孝顺竹愈伤组织诱导及植株再生

利用孝顺竹小穗和种胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织并成功实现植株再生.对影响愈伤组织诱导和分化的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选,结果表明:愈伤组织诱导以NB,N6基本培养基附加4 mg·L-1 2,4-D较好;外植体在NB+500 mg·L-1脯氨酸+500 mg·L-1谷氨酰胺+300 mg·L-1水解酪蛋白+30 g·L-1蔗塘+8 g·L-1卡拉胶(Carrageenan)+4 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上经20 d培养,小穗愈伤组织诱导率达87.30%,种胚愈伤组织诱导率为76.27%.愈伤组织预分化及分化的基本培养基以MS较适宜,经MS+30 g·L-1蔗糖+10 g·L-1卡拉胶+4 mg·L-1 KT培养基预分化7 d后,转入无激素的MS培养基上分化14 d,小穗愈伤组织仅个别长出绿色芽头;但种胚愈伤组织芽分化率可达80.0%.分化芽中有8%左右的白化苗,并伴有花叶苗出现.优化后的种胚愈伤组织预分化最佳培养基是MS+3 mg·L-1 6-BA+3 mg·L-1 KT.分化芽苗在添加2mg·L-1 NAA的MS培养基上生根良好,移栽成活率可达70%以上.     

华北落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究

以成熟合子胚为外植体,用完全随机、正交设计等试验方法加之组培技术来研究影响华北落叶松(Larix princi-pis-rupprechtii)胚性愈伤组织诱导的几种主要因子。结果表明:诱导胚性愈伤组织过程中的最佳灭菌方式为2%Na-ClO灭菌30 min,剥皮、去胚乳处理。其中污染率和NaClO的灭菌时间呈负相关:NaClO灭菌时间越长,污染率越低。诱导胚性愈伤组织的最佳琼脂浓度为4 g·L-1,且过高和过低的琼脂浓度不仅降低了其诱导率,提高了愈伤组织的褐化水平,也影响了外植体的发育形态。外源激素的正交试验结果表明:2,4-D是主要影响因子,对诱导率的影响显著,其次是KT,最后是6-BA。最佳的植物外源激素配比是2,4-D 1.8 mg·L-1+6-BA 0.3 mg·L-1+KT 0.3 mg·L-1。     

油茶优良无性系叶片愈伤组织诱导研究

以油茶优良无性系湘林1号和湘林4号为材料,采用正交设计试验对其叶片进行离体培养并诱导形成愈伤组织.试验结果表明:激素种类与浓度组合对愈伤组织诱导影响很大,且两个品种表现不一致,湘林1号以IBA 0.01 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+2,4-D 0.5 mg·L-1+NAA 2.0 mg·L-1最佳,湘林4号以IBA 0.1 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1+NAA 2.0 mg·L-1最佳,诱导率均达100%.低温预处理5～10 d有助于愈伤组织的诱导,不同光照条件以及叶片不同部位均对愈伤组织的诱导有影响.     

红豆杉愈伤组织诱导试验初探

以1年生红豆杉的茎段、芽尖及种子作为外植体,以MS和B5培养基添加2,4-D、NAA、KT进行愈伤组织诱导试验。结果表明:最适宜红豆杉愈伤组织诱导的条件为以茎段为外植体,消毒时间6 min;B5 NAA1.0 mg/L KT0.2 mg/L GA0.75 mg/L培养基;25℃左右培养;接种后外植体暗处理1～2周效果更佳,诱导率高,且诱导出的愈伤组织质量好。     

香蕉薄切片愈伤组织再生体系的建立研究

以巴西香蕉品种的薄切片为外植体高频地诱导出愈伤组织,并诱导出了不定芽,获得了再生植株。在实验过程中,利用正交实验中筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 4.0 mg.L-1+KT 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1+活性炭200 mg.L-1,诱导率可达100%,愈伤组织增殖的最佳培养基是MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1+活性炭100 mg.L-1,继代3-4次的愈伤组织在6-BA浓度为5.0 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽,继代10次之后愈伤组织在继代培养基上开始出现褐化现象,愈伤组织增殖明显受到抑制,褐化的愈伤组织逐渐死亡。     

地被菊间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系的研究

采用三步培养法建立了地被菊花品种‘玉人面'间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系.试验以地被菊花品种‘玉人面'茎段(节间)为外植体,研究了生长调节剂、光照强度等因子对其间接体细胞胚诱导和分化的影响,同时进行了抗生素敏感性试验.结果表明:胚性愈伤组织诱导培养基为MS KT 2.0 mg·L-1 2,4-D 2.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1,诱导15 d后,将获得的黄绿色致密颗粒状胚性愈伤组织转入胚性愈伤组织分化培养基MS KT 2.0 mg·L-1 2,4-D 1.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1中,诱导15 d后再转入MS KT 2.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1的分化培养基中培养20 d,光照强度为1 000～2 000 lx,胚性愈伤组织诱导率、分化率分别为95.3%、92.7%,平均每个外植体分化的芽数为17.8个,获得的再生芽的稳定性为99.5%.抗生素敏感性试验表明:地被菊花品种‘玉人面'间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系中,卡那霉素选择压为20 mg·L-1;头孢霉素在胚性愈伤组织诱导时的选择压为300 mg·L-1,在胚性愈伤组织分化培养时选择压为100 mg·L-1.     

无患子愈伤组织诱导与分化培养技术研究

为解决无患子组织培养中的难题,对愈伤组织诱导最佳外植体与基本培养基类型先进行筛选,再通过正交试验设计,筛选愈伤组织诱导植物生长调节剂、生长及分化培养最佳抗褐化剂和植物生长调节剂种类与浓度水平。结果显示：(1)1 a生嫩茎段是无患子愈伤组织诱导最佳外植体;(2)培养基中添加20.0 mg/L抗坏血酸和10.0 mg/L半胱氨酸能有效抑制愈伤组织褐化现象的发生;(3)以改良MS作为基本培养基,外加6-苄基腺嘌呤(6-BA)0.6 mg/L+糠基腺嘌呤(KT)0.15 mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)3.0 mg/L植物生长调节剂浓度组合,愈伤组织诱导率最高,结构致密;(4)愈伤组织团在改良MS外加6-BA 3.0 mg/L+萘乙酸(NAA)0.4 mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.25 mg/L植物生长调节剂浓度组合下,不定芽诱导率最高,芽苗健壮。     

小叶龙竹高频植株再生系统的建立

以离体保存的小叶龙竹试管丛芽为外植体进行脱分化形成愈伤组织和愈伤组织再分化的研究。结果如下:1丛芽、茎尖、茎节和叶片,都能长出愈伤组织,效果较好的是丛芽、茎尖,其次为茎节,叶片较差。2最适培养基为MS+2,4-D 3 mg·L-1+Kt 0.2 mg·L-1+S 3%。3 1~3代愈伤组织分化芽的频率高,每隔6~8个月新启动一批丛芽诱导产生愈伤组织,可以保证高频稳定的愈伤组织再生系统的建立,以供后续的转基因研究。     

广藿香愈伤组织的诱导和增殖

以广藿香的幼叶、茎段为外植体,接种于附加不同浓度的2,4-D、NAA、6-BA、KT、TDZ及其组合的MS固体培养基上进行愈伤组织的诱导,结果表明:单独使用5种激素在一定范围内均能诱导出愈伤组织;最佳组合培养基为MS+6-BA 1.0 mg.L-1+2,4-D 0.1 mg.L-1。进一步研究发现,茎段和叶片诱导的愈伤组织的生长曲线都呈“S”型,且生长周期均为18 d。     

平榛组织培养与快速繁殖

以平榛茎段为外植体,进行不定芽的诱导和快速繁殖研究。结果表明:初代培养基DKW 5mg·L-16-BA 0.01mg·L-1IBA中加入维生素C2.0g·L-1可有效抑制褐化的发生。附加64.42mg·L-1腐胺、58.10mg·L-1亚精胺和20.20mg·L-1精胺有利于外植体芽体的萌发与生长,经初代培养后茎段切口可产生愈伤组织,并可直接成芽;以产生的愈伤组织为材料,在培养基DKW 0.01mg·L-1IBA 2.5mg·L-1TDZ 32.21mg·L-1腐胺 29.05mg·L-1亚精胺 10.10mg·L-1精胺上,平榛愈伤组织可诱导分化出不定芽,加多胺的处理有利于提高芽体萌发率和加快生长。在培养基1/2MS IBA0.25mg·L-1上生根率达90%以上。     

落叶松胚性愈伤组织诱导培养基中激素的311-A最优回归设计筛选

采用311-A最优回归设计，对落叶松胚性细胞诱导中激素种类与浓度优化筛选，建立胚性愈伤组织量依2，4-D、BA、KT的多基本原则 式回归方程，分析了试验因子的主效应和互作效应，借助此方程获得了3因子的最佳配比组合以及最佳胚性愈伤组织发和亘，2，4-D为1.29mg.L^-1、BA为0.39mg.L^-1和KT为0.58mg.L^-1时，落叶松胚性愈伤组织的诱导量可达到13.9317mg.个^-1(外植体）。结果表明，这是一种简便、实用、科学的优化培养基的途径。     

几种作用因子对多年生黑麦草组织培养影响的研究

以多年生黑麦草成熟种子为外植体进行了愈伤组织诱导和分化的研究。结果表明:dicamba替代2,4 D,蔗糖替代麦芽糖可以显著提高愈伤组织诱导率和植株再生率;在一定的浓度范围内(3～9mg·L-12,4 D)2,4 D浓度的升高可明显提高愈伤组织的诱导率,但同时却降低了分化率;在愈伤诱导培养基中同时使用两种生长激素(2,4 D和NAA)的效果要好于单独使用一种生长激素(2,4 D)的效果;水解酪蛋白、脯氨酸和谷氨酰胺浓度的增加并没有促进植株再生率的升高。     

美国枫香茎段组织培养与植株再生

美国枫香(Liquidambar styraciflua L.)为金缕梅科(Hamanelidaceae)枫香属(liquidambar L.)落叶乔木。生长迅速,树高18～20m,夏末叶片变为红、黄、紫等多种混合颜色,红叶期长,喜阳,适合酸性至中性土壤,广泛分布于北美南部以及墨西哥、中美洲至洪都拉斯的高海拔山区,是胶合板和造纸的良好用材^[1],也是良好的造林绿化树种,很有发展前景。     

沟叶结缕草的组织培养和无性系的建立

通过研究不同基本培养基及植物生长调节组合对沟叶结缕草丛生芽诱导、增殖和愈伤组织诱导、分化的影响,建立起沟叶结缕草试管无性系。以地下匍匐根状茎的顶芽为外植株,在MS 6-BA 2 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1培养基上诱导丛生芽形成,以MS KT 3 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1作为继代增殖培养基,建立起丛生芽苗→不定芽发生→丛生芽苗速生试管无性系;以丛生芽苗基部为外植体,以MS 2.4-D 4 mg.L-1作为愈伤组织诱导培养基,以MS基本培养基作为愈伤组织分化培养基,建立起丛生苗→愈伤组织→愈伤组织分化→丛生苗试管无性系。试管无性系室外移栽成活率达95%以上。沟叶结缕草试管无性系的建立为细胞工程育种和基因转化的研究奠定了基础。     

晚松悬浮细胞系的建立和原生质体的分离

植物悬浮细胞系的建立和原生质体的分离已被广泛地应用于生理学、生物化学、细胞学、遗传学及分子生物学的研究 ,它是生物技术中进行原生质体培养、杂交、基因转移、突变系筛选等项研究的较理想手段[1] 。针叶树在这方面的研究起步虽晚 ,但至今已取得令人瞩目的进展[2 ] 。晚松     

Establishment of cell suspension line of <Emphasis Type="Italic">Populus tomentosa</Emphasis> Carr.

Leaves of fine Populus tomentosa genotype TC152 were used as explants to establish cell suspension lines. The effects of plant growth regulators on callus induction and establishment of cell suspension lines were studied. The callus induction rate was the highest on a MS solid medium supplemented with 1.0 mg·L^-1 2,4-D. A cell suspension line could be obtained by inoculating calli which were not subcultured into a MS liquid medium supplemented with 1.5 mg·L^-1 2,4-D. The best subculture medium was MS ＋ 0.8 mg＇L-1 2,4-D ＋ 30 g·L^-1 sucrose with a subculture cycle of seven days.     

Somatic embryogenesis from cell suspension cultures of aspen clone

Suspension cultures initiated from callus derived from petiole explants of aspen hybrid (Populus tremuloides × P. tremula) produced somatic embryos. Callus was induced on a MS medium supplemented with 5 mg·L–1 2,4-D and 0.05 mg·L–1 zeatin under light conditions. Embryogenic calli were obtained when a subsequent subculture of calli was suspended in the same basal me-dium with 10 mg·L–1 2,4-D. The highest number of globular embryos were induced from embryogenic calli by cell suspension cul-ture in a MS liquid medium supplemented with 10 mg·L–1 2,4-D. Genotype and 2,4-D concentration were vital to the induction of embryogenic calli producing competent cells. Embryogenic calli for each genotype were heterogeneous. Green calli with gel-like consistency could yield more competent cells than light yellow embryogenic calli. However, some globular embryos broke into slices and some developed abnormally after one month of culture under the same or other hormonal conditions.     

东北刺人参组培快繁培养基的筛选

东北刺人参(Oplopanax elatusNakai.)又称刺参,五加科(Araliaceae)多年生落叶灌木,其干燥根和茎均可入药,是一种用途广泛的中药材。近些年来,医药科研工作者对其成分及药理进行了大量的试验和研究,其结果表明,根、茎入药有类似于人参的作用,可用于治疗神经衰弱、低血压和风湿性