抑制性差减杂交结合基因芯片技术在植物基因差异表达研究中的应用

抑制性差减杂交技术和基因芯片技术是近年来发展起来的研究基因差异表达的2种非常有效的方法.SSH技术或基因芯片技术单独使用都存在不同程度的缺陷和不足,但若将2种技术结合起来使用,则能充分发挥各自的优势,并最大限度地弥补各自的不足.鉴于此,对SSH技术与基因芯片技术的原理与优缺点以及两者的结合在植物研究上的应用进行了综述.     

抑制性差减杂交(SSH)技术在柑桔逆境胁迫研究中的应用

抑制性差减杂交(SSH)技术作为一种稳定、高效、简单的富集和分离差异表达基因方法,为研究植物生长发育及病虫害和其他一些生物或非生物逆境胁迫下的特异基因的表达和相关基因的分子克隆提供了有力的工具。介绍了SSH技术的基本原理、技术要点,并对SSH技术在其他植物和柑桔逆境生理研究中的应用现状和前景进行了探讨。     

高盐胁迫下的草原龙胆基因表达分析

为了更好的理解植物对盐胁迫的反应的分子机理,结合差减抑制杂交技术和基因芯片的方法,研究了草原龙胆对于高盐胁迫响应重要性和新基因.先利用草原龙胆50#叶片进行盐处理和非盐处理,并以此构建抑制差减文库.从此文库中选取部分克隆构建了草原龙胆基因芯片,进行了芯片分析,研究了高盐处理对非处理条件下的基因表达变化.在3 h的高盐胁迫下,基因芯片分析显示有36个单一基因有差异表达,大多数基因未见报道.这些基因的存在表明盐胁迫导致了草原龙胆复杂的胁迫响应.     

抑制消减杂交技术在瓜菜作物研究中的应用

抑制消减杂交(SSH)是一种适用于分离2个遗传背景相关的样品之间差异表达基因的技术,目前该技术在植物研究中的应用不是很多。文章主要综述了抑制消减杂交技术在瓜菜类作物不同发育阶段和抗病、逆境胁迫相关的差异表达基因以及其他相关差异基因研究中的应用现状。     

打叶复烤生产现场质量管控策略探究

打叶复烤是一种新型工艺,是以挂杆复烤为基础发展起来的,将复烤厂的复烤工序与卷烟厂的打叶风分工序进行有机结合的新工艺。我国对于打叶复烤技术的研究起步较晚,相关工艺尚不成熟,笔者结合工作经验,对此项技术进行分析,并根据不足提出一些见解。     

基因芯片技术及其在果树上的应用

基因芯片（DNA芯片，微阵列）是20世纪后期在杂交理论基础上发展起来的又一个分子生物学技术，将大量的核苷酸探针以点阵列方式排列于特定的固相支持物上，与放射性或荧光标记的样品靶DNA杂交，通过激光共聚焦等技术来分析靶DNA的存在和量的方法。本文介绍了基因芯片技术原理、特点以及这项技术在果树上的应用。     

三亚市高校雨水利用系统及景观营造研究

查阅了大量国内外有关雨水利用系统和景观营造的文献,并分析了一些校园雨水系统的优秀案例,提出了三亚市高校校园雨水系统的现状和不足,掌握校园雨水利用系统与景观结合的方法,对三亚市高校的雨水利用系统与景观营造结合起来研究具有示范与探索性质。     

崇尚与控制——中西古典园林艺术差异比较

自古以来,中西方古典园林在各自的自然条件、人文思想中独立产生和发展起来,蕴含了不同的造园思想,形成了2种截然不同的艺术氛围。通过对中西古典园林艺术的研究,分别从园林的道路、植物、水体、雕塑、取景和空间等6个方面来进行分析比较,总结出两者的艺术差异即对自然的崇尚与控制。     

利用SSH技术分离甘蓝抗黑腐病相关基因的研究

采用抑制差减杂交(SSH)技术,构建甘蓝抗病品种A21经黑腐病菌诱导6、8、12、24h后的混合SSH文库。经反向Northern筛选,共获得87条高质量ESTs。通过NCBI中BLAST数据库比对分析发现,83个ESTs与已知蛋白或基因具有不同程度的同源性。     

早春设施栽培马铃薯与秸秆生物反应堆结合应用技术

早春设施马铃薯生产中经常遇到低温冷害、CO2缺乏、病害严重和土壤养分失衡等问题,制约了早春马铃薯的稳产高产.将秸秆生物反应堆技术与早春设施马铃薯栽培结合起来,利用秸秆生物反应堆分解释放热量、CO2、抗病原微生物和增加土壤养分的功效,实现显著的增产效果和良好的效益.     

抑制性消减杂交技术(SSH)在辣椒抗病基因研究中的应用

基于抑制性PCR及差减杂交技术建立的抑制性消减杂交技术,因其假阳性率低、敏感性高、效率高等优点广泛应用于植物基因差异表达研究.对该技术的原理、主要优缺点及其在辣椒植物抗病性机制研究中的应用进行了综述.     

应用抑制性消减杂交技术从枳中筛选根特异表达基因

为筛选分离植物根组织特异表达基因,以枳根RNA为试验组,叶RNA为驱动组,构建了枳根消减文库。从该消减文库中共获得有效序列1 177个,其片段长度主要分布在200 ~ 500 bp;序列拼接后得到455个非重复序列,其中245个与已知基因匹配,具有结合功能、催化活性和转运活性等生物学功能,可参与植物的代谢、细胞生长、个体发育、应激反应等生物学过程。实时定量PCR检测结果显示这些基因中的主要乳液蛋白、早期结瘤素样蛋白和贝壳杉烯酸氧化酶等基因在根中高表达。     

Identification of some expressed sequence tags in cerebellum of rat

AIM: To obtain differentially expressed cDNA fragments in the cerebellum of rats and screen unknown expressed sequence tag (EST). METHODS:Suppression subtractive hybridization (SSH) was carried out, in which the cDNA fragments of cerebellum were taken as "tester" and correspondingly that of cerebrum and brain stem as "driver". The homogeneous sequences between the tester and driver were excluded and the rare sequences in cerebellum were enriched by SSH. The differentially expressed cDNA fragments were further cloned for the construction of subtracted cDNA libraries and sequencing. RESULTS: 32 clones were selected and 34 cDNA fragments were sequenced. 8 of 32 were proved to be true positive with reverse Northern assay, 13 of 34 fragments were identified to be new cDNA fragment and given the gene sequence numbers by GenBank (AW288461-AW288474).CONCLUSION:SSH is very useful method for screening differentially expressed genes.Our data may be helpful to understand the molecular mechanism of brain function.     

Development of gene therapy in wound healing

The basic concept of gene therapy is to introduce a therapeutic gene into a cell, whose expression can improve to healing of wound. To achieve this goal, the suitable therapeutic gene has been selected and delivered into the reparative cell, which is becoming a focal point works about gene therapy in wound healing. There have been several different therapeutic genes and gene transfer strategies that have been used in models of wound healing. This article discusses several methods that have been used to deliver genes encoding growth factor proteins, stem cells into wounds and the advantages/disadvantages of each approach. We hope a safe vectors system to deliver the effectual transgene in wound healing.     

PCR-select differential screening of a subtracted cDNA library of heat-adapted rat liver

AIM: To reveal the molecular mechanisms of heat adaptation by study the change of gene expression in rat liver when the rats exposed to hyperthermia stress and heat adaptation. METHODS: Differentially expressed genes in rat liver in association with heat adaptation were identified using the suppression subtractive hybridization (SSH) technique to prepare subtracted cDNA libraries in heat adaptation. The PCR-amplified cDNA fragments generated by SSH were then ligated into the plasmid pGEM-T (Promega). PCR-select differential screening technique was used to filtrate differentially expressed genes. Each of these differentially expressed genes was sequenced and was compared to known sequences in the GenBank database. RESULTS: eight up-regulating expressed genes segments were isolated from the up-regulating differentially expressed library, three of which were known gene such as p53 and five genes were new expressed sequence tags. CONCLUSION: Up-regulating expressed genes such as p53 maybe participate in the signal transduction pathway of heat adaptation.     

辣椒Me3基因介导抗根结线虫相关基因的SSH分析

以辣椒（Capsicum annuum L.）双单倍体HDA149为试验材料,接种南方根结线虫（Meloidogyne incognita）12、24、36 h的根尖材料作为测验方(Tester),相应的未接种根尖材料作为驱动方(Driver),构建一个南方根结线虫诱导Me3 基因表达早期的抑制消减杂交cDNA文库,通过高密度点阵膜杂交差异筛选,获得了309条表达序列标签(EST)。通过测序,除去重复序列共得到259条EST序列,在GenBank上进行BLAST分析,30个EST片段未发现同源性基因,229个为具有同源性的已知基因,其中71个为功能未知的基因。在显微观察和抗性相关EST表达谱分析的基础上,推测在Me3基因介导的不亲和互作中,编码NBS-LRR结构的抗病基因参与了寄主对根结线虫的识别,激发了过敏性坏死反应的信号基因, 同时多种抗性相关的转录因子基因表达, 使以代谢为基础的防御反应和保护机制发挥抗线虫作用。     

分子标记在濒危植物遗传多样性研究中的应用

介绍微卫星DNA标记、RFLP分析、RAPD分析、AFLP分析、ISSR分析的基本原理及其在濒危植物遗传多样性研究中的应用，并对这些分子标记手段的优缺点进行了比较。     

植物害虫检疫处理技术研究进展

介绍国内外植物检疫各种处理技术应用现状及其优缺点,探讨辐射处理技术和气调处理技术的研究方向和发展趋势。     

绵阳城市广场建设中的特色分析

在调查的基础上，介绍了四川绵阳市的广场，并以铁牛广场为例分析其特色和不足。