蛋白质芯片技术在传染病检测中的应用研究进展

蛋白质芯片以其特异、灵敏及高通量等特点已在生命科学的多个领域得到应用,如蛋白质组学研究、新药的开发、酶与底物的相互作用和疾病检测等。论文详细介绍了蛋白质芯片技术的原理、芯片介质的种类及蛋白质的固定技术,论述了蛋白质芯片在传染病检测中的研究概况,分析了蛋白质芯片检测技术中存在的问题及应用前景。     

蛋白质芯片技术及其在动物源性食品检测中的应用

近年来,蛋白质芯片技术以其平行性、高通量、灵敏度高、样品用量少及检测速度快等优点,成为生命科学研究的一种新的技术平台,因而倍受人们的关注。本文针对蛋白质芯片技术在动物源性食品检测中的应用进行了简要综述,并探讨了其在食品安全检测中的应用前景。     

蛋白质芯片在临床诊断中的研究进展

蛋白质芯片技术是建立在基因芯片基础上发展起来的,是对基因芯片技术的补充,具有高通量、直接、快速、灵敏等特点,它与其它技术的联合应用可以推动多学科技术的发展,具有重大的临床应用价值,本文主要就其在临床诊断方面的应用做一综述。     

液相芯片技术在动物疫病检测中的研究进展

液相芯片技术是整合了激光技术、流式细胞仪、数字信号处理和传统化学技术的一种新型生物分子检测技术,目前广泛应用于各种免疫分析和核酸检测中。液相芯片技术支持单重和多重分析,可在多种测定方法中对蛋白质和核酸靶标进行高通量检测,具有高通量、操作简单、适用范围广、重复性好、特异性高、所需样品量少、更灵敏稳定、成本低等优点,正逐渐代替传统检测和定量病原体的工具,如实时荧光定量PCR扩增检测系统（qPCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）等检测方法。动物传染病严重危害着养殖业健康发展,一些诸如高致病性禽流感的人畜共患病对人类健康造成了严重威胁。高效灵敏的诊断系统将有助于在传染病暴发期间筛选大量样本,防止感染扩散。液相芯片技术的发展为高通量检测和疾病的预防提供了新的平台。作者简要概述了液相芯片技术的原理和优点,重点阐述了液相芯片技术在检测动物疫病,包括猪病、禽病、兔病、犬病、啮齿类动物和其他动物疫病方面的研究进展。相信今后液相芯片技术会成为临床诊断、基础研究、新药开发、司法鉴定、食品卫生监督、生物武器防范等领域的一项重要分析检测技术,该技术的发展将大大推动生命科学研究与进步。     

蛋白质芯片技术研究进展

蛋白质芯片亦被称为蛋白质微阵列。除了在蛋白质间相互作用,前导药物发现等基础研究领域得到重要的应用之外,蛋白芯片技术业已被应用到疾病过程的生物标志分子发现,传染性疾病的分子诊断等应用研究领域。蛋白质芯片所具有的高通量,微型化,高自动化特征弥补和扩增了常规的分子诊断技术。     

不同家禽红细胞悬液对禽流感血清抗体检测的影响

为探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响，对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后，做了一系列对比试验。结果发现，经受体破坏酶(RDE)处理后，虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响，但因处理复杂，费用高，不宜推广应用；经鸡红细胞吸附处理，可明显降低水禽血清对异种红细胞的非特异性凝集作用，但处理费时；而用水禽红细胞检测同种水禽的禽流感血清抗体，可以有效去除血清非特异性凝集的影响．且更能准确地反映水禽经禽流感疫苗免疫后的抗体水平。因而，应选用与宿主来源相同的红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体。     

口蹄疫病毒悬液的澄清及高倍超滤浓缩工艺研发

选用3种不同的澄清剂对口蹄疫病毒悬液进行澄清。并与后续的浓缩纯化工艺相结合,比较澄清效果及其对浓缩纯化的影响,筛选出一种适合超滤工艺的澄清剂。结果表明,将该样品前处理方法与超滤工艺相结合,口蹄疫病毒液最高浓缩倍数可达80倍,大大提高了超滤的效率。     

冷藏保存BHK21细胞悬液及复苏试验

采用方瓶存放BHK21细胞悬液,在2℃～8℃冰箱存放不同时间后,按常规方法进行细胞复苏和传代。对比存放不同时间后细胞复苏时的驯化次数、细胞数量和细胞活力,寻求最佳存放时间和复苏代次以指导生产。同时将2℃～8℃冷藏保存方法与液氮冻存细胞方法在细胞复苏周期和达到所需扩繁细胞数方面进行比较。结果表明,方瓶冷藏保存BHK21细胞悬液最长可存放60d,经2—5代驯化后,细胞形态和活力恢复正常,细胞数量与收悬液前细胞数量无显著差异,并能稳定传20代以上。与液氮冻存细胞方法相比,该方法在快速恢复细胞产量时有较大优势,在生产周期紧张的情况下可作为辅助方法保障细胞传代的延续。     

用鸭红细胞悬液消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响

禽流感自1878年在意大利首次发生以来不断蔓延,近年来,在许多国家和地区出现暴发和流行,成为严重危害养禽业健康发展的一种主要家禽传染病。因此,加强禽流感的检测是预防和控制禽流感的重要措施。目前,基层单位大都采用微量红细胞血凝抑制试验(简称HI试验)来检测家禽禽流感血清     

邻位连接技术及其在病原检测中的应用

邻位连接技术(proximity ligation assay,PLA)是近年新研发的一种蛋白质体外分析技术,该技术运用邻位连接与实时定量PCR扩增原理,通过一对可特异性识别靶蛋白的邻位探针进行双识别并连接产生可PCR扩增的检测信号,实现蛋白质的定量检测.该技术综合了抗原抗体结合的高特异性和实时定量PCR技术的高灵敏度...     

基于CRISPR-Cas系统的病原体检测研究进展

开发快速、灵敏、特异的检测方法对于新发突发人兽共患病、动物疫病的监测及防控至关重要。规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白(CRISPR-Cas)系统以高敏感性、特异性及可扩展性的DNA和RNA识别为特点,已成为新一代的分子诊断工具,在病原体快速检测技术研发中得到广泛应用。在新型冠状病毒肺炎疫情中,基于CRISPR-Cas系统开发的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)检测试剂盒(SHERLOCK和DETECTR)在美国相继获批,中国研发的基于CRISPR-Cas12系统的SARS-CoV-2检测试剂盒也已获批上市,这表明基于CRISPR-Cas系统的病原体检测方法在未来的应用前景非常可观。文章首先简述了CRISPR-Cas系统类型,尤其是常用于病原体检测的Cas9、Cas12和Cas13;介绍了CRISPR-Cas系统的作用机理以及广泛应用。同时分析了CRISPR-Cas检测平台研发的关键技术问题,包括靶标基因的序列保守性、靶标基因的富集与扩增、终信号不同的读取方式等,并对CRISPR-Cas系统的未来发展及应用前景进行了展望。     

阿莫西林注射用混悬液及其在猪体内的药物动力学研究

以阿莫西林为原料,注射用大豆油为溶媒,成功研究出阿莫西林注射用混悬液,并对制剂进行了稳定性研究。所有参试样品的相对含量、外观性状、粒度、分解产物等指标均无明显变化,表明该制剂对光、热稳定。选用5头健康猪进行了药物动力学研究,按15mg/kgB.W的阿莫西林剂量肌内注射,药时曲线符合一级吸收二室模型,主要动力学参数为:Tmax=0 53±0 17h,Cmax=12 33±0 47μg/ml,AUC=79 62±4 32(μg/ml)h,T1/2β=33 62±4 06h。结果表明,阿莫西林注射用混悬液在猪体内吸收缓慢,持效时间长。临床应用48h给药1次仍能维持对常见病原菌的有效血药浓度。     

猪嵴病毒PCR检测方法的建立及其应用

本研究根据GenBank上猪嵴病毒核苷酸序列设计了一对特异性引物,建立猪嵴病毒的PCR检测方法。该方法特异性强,敏感度高,重复性好。应用该PCR方法对2010年在上海周边地区采集的116份猪粪样品进行检测,结果45份为猪嵴病毒阳性,表明上海地区猪群中猪嵴病毒相当流行。本研究建立的PCR方法可以用于猪嵴病毒的流行病学监测。     

乳铁蛋白检测及应用研究进展

乳铁蛋白(lactoferrin,LF),也称为乳运铁蛋白(1actotransferrin),是牛乳中重要生物活性物质之一。本文综述了乳铁蛋白的含量、分布,分离提纯及定性定量检测方法,同时阐明了乳铁蛋白在食品、动物生产及其他领域的应用。     

牛传染性鼻气管炎检测方法的研究进展

牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)是引起牛传染性鼻气管炎的病原。文中介绍了牛传染性鼻气管炎的各种检测方法的研究进展,包括病理组织学诊断、病毒的分离鉴定、免疫学检测和核酸分子检测,为牛传染性鼻气管炎的检测提供了有价值的参考。     

阿莫西林-克拉维酸注射剂及其在猪体内的药物动力学研究

以阿莫西林(AMO)和克拉维酸(CLA)为原料,以注射用大豆油为溶媒,成功研制出AMO-CLA注射用混悬剂。采用加温加湿试验和光加速试验对制剂进行稳定性研究,结果表明该制剂稳定性良好,AMO和CLA的相对标示量均在90%以上、样品的外观色泽、粒度、分解产物等指标均无明显变化。在药物动力学研究中,用HPLC-UV法测定在血浆中AMO和CLA的含量。血药浓度数据经3p97软件处理,静注AMO和CLA水溶液在猪体内的药物动力学过程均符合一级吸收一室模型,肌注自制AMO-CLA注射用混悬剂、辉瑞公司的AMO-CLA注射用混悬剂及单方AMO注射用混悬剂在猪体内的动力学过程均符合一级吸收二室模型,且吸收良好,半衰期长。AMO在猪体内的持效时间(C>0.3μg/mL)超过48h,缓释作用显著。自制AMO-CLA注射用混悬剂的主要动力学参数与辉瑞公司的AMO-CLA注射用混悬剂的动力学参数比较差异不显著。     

生物芯片及其在乳品检测中的应用研究进展

生物芯片作为一种新兴起的微量和高通量分析与检测技术,逐渐开始应用于生物研究、食品、医疗和农业领域等.本文主要介绍生物芯片的基本原理、分类和制作过程.深入探讨生物芯片在食品安全领域中的应用,重点介绍了生物芯片在乳品行业中的应用,并对该技术存在的问题及发展趋势进行了简要的阐述.     

李斯特菌套式PCR快速检测方法的建立及初步应用

根据GenBank数据库的单核细胞增生李斯特菌iap基因设计2对引物,建立了套式PCR快速检测单增李斯特菌的方法。两对引物分别扩增出约1 500 bp和500 bp片段,与预期大小一致。套式PCR方法灵敏性实验检测极限为10 cfu/mL;人工污染猪肉检测极限为103cfu/mL;整个检测过程可在7 h内完成。采用该法对南海口岸进口的冻肉进行检测,检测出9份阳性,与传统的细菌分离方法完全一致,说明套式PCR方法具有很好的特异性。     

数字PCR技术在动物疫病检测中的应用

为了支持动物疫病流行地区的控制及消除计划,以及在动物疫病非流行地区进行有效筛查,必须使用更加准确灵敏的诊断手段。数字PCR可实现绝对定量及痕量核酸的检测,与传统检测方法相比具有不依赖参考物或标准品、对抑制剂具有较高耐受性、灵敏度和精准度更高的优点。数字PCR作为一种定量分析的核酸检测新方法,在动物疫病检测中得到了应用,围绕数字PCR技术的原理、应用、存在的问题及发展趋势等进行综述及分析,为数字PCR在动物疫病检测中的进一步应用提供参考。