发酵菌种对生物饲料及全混合日粮霉菌生长的影响

试验旨在研究发酵菌种对生物饲料及全混合日粮(TMR)霉菌生长的影响。试验1:0.1%的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌及植物乳杆菌混合添加至基础日粮中,按照比例分为7组,对照组不添加菌种,将各组置于孟加拉红平板培养基上,测定霉菌生长区域占平板面积的百分比。结果显示：饲料经过发酵可有效抑制霉菌生长;含有植物乳酸菌发酵的生物饲料对霉菌抑制效果均较好,枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌共同发酵的饲料对霉菌的抑制效果最差。试验2：在TMR日粮中添加100 g/kg试验1中的生物饲料,测定各组TMR在室温(13℃)和高温(26℃)条件下的温度变化和霉菌生长情况。结果显示：常温试验中,添加植物乳酸菌发酵的生物饲料的TMR温度和霉菌总数显著低于对照组(P<0.05),添加枯草芽孢杆菌和酿酒酵母共同发酵的生物饲料的TMR温度最高;高温试验中,除枯草芽孢杆菌与酿酒酵母混合菌种组,其余各生物饲料发酵菌种处理组TMR温度和霉菌总数显著低于对照组(P<0.05)。研究表明,植物乳酸菌是主要抑制霉菌生长的菌种,加入酿酒酵母菌或枯草芽孢杆菌,抑制霉菌生长效果更佳;两菌发酵和三菌发酵中,枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌间具有拮抗...     

一株固态发酵豆粕的枯草芽孢杆菌的分离与应用

本研究筛选获得一株产纤维素酶的耐高温枯草芽孢杆菌FJAT-5561,分析其产酶和抑菌特性,应用于豆粕固体发酵。枯草芽孢杆菌FJAT-5561在45℃、pH为8时的酶活性达0.90 U/mL。抑菌试验结果显示：该菌对青霉具有抑制效果,电镜观察显示FJAT-5561菌株的发酵上清液使青霉菌丝变形和萎缩,抑制菌丝生长。豆粕发酵试验结果表明,添加枯草芽孢杆菌FJAT-5561可降低豆粕中难降解的粗纤维含量,提升豆粕中的粗蛋白质含量。发酵后的豆粕中未检出黄曲霉素、赭曲霉毒、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镶刀菌烯醇等真菌毒素,也未检出黄曲霉。     

菠萝心腐病拮抗菌的分离、筛选及鉴定

菠萝心腐病是危害菠萝生产的重要病害之一,近年来发生较严重,严重影响菠萝的产量和品质。本研究从海南乐东菠萝园、香蕉园等地的土壤中分离出224株细菌,其中分别属于枯草芽孢杆菌和链霉菌的HL2和HL3菌株对菠萝心腐病菌烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)具有显著抑制效果。抑菌试验结果表明HL2和HL3对菠萝心腐病病菌菌丝生长的抑制率分别为71.6%、53.3%,对病菌产孢子囊的抑制率分别为83.3%、61.7%,拮抗菌培养过程中产生的挥发性抑菌物质能明显抑制病原菌菌丝的生长。     

一株颉颃黄曲霉菌枯草芽孢杆菌的生物学特性研究

对筛选出的一株枯草芽孢杆菌进行生物学特性研究。将枯草芽孢杆菌全菌液、上清液及超声波菌体分别进行抑制黄曲霉菌生长试验和降解黄曲霉毒素解毒效率,并进行抑制大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌抑菌试验,以及耐酸、耐胆盐、胃肠耐受能力和温度敏感试验。结果表明该株枯草芽孢杆菌超声波菌体对黄曲霉生长具有明显抑制作用,对黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素M1的降解活性分别为75%、70%和62%,而全菌液和上清液效果较差。对大肠杆菌和沙门菌抑菌效果较好,对金黄色葡萄球菌较差,能够耐酸、耐胆盐、胃肠耐受能力和耐高温。试验对该株枯草芽孢杆菌应用临床提供理论依据。     

抑菌肽在枯草芽孢杆菌中的构建表达、抑菌特性及发酵条件优化

本研究从蚯蚓中克隆得到抑菌肽基因ew T1,将其构建在枯草芽孢杆菌表达载体p HT43中得到重组质粒p HT43-ew T1,并转化至枯草芽孢杆菌蛋白酶缺陷型菌株WB800N中,得到重组菌,然后进行诱导表达以及发酵条件优化。优化后的重组菌发酵上清液对猪粪大肠杆菌的抑菌效价为47,362U/m L。蚯蚓抑菌肽基因ew T1可以在枯草芽孢杆菌中实现异源表达,为枯草芽孢杆菌抑菌肽分泌表达系统的进一步优化奠定了基础。     

降解黄曲霉毒素枯草芽孢杆菌的解毒性、抗菌性及抗逆性研究

试验对筛选得到的高效降解黄曲霉毒素B1、G1和M1的枯草芽孢杆菌(霉立解060菌)进行解毒活性、抗菌活性及抗逆性研究。将枯草芽孢杆菌发酵液分成上清液、菌悬液和胞内液组分,验证各组分对黄曲霉毒素的解毒效率。试验结果表明,枯草芽孢杆菌发酵后的上清液对AFB1、AFG1和AFM1的降解活性最高,确定发酵后的上清液中存在解毒活性组分;对解毒活性物质进行加热和蛋白酶K变性处理后,解毒活性显著降低,表明起解毒作用的活性物质是其分泌的一种胞外酶;试验进一步证明枯草芽孢杆菌具有显著抑制大肠杆菌、沙门氏菌以及金黄色葡萄球菌,抵抗胃酸、胆盐、高温等不利环境的特性,具有很强的抗菌性和抗逆性。     

饲用枯草芽孢杆菌抑菌性能的研究进展

文章综述枯草芽孢杆菌在体内、体外的抑菌性能，旨在保障枯草芽孢杆菌的饲用效果，重点总结3方面：其一，枯草芽孢杆菌抑菌性能评估方法；其二，枯草芽孢杆菌的体外抑菌作用（牛津杯法体外抑菌试验评估）；其三，饲用枯草芽孢杆菌对畜禽肠道菌群的调控效果（体内抑菌试验评估）。体外试验文献显示，枯草芽孢杆菌对肠道有害菌和饲料源有害菌的抑菌报道较多，对肠道有益菌和其他商业益生菌的抑制研究很少，且不同菌株的抑菌性能差异较大，这与饲用枯草芽孢杆菌对畜禽肠道有益菌及个别有害菌调控出现差异化结果相符。文章建议完善枯草芽孢杆菌体外抑菌评估的体系，这有助于筛选安全的菌株及高效地研制单一和复合饲用枯草芽孢杆菌制剂。     

一株香蕉枯萎病拮抗菌的鉴定及香蕉组培袋装苗防病试验

采用平板对峙法从海南省土壤中分离到5株对香蕉枯萎病有较强拮抗作用的芽孢杆菌,经形态特征及16S rDNA序列将菌株S40鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株S40的拮抗试验表明,不同浓度的发酵滤液均可抑制病原菌菌丝生长和孢子的萌发和生长。组培袋装苗实验表明拮抗菌可明显推迟其发病和死亡时间,三种不同处理的相对防治效果分别为71.2%、83.3%和92.4%。     

不同组合菌种固态发酵马铃薯渣对其营养价值影响研究

研究以马铃薯渣为原料,芽孢杆菌、酵母和霉菌为候选发酵菌种,固态发酵马铃薯渣,研究不同菌种组合固态发酵对其营养价值影响。结果表明:在温度为30℃及自然p H的条件下,发酵72 h,15个组合均能够提高马铃薯渣真蛋白和氨基酸含量、降低粗纤维含量和优化氨基酸组成。其中枯草芽孢杆菌+产朊假丝酵母+绿色木霉和枯草芽孢杆菌+扣囊腹膜酵母+黑曲霉组合改善马铃薯渣氨基酸组成效果较好,总氨基酸含量分别提高111.87%、106.34%和107.93%;枯草芽孢杆菌+酿酒酵母+绿色木霉、枯草芽孢杆菌+产朊假丝酵母+霉菌X3、枯草芽孢杆菌+酿酒酵母+霉菌X3及枯草芽孢杆菌+产朊假丝酵母+绿色木霉组合综合增值能力较强,枯草芽孢杆菌+酿酒酵母+绿色木霉增值加权值达到37.09%,明显或显著高于其他组合(P0.05)。     

生防芽孢杆菌对芒果镰刀菌的抑菌效果评价

为探索芒果镰刀菌病害生物防治的有效途径,开展了4株生防芽孢杆菌对芒果上镰刀菌的平板对峙和分生孢子萌发等室内生物测定实验。结果表明,供试生防菌发酵液对芒果镰刀菌菌丝生长及分生孢子萌发有明显的抑制作用,其中菌株FCK抑菌活性最强,最高达66.10%,抑菌带达0.85 cM,菌株5a-9、6c-5次之,菌株6a-3抑菌率最弱;菌株FCK对分生孢子萌发的最高抑菌率达56.80%,菌株6a-3次之,菌株6c-5最低;生防菌的发酵灭菌液热稳定性差,高温灭菌后抑菌活性显著下降,对部分镰刀菌分生孢子萌发起到一定的促生作用;发酵灭菌液对分生孢子萌发的促生作用强于发酵滤液。本研究表明,供试芽孢杆菌可以作为芒果镰刀菌病害的生防材料,具有良好的应用前景。     

不同益生菌中兽药黄荆子微生态制剂功效研究

实验旨在研究不同益生菌发酵中兽药黄荆子对黄荆子微生态制剂功效的影响。实验以不加益生菌为对照,选择枯草芽孢杆菌S21单菌发酵、枯草芽孢杆菌S21和产朊假单丝酵母M22双菌发酵、枯草芽孢杆菌S21、产朊假单丝酵母M22和植物乳杆菌T3三菌发酵,测试不同益生菌黄荆子微生态制剂的抑菌活性、活菌数、黄酮含量及消化酶等变化,结果表明,单独选择枯草芽孢杆菌S21发酵,其黄荆子微生态制剂的抑菌活性、活菌数、黄酮含量及消化酶活性等综合起来比复合发酵好,揭示复合发酵时不同的益生菌的颉颃作用,会对微生态制剂功效产生巨大影响,选择复合菌种发酵中兽药时,要注意不同菌种的相互作用。     

对产气荚膜梭菌具有抑菌作用的益生菌的筛选及其抑菌性能探究

研究旨在筛选对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)具有抑制作用的益生菌,探讨其抑制效果。采用抑菌圈法对益生菌菌株进行初筛,通过测定发酵液最低抑菌浓度(MIC)以及菌体共培养,探究所筛益生菌对产气荚膜梭菌的抑杀性能,测定乳酸对益生菌MIC的影响及益生菌菌数的动态变化,探究乳酸对益生菌抑菌作用和耐储性的影响。结果显示,筛选出3株对产气荚膜梭菌具有抑制作用的益生菌,分别为枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和丁酸梭菌,其发酵液抑菌圈直径分别为16.67、14.54、15.72 mm,MIC分别为250、250、125 mg/g。枯草芽孢杆菌和产气荚膜梭菌共培养12 h,产气荚膜梭菌的生长快速下降,共培养48 h后,无法检出产气荚膜梭菌活菌。凝结芽孢杆菌与产气荚膜梭菌共培养24 h,其生长快速下降,培养至72 h,未检测出产气荚膜梭菌活菌。乳酸的加入可以增强枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和丁酸梭菌发酵液的抑菌效果,其MIC分别为31.25、62.50、31.25 mg/g。酸化后的枯草芽孢杆菌发酵液、凝结芽孢杆菌发酵液和丁酸梭菌发酵液分别在31.25、62.50、31.25 mg/g浓度下能完全抑制产气荚膜梭菌的生长。该酸性制剂储存2个月后,枯草芽孢杆菌和丁酸梭菌芽孢存活率分别为33.22%和0.10%。研究表明,枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和丁酸梭菌对产气荚膜梭菌均具有一定的抑制作用,但酸化的发酵液(芽孢为主)的储存性均较差。     

地衣芽孢杆菌发酵条件优化和抑菌活性测定

【目的】探究不同培养及发酵条件对地衣芽孢杆菌19148抑菌作用的影响及地衣芽孢杆菌19148的耐药性。【方法】设计单因素试验,分别在不同温度、酸碱度、金属离子、摇床转速、发酵时间和接种量的条件下培养地衣芽孢杆菌19148菌液,将培养后的菌液离心、过滤制成无菌滤液,并通过牛津杯抑菌试验探究无菌滤液对大肠杆菌K88、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌1882的抑制能力。通过药敏纸片法探究地衣芽孢杆菌19148对27种抗菌药的耐药性。【结果】地衣芽孢杆菌19148在4和75 ℃下生长受到抑制,25、37和45 ℃能正常生长,其中在37 ℃抑菌活性最好。在pH 5.0~9.0的条件下能正常生长,在pH为6.0条件下抑菌活性最好,对铜离子不耐受,但对镁离子表现出了良好的耐受性,且不同浓度镁离子处理组间抑菌活性无显著差异（P＞0.05）。体外发酵试验中,地衣芽孢杆菌19148在3%种子液接种量、150 r/min发酵28 h时,体外发酵的抑菌活性最好。耐药性评价试验结果显示,地衣芽孢杆菌19148对青霉素、四环素、头孢他啶、呋喃唑酮和多黏菌素B 5种抗菌药中介,对头孢哌酮和红霉素等其他22种抗菌药敏感。【结论】地衣芽孢杆菌19148具有较好的稳定性,能应用于工业发酵饲料生产,对抗菌药不具有耐药性。     

益生菌混合培养物对黄曲霉菌生长以及产毒效果的影响

为探讨乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、尿肠球菌3种益生菌的混合培养物对黄曲霉菌生长及产毒效果影响,将乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、尿肠球菌活化后进行培养,调整浓度为1×108cfu/m L,将乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌和尿肠球菌均按照1∶1比例制成益生菌混合培养物,并以乳酸杆菌作为对照,分别加入黄曲霉菌培养基中,测定不同类型益生菌混合物对黄曲霉菌菌落生长抑制率、黄曲霉菌孢子生长抑制率和黄曲霉产毒量抑制效果。结果显示:在培养72、96 h时,乳酸杆菌和尿肠球菌混合物组、乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌混合物组对黄曲霉菌菌落生长率与乳酸杆菌组相比,分别提高了27.1%、49.6%、42.1%、61.6%(P0.05);在培养6、18、24 h时,乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌混合物组黄曲霉菌孢子的抑制率与乳酸菌组相比,分别提高了35.4%、16.2%、21.1%(P0.05);培养18、24 h时,乳酸杆菌和尿肠球菌混合物组与乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌混合物组黄曲霉菌产毒量抑制率均高于乳酸杆菌组,分别提高了24.5%、41.9%、55.2%、65.4%(P0.05)。综上所述,枯草芽孢杆菌和乳酸杆菌混合培养物对黄曲霉菌生长及产毒具有很好抑制效果。     

灵芝粉枯草芽孢杆菌发酵条件的优化与质量检测

灵芝是多孔菌科真菌赤芝或紫芝的子实体,含有灵芝多糖等多种可调节动物免疫的活性成分,发酵可提高灵芝中免疫活性物质的吸收与利用,本试验旨在探索优化枯草芽孢杆菌发酵灵芝的条件。将枯草芽孢杆菌菌液接种于粉碎的灵芝,通过考查发酵后枯草芽孢杆菌的数量,对接种比例、发酵温度和发酵时间进行优化。结果表明,枯草芽孢杆菌发酵灵芝最佳发酵条件为:接种比例为1∶5,发酵温度为37℃,发酵时间为22 h,此条件下发酵产物中枯草芽孢杆菌数最多,可达1.0×10~8 CFU/g;检测常温保存30 d的发酵产物不见霉菌生长,枯草芽孢杆菌数量保持1.0×10~8 CFU/g水平不变。发酵灵芝产品可用于提高动物的免疫抗病力,为畜牧生产中代替抗生素使用提供依据。     

一株桑树内生细菌的鉴定和对桑椹核地杖菌的拮抗作用

桑椹菌核病是由桑椹核地杖菌(Scleromitrula shiraiana)等病原真菌引起的果桑毁灭性病害。寻获对桑椹菌核病病原菌有拮抗作用的桑树内生菌,可以达到通过安全、长效的生物防治方法控制病害的目的。以生产上对桑椹菌核病抵抗力较强的桑树品种川7637为材料,采用组织分离法从其健康植株的茎中分离获得一株对桑椹核地杖菌具有显著拮抗作用,且对桑树组培苗有促生作用的内生细菌7PJ-16菌株。基于7PJ-16菌株的形态、生理生化特性及16S rDNA系统发育分析结果,将其鉴定为特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis),命名为Bacillus tequilensis 7PJ-16。抑菌谱测试结果表明B.tequilensis 7PJ-16菌株96 h发酵滤液对10种植物病原真菌具有不同程度的抑制作用,其中对桑椹核地杖菌的抑菌率高达100%,且发酵滤液的热稳定性强。对B.tequilensis 7PJ-16菌株培养特性的初步研究表明,该菌株的最适生长温度为25℃,培养96~120 h的发酵滤液对桑椹核地杖菌的抑菌率可达100%。田间防效试验的初步结果显示,在桑树花期喷施5次B.tequilensis 7PJ-16菌株的发酵上清液,其病果率仅为1.83%,较清水对照处理组降低18.66个百分点。综上研究表明,筛选获得的桑树内生细菌B.tequilensis7PJ-16菌株对桑椹核地杖菌有较强的拮抗作用,是开发桑椹菌核病生防制剂较为理想的候选菌株     

猪源枯草芽孢杆菌HEW-B113的鉴定及发酵工艺优化

研究从猪肠道中获得一株疑似枯草芽孢杆菌,通过形态特征、生理生化鉴定和16S r DNA分子鉴定确定其为枯草芽孢杆菌,并采用液体发酵法,以发酵液中活菌数和芽孢数为指标,通过单因素试验和正交试验对枯草芽孢杆菌HEW-B113的培养基和发酵条件进行优化。确定其最佳培养基配方为玉米淀粉2%、葡萄糖1%、豆粉1%、硫酸锰0.2%和硫酸铁0.15%;最佳发酵条件为初始p H 7.1、接种量0.8%、发酵摇瓶装液量100 m L/500 m L、转速200 r/min、发酵温度35℃及发酵时间40 h。采用枯草芽孢杆菌的最优发酵工艺可以降低成本,提高质量,为枯草芽孢杆菌的扩大化生产提供理论依据。     

抗鸡源大肠杆菌的枯草芽孢杆菌鉴定及代谢产物理化特性研究

本试验采用鸡源大肠杆菌O2作为指示菌,对29株芽孢杆菌的发酵产物进行了抑菌效果检测,获得了4株抑菌圈在15mm以上的芽孢杆菌;在此基础上,对其代谢产物进行了抑菌谱的测定及理化稳定性试验,发现其中一株芽孢杆菌对革兰氏阳性、阴性细菌及真菌均具有良好的抑菌和杀菌效果,理化性质稳定,对鸡源大肠杆菌抑菌圈达到20mm以上;生理生化鉴定及16S rDNA测序结果显示该菌为一株枯草芽孢杆菌,命名为枯草芽孢杆菌GD株。     

复合菌发酵奶牛精饲料工艺条件的研究

主要探讨混菌发酵奶牛精饲料发酵条件的优化,采用枯草芽孢杆菌和酵母菌混合发酵的方法,研究种子液中腐植酸钠添加量、发酵底物中腐植酸钠添加量、麸皮含量、含水量、接种量、发酵时间和发酵温度对发酵产物中活菌数的影响。结果表明:在枯草芽孢杆菌与酵母菌接种比例3∶7的前提下,奶牛精饲料的最佳发酵工艺条件:种子液中腐植酸钠添加量2.0%,发酵底物中腐植酸钠添加量2.0%,麸皮5.0%,含水量50.0%,接种量5.0%,发酵时间48 h,发酵温度34℃。在此试验条件下进行发酵,测得产品中枯草芽孢杆菌数量可达48.00亿CFU/g,酵母菌数量可达4.96亿CFU/g。     

菌酶协同处理对玉米秸秆饲用价值的影响

为研究菌酶协同处理对玉米秸秆饲用价值的影响,设置未发酵玉米秸秆为对照组（CK）,3个复合菌组,即T1组（枯草芽孢杆菌50%、植物乳杆菌25%、假丝酵母菌25%）、T2组（地衣芽孢杆菌50%、植物乳杆菌25%、假丝酵母菌25%）、T3组（枯草芽孢杆菌50%、米曲霉菌25%、假丝酵母菌25%）,3个复合菌酶组,即TG1组（T1+0.5%葡萄糖氧化酶）、TG2组（T2+0.5%葡萄糖氧化酶）、TG3组（T3+0.5%葡萄糖氧化酶）,每组3个重复,活菌数1.0×108 CFU/mL,酶活2 000 U/g,分别处理玉米秸秆,发酵60 d后,检测营养成分、霉菌毒素、72 h产气量、瘤胃发酵参数和体外消化率。结果表明：TG1组和TG2组干物质和粗蛋白质含量高于对照组（P<0.01）,复合菌酶组钙含量高于复合菌组（P<0.01）,T1组磷和粗灰分含量高于其他组（P<0.01）,T2组、T3组和复合菌酶组中性洗涤纤维含量低于对照组（P<0.01）,6个试验组的粗纤维和酸性洗涤纤维含量低于对照组（P<0.01）,各组霉菌毒素含量均在安全范围内;试验组培养液pH低于对照组（P...