绿汁发酵液及青贮苜蓿中乳酸菌的分离筛选及鉴定

苜蓿较难青贮,用青贮接种剂可提高苜蓿青贮的质量。本研究以pH的降低程度及稳定性,乳酸积累量多,产生香甜气味为指标,通过连续限制性培养,从绿汁发酵液、青贮苜蓿中共筛选出3株乳酸球菌和3株乳酸杆菌;该6株菌在72 h内均能使MRS液体培养基pH下降至3.2左右并维持稳定,在MRS固体培养基中培养散发出香甜气味,此6株菌可供开发苜蓿青贮接种剂作进一步研究。     

苜蓿青贮乳酸菌的筛选及应用研究进展

苜蓿青贮是草食动物重要的粗饲料,调制并生产优质的苜蓿青贮对畜牧业尤其是奶牛行业的发展具有重要作用。青贮添加剂种类多样,乳酸菌是苜蓿青贮中的一种核心菌种,也是一种常见的青贮添加剂,它可以改善苜蓿青贮的发酵环境和有氧稳定性,从而提升其发酵质量和营养品质。本文对苜蓿青贮乳酸菌的筛选及其应用进行了归纳和阐述,以期为发掘适合苜蓿青贮的乳酸菌提供科学依据。     

苜蓿青贮乳酸菌的筛选及其对苜蓿青贮发酵的影响

为获得苜蓿青贮用乳酸菌,本研究从苜蓿附生乳酸菌中通过抑菌活性、酸化苜蓿粉及结构性糖代谢中间产物的性能指标筛选优良菌株,并研究其对苜蓿(Medicago sativa)青贮发酵的影响。结果表明,1)筛选到抑菌活性较高、酸化苜蓿粉及结构性糖代谢中间产物综合性能较好的菌株ZZU A341,被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);2)青贮90 d,添加该菌株的处理组pH、氨态氮含量低于添加商业菌株(YX)的处理组,显著低于自然青贮(P <0.05)。综上所述,使用该筛选方法获得的优良乳酸菌可有效改善苜蓿发酵品质。     

苜蓿青贮中乳酸菌特性研究

从青贮饲料中分离鉴定了39株乳酸菌,并研究了这些乳酸菌的特性。结果表明：分离菌株都是革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性、兼性厌氧菌,根据其形态学和生理生化特性,可分为7组（A-G）,A组、B组为片球菌属（Pediococcus）,C组、D组和E组为肠球菌属（Enterococcus）,F组和G组属于乳杆菌属（Lactobacillus）。     

具广谱抑菌活性乳酸菌的筛选

从传统发酵食品、市售酸奶中分离出78株乳酸杆菌,其中对B.subtilis和E.coli明显有抑菌活性的有58株。挑取抑菌效果较好的9株进一步研究。结果发现,菌株Lac8和Lac9产生的抑菌素pH作用范围比较广,在pH5～6的范围内仍有较强的活性;热稳定性也很好,加热不仅没有减弱其抑菌活性反而可促进其抑菌活性的发挥。虽然抑菌谱实验中两者对真菌都没有抑菌活性,但其对革兰氏阳性和阴性细菌都有强而稳定的抑菌活性,有进一步研究和工业应用的优良潜质。     

弯曲杆菌中具有高抑菌活性乳酸菌的筛选

使用微生态制剂来替代抗生素用于动物疫病防制是未来的发展趋势,而乳酸菌是目前微生态制剂最主要的成分。试验旨在筛选弯曲杆菌中具有高抑菌活性并耐受动物胃肠道环境的乳酸菌。从广东不同地区采集家禽粪便样品,对分离的乳酸菌进行生化鉴定、PCR鉴定及16S rDNA测序。同时,对分离菌株进行鸡源空肠弯曲杆菌、鸭源空肠弯曲杆菌和鹅源结肠弯曲杆菌的抑菌试验,以及模拟胃肠道环境的耐酸、耐胆盐和耐胰蛋白酶试验。结果表明,唾液乳杆菌R3对不同禽源的弯曲杆菌都具有高抑菌活性和耐受能力。因此,唾液乳杆菌R3为开发防控家禽弯曲杆菌疾病的微生态制剂提供了候选株。     

牧草青贮型乳酸菌的分离、筛选及鉴定

为了筛选性状优良的益生性乳酸菌,并为制备优良的牧草青贮型发酵菌剂奠定基础,试验采用MRS-Ca CO3平板从青海高海拔地区牧草或青贮牧草中筛选乳酸菌,同时对其进行形态学鉴定和生理生化特性、产酸能力、生物学特性及16S rRNA序列分析。结果表明:从燕麦草中共筛选获得水解圈直径比值较大的菌株12株,其中植物乳杆菌4株,发酵乳杆菌3株,干酪乳酸杆菌2株,屎肠球菌1株,嗜酸乳酸杆菌2株;植物乳杆菌YZ05和屎肠球菌YZ06是同型发酵乳酸菌,与其他菌株相比,具有很强的产酸能力和良好的益生特性。说明植物乳杆菌YZ05和屎肠球菌YZ06是制备青贮饲料的优良菌剂。     

高产乳酸菌的筛选、鉴定及抑菌性研究

试验旨在从动物肠道中筛选产酸能力较好的乳酸菌,采用MRS培养基对菌株进行分离、纯化,运用16S rDNA序列分析及生理生化特征进行鉴定,通过溶钙圈法和高效液相色谱法筛选得到一株产酸能力稳定较优的菌株,并探究其抑菌性能。结果显示：本试验筛选得到产酸能力较强的L-2菌株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,其对大肠杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌三种食源性病原菌均有显著抑制效果,抑菌圈直径分别为19.5、18.3、17.8 mm;对尖孢镰孢菌、禾谷镰孢菌、拟轮枝镰孢菌等真菌也具有明显抑制,抑菌圈直径分别为15.6、15.2、14.3 mm。     

上海地区苜蓿附生乳酸菌中优良菌株的筛选和鉴定

研究旨在筛选和鉴定适用于低可溶性糖含量的牧草青贮中的优良乳酸菌。将上海地区35个苜蓿样品中分离得到的67株乳酸菌进行抑菌活性检测和产酸性能的测定,分离菌株在葡萄糖浓度为0.5%的MRS液体培养基中进行发酵试验,并对发酵苜蓿粉的性能进行检测,从中筛选出优良乳酸菌。通过生理生化试验和16S r RNA序列分析对筛选优良乳酸菌进行鉴定。发现其中ZZU A95、ZZU A101、ZZU A104和ZZU A105菌株的抑菌活性较强、产酸速率较快,能于24 h内将培养基p H值降至4.0以下。筛选出的优良乳酸菌ZZU A95在低可溶性糖条件下发酵产酸性能较好,被鉴定为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。研究表明,菌株ZZU A95在低可溶性糖含量的牧草青贮中具有潜在的应用价值。     

高抗菌活性乳酸菌的筛选及菌种鉴定

研究旨在筛选适用于饲料青贮的高抗菌活性乳酸菌，并进行菌种鉴定。以藤黄微球菌、沙门氏菌、大肠杆菌为指示菌，通过牛津杯双层平板法对从玉米、水稻、蔬菜残渣、猪粪、鸡粪等样品中分离出的121株乳酸菌进行抑菌试验。通过生理生化，碳源发酵试验和16S rRNA分子鉴定及recA基因扩增对所选菌株进行鉴定。菌株ZZU 575具有较强抗菌活性，排除酸、过氧化氢干扰后，其发酵上清液对大肠杆菌抑制作用消失，但对藤黄微球菌及沙门氏菌仍有很强的抑制活性；其抑菌活性在酸性条件下较强，在加入蛋白酶K和胰蛋白酶以及100℃以上热处理时明显下降甚至消失；ZZU 575被鉴定为植物乳杆菌。菌株ZZU 575在饲料青贮中具有潜在应用价值。     

N+注入诱导突变乳酸菌筛选及对苜蓿青贮品质的影响

可溶性糖含量低影响乳酸菌添加剂产酸是影响苜蓿(Medicago sativa)青贮品质的重要因素之一。本研究采用N~+注入诱变的方法提高乳酸菌分解纤维素性能,以增强其在苜蓿青贮中的产酸能力。对具有良好抑菌活性及产酸能力的出发菌株植物乳杆菌ZZU A345进行N~+注入诱变,筛选出对羧甲基纤维素钠具有较好分解作用的突变菌株zw2-21和zw3-57,两株突变菌株酸化苜蓿粉的能力相较ZZU A345有显著(P0.05)提高,纤维素内切酶的活性亦高于ZZU A345,但没有显著差异(P0.05);苜蓿青贮试验结果显示,青贮65 d,添加zw2-21的处理组p H降至4.83,显著低于未添加乳酸菌的对照组(p H 5.5),也低于添加ZZU A345的处理组(p H 5.08),但没有显著差异;添加zw2-21的处理组乳酸含量达到1.22%,比添加ZZU A345的处理组提高了一倍。结果表明,N~+注入诱变技术在提高乳酸菌分解纤维素性能及苜蓿青贮高效产酸乳酸菌菌种选育方面具有潜在应用价值。     

苜蓿青贮饲料中优良乳酸菌菌株的筛选

本研究从苜蓿（Medicago sativa L.）青贮饲料中分离得到若干株乳酸菌,对所有菌株进行生长曲线和产酸速率测定,发现其中8个菌株产酸速率较快,能于24h内将培养基pH值降至4.0以下。根据形态、生化鉴定及16S rDNA同源性序列分析,鉴定4株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,2株为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）,1株为类植物乳杆菌（Lactobacillus paraplantarum）,1株为副干酪乳杆菌（Lactobacillusparacasei）。通过适当的工艺处理其有望作为乳酸菌添加剂单独或混合添加入青贮中以提高青贮饲料品质。     

蔬菜废弃物中高抗菌活性乳酸菌的筛选及鉴定

试验应用传统纯培养技术从蔬菜废弃物中分离出62株乳酸菌,并通过牛津杯双层平板法筛选得到4株,对革兰阳性指示菌和阴性指示菌,均具有高效抑菌活性的乳酸菌;应用高效液相色谱法分析发酵上清液中的有机酸成分。经过生理生化试验及16S rDNA序列同源性分析,这4株高抗菌活性的乳酸菌菌株其中2株被鉴定为Lactobacillus plantarum,另外2株为Leuconostoc lactis。试验结果表明,这4株乳酸菌在青贮添加剂,生物防腐剂方面具有良好的应用潜力。     

绵羊消化道中乳酸菌的筛选及鉴定

试验采集了4只瘘管蒙古羯羊的瘤胃液和食糜,分离和筛选乳酸菌,利用传统分类法和16S rRNA部分序列分析法鉴定绵羊消化道中的乳酸菌.结果表明,分离到的绵羊瘤胃液和食糜中乳酸菌属于植物乳杆菌.     

自然发酵酸菜汁中乳酸菌的分离鉴定及抑菌活性的分析

为了检测乳酸菌的抑菌活性,试验从自然发酵酸菜汁中分离、纯化出10株乳酸菌,通过体外试验筛选出4株产酸力较强的乳酸菌,经生理和生化鉴定分别为植物乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和短乳杆菌。牛津杯抑菌试验结果表明:4株乳酸菌对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑菌作用,而对肺炎克雷伯菌和白色念珠菌无效;产酸量大的菌株抑菌作用也强,推测其抑菌作用与低酸环境有关。说明研究和开发乳酸菌抑菌产品具有广阔前景。     

耐低温乳酸菌的筛选鉴定及其对黑麦草青贮的影响

本研究通过限制性培养方法,以温度和pH值为限制因素筛选耐低温菌株;并利用生理生化及16S rDNA同源序列分析方法综合鉴定筛选菌;将筛选菌分别添加于多花黑麦草(Lolium multiflorum)新鲜和晾晒青贮原料中,观察其在低温条件下的青贮发酵效果。结果表明:LT1,LT2及LT3均为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),可在10℃,pH4.0下生长。单纯晾晒可提高黑麦草的青贮品质。15℃条件下,无论是否晾晒,添加3株耐低温乳酸菌均可促进乳酸发酵,降低pH值,减少蛋白质或氨基酸的分解,显著提高青贮饲料的发酵品质,效果优于对照菌,而2个对照菌对晾晒的黑麦草无效果。     

高寒地区菊芋青贮物料耐低温乳酸菌的筛选与鉴定

为筛选可提升高寒地区菊芋(Helianthus tuberosus)青贮发酵品质的耐低温乳酸菌,本研究以‘青芋2号’菊芋青贮物料为材料,利用平板培养法分离乳酸菌株,分析菌株生理生化特性,并通过16S rRNA测序进行菌株种属鉴定。结果表明,菊芋青贮物料中共分离得到34株乳酸菌株,经低温及生理生化筛选获得13株耐低温乳酸菌株,包括11株同型发酵乳酸菌和2株异型发酵乳酸菌,其耐酸性和耐盐性均较强;经产酸和生长能力对比,GN02菌株生长最快(OD=2.63),GN10菌株具有更强的产酸能力(pH=3.59),XN25菌株兼具较强的生长和产酸能力;16S rRNA测序鉴定出9株植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)、1株戊糖乳杆菌(Lactiplantibacillus pentosus)、1株棒状乳杆菌(Lactiplantibacillus coryniformis)、1株短乳杆菌(Lactiplantibacillus brevis)及1株无法鉴定。本研究筛选出适合高寒地区菊芋青贮发酵的耐低温植物乳杆菌、戊糖乳杆菌、短乳杆菌各1株。     

地源性优势青贮发酵乳酸菌的筛选与鉴定

为了获得饲料青贮发酵优势乳酸菌株,用其研制高效青贮微生物添加剂.通过产酸和抑菌效果试验,对前期分离得到的6株地源性乳酸菌进行检测,然后采用PCR技术和最适生长条件试验,将产酸和抑菌效果均优良的乳酸菌株作进一步鉴定筛选.结果表明,6株地源性乳酸菌菌(编号为F1、F2、F3、T1、T2、T3)中的F1和T2株产酸效果最好(...