝条在Ｍ７培养基（１／２ＭＳ基本成分＋０．８％琼脂＋１．０蔗糖＋０．５ｍｇ／Ｌ萘乙酸＋０．０５％活性炭,ｐＨ６．０）培养可诱导生根,生根率６０％,获得了人有根,茎,叶,的完整柱花组培植株。     

红三叶组织培养及再生植株

本文采用ＭＳ，Ｂ５和ＰＣ一Ｌ２作为基本培养基，在不同激素组合条件下对红三叶（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍｐｒａｔｅｎｓｅ）子叶及下胚轴进行组织培养。在ＭＳ，Ｂ５和ＰＣ一Ｌ２附加２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ和０．５ｍｇ／ＬＢＡ的培养基上，子叶及下胚轴愈伤组织诱导率均在８９％以上。愈伤组织继代在Ｂ５无机盐十三倍ＭＳ有机成分＋３％蔗糖＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ，＋１０ｍｇ／ＬＶｃ的培养基上生长良好。愈伤组织在Ｂ５附加０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／ＬＩＢＡ的培养基上再生植株。下胚轴在ＭＳ附加２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋１ｍｇ／ＬＮＡＡ的培养基上直接分化形成丛生苗，转入无激素ＮＳ培养基上再生根。实验表明ＶＥ，Ｖｃ，ＰＶＰ和活性碳对愈伤组织褐化有抑制作用，１０ｍｇ／ＬＶｃ抗褐化作用最好。     

白羊草幼穗的组织培养

白羊草幼穗在附加在２,４－Ｄ １．０ｍｇ／Ｌ,水解酪蛋白５００或１０００ｍｇ／Ｌ的Ｎ６或ＭＳ培养基中,在２５±１℃,暗光培养条件下,两周时形成０．５ｃｍ＾２大小的愈伤组织块。愈伤组织的发生率为８４％,培养３周后形成旺盛生长的的愈伤组织。其分化是在含有ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ,ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上或在附加有ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ、ＩＡＡ０．４ｍｇ／Ｌ、ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ的Ｎ６培养基上２￣４周后     

假俭草侧芽愈伤诱导和植株再生

以中国优良品系Ｅ １２６假俭草的侧芽为外植体建立高效的再生体系。试验结果显示,１）适宜于侧芽生长的培养基为ＭＳ＋ＢＡＰ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．８ ｍｇ／Ｌ;２）在最佳诱导培养基ＭＳ＋２,４ Ｄ１．０ ｍｇ／Ｌ＋ＢＡＰ０．１ ｍｇ／Ｌ上,侧芽愈伤诱导率达９３％。较强的光照能提高愈伤组织的诱导率;３）在最佳分化培养基ＭＳ＋ＫＴ２．０ｍｇ／Ｌ 上,绿苗分化率为１２．６％;４）试管苗最佳生长培养基为ＭＳ＋ＢＡＰ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．８ ｍｇ／Ｌ;５）在最佳生根培养基ＭＳ＋ＮＡＡ０．６ｍｇ／Ｌ 上,试管苗的生根率达９８％,植株移栽成活率为９４％。本试验为假俭草体细胞筛选和遗传转化提供依据。     

百脉根的组织培养与植株再生

百脉根下胚轴在附加有２，４－Ｄ ０．６￣２．０ｍｇ／Ｌ、ＫＴ ０．３ｍｇ／Ｌ的ＭＳ的培养基上，３￣４周时形成愈伤组织，继代２￣４次后，在附加有ＢＡ ０．５￣２．０ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ０．１￣２．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上２￣３周有白色根形成。     

影响桑树叶片培养不定芽形态分化主要因素的研究

以ＭＳ为基本培养基，探讨了植物激素、ｐＨ值、糖类、琼脂含量及桑树品种、外植体六因素对桑树叶片培养不定芽形态分化的影响，明确了植物激素是控制不定芽分化的决定因素，以ｐＨ５．６、琼脂６ｇ／Ｌ、葡萄糖２０ｇ／Ｌ为宜，桑树品种间不定芽分化率差异极显著，外植体以试管植株叶片分化率为高，田间植株叶片培养从桑树脱苞至停止生长前皆可进行。叶片不定芽分化率已达９６％。     

激素对兰引Ⅰ号草坪型狗牙根愈伤组织及器官形成的影响

对兰引Ⅰ号草坪型狗牙根茎段外植体进行了愈伤组织和器官形成的诱导，结果表明ＭＳ＋２，４－Ｄｍｇ／Ｌ可诱导其产生愈伤组织，诱导率达７３％，ＭＳ＋ＮＡＡ ２ｍｇ／Ｌ仅能诱导生根，这２种生长素与细胞分裂素６－ＢＡ（浓度０．５ｍｇ／Ｌ）的组合可诱导出大量的分蘖芽。     

利用桑树特异种质资源的冬芽组织培养再生植株的试验

以不同类型的桑树特异种质资源的冬芽为材料,分别在含有不同种类生长调节剂及添加量的培养基中培养诱导桑树再生植株,考察桑树特异种质资源利用冬芽培养再生植株的可行性,筛选适宜的生长调节剂及其用量。结果表明:供试桑树种质资源的冬芽在不添加生长调节剂的培养基中外植体停止生长,添加生长激素TDZ能较好地诱导和促进愈伤组织的形成与生长,但会抑制生长芽的再生长,而添加细胞分裂素6-BA能促进冬芽的再生,且添加3.0 mg/L 6-BA的培养基中冬芽再生率显著高于添加1.0 mg/L 6-BA的培养基;8份桑树种质资源的冬芽在含3.0 mg/L 6-BA的改良培养基中培养,新疆药桑和小花叶皮桑的丛生芽诱导率最高,其冬芽的再生率均为66.7%,滇桑次之,再生率为55.5%,天目山桑和斯里兰卡的再生率分别为40.0%和25.0%;5份桑树种质资源的冬芽再生组培苗转移至生根培养基中培养1个月后,只有滇桑和新疆药桑分别诱导出再生根系(诱导率为分别为20.0%、14.3%)后移栽成活。研究结果初步显示,离体组织再生培养是保存和利用天然22倍体新疆药桑、渐危种滇桑等珍稀桑树种质资源的有效途径之一。     

桑树内生真菌Macrophomina phaseolina MOD-1产油脂培养基及摇瓶发酵条件的优化试验

从健康桑树根系中分离筛选得到一株内生产油脂真菌——菜豆壳球孢菌MOD-1(Macrophomina phaseolina,MOD-1)。结合均匀设计和单因子筛选法得到该菌株产油脂发酵培养基最优配方为:可溶性淀粉105 g/L,蛋白胨1.1 g/L,磷酸二氢钾1.5 g/L,硫酸铵0.3 g/L,硫酸镁0.32 g/L,氯化锰4.9 nmol/L。在此基础上优化该菌株产油脂的摇瓶发酵条件为:发酵液初始pH7.0,发酵温度26℃,摇瓶转速190 r/min,装液量100 mL。在优化后的培养基组分及摇瓶发酵条件下培养6 d,菌体生长量(干质量)高达41.852 g/L,油脂产量达到25.511 g/L。利用气相色谱-质谱法分别测定菌株在优化后的培养基或发酵条件下产生油脂的脂肪酸组成,前一种条件下检测出9种脂肪酸成分,其中单不饱和脂肪酸含量为67.92%;后一种条件下检测出7种脂肪酸成分,其中单不饱和脂肪酸含量为74.32%。结果表明,在优化培养基及摇瓶发酵条件下,MOD-1菌株的油脂产量增高,组成简单,易于纯化,且单不饱和脂肪酸含量较高。     

紫叶李组织培养及快繁体系的建立

试验以紫叶李春季萌生苗嫩枝为外植体,在腋芽诱导的基础上,建立“以芽尖诱导丛生芽”的组培快繁体系。腋芽诱导培养基为MS+6BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L与MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;丛生芽增殖培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.3mg/L;壮苗培养基为MS+6BA0.4mg/L+IBA0.1mg/L+GA30.2mg/L。最佳生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+蔗糖20g/L。     

培养基成分对桑树试管苗黄酮类化合物含量的影响

基于探讨适合桑黄酮类化合物合成的优化培养条件,以桑品种陕桑305为材料,研究了培养基成分及其添加量对桑树试管苗黄酮类化合物含量的影响。结果表明:当培养基中果糖的质量浓度为30g/L,氮元素浓度为60.02mmol/L,氨态氮与硝态氮物质的量比为0.3165,MnSO4·4H2O和ZnSO4·7H2O的质量浓度分别为11.15、4.3mg/L,激素质量浓度为0.1mg/LNAA(α-萘乙酸)、0.5mg/L6-BA(6-苄氨基嘌呤)、0.5mg/LKT(激动素)时,有利于桑树试管苗叶片中黄酮类化合物的合成;Mn2+和Zn2+浓度能影响苯丙氨酸解氨酶活性,当培养基中的MnSO4·4H2O和ZnSO4·7H2O分别为11.15、4.3mg/L时,酶活性最高。     

疏叶骆驼刺茎段离体快繁技术的研究

以疏叶骆驼刺Alhagi sparsifolia无菌苗茎段为外植体,探讨了不同浓度6 苄氨基嘌呤（6 BA）和萘乙酸（NAA）、水解糖蛋白（LH）、赤霉素（GA3）在疏叶骆驼刺茎段离体快繁中的作用以及NAA在生根时的作用。结果表明：1）当NAA浓度为0.1 mg/L时,降低6 BA浓度,有利于芽的生长,反之,有利于丛生芽分化;2）LH 能促进苗的生长,增加芽分化能力,MS+ 0.5 mg/L 6 BA +0.1 mg/L NAA+1.5 g/L LH为疏叶骆驼刺茎段快繁最佳培养基,增殖倍数为6.8;3）GA3对骆驼刺茎段离体培养无显著促进作用;4）1/2 MS+0.1 mg /L NAA为最佳生根培养基,生根率为71.7%。     

紫花斜茎黄芪腋芽茎尖组织培养和植株再生研究

通过对紫花斜茎黄芪 (Astragalusadsurgens)进行组织培养和植株再生 ,着重对培养基和培养条件等方面进行了筛选和研究 ,结果表明 ,紫花斜茎黄芪腋芽和茎尖作为外植体的组织培养和继代增殖培养 ,最适宜培养基为MS + 1mg/LBA + 0 .1mg/LNAA和MS + 0 .5mg/LBA + 0 .1mg/LNAA。培养温度 2 0～ 2 6℃ ,光照每天 10h ,光照强度 15 0 0Ix。生根培养最适宜的培养基为MS + 0 .1mg/LNAA ,培养温度 2 0～ 2 5℃ ,光照每天 10h ,光照强度仍为 15 0 0Ix。     

桑树叶片愈伤组织的诱导及不定芽分化影响因素的研究

通过正交试验,探讨了植物生长调节剂噻二唑苯基脲(Th id iazuron,TDZ)、α-萘乙酸(NAA)、桑品种、叶龄、叶位等5种因素对桑树叶片愈伤组织诱导的影响。筛选出了桑树叶片愈伤组织诱导的最佳条件为:21 d苗龄的陕305组培苗叶片,培养基MS+1.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA。在此条件下,陕305愈伤组织诱导率可达93.9%。对得到的陕305叶片愈伤组织进行了不定芽分化诱导,结果表明,最佳分化培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+2%果糖,愈伤组织不定芽分化率高达100%。     

兔眼蓝莓‘园蓝’离体培养增殖技术研究

本试验以兔眼蓝莓主栽品种‘园蓝’为试材,研究其离体培养增殖技术。基本培养基为WPM培养基,添加蔗糖20g/L,琼脂10g/L,pH为5.2。实验总体分为两个过程：第一步,在基本培养基中加入ZT (2mg/L, 4mg/L, 6mg/L)或2ip (2mg/L, 5mg/L, 10mg/L),共6个处理,培养60d后,观察记录蓝莓腋芽萌发情况,WPM ZT 4mg/L更有利于腋芽萌发,各处理中腋芽萌发后生长速度都很慢;第二步,在基本培养基中加入4mg/L的ZT及IAA（0.1mg/L, 0.2mg/L）或IBA（0.1mg/L, 0.2mg/L）,共4个处理,培养60d后进行数据统计,发现最佳处理为WPM ZT 4mg/L IBA 0.2 mg/L,并且芽子长势较好。因此,兔眼蓝莓‘园蓝’腋芽诱导和生长的最佳培养基为WPM ZT 4mg/L IBA 0.2 mg/L。     

钝叶瓦松带芽叶片的组织培养和快速繁殖

以钝叶瓦松（Orostachys malacophyllus）带芽叶片为外植体,MS为基本培养基添加不同质量浓度的6 BA、NAA和2,4 D,探讨了不同植物生长调节剂对钝叶瓦松带芽叶片启动的影响,以期筛选出最佳培养基配方,建立钝叶瓦松组织培养再生体系。结果表明,叶片腋芽最佳启动培养基为MS+6 BA 3 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,腋芽增殖的最佳培养基为MS+6 BA 1.5 mg·L-1+2,4 D 0.2 mg·L-1,腋芽的增殖倍数为5.35。最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.3 mg·L-1,生根率为96.67%,移栽后成活率为76.67%。