741杨离体叶片再生及抗虫基因转化

用７４１杨［Ｐｏｐｕｌｕｓａｌｂａ（ｐ．ｄａｖｉｄｉａｎａ×Ｐ．ｓｉｍｏｎｉｉ）×Ｐ．ｔｏｍｅｎｔｏｓａ）］试管植株无菌叶片作外植体，经研究，筛选了诱导不定芽分化、增殖和生根培养基；暗培养５～１５ｄ能提高不定芽分化的诱导率。无根或生根试管植株两类叶片均可用作外植体。建立了７４１杨最佳转化和再生系统。用含有完全改造的Ｂｔ基因表达载体ｐＢ４８．７转化优良杨树新品种－７４１杨，经在含有卡那霉素培养基上选择和ＰＣＲ检测已获得初步确定的转基因植株。     

苹果叶片再生的改进及转抗虫基因植株的获得

用分别含有全部改造和垢Ｂｔ基因植物表达载体ＰＢ４８，７和ＰＢ４８．６的土壤农杆菌转化苹果优良品种（红富士、早生富士、辽伏）的叶片外植体，经过对ＭＳ培养基成分调整，在Ｎ量保持不变的条件下以（ＮＨ４）２ＳＯ４取代ＮＨ４ＮＯ３，使得转化后再生频率大增，现已获得２３２株转化再生植株，这些植株可以在含５０ｍｇ．Ｌ＾－１的卡那霉素培养基上生长，选出部分植株作ＰＣＲ检测，表明Ｂｔ基因已被导入这些苹果品种中。     

苹果叶片再生的改进及抗虫基因植株的获得

用分别含有全部改造和部分改造的Ｂｔ基因植物表达载体ｐＢ４８．７和ｐＢ４８．６的土壤农杆菌转化苹果优良品种（红富士、早生富士、辽伏）的叶片外植体，经过对ＭＳ培养基成分调整，在Ｎｔ保持不变的条件下以（ＮＨ４）：ＳＯ４取代ＮＨ４ＮＯ３，使得转化后再生频率大增，现已获得２３２株转化再生植株，这些植株可以在合５０ｍｇ·Ｌ－１的卡那霉素培养基上生长，选出部分植株作ＰＣＲ检测，表明Ｂｔ基因已被导入这些苹果品种中。     

毛白杨叶片离体再生培养的基因型效应

以5个毛白杨基因型(TC121、TC152、TC332、TC510和TC970)叶片为外植体,研究毛白杨不同基因型叶片再生能力的差异,通过单因子和正交试验设计,建立并优化毛白杨叶片再生体系.结果表明,毛白杨叶片离体再生能力受基因型的影响,基因型间的叶片再生率差异显著.其中基因型TC152再生率最高,在MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.05 mg/L + 蔗糖 30 g/L + 琼脂 6 g/L 培养基上可达到97.0%;基因型TC970在MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.05 mg/L + 蔗糖 30 g/L + 琼脂 6 g/L 培养基上再生率可达到94.7%;经培养基优化后,基因型TC332再生率提高至72.3%,而基因型TC510和TC121再生率仍低于50.0%.      

影响大白菜离体再生及基因转化的因素研究

以耐热大白菜４２号自交不亲和系的子叶为外植体再生及 研究了几种因素对大白菜植株再生的影响和农杆菌介导法转ＣｐＴＩ基因的条件,含０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ,１．０－２．０ｍｇ／ＬＣＰＰＵ,５．０－１０．０ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３的ＭＳ培养基较适合于大白菜４２号自交不亲和系的子叶离体培养再生植株。测定了在含不同激素组合的培养基上离体２７ｄ后的子叶的内源激素含量,在不定芽诱导培养基上子叶内源ＩＡＡ、ＡＢＡ含量分别比     

影响大白菜离体再生及基因转化的因素研究

以耐热大白菜42 号自交不亲和系的子叶为外植体,研究了几种因素对大白菜植株再生的影响和农杆菌介导法转CpTI基因的条件。含0.1 m g/LNAA, 1.0～2.0 m g/LCPPU, 5.0～10.0 m g/LAgNO3 的MS培养基较适合于大白菜42 号自交不亲和系的子叶离体培养再生植株。测定了在含不同激素组合的培养基上离体培养7 d 后的子叶的内源激素含量,在不定芽诱导培养基上子叶内源IAA、ABA 含量分别比培养在不含激素的培养基上下降42.6% 、10.5% , 比培养在生根培养基上下降52.4% 、19.0% ; iPAs 含量、GA1 3 含量分别比培养在不含激素的培养基上上升510.9% 、143.9% ,比培养在生根培养基上上升860.5% 、558.3% 。头孢霉素抑制子叶再生不定芽,而羧苄青霉素则有促进作用。筛选转化体的适宜卡那霉素浓度为5～10 m g/L。     

菊花叶片离体高效再生体系的建立

本文报道了以菊花叶片为外植体，诱导植株再生，建立高效植株再生体系。获得诱导愈伤组织、芽和根的最佳培养基。在有6-BA、NAA的MS培养基上获得较高的愈伤组织诱导率，在有2，4-D的培养基上其愈伤组织诱导率很低。带有愈伤组织的外植体转移到有6-BA、NAA的MS培养基上催化芽的产生，并筛选出能直接诱导芽再生的培养基(MS 6-BA(3mg／L) NAA(1mg／L))。AgNO3可明显提高芽的再生率。茎段在1／2MS和有IBA或NAA的1／2MS培养基上诱导生根。生根的小苗在温室里生长良好。     

以叶片为外植体建立三倍体毛白杨高效再生体系

[目的]建立三倍体毛白杨叶芽再生体系与探索抗生素对叶片再生不定芽的影响。[方法]以叶片为外植体,探索适合三倍体毛白杨遗传转化的再生条件和抗生素对叶片再生不定芽的影响。[结果]结果表明,三倍体毛白杨最适合的不定芽分化培养基配方为MS+6-BA 1.00 mg/L+NAA 0.50 mg/L;在基因工程中,40 mg/L的卡那霉素为选择性抗生素使用浓度,300 mg/L的头孢霉素为抑菌性抗生素使用浓度;再生的不定芽在MS+IBA 0.10 mg/L固体培养基中生根率可达82%。[结论]该研究为毛白杨遗传转化中适宜的培养基成分和抗生素浓度的选择提供科学依据。     

6-BA和NAA对菊花叶片离体再生的影响

以叶片为外植体进行了菊花(Chrysanthemum morifllium)组织培养技术的研究。结果表明,菊花叶片用0.1%HgCl2消毒7min为佳;较低浓度的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和较高浓度的α-奈乙酸(NAA)有利于愈伤组织的诱导,其中以MS 1.0mg/L6-BA 0.3mg/LNAA诱导的效果较好;较高浓度的6-BA和较低浓度的NAA则有利于芽的诱导,其中以MS 4.0mg/L6-BA 0.2mg/LNAA诱导的效果较好;以1/2MS附加0.1mg/LIBA的培养基诱导的根量最大,且根粗长。     

RolB基因对三倍体毛白杨的转化研究

为了提高三倍体毛白杨的生根能力,把rolB基因转入三倍体毛白杨中,获得20个转化植株,在无激素培养基上,转化植株的生根率达到100%,而未转化植株的生根率只有15%~20%。PCR扩增证明目的基因已经插入到植物的基因组中。对部分rolB基因转化植株进行了GUS组织化学染色检测,转化植株叶片中有GUS活性的表达。     

不同无性系毛白杨离体植株再生能力比较研究

以毛白杨无菌苗的嫩茎为外植体,对5个毛白杨无性系的植株再生能力进行了比较。结果表明,5个无性系通过器官培养途径均能再生植株,但不同无性系在植株再生能力上有很大差异,茎芽数最多的4号无性系是总平均的122.7%,而最少的1号无性系仅为总平均的78.4%;2号无性系生根率可达60%,3号仅28.7%,说明茎芽分化及生根能力受遗传的控制。0.5mg/L6-BA适合大多数无性系的茎芽增殖和生长,平均茎芽增殖达到8.8个,但生根率仅为49.5%。1/2MS基本培养基适合各无性系的生根培养,在培养基中添加低质量浓度的生长素可以增强生根能力。毛白杨在植株再生能力方面存在明显的培养基×无性系交互作用。     

油柿叶片离体再生体系的建立

 以油柿叶片为材料开展了离体培养研究，旨在建立其再生体系，为转基因操作奠定基础。结果表明，油柿叶盘在MS（1/2N）+IBA0.1mg/L+ ZT3.0mg/L培养基上，经前期暗处理3周后移至正常光照下培养的再生效果最好，其不定芽再生率和外植体平均不定芽数最高，分别为80.5%和（4.1±0.8）个。再生苗接种于添加IAA和IBA各0.5mg/L的MS(1/2N)培养基上，4周时生根率可达92%，成功地建立了油柿叶片的离体再生体系。     

浙贝母叶片不定芽再生和基因转化条件研究

浙贝母为百合科多年生草本植物,是中常用的药用植物~([1]).贝母在荷兰、英国和法国等欧美国家,多为观赏植物.近年来中国也因其花朵色雅且别致,逐渐在园林中应用.     

草莓叶片再生体系的建立

以广西草莓的主栽品种丰香无菌苗的叶片为外植体，接种在一系列改良MS培养基上进行培养。实验结果表明：丰香在MS TDZ 2．0mg／L IAA 0．25mg／L培养基培养时，叶片再生频率达到88％以上，适合于进行遗传转化研究。     

辣椒叶片离体培养与植株再生

以辣椒无菌苗叶片为外植体，就激素对其不定芽分化及植株再生的影响进行了研究。结果表明，ＢＡ对叶片不定芽的诱导效果最好，ＺＴ次之，ＫＴ不能有效地诱导叶片形成不定芽；ＩＡＡ与ＢＡ相配合使叶片不定芽分化频率明显提高；ＩＢＡ或ＮＡＡ与ＢＡ的激素组合使叶片不定芽分化频率有所下降；２，４－Ｄ对叶片不定芽分化有明显的抑制作用。在分化培养基中添加１．０ｍｇ／Ｌ ＧＡ３有利于不定芽的伸长。不定芽伸长后在不含激素的ＭＳ     

文冠果叶片离体再生体系的优化研究

[目的]探明不同处理对文冠果叶片离体再生体的反应。[方法]以成熟文冠果叶片作为外植体,通过诱导和培养的方法,研究不同培养基激素配比对文冠果离体培养的影响。[结果]2,4-D及其与BA组合诱导的愈伤组织不适宜进行间接不定芽诱导;MS培养基中添加2.0mg·L-1 KT和0.2mg·L-1 NAA时,愈伤组织诱导率最高,且在愈伤组织上可分化出不定芽,是叶片通过愈伤组织诱导不定芽再生的一条最佳途径。IBA与NAA、IAA组合中,NAA、IAA浓度为1.0mg·L-1时,为最佳生长素配比;生长素速蘸方法不适宜进行试管苗生根培养。[结论]不同组合和配比生长系,对文冠果再生体有不同效果。     

花椰菜叶片离体再生技术的研究

以花椰菜叶片为外植体,经消毒处理后在不同激素浓度的培养基上进行诱导再生。结果表明:在附加3mg/L6-BA和0.2mg/LNAA的MS培养基上培养,芽分化率最高,达100%,平均每块外植体产生5.71个芽。     

红掌离体叶片再生途径的研究

本文是以红掌的叶片做为外植体,探讨植株再生途径,以期为红掌组培苗工厂化提供一定的技术储备。通过培养基对比试验研究表明：诱导红掌叶片愈伤组织的理想配方是：1/2 MS＋6-BA2.0 mg/L＋2,4-D 0.5 mg/L,诱导出愈率为64.3%;诱导愈伤组织分化及不定芽增殖的培养基是MS＋6-BA2.0 mg/L＋NAA0.2 mg/L,分化率达63.3%,增殖系数为4.1,芽苗健壮;最佳的生根培养基为1/2MS＋NAA 0.1 mg/L,生根率达92.2%。