西藏阿里地区冰川棘豆(Oxytropis glacialis)毒性生物碱的鉴定

光谱分析表明 ,冰川棘豆生物碱结晶 为含有一分子结晶水的 2 ,2 ,6 ,6 -四甲基 - 4-哌啶酮 (2 ,2 ,6 ,6 - tetramethyl-4- piperidone,TMPD)。小鼠口服 L D50 为 935 .4m g/ kg,95 %可信限为 85 2 .7～ 10 2 1.4m g/ kg,小鼠 TMPD急性中毒症状与山羊冰川棘豆自然中毒症状基本相似。     

西藏阿里地区冰川棘豆毒性生物碱的鉴定

光谱分析表明冰川棘豆生物碱结晶Ⅰ为含有1分子结晶水的2,2,6,6-四甲基-4哌啶酮（2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidone,TMPD）。小鼠口服LD50为935.4 mg/kg,95％可信限为852.7～1021.4 mg/kg。小鼠TMPD急性中毒症状与山羊冰川棘豆自然中毒症状基本相似。     

西藏阿里地区草原冰川棘豆有毒生物碱鉴定

本研究在西藏阿里的冰川棘豆（Oxytropis glacialis)中提取到一种结晶物，经红外光谱、核磁共振谱分析，确定为2．2．6．6－四甲基－4－哌啶酮，本品经口灌胃小鼠LD50为935.4mg/kg,95%可信限为852．7－1021．4mg/kg，是一种具有中等毒的生物碱。其中毒症状与羊自然中毒病例相似。     

硝基苯染毒致小鼠脑的毒性作用

为探讨硝基苯染毒致小鼠脑的毒性作用,用灌胃的方法对试验小鼠进行了硝基苯染毒,染毒剂量分别为26、52、105mg／kg,每日染毒1次,共30d。于末次染毒后第2d将小鼠脱颈椎处死,立即取出脑,检测SOD和GSH—Px活性和．MDA含量,并对其显微及超微结构进行了观察。结果,硝基苯对小鼠脑有明显的毒性作用,主要表现为大脑血管间隙扩大,周围神经纤维疏松;小脑、海马区部分浦肯野氏细胞核固缩、核溶解,锥体细胞核固缩;神经细胞肿胀,线粒体明显肿胀,粗面内质网形态扩张;大部分胶质细胞电子密度增加,胞核变小、核固缩,胞质内细胞器明显减少;有些神经纤维脱髓鞘,神经微丝溶解;随着染毒剂量的加大,MDA含量逐渐升高,CAT和SOD活性不断显著降低。结果表明,硝基苯可以通过氧化应激和诱发细胞凋亡对小鼠脑组织造成损伤。     

四甲基哌啶酮对小鼠的急性和慢性毒性试验

为了探讨小鼠长期接触2,2,6,6-四甲基哌啶酮(TMPD)引起有害效应的剂量,以评价对其进行长期接触的危险性,对小鼠进行TMPD的急性和亚慢性毒性试验。结果表明,TMPD对小鼠具有一定急性毒性(LD50=292.429mg/kg-1);亚慢性毒性表现出一定的雌雄差异,肝脏和肾脏是其主要靶器官。     

钩吻生物碱急性毒性研究

为评价钩吻生物碱的安全性,采用改良寇氏法考察钩吻生物碱的急性毒性。给小鼠一次性灌胃给予200、158、124.88、100 mg/kg不同剂量钩吻生物碱,连续观察7 d,并测定存活小鼠的血常规与脏器指数。结果表明,小鼠灌胃给药的最大耐受量为100 mg/kg,其LD50为136.60 mg/kg,LD50的95%可信限为126.74-147.23 mg/kg。与空白对照组相比,124.88、100 mg/kg剂量组小鼠血常规中的白细胞总数减少,血红蛋白减少,其他指标无显著性差异,脾脏指数下降,其他脏器指数无显著性差异。该结果为钩吻生物碱的安全性评价奠定了基础。     

喹胺醇对小白鼠精子致畸性试验

用昆明小白鼠为靶动物，进行了小鼠精子畸形试验，研究以喹胺醇的致畸作用。选择成年健康雄性昆明种小鼠30只（体重28－32g），随机分成6组。喹胺醇分为450mg/kg(1/20LD50），750mg/kg(1/12LD50），1000mg/kg(1/9LD50）和1500mg/kg(1/6LD50）4个剂量组，用2％吐温－80配成混悬液灌胃，阴性对照组2％吐温－80灌胃，阳性对照组用环磷酰胺（40mg/kg）腹腔注射，连续5d。结果表明，喹胺醇对小白鼠精子无致畸作用。     

骆驼蓬总碱对人工感染牛双芽巴贝氏焦虫病的治疗试验

骆驼蓬总生物碱（Total Alkaloids of Peganum harmala L.)的盐酸盐注射液按5mg/kg体重肌肉注射；总生物碱纯粉按2－3mg/kg体重溶于定量70％乙醇中静脉注射，对人工感染牛双芽巴贝氏焦虫的8头1－5岁土种黄牛进行治疗试验。结果：对照组4头牛存活3头，死亡1头，其配对分组时平均染虫率为0．23％，病期平均最高染虫率为8．07％，血液中虫体间歇、反复出现，在20天的观察期内持续存在，试验组4头牛经用骆驼蓬总碱治疗全部治愈，其配对分组时（药前）平均染虫率为0．365，经肌肉注射药物2次或静脉给药1次后，血液中虫体消失，连续10天涂血片镜检，均未发现虫体，试验表明该总生物碱杀灭牛双芽巴贝氏焦虫的效果显著。     

枸杞多糖对免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-10和IL-12/IL23 p40分泌水平的影响

通过研究枸杞多糖(LBP)对免疫抑制小鼠血清中细胞因子IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10分泌的影响,探讨LBP的免疫调节机制,为LBP的开发利用提供理论依据。60只ICR雌性小鼠,随机分为5组,对各组小鼠进行连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg),间隔3d后,再连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg);同时,用高(40mg/1kg)、中(20mg/1kg)、低剂量(10mg/1kg)的LBP给小鼠连续灌胃2周,阳性对照和阴性对照分别用LPS(1mg/kg)和PBS,连续2周。小鼠眼眶取血,分离血清,ELISA检测血清中IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10的分泌水平。结果显示,与阳性对照和阴性对照组相比,LBP能提高免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10的分泌水平,提示LBP能增强小鼠细胞免疫与体液免疫应答,为枸杞多糖作为免疫增强剂的开发应用奠定了一定的理论基础。     

结核分枝杆菌ESAT-6 DNA疫苗的细胞和体液应答及保护效率研究

构建了含分枝杆菌抗原ESAT_6( 6kDa)分泌蛋白 (结构基因 )的真核表达载体pJW43 0 3 ,进行了酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,收集表达细胞或浓缩上清液 ,进行SDS_PAGE电泳 ,用结核杆菌特异性抗体进行免疫印迹检测 ,证明上述重组质粒能在哺乳动物细胞中表达出特异蛋白。重组表达质粒肌注免疫小鼠 ,首免后 2 1d,未检测到特异性抗体 ,二免和三免 2 1d后ESAT_6的特异性抗体平均效价分别为 1∶40 0和 1∶80 0。三免后 2 1dESAT_6的特异性细胞因子γ_干扰素的浓度为 1 2 .8± 0 .4ng/mL,而阴性对照空载体DNA组三免后只诱导产生 <0 .1ng/mL的γ_干扰素。三免后经静脉强毒攻击 ,免疫组小鼠肺脏的细菌数比对照空载体组减少了 90 %以上。本研究表明 ,该核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞和体液免疫应答并获得较高的保护效率。     

两株鸭源H6N2亚型禽流感病毒的序列分析及对鸡的致病性研究

为了解鸭源H6N2亚型禽流感病毒(AIV)的生物学特性,本研究对两株鸭源H6N2亚型AIV [A/duck/Hube/Sd061/2008(HB/061/08)和A/duck/Fujian/S2080/2009(FJ/080/09)]进行序列分析和致病性试验.序列分析显示:两株病毒的HA和NA基因均来源于我国近年流行的H6亚型病毒株,但是HB/061/08株的内部基因可能来源于H9、H5等其他亚型.与病毒株HB/061/08 NP、PA、PB2基因的核苷酸同源性最高的病毒株为A/environment/Hunan/2-84/2007(H9N2);与M、PB1和NS基因的核苷酸同源性最高的病毒株分别为A/duck/Zhejiang/11/2000(H5N1)、A/chicken/Hebei/7/2008(H9N2)和A/chicken/Henan/L1/2008(H9N2).两株病毒的抗原差异性较显著,相关系数为0.49;用106 EID50病毒剂量感染4周龄SPF鸡,结果显示FJ/080/09株不能感染鸡,而HB/061/08株在鸡体内能够高效复制,并通过咽喉和泄殖腔持续排毒.鸡群感染后第3d采取脏器样品,在气管和肺部能够检测到病毒存在,部分脏器和器官的组织学观察显示存在一定程度的病理变化.以上数据表明,H6亚型AIV在跨越不同宿主感染的传播过程中,对新宿主适应能力的差异导致对其致病性的差异.     

三肽囊素对鸡血浆蛋白组分及IL-2与IL-6含量的影响

144只1日龄黄羽肉鸡随机分为4组,第7日龄时第Ⅰ～Ⅳ组分别注射0、0.005、0.010、0.030mg/kg剂量的三肽囊素,在14、35及56日龄时每组各取一个重复,取血浆,醋酸纤维薄膜电泳检测血浆蛋白各组分的比率,放射免疫法检测血浆IL-2与IL-6的含量.结果显示不同剂量的三肽囊素可提高血浆γ球蛋白水平:对血浆...     

白细胞介素和干扰素γ对绵羊体外受精胚胎体外发育影响的研究

利用SOFM+0.8%BSA+1mM谷氨酰胺作为绵羊胚胎的培养液,分别添加LIF、IL-1β、IL-2、IL-6及IFN-γ,以研究LIF、IL-1β、IL-2、IL-6及IFN-γ对绵羊早期胚胎发育的影响。结果说明,LIF促进2～8细胞胚胎发育至桑椹胚,同时也能够促进桑椹胚向扩大囊胚和孵化囊胚发育。但IL-1β、IL-2、IL-6及IFN-γ对绵羊早期胚胎的发育无显著影响。     

不同光照条件下褪黑素对鸡鸭外周血中白介素含量变化的影响

为探讨不同褪黑素水平对禽类机体免疫系统的调节作用,本试验通过控制不同光照时间分3组(分别是短光照组6h,对照组12h,长光照组18h)饲养鸡45只、鸭45只,采用放射免疫法(RIA)测定血清中褪黑素(MLT)和白介素(IL-2、IL-6)含量,研究不同褪黑素水平对鸡、鸭血清中IL-2,IL-6含量变化的影响。结果表明:短光照组的鸡、鸭血清中褪黑素水平明显升高;长光照组血清中褪黑素水平明显降低,且与对照组相比,差异显著;短光照组鸡、鸭血清中IL-2含量由于褪黑素水平的升高而有不同程度的升高,长光照组的则有不同程度的降低,分别与对照组相比,差异显著;IL-6含量随光照时间变化不明显。结论:由于控制光照时间使内源性褪黑素水平不同,褪黑素水平对鸡、鸭外周血IL-2含量有显著影响,对IL-6含量影响不明显。     

三价铬在荷斯坦牛乳中沉积量及对泌乳量影响的研究

将 30头胎次、泌乳期、泌乳量相近的荷斯坦牛分成 6组 ,每组 5头 ,在其日粮中分别投饲 2、3及 4mg铬量的三氯化铬 (Crcl3 ·6H2 O)和吡啶甲酸铬 (CrPIF) ,以同舍非试验牛群为对照 ,饲养 36天。结果表明 :①试验组 16、36天的泌乳量 ,两种铬源均随铬水平的递增呈下降趋势 ,2mg无机铬和有机铬对泌乳量有积极影响。②三水平无机铬组乳中铬含量低于对照组 (P >0 0 5 ) ,三水平有机铬随铬浓度的递增 ,乳中铬含量亦呈下降趋势 ,均高于无机铬组 ,其中 2mgCrPIF组比对照组乳中铬含量高 43 7%(P >0 0 5 ) ,且显著高于三水平无机铬组 (P <0 0 5 )。     

鸭流感病毒4/2004-H6N2亚型毒株的血凝素基因全序列克隆与分析

2004初从正常鸭群中分离到一株鸭源禽流感病毒，命名为A／Duck／HN／4／2004(H6N2)。经对血凝素基因(HA)序列分析发现HA基因全长为1744bp，共编码566个氨基酸，在裂解位点仅含一个碱性氨基酸-精氨酸(R)，符合LPAIV的标准。将所得基因序列与已发表的同一亚型参考序列分析表明，与H6亚型流感HA基因同源性为89．2％-97．1％，经分子遗传演化分析表明本次分离株与香港分离株A／Duck／Hong Kong／3600／99(H6N2)、A／Duck／Hong Kong／3600／99(H6N2)最近。     

猪细小病毒2型、3型、6型多重PCR检测方法的建立及初步应用

为建立同时快速检测猪细小病毒2型(PPV2)、猪细小病毒3型(PPV3)、猪细小病毒6型(PPV6)的方法,本研究根据PPV2、PPV3、PPV6各自的NS基因序列设计3对特异性引物,建立了一种能同时检测上述病原的多重PCR方法。结果显示,建立的多重PCR方法对PPV2、PPV3、PPV6的基因组DNA均能有效扩增,对猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、副猪嗜血杆菌(HPS)、猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、日本乙型脑炎病毒(JEV)的核酸均无特异性扩增,特异性较强;对PPV2、PPV3、PPV6的重组质粒最低检测限分别为4.32×10^3拷贝/μL、9.62×10^3拷贝/μL、4.25×10^3拷贝/μL,与其他研究者已建立的单一PCR检测结果一致,敏感性较高。利用本研究建立的多重PCR方法对25份可疑临床样品检测,同时利用文献报道的单一PCR方法检测,二者结果一致。本研究建立的多重PCR方法为检测PPV,及该病的流行病学调查提供了技术支持。