高效液相色谱法测定乳品中乳铁蛋白的含量

建立乳品中乳铁蛋白高效液相色谱的测定方法。采用pH值为7.0磷酸盐缓冲溶液做为提取剂,C_(18)色谱柱分离,不同浓度的乙腈-0.5 mol/L的氯化钠溶液-三氟乙酸的二元系统进行梯度洗脱。每100g奶粉(或每100mL液态奶)中乳铁蛋白添加量为5~10 mg时,回收率大于90%。定量限为0.5 mg/100g。该方法具有结果准确,操作简便,重复性好等优点,可用于乳品中乳铁蛋白的检测。     

茶园土壤与茶树氟含量调查分析

在雅安市雨城区多地取样,调查分析了茶树和茶园土壤的氟含量与分布情况。结果显示,茶树新梢水溶性氟含量平均值为109.0mg/kg,而老叶水溶性氟含量平均值为759.2 mg/kg,老叶氟含量大于新梢;茶园土壤表土层(0~20cm)和心土层(20~40cm)水溶性氟含量为0.38mg/kg和0.30mg/kg,表土层水溶性氟含量大于心土层水溶性氟含量。同时,茶园土壤pH值检测表明,茶园表土层土壤pH平均值为3.69,心土层土壤pH平均值为3.72,表土层土壤pH值低于心土层土壤pH值;与之相邻的非茶园土壤表土层和心土层pH平均值分别为4.13和4.20,均大于茶园土壤的pH值。相关性分析表明,茶园土壤pH值与土壤水溶性氟含量不具备相关性,土壤水溶性氟含量与茶树体内水溶性氟含量相关性显著。     

氟尼辛葡甲胺在黄牛血浆、组织液和炎症渗出液中的药动学

6头成年健康黄牛,皮下埋置组织笼后,建立急性炎症模型,以2.2mg/kg剂量单次快速静注氟尼辛葡甲胺,高效液相色谱(HPLC)-紫外检测法测定血浆、组织液和炎症渗出液中氟尼辛葡甲胺的质量浓度,用WinNonlin药动学软件的"非房室模型"分析药动学参数。结果显示:静注氟尼辛葡甲胺后,黄牛血浆中药物质量浓度下降迅速,体内分布广泛,消除半衰期为(t_(1/2λz))为5.34h,体清除率(CL)为0.18L/kg,表观分布容积(Vd)为1.37L/kg,药-时曲线下面积(AUC)为12.33μg·h/mL;氟尼辛葡甲胺广泛地分布到组织液和炎症渗出液中,但是渗透速度慢。组织液和炎症渗出液中药物的平均达峰时间(t_(max))分别为7.12h和3.25h,峰浓度(C_(max))分别为0.65mg/L和1.44mg/L,组织液和炎症渗AUC与血浆AUC比值(AUCratio)分别为118%和214%。以上数据表明,氟尼辛葡甲胺分布到炎症组织的能力强于正常组织,组织液和炎症渗出液中药物消除均速度慢于血浆,每天静脉注射2.2 mg/kg氟尼辛葡甲胺可以在黄牛体内发挥有效作用。     

高效毛细管电泳法同时检测地克珠利和妥曲珠利的含量

采用毛细管电泳-二极管阵列检测法建立了地克珠利和妥曲珠利两种结构相近的均三嗪类抗球虫药物的分离检测方法.同时还探讨了缓冲溶液的种类、浓度、pH值等诸多因素对分离检测结果的影响.上述两种药物在8 min内实现了基线分离.线性检测范围为0.5～100 μg/mL,检出限为0.1 μg/mL (S/N=3).     

山羊奶Mozzarella干酪工艺筛选及生物活性肽测定

本研究筛选了山羊奶Mozzarella干酪的最佳加工工艺，分析测定了干酪产品的生物活性肽活性。以山羊奶为原料，通过单因素、正交试验筛选干酪最佳工艺参数；分析干酪的质量指标(质构、理化、微生物等)；研究干酪中分子质量<3ku的肽段的体外抗氧化活性、ACE抑制活性，确定肽的功能活性。筛选的最佳工艺为：发酵剂0.05%、氯化钙0.03%、小牛皱胃酶添加量0.03%、凝乳温度40℃。干酪产品的常规理化成分为：蛋白质19.02%±0.84%、脂肪35.46%±0.90%；成品率10.22%±0.88%；质构参数为：硬度10749±31.56g、内聚性0.366±0.08、弹性0.775±0.06；微生物指标符合国家标准。干酪产品活性肽还原力RP、DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率的IC₅₀值分别为0.697mg/mL、0.793mg/mL、0.853mg/mL,ACE抑制活性的IC₅₀值为0.1505mg/mL。山羊奶Mozzarella干酪口感滋味好、营养丰富、质量安全。研究可为奶企解决加工山羊奶Mozzarella干酪不易拉伸成型的...     

毛细辛提取物体外抗氧化活性研究

通过毛细辛不同溶剂提取物体外抗氧化活性研究,为进一步开发毛细辛的药用价值提供参考。用50%的乙醇回流提取毛细辛的粉末,减压浓缩过滤得到乙醇浸膏,加蒸馏水制成悬浮液,依次用等体积的石油醚,乙酸乙酯,正丁醇萃取,得到石油醚,乙酸乙酯,正丁醇和水提物。以2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)为对照,分别采用DPPH法、Fenton法、NBT还原法和Fe²⁺螯合法测定4种提取物的抗氧化活性。结果表明,毛细辛4种溶剂提取物均有不同程度的抗氧化活性,且活性与浓度成正相关。毛细辛乙酸乙酯提取物的1,2-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)的清除活性(IC₅₀值0.376 mg/mL),超氧阴离子自由基(O₂^-·)的清除活性(IC₅₀值0.297 mg/mL)均最强。正丁醇提取物的羟基自由基(·OH)清除活性(IC₅₀值0.776 mg/mL)为最强,水提物的金属离子螯合活性(IC₅₀值0.026 mg/mL)为最强,远超过对照BHT(0.373 mg/mL)。实验表明,毛细辛乙酸乙酯提取物,正丁醇提取物和水提物均有较强的自由基清除活性,可作为新的自由基清除剂;水提物可以作为新的金属离子螯合剂。     

100种中草药对溶藻弧菌的体外抑菌实验

为筛选有效控制水产养殖动物弧菌病的中草药,本研究采用琼脂扩散法测定100种常见中草药提取液对溶藻弧菌的抑制作用。采用t检验对其中24种有明显抑菌效果的药液pH值调至中性前后的抑菌效果进行分析比较,结果表明它们的抑菌效果下降极显著(p<0.01)。采用双倍试管稀释法测定7种中草药在pH值调至中性后的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,在药液pH值调至中性后,五倍子、公丁香和石榴皮能够有效抑杀溶藻弧菌。五倍子的MIC和MBC值均为7.813 mg/mL;石榴皮的MIC和MBC值均为15.625 mg/mL;公丁香的MIC和MBC值均为125 mg/mL;黄连、黄精和大黄的MIC和MBC值均为500 mg/mL;五味子的MIC和MBC均为1 000 mg/mL。     

氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片的质量标准研究

为了建立氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片的质量标准,采用薄层色谱法(TLC)鉴别氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片中的氟尼辛葡甲胺,采用高效液相色谱法(HPLC)测定该制剂中氟尼辛葡甲胺的含量,并测定了其崩解时限、重量差异、脆碎度和溶出度。结果显示:氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片能在30 s内崩解完全,重量差异和脆碎度均符合规定;制剂在人工唾液中60 s内溶出低于10%,在pH值4.5的醋酸缓冲液中10 min内溶出超过80%,表明具有掩味效果及速释特性;TLC背景清晰,分离效果好,无干扰;氟尼辛葡甲胺在24.5～245μg/mL范围内线性良好,相关系数为0.999 8,平均回收率为99.55%,RSD(n=6)为0.58%。表明本试验建立的鉴别和含量测定方法简便、准确、可靠,为氟尼辛葡甲胺掩味口腔崩解片质量标准的建立提供了参考。     

饲料中磺胺二甲嘧啶的检测-ELISA方法

本研究以磺胺二甲嘧啶的单克隆抗体为核心试剂建立ELISA检测方法,可检测鸡饲料和猪饲料中的磺胺二甲嘧啶。ELISA方法的标准曲线为:y=-29.448x 74.565,R2=0.9917,IC50=6.8ng/mL,线性范围为0.7～71.3ng/mL,检测限为0.3ng/mL。选择磷酸盐缓冲溶液(0.01mol/L,pH7.4)为提取溶剂,以0.1、1μg/g和10μg/g的浓度添加于空白的鸡和猪配合饲料时,其回收率为73.3～107.3%,变异系数为0.9%～19.2%。     

反相高效液相色谱法测定发酵乳中赤藓红含量

建立发酵乳中赤藓红的反相高效液相色谱分析方法。使用酶法分解蛋白,无水乙醇作为提取剂,碱性条件下使用HLB固相萃取小柱净化,以C₁₈反相色谱柱分离,20 mmoL/L乙酸铵缓冲溶液(pH 6.5)-甲醇为流动相,采用梯度洗脱,检测波长520 nm,外标法定量。结果表明：赤藓红在0.05～20.00μg/mL线性良好,发酵乳样品中赤藓红的定量限为0.2 mg/kg,检出限为0.1 mg/kg;发酵乳中赤藓红的添加量为0.2～2.0 mg/kg时,加标回收率为96.5%～105.6%,相对标准偏差为1.87%～2.21%。本方法操作简便、结果准确、回收率高、重复性好,适用于发酵乳中赤藓红的含量测定。     

瓜蒌纤溶酶的分离纯化及性质研究

利用亲和层析从瓜萎蛋白粗提液中分离纯化得到一纤溶酶,并对其部分酶学性质进行研究.结果表明,该酶表观分子量为66.0 kD;最适pH值为9.0;在4～40℃活性无明显变化,78℃以上完全失活;在以酪蛋白为底物的水解反应中,温度、酶底物比、pH值、反应时间4种因素对水解反应的影响力大小为:温度>酶底物比>反应时间>pH;Km值为1.89mg/mL,Vmax=555.56μmol/(L·min).     

氟苯尼考在大鼠肠内吸收特征试验

考察氟苯尼考的溶解度及在大鼠肠内吸收行为,为研究高效快速吸收氟苯尼考制剂提供参考.高效液相色谱法测定药物的浓度,紫外分光光度法测定酚红浓度,以饱和法测定氟苯尼考的溶解度,在肠内循环模型考察氟苯尼考在大鼠体内吸收行为.结果显示,氟苯尼考在蒸馏水、乙醇、丙酮中的饱和溶解度分别为1.224、26.88、78.91 mg/mL.低、中、高浓度大鼠肠吸收的吸收速率常数分别为0.221 h-1、0.221 h-1、0.235 h-1,半衰期分别为3.135 7 h、3.135 7 h、2.961 5 h,2h吸收率分别为为35.75％、36％、36.6％.表明氟苯尼考的吸收为一级动力学吸收过程,以被动扩散为主；提示在进行氟苯尼考药物剂型时应该充分考虑到药物的低溶解度、低吸收速度特性.     

疯草毒素对瘤胃细菌发酵的影响

[目的]为了探讨疯草毒素对瘤胃细菌的生长和发酵的影响;[方法]分别配制含有0.18mg/mL、0.36mg/mL、0.72mg/mL、1.44mg/mL、2.88mg/mL、5.76mg/mL疯草毒素的培养基对瘤胃混合细菌进行体外培养。用分光光度计实时测定培养物的OD值,培养结束后用pH计和凯氏定氮法测定了发酵终产物的pH值和氨氮浓度。在正常生长条件下,对瘤胃细菌的生长曲线进行了测定。[结果]发现,在培养过程中,不同浓度的疯草毒素对瘤胃细菌的生长无显著影响(P0.05)。培养后培养液的pH值、氨氮浓度无显著差异(P0.05)。[结论]研究表明,体外培养条件下疯草毒素对瘤胃细菌的发酵无显著影响。瘤胃细菌的生长曲线为:Y=0.79/(1+7.81*e-0.942*x)(X=t,Y=OD值)。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对Balb/c小鼠肠道营养物质表观消化率的影响

为了研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON)对Balb/c小鼠肠道营养物质表观消化率的影响,试验选用平均体重为(20±2) g的Balb/c小鼠80只,随机分成4组,每组20只,4个组分别为对照组和0.2, 0.6, 1.8 mg/kg剂量组,连续灌胃28 d,期间每天观察小鼠的临床表现,试验结束后收集各组小鼠粪便,对粪便pH值、水分含量、常规营养成分、氨基酸及微量元素表观消化率进行研究。结果表明:1.8 mg/kg剂量组小鼠采食量减少,解剖可见胃肠有损伤;与对照组相比,0.6, 1.8 mg/kg剂量组小鼠粪便pH值显著升高(P0.05),1.8 mg/kg剂量组水分含量显著降低(P0.05);各剂量组粗脂肪和粗纤维表观消化率显著低于对照组(P0.05),1.8 mg/kg剂量组灰分和粗蛋白表观消化率显著低于对照组(P0.05);与对照组和0.2 mg/kg剂量组相比,0.6 mg/kg剂量组缬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸和丙氨酸等氨基酸的表观消化率降低(P0.05或P0.05);与对照组相比,1.8 mg/kg剂量组15种氨基酸和微量元素铁、铜、镁的表观消化率均显著降低(P0.05),此外铁、铜、镁的表观消化率还显著低于其他组(P0.05)。说明灌胃DON能诱导肠道pH值升高、水分含量减少,不同营养物质的表观消化率降低,并且呈剂量-效应关系。     

半胱胺对藏绵羊断奶羔羊瘤胃pH值、总脱氢酶及TVFA的影响

试验研究了半胱胺(Cs)对藏绵羊断奶羔羊瘤胃pH值、总脱氢酶及TVFA的影响。将10只(公母各半)80日龄左右、体重平均为(16.00±0.31)kg、装有永久性瘤胃瘘管的藏绵羊断奶羔羊随机分为2组(试验组和对照组),在日粮精料中添加300 mg/(kg·BW)的Cs,隔日添加1次,试验期42 d。正式试验当日及试验第7、14、21、28、35天的7:00、9:00、11:00、13:00、15:00、17:00、19:00、21:00、23:00、1:00、3:00、5:00于颈静脉采血样10 mL,同时采集瘤胃液10 mL,测定瘤胃pH值、总脱氢酶的活性和TVFA。检测结果表明,试验组精料中添加Cs使藏绵羊断奶羔羊瘤胃液pH值升高;血清尿素氮浓度降低,与对照组相比差异极显著(P0.01);瘤胃液总脱氢酶活力提高极其明显(P0.01);整个试验期内,半胱胺对瘤胃TVFA的影响极显著(P0.01)。     

HPLC法测定头孢呋辛酯中高分子聚合物含量

固定相为：TSK·GELG2000SWXL色谱柱(7.8mm×300mm,5μm),0.06mol/L磷酸盐缓冲液(0.06mol/L磷酸氢二铵溶液,用磷酸调节pH值7.0)-乙腈(95：5)流动相,检测波长为280nm;头孢呋辛酯浓度在0.3~1.5mg/mL范围内内呈良好的线性关系。本法简便、重现性好,可用于头孢呋辛酯中高分子聚合物的含量测定。     

高效液相色谱法检测鸡蛋中氯羟吡啶残留量

为建立鸡蛋中氯羟吡啶残留的高效液相色谱法,经乙腈提取净化鸡蛋试样中残留的氯羟吡啶,以磷酸盐缓冲溶液-乙腈(85+15)为流动相,采用C18色谱柱,标准曲线在0.025～2μg/mL浓度内呈线性相关,相关系数(R2)为0.9999;在空白鸡蛋样品中添加0.05mg/kg(定量限)、1mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg的氯羟吡啶,回收率为70%～110%,相对标准偏差(RSD)小于10%。该方法简单快速,灵敏度高,重现性好,适合鸡蛋中氯羟吡啶药物残留的测定。     

猫肾脏CT多期增强扫描技术研究

确定猫肾脏CT多期增强扫描最佳造影剂使用剂量、注射速率及延迟时间。选择不同剂量的碘海醇(350,400,450,500 mg I/kg)及注射速率(3,4 mL/s)对猫肾脏进行造影，动态扫描测量主动脉、肾皮质CT值，计算主动脉、肾皮质CT增强值(ΔCT),通过比较主动脉及肾皮质ΔCT的变化确定最佳造影条件。使用最佳造影条件对猫肾脏进行造影，动态扫描并绘制肾脏时间—密度曲线，统计肾皮质达峰时间T_CP、肾皮质与肾髓质CT值相近的起始时间T_NP、观察造影剂排泄至肾盂和膀胱的情况，并计算肾皮质达峰时间与注射时间的差值ΔT_CP、肾皮质与肾髓质CT值相近的起始时间T_NP与T_注射的差值ΔT_NP,最终确定各期最佳扫描延迟时间。试验结果表明：最佳造影剂剂量为450 mg I/kg、注射速率3 mL/s,该条件下主动脉及肾皮质ΔCT值较高。计算得出ΔT_CP平均为11 s,ΔT_NP平均为26 s,各期扫描延迟时间分别为：T_...     

8味中药对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验

选用金银花、连翘、蒲公英等8味中药分别采用乙醇回流法进行提取,用试管二倍稀释法测定来自奶牛乳房炎的3种主要致病菌(金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌)的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果显示,以金银花和连翘对金黄色葡萄球菌抑菌效果最强,MIC值均为15.63mg/mL,其MBC值为31.25mg/mL和62.5mg/mL;芙蓉花对大肠杆菌和无乳链球菌的效果最强,MIC值为31.25mg/mL和15.63mg/mL,MBC值为62.5mg/mL。本试验结果,对临床用药选取合适的中药有直接的指导意义,同时为体内用药的浓度提供参考依据。     

饲料中氟腺呤含量HPLC检测方法的建立

建立了检测饲料中氟腺呤含量的高效液相色潽法。饲料中氟腺呤经甲醇提取,液液分配净化后,以40%乙腈溶液为流动相,在C18色谱柱上,紫外检测器(波长261 nm)下分离检测。方法的检测限为0.007 2 mg/mL,定量限为0.018 mg/mL。该方法线性关系良好,在添加浓度范围内,氟腺呤的平均回收率为85.7%⁹9.2%,相对标准偏差为1.9%99.2%,相对标准偏差为1.9%³.8%。经验证该方法快速简便,准确性和重现性良好。