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动物血液中超氧化物歧化酶的提取方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
超氧化物歧化酶,简写为SOD,目前市场上所用SOD一般为CuZn-SOD,本文介绍了提取动物血块中CuZn-SOD的分离提取方法,在实验中利用血块采用机械破碎法破膜,采用热变性及两次乙醇-氯仿沉淀去除杂蛋白,然后用丙酮沉淀得到CuZn-SOD成品。 相似文献
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本研究利用红细胞连续分离和热变性、超滤、丙酮沉淀、离子交换等技术,建立了一套牛血铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)规模化生产的简便易行新工艺。该工艺采用碟式分离机对红细胞进行连续分离,其分离速度可达1000kg牛血/h以上;采用添加Cu2 、Zn2 的一次热变性方法除去血红蛋白,可以代替传统方法中的氯仿和乙醇,并且在超滤技术浓缩提取液后,沉淀过程中丙酮的用量减少了90%;减轻了这些有机溶剂对环境造成的压力。在规模化生产条件下,利用新工艺,投料14批,共570.5kg红细胞,得到SOD冻干粉36069.35 mg,平均比活达到6164.19U/mg.pro,平均收率为34.41万U/kg红细胞,并且主要化学试剂成本降低93.0%。此外试验结果还表明,冷冻红细胞热变性后,酶的平均总活力一般稳定在72.86万U/kg红细胞;与新鲜红细胞制备的SOD在收率、纯度、比活等方面无明显差别,即可以以冷冻红细胞为原料制备SOD,从而解决了原料长期保存问题。 相似文献
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本研究利用红细胞连续分离和热变性、超滤、丙酮沉淀、离子交换等技术,建立了一套牛血铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)规模化生产的简便易行新工艺.该工艺采用碟式分离机对红细胞进行连续分离,其分离速度可达1000kg牛血/h以上;采用添加Cu2+、Zn2+的一次热变性方法除去血红蛋白,可以代替传统方法中的氯仿和乙醇,并且在超滤技术浓缩提取液后,沉淀过程中丙酮的用量减少了90%;减轻了这些有机溶剂对环境造成的压力.在规模化生产条件下,利用新工艺,投料14批,共570.5kg红细胞,得到SOD冻干粉36069.35 mg,平均比活达到6164.19U/mg·pro,平均收率为34.41万U/kg红细胞,并且主要化学试剂成本降低93.0%.此外试验结果还表明,冷冻红细胞热变性后,酶的平均总活力一般稳定在72.86万U/kg红细胞;与新鲜红细胞制备的SOD在收率、纯度、比活等方面无明显差别,即可以以冷冻红细胞为原料制备SOD,从而解决了原料长期保存问题. 相似文献
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贮藏条件对苜蓿叶蛋白功能性酶的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以苜蓿为原料,采用酸碱法沉淀叶蛋白凝聚物。冷冻干燥后,分析叶蛋白中常规营养成分的含量和氨基酸组成,以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶的含量;得到的苜蓿叶蛋白分别在常温、4℃、-20℃、-40℃条件下储藏,在2周、4周、8周、12周时取样,分析超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶活性在储藏过程中的变化。结果表明:苜蓿叶蛋白中常规营养成分的含量远高于日常食品,各种氨基酸种类齐全;苜蓿叶蛋白中含有丰富的SOD和谷胱甘肽过氧化物酶;低温对SOD和谷胱甘肽过氧化物酶的酶活性保存率保存效果最好。 相似文献
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本文首次报道了以制造破伤风抗毒素马血红细胞为原料,采用乙醇—氯仿、热变性除血红蛋白和杂蛋白、丙酮沉淀、DEAE-Sephad exA-50柱层析等分离步骤制备马血SOD的简便、经济方法。制备的马血SOD经SDS-PAGE为一条带,比活为12940u/mg蛋白,回收率为62%。实验证明,马血SOD分子量为35,000;等电点为6.55,7.04和7.52。对热和pH相对稳定,二价金属离子Fe~(2 )、Mg~(2 )及L-组氨酸、L-半胱氨酸对其活性有不同程度的影响。 相似文献
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沉水植物苦草粗蛋白的提取工艺研究 总被引:2,自引:0,他引:2
苦草是减少水体污染,缓解水体富营养化的一种重要沉水植物,含有丰富的蛋白质。试验研究目的是优选沉水植物苦草粗蛋白提取的最佳工艺。采用碱提酸沉法从苦草中提取粗蛋白,通过单因子试验(单因素:NaOH溶液浓度、固液比、提取温度、提取时间)和L(934)正交试验,对影响粗蛋白的提取工艺进行了研究;同时比较了不同pH值对粗蛋白沉淀的影响。结果显示:苦草粗蛋白的最佳提取工艺条件为NaOH溶液浓度0.12mol/l、固液比1:60、提取温度70℃、提取时间80min,此条件下粗蛋白的提取率为67.62%;调节不同pH值沉淀苦草中粗蛋白时,pH值控制在1.05 ̄1.51之间可以获得最大的沉淀量;优选的苦草粗蛋白提取工艺效果较好,且稳定可行。 相似文献
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利用基因重组技术合成了具有良好细胞粘附活性的重组家蚕丝素-RGD融合蛋白质(Silk-RGD),探讨了其盐析的工艺条件。研究发现,在融合蛋白等电点pH8附近,当硫酸铵在溶液中的饱和度较低(10%)时,其蛋白质沉淀量随着温度的升高而增加;当硫酸铵的饱和度升至20%时,蛋白质沉淀量不再随着温度的变化而变化,但与低饱和度硫酸铵时相比,沉淀量明显增加;当硫酸铵的饱和度升至30%或以上时,沉淀中杂蛋白含量明显增多,不利于目的蛋白的纯化。Silk-RGD融合蛋白相对合理而且易操作的盐析纯化条件为:pH8,硫酸铵在溶液中的饱和度为20%,室温(约20℃)。利用该工艺条件,可以低成本、高效率地生产Silk-RGD融合蛋白,从而满足新型材料规模化开发的需要。 相似文献
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以牛奶为载体,以巴氏杀菌乳工艺为基础,开发营养素强化奶,解决了产品容易产生沉淀、分层、上浮等问题,并改善了产品的适口性。 相似文献
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研究了丹参脂溶性有效部位的纯化工艺,以总丹参酮含量和提取率为考察指标,比较了醇提水沉、大孔树脂纯化、CO2超临界萃取、氯仿萃取4种纯化方法,并对醇提水沉工艺参数进行了考察。结果表明,丹参脂溶性成分的最佳纯化工艺为醇提后20倍生药材量的水冷藏沉淀24 h为最佳。 相似文献