兔瘟蜂胶组织灭活苗的研制及免疫效果观察

采用人工感染兔瘟(兔病毒性出血症)病毒致死的兔的脏器(主要是肝)，制成10％的兔瘟组织灭活苗和10％的兔瘟蜂胶组织灭活苗。采用常规血凝抑制实验，初步分析比较了注射兔瘟组织灭活苗和兔瘟蜂胶组织灭活苗后兔体内抗体水平的消长情况。结果表明：兔瘟蜂胶组织灭活苗能明显提高抗体效价，增强免疫效果。     

间接ELISA检测试剂盒在兔瘟抗体监测中的效果评价

兔瘟是一种急性、热性、败血性和毁灭性的传染病,发病率和死亡率极高,是目前危害我国养兔业最重要的疫病之一。间接ELISA抗体检测方法是兔瘟血清学抗体水平检测的主要方法,在兔瘟的诊断、流行状态的监测和流行病学调查等方面得到了广泛应用。为了评价兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒在兔瘟抗体检测中的应用效果,利用兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒对2012年采集于河南、河北、山东等地的818份免疫兔血清进行了检测,并进行了间接ELISA抗体检测试剂盒与间接血凝抑制试验(HI)的符合率研究。结果显示两者的符合率达94.0%,说明ELISA试剂盒具有良好的临床适用性和准确性,非常适用于兔场免疫后兔群的抗体水平监测。     

中国白兔IL-6基因真核表达质粒的构建及其对兔瘟组织灭活苗免疫效果的影响

研究兔白介素-6基因真核重组质粒(pcDNA-IL-6)对兔瘟组织灭活苗免疫效果的影响。本文构建了真核重组质粒pcDNA-IL-6,并将其与兔瘟组织苗共同免疫家兔,以兔瘟组织灭活苗和质粒pcDNA3.1(+)作对照,用血凝抑制试验检测家兔抗RHDV特异性抗体水平。结果:在免疫后的7～70d,兔瘟组织灭活苗与真核重组质粒pcDNA-IL6注射免疫组抗体水平高于只免疫兔瘟组织灭活苗组,差异均显著p0.05或极显著p0.01。真核重组质粒pcDNA-IL-6对兔瘟组织灭活苗表现出来明显的免疫佐剂效应。     

抗兔瘟精制卵黄抗体的研制

选用免疫原性好的兔瘟抗原加工成浓缩兔瘟灭活组织疫苗,按特定的免疫程序接种健康商品鸡群,通过血凝抑制试验检测免疫鸡群血清和卵黄的兔瘟抗体效价,适时收集高免卵黄,选用特定的抗体分离提纯工艺,研制对兔瘟有预防和治疗双重作用的精制卵黄抗体。经实验室生物学检验,本品使用无刺激,作用迅速,对兔瘟早期治愈率为80%,对兔瘟紧急预防有效率为100%。     

“兔瘟”组织灭活疫苗免疫兔的抗体消长规律

我们于1985年研制成功了“兔瘟”组织灭活疫苗,经在疫区小区域应用效果很好。为搞清注苗后兔体内的抗体消长规律,给制订合理的兔瘟免疫程序提供可靠的依据,我们先后进行了两次抗体消长规律监测,现将结果报告如下。     

以免疫纳米微球为凝集原的犬细小病毒2型抗体凝集检测方法的建立

为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体的犬细小病毒(CPV)抗体检测的间接凝集方法,本研究表达纯化了CPV-2VP2截短的重组蛋白rsVP2,并以rsVP2为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过对反应条件的优化,建立了一种快速检测CPV-2抗体的间接凝集方法。特异性试验结果显示,致敏微球仅与CPV-2阳性血清发生凝集反应,不与犬瘟热病毒、狂犬病病毒和犬腺病毒的阳性血清发生凝聚反应,特异性强;该凝集方法检测血清中和抗体的最低效价为1∶256;同一批次制备的3份致敏微球、3个不同批次制备的致敏微球以及4℃保存90d的致敏微球与CPV-2阳性血清的凝集反应特异性一致,凝集程度无明显差异,重复性稳定性均较好。该间接凝集检测方法对40份血清样品的检测结果与ImmunoComb■ Canine VacciCheck试剂盒(Dot-ELISA)检测结果的阳性符合率为97%。本研究建立的间接凝集方法为幼犬CPV-2母源抗体或免疫犬CPV-2抗体检测提供了一种快速、简便、准确、经济的方法。     

红细胞吸附病毒-荧光抗体染色法快速诊断“兔瘟”

“兔瘟”是由病毒所引起,其病原可凝集人的“O”型红细胞,而且此种凝集现象可被相应的抗病毒抗体所抑制。为寻求更为简便、快速的诊断方法,特进行本试验。材料及方法一、免瘟种毒:由自然病兔中分离,并经用江苏农学院制备的“兔瘟”组织灭活疫苗做免疫保护试验证实为“兔瘟”病毒。取人工接种第5代病死兔的肝、牌,-30℃保存作为种毒,代号RZ-5。     

免疫扩散法诊断“兔瘟”的研究

用“兔瘟”病兔肝脏乳剂制备的冻融抗原对感染“兔瘟”毒的兔血清进行琼脂糖免疫扩散检查,检出特异性抗体。各批抗原对阴、阳性血清检验结果一致.对人工感染耐过兔血清,在接毒后第7～9天可检出沉淀抗体,抗体持续期最少可达80天。     

兔瘟精制卵黄抗体的实验室制备及检验

选用免疫原性良好的兔瘟抗原制备成兔瘟灭活疫苗,按特定的免疫程序接种健康商品蛋鸡群,通过HI检测免疫鸡群血清和卵黄的兔瘟抗体效价,收集合格的高免蛋,制备兔瘟精制卵黄抗体。经实验室检验,本品安全性良好,     

怎样使用兔瘟疫苗

近年来我县养兔业发展很快,一些养兔户由于使用兔瘟疫苗不当,引起兔瘟发生,造成了一定的经济损失。1995年以来,我们对不同情况的兔,采用不同的免疫时间及不同的免疫剂量,有效地控制了兔瘟的发生,现介绍如下。1)仔兔的免疫是指母兔免疫后4个月内生的仔兔,因这时母兔体内的抗体较高,每只仔兔可在分窝后5～7天皮下注射兔瘟疫苗1mL;母兔免疫已5～6个月,这时母兔体内的抗体较低,每只仔兔分窝后需马上皮下注射兔瘟疫苗1mL;如果仔兔分窝较晚,仔兔哺乳时注苗1次,每只每次1mL;对于兔瘟流行严重的地区,仔兔第1次注射兔瘟疫苗后,7天以后再注射1次,每…     

兔瘟免疫失败的原因分析及预防措施

近年来，在养兔生产中，虽已接种了兔瘟疫苗，但在规定免疫期内仍可能发生兔瘟或抗体检测不达标，甚至整个兔群仍可能暴发兔瘟等情况。笔者在生产实践中进行深入调查，对家兔免疫失败原因进行分析，现总结如下，供参考。     

新剂型兔瘟疫苗的研究

经血凝抑制和攻毒试验结果表明，在含有相同抗原量制备的疫苗，兔瘟油乳剂灭活疫苗比兔瘟组织灭活苗免疫后血清ＨＩ抗体效价高３．２５￣６．０ｌｏｇ２，即使油乳剂灭活疫苗仅为组织灭活苗四分之一的抗原量，免疫后血清ＨＩ抗体效价还高１ｌｏｇ２。油乳剂灭活苗免疫兔第５０天其血清ＨＩ抗体未见下降，而组织灭活苗免疫后第２６天已开始下降。虽然接种二种剂型的疫苗攻毒后均具有１００％的保护率，但血清ＨＩ抗体效价消长情况证明     

天水市兔瘟调查报告

“兔瘟”(暂定名)又名兔病毒性出血症或兔病毒性出血性肺炎,是兔的一种烈性传染病。本病来势凶猛、传播快、病程急、潜伏期短、发病率和死亡率高,对2—3月龄以上的青壮年兔可造成毁灭性灾害。1986年3—4月,天水市城郊13个兔场(群)发病660只,死亡659只,致死率99.9％。我们对其病原、流行病学、剖检变化及免疫与防制等进行了调查研究,报告如下。     

鸭瘟弱毒疫苗早期免疫的研究——Ⅰ.鸭瘟疫苗早期免疫途径和时间以及程序的研究

本试验对388只含有母源抗体雏麻鸭和118只无母源抗体雏北京鸭分别进行了早期免疫接种。前者进行了不同日龄(1、5、10、15)、不同免疫途径(肌肉,皮下、点滴、饮水)鸭瘟弱毒疫苗的一次性免疫,后者进行了1日龄、不同途径(肌肉、皮下、滴鼻、喷雾)鸭瘟弱毒疫苗的首免和二免。无母源抗体雏鸭可采用肌肉和皮下途径免疫,最佳时间从1日龄开始首次免疫,免疫30天后进行二次免疫。对含母源抗体雏鸭也可采用肌肉、皮下途径,最佳时间从10日龄开始免疫,经过对含母源抗体和无母源抗体免疫雏鸭2个月的观察,前者经得住鸭瘟强毒10~(-8)的攻击,后者经得住10~(-3)的攻击;免疫效果高,免疫期达2个月仍保持着令人满意的免疫力,保护率达100％。含有母源抗体雏鸭,采用饮水和点滴途径免疫,前者最佳时间从1日龄开始免疫,后者从10日龄开始免疫,其安全性好,免疫效力高,免疫期达2个月,保护率达100％。用肌肉和饮水途径接种鸭瘟弱毒苗的方法进行大规模的预防接种,更为简便易行。 在试验中,还对早期免疫程序进行了探讨。     

基因重组抗原酶联免疫法检测兔出血症病毒抗体及其标准化

以重组兔出血症病毒(RHDV)VP60蛋白为抗原，建立了RHDV抗体间接ELISA检测方法。优化的试验反应务件为：重组VP60的包被质量浓度为1．0mg／L，用10％牛血清封闭，以大肠杆菌提取物稀释被检血清以消除非特异性反应。将所建立的ELISA与现行血凝抑制(HI)试验比较发现，不同免疫状态的兔血清的RHDV ELISA抗体与HI抗体均呈正相关。对11个RHD免疫兔场1130份血清样品的抗体检测表明，各免疫兔群血清RHDV抗体水平不完全一致，D值在1．09～1．76之间，显著高于非免疫兔(0．05)及SPF兔(0．02)，低于高免兔(2．34)。在此基础上，研制了RHDV抗体酶联免疫检测试剂盒，测定了其主要指标，制定了各成分的质量控制标准，为兔群进行免疫学监测及评价疫苗的免疫效果提供了便利。     

“兔瘟”疫苗中不同佐剂对免疫效果的影响

利用“兔瘟”病毒枣(?)毒株(RVZ85)制备的不含佐剂疫苗,甘油佐剂疫苗、氢氧化铝佐剂疫苗和矿物油佐剂疫苗免疫接种易感家兔,定期测 HI 抗体效价并进行人工攻毒试验.结果证明,不含佐剂的疫苗产生的保护力最早,免疫后三天即4/4保护.用四种疫苗免疫接种后一年内,对攻毒的保护率均为100%.四种疫苗中,以矿物油佐剂疫苗免疫兔的HI抗体效价最高,氢氧化铝佐剂疫苗次之,甘油佐剂疫苗及不含佐剂疫苗的HI效价较低。氢氧化铝佐剂疫苗在室温保存8.5个月,免疫兔4/4保护;室温保存14个月.免疫兔2/3保护:4℃保存14个月,免疫兔4/4保护.     

正确应用兔瘟疫苗

随着养兔生产的发展,各种防疫体系相继建立且逐步完善,主要传染病如兔瘟、兔出败、兔魏氏梭菌等均已有了一定的预防措施。在疫苗制备上不断改进,从单苗到联苗,既减少劳动力,也简化了手续,大大方便了生产,深受广大兔场和养兔户的欢迎。但是,在疫苗的应用中也常出现一些问题,必须引起重视。如使用兔瘟与巴氏杆菌二联苗后,幼兔仍出现兔瘟病而死亡,不得不对发生兔瘟的病兔使用兔瘟血清及兔瘟疫苗进行紧急接种。发生上述情况的原因,主要是各地收购兔毛的商贩较多,造成兔瘟病毒传播,一旦强毒带进兔场,就会导致免疫失败和兔瘟病暴发。常用的兔瘟疫苗有兔瘟油乳化苗、兔瘟甲醛灭活苗。油乳化苗安全可靠,注射后局部无肿块和炎症,免疫期可维持4～6个月。从抗体消长动态看,油乳化亩优于甲醛苗。根据我们经验。正确应用兔瘟疫苗,主要应注意以下几点:(1)先对兔群进行兔瘟单苗预防注射,然后在可能的情况下再考虑是否使用其他联苗。应用兔瘟单苗一年应不少于2次。     

兔瘟免疫失败原因及防制措施

在家兔生产过程中,尽管家兔已接种了兔瘟疫苗,但在规定的免疫期内仍发生兔瘟或抗体监测时达不到应有的抗体水平,甚至有发生整个兔群暴发兔瘟的情况.那么为什么会发生免疫失败?笔者在多年的生产实践过程中进行了深入调查,对家兔免疫失败的原因进行了分析和总结,并提出了相应的对策.     

中药“兔稳康”对兔瘟免疫增强作用的试验观察

为观察中药"兔稳康"对兔瘟疫苗的免疫增强作用,本试验选择40日龄未免疫的长毛兔120只,随机分成4组,试验组在免疫前2天分别以1%、2%和4%的剂量添加中药免疫增强剂饲喂,连用7天。免疫后第20d各组采血测定血凝抗体水平和T淋巴细胞阳性率。结果:以2%剂量添加兔疫稳康可显著提高抗体效价和T淋巴细胞阳性率,与对照组比较差异显著(P0.05),可以显著提高兔瘟的免疫效果。     

从实验诊断看“兔瘟”的季节流行

自1985年11月至1987年1月,我们用快速玻板凝集试验对本站门诊病兔及肉联厂宰前死亡的901份家兔肝脏进行了实验室检验。结果,查出“兔瘟”阳性者390只,占被检死兔的43.29％。从不同月份的检出率来看,本病一年四季均可发生,但以每年11月份至次年4月份发病率较高(检出率为64.1～100％);而5至7月份发病率则较低(9.8～38.89％)。