利用葡聚糖或木聚糖乳酸菌的筛选及特性研究

筛选分解利用葡聚糖或木聚糖的乳酸菌作为饲料作物青贮添加剂。从30株供试乳酸菌中筛选能够利用葡聚糖或木聚糖产酸的菌株。通过抑菌活性、生长情况、碳源发酵及利用饲料作物粉产酸试验研究菌株的特性,结合形态学特征和16S rRNA序列分析鉴定菌种。筛选得到1株利用葡聚糖及木聚糖产酸效果较好的乳酸菌ZZU 360;该菌株对G+及G-细菌均具有较好的抑菌活性,在45和50℃及pH 3.5、4.0和4.5环境条件下生长较好,能够耐受6.5%盐溶液,利用碳源种类比较广泛,对40%干物质的苜蓿粉、饲料桑粉及饲料槐粉均具有较好的酸化作用,菌株ZZU 360被鉴定为戊糖片球菌。该菌株在可溶性糖短缺的饲料作物青贮中具有潜在的应用价值。     

一株高产酸乳酸菌的分离、鉴定及高密度发酵研究

为获取产酸能力强、发酵性能好、具有强抑菌能力的乳酸菌,本试验以35日龄断奶健康仔猪粪便为菌源,对其乳酸菌进行筛选、分离、鉴定,并对分离菌株进行发酵性能研究。从35日龄断奶健康仔猪粪便中分离得到6株目标菌株,经产酸测试及抑菌试验后,得到一株产酸能力强、抑菌效果良好的筛选菌株,命名为RSJ-5。通过对RSJ-5菌株的菌落与菌体形态观察、生理生化鉴定试验、糖醇发酵试验,确定其为嗜酸乳杆菌。利用50 L发酵罐接种RSJ-5菌株厌氧发酵36 h,发酵液活菌数达158 CFU/mL,乳酸钙含量为85 mg/mL,pH4.2,发酵液对大肠杆菌、沙门氏菌有较强抑菌作用。结果表明RSJ-5嗜酸乳杆菌具备优良乳酸菌发酵剂的性能,探索了发酵工艺的可行性,为液体饲料(乳酸菌发酵液)大规模发酵生产提供参考。     

一株优良乳酸菌的分离鉴定与特性研究

利用乳酸菌分离专用培养基-MRS培养基从发酵40 d的酸菜汁中分离得到一株乳酸菌,利用经典分类法对所分离的乳酸菌菌株进行了系统的细菌学鉴定和生物学特性研究。结果该菌株被鉴定为乳杆菌属、植物乳杆菌。对其进行生长曲线、pH及酸度的测定,结果显示分离乳酸菌的对数生长期较长;培养以后pH下降达到稳定;酸度较高的产酸时间为前20 h。抑菌试验表明：该菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用。由于该菌具有生长快、产酸量高并具有抑菌活性等特点,因而适合作为微生态制剂的优良菌种开发利用。     

地源性优势青贮发酵乳酸菌的筛选与鉴定

为了获得饲料青贮发酵优势乳酸菌株,用其研制高效青贮微生物添加剂.通过产酸和抑菌效果试验,对前期分离得到的6株地源性乳酸菌进行检测,然后采用PCR技术和最适生长条件试验,将产酸和抑菌效果均优良的乳酸菌株作进一步鉴定筛选.结果表明,6株地源性乳酸菌菌(编号为F1、F2、F3、T1、T2、T3)中的F1和T2株产酸效果最好(...     

长白山原始森林土壤源耐低温乳酸菌的筛选

试验旨在筛选长白山原始森林土壤中耐胁迫生长能力强、产酸能力强、体外抑菌特性好的耐低温乳酸菌,并对其相关生物学特性进行分析,为东北地区寒冬季节低温青贮提供优良乳酸菌菌种资源。采用低温（10℃）进行耐低温乳酸菌初筛,经不同pH、温度及盐度等条件下进行乳酸菌生长特性测定后,进行候选菌株的种属鉴定,并对候选菌株进行生长曲线、产酸曲线、耐酸和耐胆盐性能、抑菌性能测定及小鼠饲喂试验。结果显示,通过10℃低温条件培养,初筛获得11株能够良好生长的耐低温乳酸菌,其中C37、C34和C4212经16S rRNA测序分析后鉴定为植物乳杆菌,在培养7 d时,pH均可下降至4.25以下,均能够在4℃、45℃、pH 3.0、6.5% NaCl等条件下良好生长。生长曲线分析发现,3株乳酸菌均在4 h达到对数生长期,10~12 h后进入生长稳定期。在培养24 h时,C37、C34和C4212可将pH分别降至4.04以下,在pH 3.0条件下,C37和C4212具有较高的存活率,且对0.5%胆盐具有一定的耐受性,其存活率均在80%以上。对常见病原菌体外抑菌表明,3株乳酸菌对产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及肠炎沙门氏菌均有抑制作用,小鼠饲喂试验表明生物安全性好。本试验结果表明,从长白山原始森林土壤中筛选和鉴定出的乳杆菌C37、C34、C4212可作为东北地区寒冬季节低温青贮优良乳酸菌菌种资源。     

卤水中耐酸耐盐产细菌素乳酸菌的筛选

为筛选出适合作为微生物饲料添加剂且有抑菌活性的乳酸菌，以贵州省黔东南苗族侗族自治州农家生产卤水为试验对象，筛选耐酸、耐盐且有抑菌活性的乳酸菌。采用琼脂扩散法，对其生长曲线、产酸能力、耐酸能力和耐盐能力进行研究，经过观察其生长特性、生理生化鉴定、16S r DNA测序分析对菌种进行鉴定，并通过排酸试验、排过氧化氢试验和蛋白酶敏感试验对其抑菌物质种类进行初步分析。结果显示：从卤水中初步分离出的155株菌，筛选得到1株MMB-09，对金黄色葡萄球菌、腐败希瓦氏菌、大肠杆菌以及蜡样芽孢杆菌有良好的抑菌效果，其中对腐败希瓦氏菌的抑菌效果最显著，抑菌圈直径达（14.3±0.42）mm；该菌株在8 h时OD600达到2.0以上，在12 h进入生长稳定期；有较好的产酸能力，8 h时其pH就已经降至4.2；具有较好的耐酸性和耐盐性，在pH为3和盐含量80 g/L时仍生长良好。对菌株进行形态学特征、生理生化鉴定和16S r DNA测序分析鉴定其为植物乳杆菌。该菌株在pH为6时还保留50.15%的抑菌活性，对过氧化氢酶不敏感以及蛋白酶处理后抑菌效果下降明显（P <0.05），表明其抑菌成分中包含蛋白类...     

一株饲料乳酸菌的选育及特性研究

以饲料为材料筛选出一株产乳酸量高的乳酸菌,经过16S rDNA序列比对鉴定其为屎肠球菌。经过紫外诱变,选育出一株高产乳酸的菌株HQ10-5。通过研究培养条件各因素对乳酸菌生物量及乳酸产量的影响。结果显示,以MRS培养基为基础,提高葡萄糖含量至4%、酵母粉含量至5%,在37℃、210 rpm振荡培养48 h的条件下,菌株HQ10-5的生物量可高达3.42×10~9 CFU/mL;流加葡萄糖至终浓度为8.0%,37℃静置培养48 h时乳酸产量最高,达到39.8 g/L。菌株HQ10-5体外抑菌试验效果良好,对G~+、G~-细菌和产芽孢的细菌均有良好的抑制作用。菌株HQ10-5可作为微生态制剂应用于饲料中,为发酵饲料的开发提供种质资源参考。     

一株乳酸片球菌的分离鉴定

研究从青贮饲料中分离筛选获得3株乳酸菌,通过产酸试验、不同温度和pH培养试验及对糖类利用及抑菌试验,筛选出1株适合作为青贮接种剂的优良菌种,通过形态学、生理生化和分子鉴定相结合的方法对获得的菌株进行鉴定,最终确定菌株P1为乳酸片球菌,为青贮接种剂提供优良菌株。     

肉牛阴道益生乳酸菌功能性评价

本文旨在从肉牛阴道中分离筛选益生乳酸菌,并对其功能进行评价,为开发微生态制剂治疗生殖道感染疾病奠定基础。采用传统培养方法从肉牛阴道中分离乳酸菌,并对其抑菌能力、抑菌物质、产酸能力和抗生素敏感性进行检测,通过16S r DNA序列分析方法对乳酸菌分离株进行鉴定。结果表明,通过体外试验获得4株乳酸菌,坚强肠球菌Y1抑菌能力最强,乳酸杆菌Y5的产酸能力强于其他菌株,4株乳酸菌均对氨苄西林和万古霉素敏感。研究结果表明,4株乳酸菌可作为潜在的益生菌株治疗母牛生殖道感染疾病。     

甘蔗尾中乳酸菌的分离筛选和鉴定

该研究利用传统培养法从0–90 d打包青贮发酵的甘蔗(Saccharum sinense)尾中分离得到20株乳酸菌。通过形态学观察、API 50 CH生化试剂盒鉴定及16S rDNA基因序列分析法对分离纯化的菌株进行鉴定,并测定其产酸能力。结果显示,菌株Y42是干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),菌株Y32、Y59是副干酪乳杆菌(L. paracasei),其余的17株是植物乳酸杆菌(L. plantarum);分离的20株菌株在培养18 h后,菌株发酵液的pH可降低至3.70以下,Y67菌株的pH最低,为3.57。从甘蔗尾中分离的20株乳酸菌产酸能力均较强,具备良好的青贮潜力,可作为制备青贮饲料发酵剂的菌种。     

健康奶牛阴道乳酸菌分离鉴定及作为候选益生菌株的体外评价

为分离健康奶牛阴道乳酸菌并鉴定其益生特性,本研究采集健康奶牛阴道临床样品并分离筛选到4株乳酸菌,对其抑菌活性、产酸性能、产H_2O_2能力及对抗生素敏感性进行检测,通过16S rDNA序列分析鉴定乳酸菌分离株。结果显示,4株乳酸菌具有较好的抑菌活性和产酸性能,在体外均能够产生H_2O_2,并对万古霉素具有抗性;经鉴定4株乳酸菌分别为唾液乳杆菌1株、黏膜乳杆菌2株、坚强肠球菌1株。本研究分离鉴定的4株乳酸菌均可以作为候选益生菌株用于奶牛子宫内膜炎防治。     

高抗菌活性乳酸菌的筛选及菌种鉴定

研究旨在筛选适用于饲料青贮的高抗菌活性乳酸菌，并进行菌种鉴定。以藤黄微球菌、沙门氏菌、大肠杆菌为指示菌，通过牛津杯双层平板法对从玉米、水稻、蔬菜残渣、猪粪、鸡粪等样品中分离出的121株乳酸菌进行抑菌试验。通过生理生化，碳源发酵试验和16S rRNA分子鉴定及recA基因扩增对所选菌株进行鉴定。菌株ZZU 575具有较强抗菌活性，排除酸、过氧化氢干扰后，其发酵上清液对大肠杆菌抑制作用消失，但对藤黄微球菌及沙门氏菌仍有很强的抑制活性；其抑菌活性在酸性条件下较强，在加入蛋白酶K和胰蛋白酶以及100℃以上热处理时明显下降甚至消失；ZZU 575被鉴定为植物乳杆菌。菌株ZZU 575在饲料青贮中具有潜在应用价值。     

上海地区苜蓿附生乳酸菌中优良菌株的筛选和鉴定

研究旨在筛选和鉴定适用于低可溶性糖含量的牧草青贮中的优良乳酸菌。将上海地区35个苜蓿样品中分离得到的67株乳酸菌进行抑菌活性检测和产酸性能的测定,分离菌株在葡萄糖浓度为0.5%的MRS液体培养基中进行发酵试验,并对发酵苜蓿粉的性能进行检测,从中筛选出优良乳酸菌。通过生理生化试验和16S r RNA序列分析对筛选优良乳酸菌进行鉴定。发现其中ZZU A95、ZZU A101、ZZU A104和ZZU A105菌株的抑菌活性较强、产酸速率较快,能于24 h内将培养基p H值降至4.0以下。筛选出的优良乳酸菌ZZU A95在低可溶性糖条件下发酵产酸性能较好,被鉴定为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。研究表明,菌株ZZU A95在低可溶性糖含量的牧草青贮中具有潜在的应用价值。     

分泌抗金黄色葡萄球菌细菌素乳酸菌的分离鉴定

为分离和筛选产抗金黄色葡萄球菌乳酸菌素的优势乳酸菌,利用乳酸菌分离培养基MRS从收集的各种腌制菜汁中分离培养乳酸菌,通过细菌培养特性、革兰氏染色特点、生理生化特性初步鉴定,同时根据Genbank中乳酸菌的16SrDNA序列设计特异性引物,采用PCR方法进一步鉴定,并以金黄色葡萄球菌为指示菌对乳酸菌的发酵上清液进行抑菌特性研究。结果表明,从腌渍菜汁中分离获得90株产酸菌,通过形态学、生理生化特性和PCR鉴定,结果73株产酸菌为乳酸杆菌;分泌产物抑菌试验表明,有10株菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性,经酸排除和过氧化氢排除试验,仍然有5株乳酸菌的分泌产物具有抑制金黄色葡萄球菌活性。可见,从腌渍菜汁分离到的乳酸菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性的特性,主要是通过分泌乳酸菌素来发挥作用。     

饲料原料中两株优良乳酸菌的分离、筛选与鉴定

为获得性能优异的乳酸菌,对一些饲料原料中乳酸菌进行了筛选和鉴定,共获得了105株乳酸菌,通过形态学观察,16S rRNA基因序列分析以及生理生化试验等手段获取了有代表性的16株乳酸菌,通过产酸性能、酸耐受性、耐胆盐能力和抑菌效果等试验测定,共获得了2株性能优异的乳酸菌P16和C20。经鉴定,P16为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus),对大肠杆菌K88(Escherichia coli CVCC 225)的抑菌能力较强,12 h发酵液pH值为3.36, 0.3%胆盐处理2 h存活率为82.00%;C20为希氏肠球菌(Enterococcus hirae)对指示菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ATCC 25923)的抑菌效果较好,发酵液12 h pH值为3.88,0.3%胆盐处理2 h存活率为97.67%;此外,P16和C20酸耐受性也相对较强,具备一定应用潜力。     

乌鸡肠道中一株乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

本试验采用添加碳酸钙的MRS培养基作为筛选培养基，从乌鸡肠道中筛选乳酸菌，并对分离到的菌种进行16S rDNA基因序列鉴定以及益生性能研究，测定其生长速率、产酸能力、耐酸和耐胆盐性能、抑菌能力及抗生素敏感性。试验结果表明：分离到的溶钙圈较好的菌株N为乳酸菌，分离菌株N产酸能力强，达到对数期的时间短，在低pH、高胆盐浓度时，仍具有较好生长活性。 [关键词] 乳酸菌|乌鸡|益生性能     

鸡源产蛋白酶乳酸菌的筛选与鉴定

为了筛选获得动物源产蛋白酶乳酸菌,开发新型微生态制剂以提高饲料利用率,试验选取新鲜健康鸡粪为样品,利用溴甲酚紫平板法筛选产酸菌,再通过酪蛋白平板法筛选产蛋白酶乳酸菌,对该菌进行形态学和16S rDNA分子生物学鉴定并分析其生长产酶规律和所产蛋白酶的酶学特性。结果表明,成功筛选到11株产蛋白酶乳酸菌,其中JF3-11所产蛋白酶活力最高,经形态学和分子生物学鉴定该菌为唾液乳杆菌,其所产蛋白酶的最适反应条件为60℃,pH值7.0,在中性条件下稳定性较好且具有一定热稳定性,Mg~(2+)、Mn~(2+)能够促进酶活,Zn~(2+)、Cu~(2+)对酶活具有抑制作用;在30℃、200 r/min条件下,培养至30 h其上清液中所产蛋白酶相对酶活可达到最高值100%(82 U/mL)。本试验成功从健康鸡粪中筛选获得一株产蛋白酶乳酸菌,对其所产蛋白酶特性的分析为其在饲料工业中的应用提供了理论基础。     

云南迪庆传统发酵乳制品中乳酸菌多样性分析及具有发酵性能菌株的筛选

为了寻找优质的发酵乳制品生产菌种,同时分析云南省迪庆藏族自治州传统发酵乳制品中乳酸菌的多样性分布状况,从云南迪庆藏族自治州传统乳制品制作和食用较多的牧区采集传统发酵乳制品29份,通过选择性分离,采用16S rRNA基因序列测定的方法对分离到的乳酸菌种进行鉴定及同源分析。对分离到的乳酸菌进行产酸性能测定、传代稳定性检测、菌株生长活力检测。结果共得到148株乳酸菌,其中各属型的数量为乳杆菌属53株、肠球菌属48株、明串球菌属37株、乳酸乳球菌属8株、片球菌属2株。这些乳酸菌属型中,乳杆菌是优势菌群(35.8%),其次依次是明串球菌(35%),肠球菌(32.4%),乳酸乳球菌(5.4%),片球菌属(1.4%)。在所有的菌种中,植物乳杆菌是优势菌,占全菌的26.4%。以产酸能力、传代稳定性、生长活力为指标,从分离到的菌株中获得发酵性能较好的乳酸菌9株。本研究初步阐明了云南迪庆藏族自治州地区传统乳制品中的乳酸菌群落的多样性分布,获得9株发酵性能较好的乳酸菌,为发酵剂的生产应用奠定了基础。     

酸驼乳中益生乳酸菌的分离筛选

旨在评价酸驼乳中乳酸菌的益生特性。采用常规方法从内蒙古阿拉善牧区采集的酸驼乳中分离乳酸菌;利用16S r DNA PCR及序列分析法对分离到的乳酸菌进行种水平鉴定;通过体外抑菌试验和耐酸、耐胆盐试验评价乳酸菌的益生特性。结果表明,从酸驼乳中分离到的1株疑似乳酸菌被鉴定为短乳杆菌,将其命名为Lactobacillus breris LT;该菌株的代谢产物对4种常见肠道性致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌、单增李斯特菌)均表现出良好的抑菌特性,且抑菌特性不受胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响;该菌株能够在低p H值(2.0、3.0)和高胆盐含量(0.1%~0.3%)的MRS培养基上生长。该研究结果为酸驼乳中优质乳酸菌资源的开发利用提供了科学依据。     

一株布氏乳杆菌的分离鉴定

研究从发酵秸秆中分离获得1株抑菌性能较强的乳酸菌(BS6),并通过形态学、生理生化和分子鉴定对该菌株进行鉴定,最终确定菌株BS6为布氏乳杆菌,并对布氏乳杆菌BS6的生长曲线、产酸曲线及耐酸性能进行研究,结果表明,菌株BS6生长速率快、产酸性能强且能够耐受pH环境,为青贮饲料接种剂提供有力的理论依据。