裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌的体外抑菌效果

为研究裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌体外抑菌试验,采用牛津杯法和肉汤二倍稀释法测定裸花紫珠提取物抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC).结果表明,裸花紫珠提取物对大肠杆菌属于中度敏感,平均抑菌圈直径为16 mm,最小抑菌浓度(MIC)为32.0 mg/mL.试验结果表明,裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌具有良好的抑菌效果,为下一...     

柳州地区罗非鱼无乳链球菌与海豚链球菌分离株药敏性分析

为了解柳州地区罗非鱼链球菌的耐药性情况,本研究对从柳州地区分离得到无乳链球菌和海豚链球菌分离株进行药敏试验。结果显示,无乳链球菌与海豚链球菌之间的药敏结果有较大差异,而同一种细菌的不同菌株对药物的敏感性却较为一致。总体来说,两种菌对青霉素、头孢类药物均具有很高的敏感性,对喹诺酮类药物敏感性不高;无乳链球菌对多粘菌素B、复方新诺明、卡那霉素、磺胺异噁唑4种药物完全耐药,但海豚链球菌却对这些药物呈现不同程度的敏感性。     

三黄连散对罗非鱼无乳链球菌的体外抑菌效果观察

为开发三黄连散于水产养殖防治细菌性疾病的应用,通过常规检查和PCR技术对试验菌株进行罗非鱼无乳链球菌鉴定后,检测三黄连散对该菌的体外抑菌效果。结果试验菌株为罗非鱼无乳链球菌,血清型为Ia型、II型、dIts型。三黄连散对该菌的最小抑菌浓度(MIC)为15.625mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为31.25mg/mL;1/2×MIC和1×MIC能抑制对数生长期的菌体分裂,2×MIC能抑制细菌进入对数生长期。本研究表明:三黄连散对罗非鱼无乳链球菌有良好的体外抑菌效果,可为其临床应用提供依据。     

中兽药裸花紫珠颗粒抗菌、抗炎及抗氧化活性研究

为了评估中兽药裸花紫珠颗粒的抗菌、抗炎及抗氧化的效果,试验通过测定裸花紫珠颗粒对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)评估其抗菌效果;以脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)构建炎症模型,用100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL裸花紫珠颗粒药液干预细胞4h,测定药物对一氧化氮(NO)含量和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA相对表达量的影响;以H₂O₂诱导犬脂肪间充质干细胞(cADSC)构建氧化损伤模型,通过试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,评估药物的抗氧化效果。结果表明：裸花紫珠颗粒对大肠杆菌的MIC为12.5 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC为6.25 mg/mL。与模型组相比,各药物组均可显著降低NO含量和TNF-α mRNA的相对表达量(P<0.05);25μg/mL组可显著降低IL-1β mRNA的相对表达量(P<0.05);各药物组的SOD活性显著提高(P<0.05),100μg/mL组的CAT活性显著提高(P...     

裸花紫珠颗粒对靶动物犬血液生理生化指标的影响的研究

为研究裸花紫珠颗粒对靶动物犬血液生理生化指标的影响,该文将20只犬（中华田园犬）按完全随机方法分成4个组,每组5只,分别为第1组（空白对照组）、第2组（裸花紫珠颗粒0.1 g/kg·bw）、第3组（裸花紫珠颗粒0.3 g/kg·bw）、第4组（裸花紫珠颗粒0.5 g/kg·bw）,采用口服给药的方法,每天给药1次,连续给药10 d,在试验期间观察试验犬临床体征表现,并评价不同剂量裸花紫珠颗粒对试验犬的体重和血液生理生化指标的影响。结果显示,试验犬口服不同剂量裸花紫珠颗粒连续10 d,临床体征表现正常,未见明显的影响,犬只血液生理生化指标与空白对照组相比无显著差异（P>0.05）。结果表明,裸花紫珠颗粒对试验犬只的临床体征、体重和血液生理生化指标无明显影响,安全性较好。     

一株罗非鱼无乳链球菌的分离鉴定及药敏试验

为确定东莞市某养殖场罗非鱼发病的原因,有针对性制定防治措施,采集发病罗非鱼的脑、肝脏、脾脏、肾脏等组织样品进行细菌分离培养鉴定,通过VITEK-2 Compact进行生化鉴定和16S rRNA基因序列分析以及系统进化树构建,并对分离菌株(DG210721)进行药敏试验.结果显示:分离纯化培养的菌株特征、形态和生化鉴定结...     

一例流产猕猴阴道无乳链球菌分离及药敏试验

对一例流产猕猴进行阴道采样,分离到一株细菌,通过鉴别培养与生化反应表明该株菌为无乳链球菌。将鉴定得到的细菌进行药敏试验,结果表明该菌株对氨苄西林、链霉素、四环素均产生耐药性,对青霉素、头孢曲松、克林霉素中度敏感;对万古霉素、头孢唑啉、红霉素、左氧氟沙星均敏感。攻毒实验证实该菌能够导致小白鼠死亡,因此该菌株可能是导致猕猴流产的主要原因。     

奶牛乳房炎性无乳链球菌药敏试验及毒力基因检测

旨在调查山东某奶牛养殖场无乳链球菌的感染状况、药敏性及毒力基因携带情况.采集该牛场临床型乳房炎奶样200份,分别用5％绵羊血琼脂平板、MHA药敏琼脂培养基、16S rRNA基因引物、12种药敏片和多重PCR进行无乳链球菌的药敏性及毒力基因的检测.从中分离出42株无乳链球菌,分离率为21％.所分离出的无乳链球菌培养菌落特...     

罗非鱼无乳链球菌的分离鉴定

从南宁市某淡水罗非鱼养殖场的濒死罗非鱼分离获得7株优势菌株,经人工腹腔注射感染罗非鱼,仅发现菌株LFY-5注射后的罗非鱼出现与自然发病罗非鱼相似的症状,死亡率高达60％。经检测,LFY-5菌株为链状或成对排列的革兰氏阳性球菌,单个球形菌体直径为1．0～1．2jxm,在血琼脂培养基上呈13一溶血;对阳性克隆进行DNA检测得到长度为1510bp的16SrRNA基因片段,即分离菌株为无乳链球菌（S．agalactiae）。药敏试验结果显示,菌株LFY-5对头孢氨苄、万古霉素、头孢唑啉、头孢哌酮、新生霉素等18种药物高度敏感,但对菌必治、复达欣、替卡西林、头孢噻肟等8种药物不敏感。     

宝石鲈无乳链球菌的分离鉴定及耐药性分析

2013年高温季节在广东广州2个养殖场患病宝石鲈(Scortum barcoo)病灶处共分离到2株细菌Py1和Py2。宝石鲈攻毒试验结果显示2株分离菌均具有较强毒力(半致死量分别为7.42×10⁶和1.72×10⁶ CFU/mL),且都对罗非鱼具有高度感染性(半致死量分别为3.39×10⁶和8.66×10⁵ CFU/mL)。经ATB生化鉴定及cfb基因序列分析,确定分离株为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae),并对其进行了相关药敏试验检测,以期为该病的预防提供参考。     

罗非鱼源无乳链球菌的分离鉴定及药敏试验

从广东省佛山市2个水产养殖场患病罗非鱼中分离到2株细菌,分别编号为T4SH和G6C,经形态学、培养特性观察、生化鉴定和16S rDNA基因序列分析证实为无乳链球菌。2株分离菌株均为革兰阳性菌,呈β溶血;16S rDNA基因序列与无乳链球菌同源性达99%以上。2株菌均对青霉素类、头孢类、林可胺类、大环内酯类、四环素类、氯霉素类抗生素敏感,对氨基糖苷类不敏感;而对磺胺类、喹诺酮类的敏感性存在差异。     

海南罗非鱼源无乳链球菌的分离鉴定及生物学特性研究

为探究目前海南地区罗非鱼无乳链球菌病的流行性,了解该地区无乳链球菌耐药情况,本研究2020年8月从海南地区部分渔业养殖场的病鱼中共分离获得15株无乳链球菌,对各分离菌株的血清型、主要毒力基因及耐药性进行检测,并对多重耐药情况进行分析。血清型检测结果显示,15株分离菌株的血清型与对照菌株A909一致,均为Ⅰa型。毒力基因检测结果显示,15株分离菌株均未检出毒力基因scpB,但该毒力基因在参考菌株人源无乳链球菌2603V/R中检出,而主要毒力基因cylE、sodA、gapC的检出率均为100%。药敏试验结果表明,15株分离菌株对甲氧胺嘧啶、磺胺异噁唑、复方新诺明、链霉素、新霉素、庆大霉素的耐药率达85%以上;对头孢克洛、头孢曲松、头孢哌酮、头孢拉定、卡那霉素、红霉素、利福平、克林霉素敏感性达80%以上;未发现对甲氧胺嘧啶、氟罗沙星、链霉素、新霉素、庆大霉素敏感的菌株。多重耐药检测结果表明,15株分离菌株均至少对4种药物表现耐药,其中6重及以上耐药的菌株占总分离菌株数的86.67%,并有2株为13重耐药菌株。本研究为海南地区鱼源无乳链球菌病的用药提供参考,为华南地区罗非鱼无乳链球菌的流行病学和疾病防控提供调查依据。     

三黄连散对罗非鱼人工感染无乳链球菌的保护作用

试验选用高剂量(26.40 g/kg)、中剂量(13.20 g/kg)和低剂量(6.60 g/kg)的三黄连散饲喂人工感染无乳链球菌的罗非鱼,观察并记录其临床症状和死亡率,旨在明确三黄连散对罗非鱼人工感染无乳链球菌的预防作用。结果显示,高剂量和中剂量的三黄连散保护率分别为77.77%和55.55%,且与市售三黄散相比,效果较稳定。研究表明,三黄连散对罗非鱼无乳链球菌的预防作用较好。     

三黄连合剂对罗非鱼人工感染无乳链球菌的预防作用

为了研究三黄连合剂对罗非鱼无乳链球菌病的预防作用,通过给罗非鱼投喂添加含中药复方提取物三黄连合剂的饲料,观察中药复方提取物对人工感染无乳链球菌罗非鱼保护作用,并以氟苯尼考作为抗生素药物对照。结果表明,给药组罗非鱼攻毒后死亡率明显小于感染不给药对照组。30 m L/kg、60 m L/kg、120 m L/kg三黄连合剂添加组、0.05 g/kg氟苯尼考添加组的罗非鱼死亡率分别为低于对照组的25(p0.05)、25(p0.05)、33.33(p0.01)和45.83(p0.01)个百分点;保护率分别为26.08%、34.78%、47.82%和26.08%。其中以120m L/kg添加剂量保护效果较好,30 m L/kg三黄连合剂保护效果与0.05 g/kg氟苯尼考相当。本试验结果说明,三黄连合剂对罗非鱼无乳链球菌病具有较好的预防效果。     

罗非鱼无乳链球菌EsxA基因克隆与原核表达

Ⅶ型分泌系统(T7SS)是近年来发现的分泌系统,分泌两种胞外蛋白,EsxA基因编码的ESAT6蛋白和EsxB基因编码的CFP-10蛋白。分泌蛋白具有良好的免疫原性,促进细菌从巨噬细胞吞噬体逃逸、影响巨噬细胞凋亡及裂解细胞等生物学功能,与致病性密切相关。以罗非鱼源无乳链球菌为模板,克隆到294bp的EsxA基因,将目的序列克隆到pMD18-T载体,经测序,目的序列与无乳链球菌EsxA基因同源率在99%以上。EsxA基因克隆到pET32a载体中,重组载体在28℃、0.5mmol/L IPTG诱导条件下表达量最大,可溶性表达。将纯化的ESAT6蛋白免疫Balb/c鼠,成功制备ESAT6蛋白鼠多克隆抗体,经Western blot,ESAT6蛋白具有良好的反应原性。研究结果为进一步进行无乳链球菌ESAT6蛋白的免疫学功能研究奠定了基础。     

广东罗非鱼无乳链球菌分离鉴定及生物学特性分析

本研究旨在明确当前罗非鱼无乳链球菌流行状况和生物学特性,为鱼源无乳链球菌病防控提供新的数据。本研究于2019—2020年,从广东罗非鱼主养区茂名、湛江地区采集病样进行无乳链球菌的分离鉴定。用PCR方法对分离株血清型及4个主要毒力基因进行检测,通过纸片法对分离菌株进行31种抗菌药物药敏试验和多重耐药研究,利用斑马鱼模型进行了致病性试验。结果显示：从261份病样中分离到35株无乳链球菌;血清型检测表明无乳链球菌分离株的血清型均为Ia型;主要毒力基因的检测证明,cylE、sodA、gapC基因在所有鱼源分离株及人源、牛源和鱼源参考株中检出率均为100%,而scpB只在人源参考菌株中检出;药敏试验结果发现,无乳链球菌分离株对19种抗菌药敏感率为90%以上,对6种抗菌药耐药率为50%以上,分离株的耐药基因型和表型部分一致,无乳链球菌分离株均多重耐药,其中5重及以上耐药的菌株为27株,占总菌株数的77.1%;斑马鱼致病试验表明,无乳链球菌分离株可导致斑马鱼不同程度的发病死亡。本研究明确了当前罗非鱼源无乳链球菌的血清型、毒力基因、耐药特性和致病性,为广东乃至全国罗非鱼无乳链球菌病的防控提供了参考。     

水温对吉富罗非鱼人工注射无乳链球菌部分生物学指标的影响

为揭示高温条件与吉富罗非鱼对无乳链球菌的抵抗力的关系,观察了不同温度对吉富罗非鱼部分生物学指标(超氧化物歧化酶,溶菌酶,碱性磷酸酶和补体C3)的影响。结果显示,在高温(34℃)条件下,吉富罗非鱼超氧化物歧化酶活性呈现先诱导后抑制的趋势;碱性磷酸酶活性在12h达到最高,显著高于31℃感染组B2(P0.05),在感染链球菌后24、36h,34℃条件下的B3组罗非鱼血清溶菌酶活力分别显著低于对照组B2(P0.05)25.88%和28.75%;感染后12、36h,补体C3活性分别显著低于对照组A3(P0.05)53.22%和36.19%。结果表明,高温降低了吉富罗非鱼的抵抗力,使鱼体对病原菌易感性增强。     

高温胁迫下罗非鱼源无乳链球菌的比较转录组分析

【目的】从分子水平了解高温季节罗非鱼无乳链球菌病容易暴发的原因。【方法】在35和28℃分别培养无乳链球菌,提取总RNA并进行转录组测序;利用华大基因Dr.Tom自主分析平台进行差异表达基因分析,并针对差异基因进行了KEGG通路和GO功能的分类和富集;通过实时荧光定量PCR随机检测10个基因的差异表达,确定转录组数据的可靠性。【结果】共得到35和28℃培养条件下的显著性差异表达基因357个,其中上调基因229个,下调基因128个;GO数据库富集能得到多个具有显著性的功能集,多集中在碳源代谢相关的途径,包括碳水化合物分解代谢过程(carbohydrate catabolic process)、糖原代谢过程(glycogen metabolic process)、细胞葡聚糖代谢过程(cellular glucan metabolic process)等;差异基因中发现了多个与无乳链球菌致病性相关的基因,如烷基过氧化氢还原酶亚基、cAMP因子、C5a肽酶等编码基因;实时荧光定量PCR与转录组数据间皮尔逊相关系数R值为0.979(P<0.001),说明转录组数据可靠有效。【结论】高温能够显...     

罗非鱼无乳链球菌生物学特性与致病力研究

本试验分离纯化1株致使罗非鱼具有链球菌发病症状的病原菌,药敏试验结果表明,该菌对氯霉素等10种药物敏感。PCR扩增该菌的cfb基因,将扩增片段测序后与GenBank上登录的罗非鱼无乳链球菌的cfb基因序列进行比对。同时对该病原菌的生物学特性进行研究,包括培养时间和pH对该菌生长的影响;培养温度对其致病力的影响;探讨了不同攻毒方式(腹腔、胸腔和背部肌肉注射)与鱼发病快慢的关系;并对不同规格(100和10 g左右)的罗非鱼对该菌的易感性进行分析。试验结果表明,该病原菌为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae);该菌的最适培养时间为11.5 h,最适培养pH为7.5;腹腔、胸腔和背部肌肉注射后,其发病时间几乎一致,但胸腔注射的试验鱼死亡速度最慢,背部肌肉注射是较安全可行的攻毒方式;33℃培养的无乳链球菌攻毒的罗非鱼发病最快,死亡最集中;100 g的试验鱼比10 g的试验鱼更易感染。