牛胚胎冷冻与移植受胎技术研究

本文进行了牛胚胎冷冻与移植受胎技术研究。摸索出了提高牛冷冻胚胎成活率和移植受胎率的综合配套技术。牛冷冻胚胎解冻成活率达８４．４％（５７／１２２）。其中１９９６年移植受胎率达到５５．６％（２０／３６）。Ａ级胚胎达以７７．８％（２１／２７），并在我国首次获得中国荷斯坦牛冷冻胚胎的二分胚的同孵孪生牛犊。且达到４２．９％（３／７）移植受胎率。     

中国荷斯坦牛胚胎冷冻与移植受胎技术研究

牛冷冻胚胎解冻成活率达８４．４％（３８／４５）;冷冻胚胎移植总受胎率达到４６．７％（５７／１２２）,其中１９９６年达到５５．６％（２０／３６）,Ａ级胚胎达到７７．８％（２１／２７）。并在我国首次获得中国荷斯坦牛冷冻胚胎二分胚的同卵孪生牛犊,且达到４２．９％（３／７）的移植受胎率。     

本地黄牛冷冻胚胎移植技术及其受胎率影响因素分析

笔者选用97头山东省平度市当地黄牛作为受体,采用玻璃化解冻进行加拿大进口北美性控高产荷斯坦奶牛冷冻胚胎移植。试验分别从冷冻胚胎级别、受体牛黄体直径、移植者技术水平、胚胎解冻后的停留时间,对冷冻胚胎移植受胎率进行了分析比较。结果表明：A级胚胎（46．3％）比B级胚胎（31．6％）、C级胚胎（0）受胎率高;受体牛黄体直径在1．0～1．5cm（49．1％）之间较2cm（28．1％）、2．5cm时受胎率要高;移植者技术水平的高（42．3％）低（21．1％）其受胎率相差较大;胚胎解冻后停留的时间10～20min（37．8％）、1～2h（46．9％）、4～6h（25％）对受胎率也影响较大。说明影响当地黄牛移植高产荷斯坦奶牛冷冻胚胎受胎率的因素主要有冷冻胚胎级别、受体牛黄体直径、移植者技术水平、胚胎解冻后停留的时间。     

牛胚胎玻璃化超快速冷冻一步法移植试验

应用 30 %乙二醇 0 .3mol/ L 蔗糖 - m- PBS液 (VS1)、30 %乙二醇 0 .3m ol/ L 蔗糖 5 %葡聚糖 (T- 5 0 0 ) - m-PBS液 (VS2 )、30 %乙二醇 0 .3mol/ L蔗糖 10 %葡聚糖 (T- 5 0 0 ) - m- PBS液 (VS3)玻璃化超快速冷冻奶牛胚胎 ,一步法移植。结果显示 ,VS1、VS2、VS3组玻璃化超快速冷冻奶牛胚胎解冻后的形态正常率分别为 10 0 % (2 0 / 2 0 )、95 %(19/ 2 0 )和 5 5 .6 % (5 / 9) ;培养存活率分别为 70 % (14 / 2 0 )、75 % (15 / 2 0 )和 2 2 .2 % (2 / 9) ;囊胚孵化率分别为 0、2 0 % (4/2 0 )和 0。VS1、VS2组玻璃化冷冻奶牛胚胎解冻后的形态正常率极显著地高于 VS3组 (P<0 .0 1) ;VS1、VS2组玻璃化冷冻奶牛胚胎解冻后的培养存活率分别显著 (P<0 .0 5 )和极显著 (P<0 .0 1)地高于 VS3组。 VS1组冷冻的胚胎经一步法移植了 5头 (1枚 /头 ) ,未获得妊娠 (0 / 5 ) ;VS2组冷冻的胚胎用一步法移植了 10头 (1枚 /头 ) ,结果获得 2头妊娠(2 / 10 ) ,并产下 2头正常犊牛。     

牛胚胎冷冻技术的研究

本文采用不同的冷冻程序，不同的植冰温度，不同的冷冻保护剂，不同的解冻液及不同的解冻方式对牛胚胎 冷冻及解冻技术的各个环节进行了研究，目的是选择简便，高效的牛胚胎 冷冻方法，缩短冷冻过程，减少岭冻，解冻中对胚胎的损伤，提高胚胎解冻成活率和移植妊娠率。     

应用牛冷冻胚胎对秦川系受体牛移植的效果

应用进口加拿大牛冷冻胚胎解冻后对秦川系受体牛进行移植，共解冻6个品种的胚胎175枚，解冻后直接移植给161头受体牛，妊娠83头，移植妊娠率51.6%。其中灵台点移植32头，妊娠20头，移植妊娠率达62.5%。     

波尔山羊冷冻胚胎移植技术的研究应用

该研究对进口的冷冻波尔山羊胚胎进行移植,并针对性地进行了以下研究解冻温度对冷冻胚胎移植妊娠率的影响;经产母羊与育成母羊胚胎移植后的妊娠率的比较;不同饲养管理条件对胚胎移植后妊娠率的影响.结果如下①解冻温度分别为25℃、32℃时移植后的妊娠率分别为62.50%、63.33%,无显著差异.②经产母羊胚胎移植后的妊娠率(66%)显著高于育成母羊胚胎移植后的妊娠率(55%).③补饲条件下的胚胎移植妊娠率(62.86%)显著高于不补饲条件下的胚胎移植妊娠率(56.67%).     

冷冻牛胚胎解冻后直接移植

冷冻胚胎解冻后能够直接移植给受体母畜，可为胚胎移植技术提供方便，并促进通过体外技术大量产生的胚胎的销售。牛胚胎直接移植技术利用蔗糖作为渗透缓部液，移植前在细管中去甘油、或者将蔗糖添加到防冻液直接移植而不必进行其他步骤。冷冻妆移植的新方法使用１．５Ｍ乙二醇中胚胎可以在保持液中直接再入水，不需要逐步稀释防冻剂，胚胎存活率与在基甘油中冷 冻用逐步法再入水的相同。另外，在１．５Ｍ乙二醇（ＥＧ）中冷冻，解冻     

在生产条件下牛冷冻胚胎直接移植的效果

以１８Ｍ乙二醇或１６Ｍ丙二醇作抗冻剂冷冻牛胚胎,解冻后在Ｍ－ＰＢＳ中一步脱除抗冻剂体外培养或不脱除抗冻剂直接移植给受体母牛。结果表明用１８Ｍ乙二醇直接移植法的体外培养存活率和移植妊娠率均显著高于１６Ｍ丙二醇组,分别为８４８％比６５５％和４８５％比４００％（Ｐ＜００５）,但与对照组（１４Ｍ甘油常规法）之间无显著差异,分别为８４８％比８６７％和４８５％比５００％（Ｐ＞００５）。     

牛胚胎冷冻技术的实用化研究

采用不同的冷冻程序，不同的植冰温度，不同的冷冻保护剂，不同的解冻液及不同的解冻方式对牛胚胎冷冻及解冻技术的各个环节进行研究，目的是选择简便，高效的牛胚胎冷冻方法，综合冷冻过程，减少冷冻，解冻中对胚胎的损伤，提高胚胎解冻成活率和移植妊娠率。     

牛胚胎快速冷冻技术的研究

我们对牛胚胎快速冷冻技术进行了研究。１９９２年８月一１１月间在木兰县，共移植受体母牛９９头，有４６头受体母牛妊娠，妊娠率为４６．５％，有２９头受体牛产犊，产犊率为２９．３％。通过研究得知，牛胚胎快速冷冻技术可以应用于生产。     

作好牛胚胎移植各环节工作,提高移植受胎率

家畜胚胎移植是继人工授精之后发展起来的一项家畜繁殖领域的高新技术.目前,该技术已成为家畜引种、扩大种群、保存遗传资源的有效方法.然而,由于受许多条件限制,我国牛胚胎移植至今尚未大步迈向商业化应用阶段.分析原因有很多,其中除胚胎生产的成本较高外,另一个主要原因是胚胎移植受胎率较低.长时间以来,冷冻胚胎移植受胎率始终在40%～50%上下徘徊,平均至少使用两枚胚胎才能怀1头牛犊,造价较高,这是胚胎移植不能象人工授精一样很快被基层养牛户接受并被大面积推广应用于养牛业生产的根本原因.如何提高胚胎移植受胎率,这是胚移工作者共同面对的课题.这里,就牛胚胎生产至移植各环节工作作以阐述,以期对提高移植受胎率有所帮助.     

奶牛冷冻胚胎直接移植法的应用试验

直接移植法大大简化了冷冻胚胎的移植步骤，使胚胎移植的大规模推广应用成为可能。本试验采用１．６１Ｍ的乙二醇代替甘油作冷冻保护剂，共冷冻保存Ａ、Ｂ级奶牛胚胎２７６枚。解冻，在１０分钟内直接装枪移植给受体奶牛。其移植青年牛４２，１８０天后确认妊娠２４头，受胎率为５７．１４％；移植成母牛８５，１８０天后确认妊娠３７头，受胎率为４３．５３％。两者合计，共植受体奶牛１２７头，确认受胎６１头，受胎率为４８．０３     

牛胚胎玻璃化冷冻技术研究进展

胚胎冷冻保存是保存和繁殖遗传优势动物的主要工具,是胚胎移植产业的重要组成部分。目前广泛使用的冷冻方法主要有慢速冷冻和玻璃化冷冻2种。由于玻璃化冷冻具有成本低、效率高、操作简单等优点,玻璃化冷冻法越来越受到人们的重视。经过多年研究,研究人员已经在玻璃化冷冻方法、冷冻液等方面取得了大量进展,玻璃化冷冻法已经开始进入商业化应用。本文综述了牛胚胎冷冻保存技术的研究进展,旨在为相关从业人员提供一定借鉴和参考。     

影响受体牛冷冻移植胚胎效果的主要因素

试验研究影响受体牛移植冷冻胚胎效果的主要因素,目的是解决胚胎移植产业化中容易出现的技术问题,以提高牛胚胎移植妊娠率。在季节、饲养管理、同期发情处理和胚胎移植技术以及环境条件等基本相同的情况下,结果表明:西门塔尔杂交牛的移植利用率和移植妊娠率高于黄牛杂交牛和黑白花奶牛,但各组间无显著性差异(P>0.05);2～6周岁的受体牛移植利用率和移植妊娠率高于7周岁以上和2周岁以下的受体牛,但各组间无显著性差异(P>0.05);经产1～3胎受体牛移植利用率显著高于4胎以上的受体牛(P<0.05),而移植妊娠率则无显著性差异(P>0.05);体况上等与中等的受体牛移植利用率和移植妊娠率无显著性差异(P>0.05);同期发情处理时卵巢处于黄体期的移植利用率显著高于卵泡期,差异极显著(P<0.01);左侧卵巢有黄体的子宫角胚胎移植妊娠率显著高于右侧(P<0.05);胚龄对胚胎移植妊娠率高低依次为早期囊胚、桑椹胚和囊胚,但无显著性差异(P>0.05)。     

绵羊玻璃化冷冻胚胎直接移植试验研究

应用EFS40玻璃化液对6.5～7日龄的绵羊胚胎进行玻璃化冷冻及解冻后直接移植试验.结果:桑椹胚、囊胚冷冻解冻后移植的妊娠率分别为37.50%(3/8)和54.55%(6/11),胚胎存活率分别为33.33%(3/9)和50.00%(6/12),差异均不显著(P＞0.05);胚胎解冻后用0.5 mol/L蔗糖脱防冻剂与直接用胚胎存放液脱除防冻剂的妊娠率分别为44.44%(4/9)和50.00%(5/10),胚胎存活率分别为40.00%(4/10)、45.45%(5/11)差异不显著(P＞0.05);10枚解冻后的胚胎细管内脱防冻剂后,直接装管移植给8只受体,妊娠率为50.00%(4/8),胚胎成活率为40.00%(4/10),与同期常规冷冻解冻组相比无显著差异(P＞0.05).     

关于优质肉羊冷冻胚胎移植应用技术研究

关于肉羊冷冻胚胎移植应用技术,其核心内容是研究冷冻胚胎处理的最佳时间、处理方法、影响移植效率的因素等方面,从而提高移植受胎率。本文分析了优质肉羊冷冻胚胎移植应用技术,获得了相关的数据,以期为胚胎移植工作者提供参考,提高冷冻胚胎移植技术水平,节省大量的人力与物力,推动肉羊行业生产开发,促进国家经济的发展。     

奶牛冷冻胚胎移植技术在白城地区的应用效果

奶牛胚胎移植技术目前已经做为一项常规繁殖技术在生产中推广应用，但是白城地区还没有在生产上得到应用。为了探讨该项技术在白城地区应用的可行性。白城市兴牧胚胎生物工程有限责任公司进行了奶牛胚胎移植技术试验示范，利用当地改良牛做受体，移植加拿大高产奶牛胚胎。2004年共进行4批移植，移植受体牛174头次，受胎79头，总受胎率45．4％。其中最高受胎率57．89％，最低受胎率17．86％。现将结果报告如下。