国标法测定植酸酶活性存在问题的探讨

利用国标法测定植酸酶活性过程中发现,植酸钠底物溶液pH为6.48,高于酶活性单位定义中pH5.5。为进一步探讨植酸钠底物溶液pH对植酸酶活性的影响,本试验研究了调节与不调节植酸钠底物溶液pH对样品空白的吸光值以及植酸酶活性的影响。结果表明:将植酸钠溶液pH由6.48调至5.5对酶活测定中的样品空白无显著影响(P>0.05),但极显著影响植酸酶活性(P<0.01),未调节pH组植酸酶活性仅相当于调节pH组的66%,利用不同的酸调节植酸钠溶液pH,对植酸酶活性无显著影响(P>0.05)。     

不同底物对植酸酶酶活检测的影响

试验采用2×5完全随机试验设计,考察不同底物(P3168和P8810)对不同酶活水平(6000、8000、10000、12000和16000U/g)的植酸酶酶活检测的影响。结果表明,以P8810为底物检测的植酸酶酶活显著高于使用P3168为底物的检测结果,但底物类型与酶活水平之间没有显著的互作效应。使用P8810与使用P3168的检测结果之间存在显著的线性关系(P=0.00),线性方程为:y(P3168)=0.843x(P8810)-431.16,R2=0.987。通过对曲线预测值验证的结果表明,可以使用P8810替代P3168作为底物进行植酸酶酶活检测。     

三种底物在检测植酸酶酶活中的对比研究

试验采用完全随机的2×3×6试验设计,考察在不同pH(5.0、5.5)条件下应用3种底物(SigmaP0109、P8810和P3168),检测不同酶活水平(1000、3000、5000、6000、7000U/g和10000U/g)的植酸酶时,其检测值之间的对比关系。结果表明:不同pH条件下,P0109与P3168的检测结果之间差异均不显著,P8810与P3168的检测结果之间差异均极显著;底物P0109可以完全替代P3168进行植酸酶酶活测定;P8810与P3168的检测结果之间存在线性关系,线性方程为:y(pH5.5,P3168)=0.7649x(pH5.5,P8810) 152.18(R2=0.9963)、y(pH5.0,P3168)=0.8767x(pH5.0,P8810) 34.818(R2=0.9979),T检验分析曲线换算值和验证值结果差异不显著,证明两个线性方程可以作为底物P8810替代P3168进行植酸酶酶活测定的换算公式。     

无淀粉麦麸为底物体外植酸酶活性评价方法的建立

为提高体外检测方法的科学性和客观性,预测植酸酶在动物体内的活性和作用效果,研究以无淀粉麦麸为底物,探索并建立了一种更为客观评价植酸酶活性的检测方法.与现有的植酸酶酶活测定国家标准相比,在不同pH值的缓冲液中检验植酸酶降解天然植酸的效果,具有更为科学、客观与简便等优点.     

沸石粉/植酸酶复合物的制备及其催化水解植酸磷活性分析

为研究沸石粉/植酸酶复合物的制备过程,分析其催化水解磷酸活性,试验选取沸石粉与饲用植酸酶为材料,以X射线衍射(XRD)、红外光谱(FTIR)表征,用冷冻干燥法以振荡吸附试验制备沸石粉/植酸酶复合物,测定温度、胃蛋白酶水解、pH值适应性及金属阳离子对复合物稳定性的影响。结果显示:植酸酶可以成功吸附在沸石粉表面;其温度耐受性相对酶活提高23.11%,蛋白酶水解耐受性相对酶活提高43.18%,适宜的pH值为5。沸石粉/植酸酶复合物作为饲料添加剂可以有效减少植酸酶的添加量,提高植酸酶利用率。     

应用钼黄法和钼兰法测定植酸酶活性测定条件的研究

植酸酶活性的测定,基于在一定的条件下植酸酶酶解底物(植酸钠),游离出磷和肌醇。游离出磷量的多寡反映出酶活的高低。测定磷的方法应用较多的为钼黄法和钼兰法。钼黄法因其标准曲线线性关系好,颜色稳定,干扰物质相对较少而成为测定低含量磷的经典方法。钼兰法其测定条件及还原剂的选择已有深入的研究,并在微量磷测定中得到应用。钼黄法和钼兰法应用于植酸酶活性的测定,由于表面活性剂的引入,植酸钠及植酸酶的存在,改变了方法的测定条件。而酶提取溶剂的选择也是影响测定成败的主要因素。本文对上述因素的引入给测定方法带来的影响进行研究,…     

植酸酶磷当量的研究

<正>1植酸酶活性与磷当量之间的关系酶活指酶催化其底物能力的大小,通常用活力单位来表示。目前国际上通用的植酸酶酶活定义为37℃及pH值5.5的条件下,1min内从5.1mmol/l的植酸钠溶液中水解1μmol无机磷所需要的酶量为一个酶活单位。所谓当量关系就是不同物质之间针对某一共     

植酸酶活性测定应注意的几个问题

1温度植酸酶作为一种酶制剂,对温度非常敏感,温度低会降低它的生物活性;温度高也会降低其生物活性,甚至完全失活。因此,在检测过程中对温度的控制则显得非常重要,国标要求植酸酶活性测定时的温度为(37±0.1)℃。在33℃时植酸酶不能很好地发挥其活性,酶活与其真实值相比约低10%;     

马铃薯渣作培养代料的两种侧耳属食用菌菌糠中两种饲用酶活性的检测研究

本研究以培养代料含马铃薯渣的凤尾菇菌糠、小白侧耳菌糠为研究对象,检测其中植酸酶及β-葡聚糖酶的酶活。凤尾菇菌糠植酸酶酶活在pH2.5下为0.0822U/g,在pH5.2下为0.0786U/g。小白侧耳菌糠植酸酶酶活在pH2.5下为0.1052U/g,在pH5.2下为0.1027U/g。凤尾菇菌糠β-葡聚糖酶酶活0.0260U/g,侧耳β-葡聚糖酶酶活为0.0354U/g。结果表明,加入马铃薯渣做培养代料的凤尾菇、小白侧耳菌糠具有一定的饲用酶活性,用其作禽畜饲料加工时,可适量减少饲用酶的加入量,以节约成本。     

液体植酸酶的稳定性研究

此文研究了液体植酸酶在不同贮存温度下的酶活稳定性,以及不同稀释倍数和调节稀释后酶液的pH时液体棱酸酶的活性和物理性状的影响,同时探讨了液体植酸酶与液体木聚糖酶复配的稳定性能。试验结果表明：液体植酸酶在低温下贮存酶活稳定性较好;不同稀释倍数对液体植酸酶活性无明显影响,但稀释倍数较大显著影响？植酸酶溶液的物理性状;通过调节稀释后的植酸酶溶液的pH可以显著改善其物理性状。此外,与液体木聚糖酶复配无论是复配后酶液蛇活性还是其物理性状均具有很好盼稳定性。     

植酸酶在肉仔鸡消化道内环境下活性变化的体外研究

本研究在体外条件下对肉仔鸡消化道内pH环境以及蛋白质水解酶对黑曲霉植酸酶活性的影响进行了研究。结果表明,该植酸酶为酸性植酸酶,最适pH为5.5。该植酸酶对pH环境和蛋白质水解酶较为敏感。当环境pH远离其最适pH时其活性迅速下降,且大部分酶活损失发生在30 min内,然后趋于稳定。在pH3.0和pH6.0条件下,加入胃蛋白酶和胰酶后,植酸酶活性亦进一步迅速降低,然后趋于稳定,但与胃蛋白酶相比,胰酶对植酸酶活性的影响更大。从植酸酶在14、28和42日龄肉仔鸡胃和小肠稳定性的研究可以看出,植酸酶在胃存留率分别为42%、40%和49%,在小肠内的存留率仅19%。植酸酶在胃内的稳定性好于小肠,小肠内环境不利于植酸酶存活。植酸酶活性受肉仔鸡消化道pH和蛋白酶的影响较大,这可能是影响植酸酶作用效果的主要因素之一。     

固态发酵饲用植酸酶酶活的快速测定法

植酸酶是近年来新出现的饲用酶制剂,在提高饲料的营养价值和改善生态环境等方面均发挥积极的作用.植酸酶酶活的测定方法很多,但大多比较烦琐,操作时间较长.笔者通过实验发现采用FeSO4--钼蓝法测定饲用植酸酶的酶活比较快速、简便,并且具有较好的准确度 .该方法是利用植酸酶水解植酸盐释放无机磷,通过加入盐酸或10%三氯乙酸(TCA)使水解反应停止,然后加入钼酸铵和FeSO4.7H2O混合液起显色反应,在750 nm下测定其吸光度,以标准磷酸溶液为参照,间接计算被测样品中植酸酶的含量.     

转基因植酸酶玉米主要营养成分及其猪消化率的测定

首先,采用国标法对转基因玉米中概略养分、氨基酸、矿物质、维生素和脂肪酸含量进行分析;然后,采用完全随机区组设计将18头杜×长×大三元杂交公猪按体重和窝别随机分成2组,分别饲喂转基因植酸酶玉米和非转基因玉米组成的饲粮,测定概略养分和能量的消化率。结果表明,转基因植酸酶玉米的植酸酶活性(7134 FTU/kg干物质)显著高于非转基因玉米植酸酶活性(126 FTU/kg干物质);转基因植酸酶玉米中非植酸磷含量比非转基因玉米高1倍,其他营养成分含量与非转基因玉米基本相近。两种玉米粗蛋白质和粗脂肪表观消化率无显著差异(P>0.05),而其他营养物质消化率转基因植酸酶玉米均显著高于非转基因玉米(P<0.05)。因此,在猪饲粮配制中,如果用转基因植酸酶玉米替代非转基因玉米,将提高饲粮消化能值和非植酸磷含量,从而减少无机磷源的添加量。     

使用植酸酶的五个注意事项

<正>植酸酶作为一种新型微生物饲料添加剂,不仅能提高植酸磷的利用率,促进蛋白质、氨基酸和矿物质等营养素的消化吸收,促进动物生长发育,而且能够减少磷、氮等元素的污染,大大提高养殖业的经济和社会效益,但使用植酸酶时还应注意以下问题。1选择酶活性高的合格产品植酸酸酶是一种微生物制品,商品制剂多由曲霉菌发酵而获得。植酸酶的主要指标是单位酶活性(1单位酶活(IFTU)是指在37℃、pH值     

植酸酶基因在嗜酸乳杆菌中的表达

植酸酶和嗜酸乳杆菌是重要的饲料添加剂,为获得产植酸酶的嗜酸乳杆菌菌株,克隆了大肠杆菌植酸酶基因,构建表达载体并转化嗜酸乳杆菌,对重组嗜酸乳杆菌进行发酵产酶并测定所产酶液的酶学性质,进一步研究重组嗜酸乳杆菌的耐酸性及植酸酶液的抗蛋白酶活性。结果表明：重组嗜酸乳杆菌发酵24 h植酸酶活性为984 U/mL,植酸酶的最适催化pH为4.5,最适催化温度为60℃。重组嗜酸乳杆菌在pH 2.0～4.5有一定的耐酸性,在pH 2.0条件下2 h的存活率为76.4%。植酸酶液用胃蛋白酶处理160 min后植酸酶液剩余85%的相对酶活,用胰蛋白酶处理160 min后剩余29%的相对酶活。上述研究结果为重组嗜酸乳杆菌后续应用研究提供了重要依据。     

影响植酸酶在畜禽消化道内作用效果的研究进展

理论上,畜禽消化道内微生物植酸酶的活性、底物可溶性植酸的浓度及产物无机磷的浓度被认为是影响植酸酶在畜禽消化道内作用的三大主要因素。文章从这三方面入手,介绍了植酸酶的一般特性及影响畜禽消化道内植酸酶活性的因素;分析了植酸的性质、植酸在饲料原料中的分布及影响畜禽消化道内可溶性植酸浓度的因素;阐述了磷在体内的吸收方式及主要的吸收部位,为植酸酶在畜禽消化道内水解植酸适宜作用部位的研究提供理论参考。     

饲用酶检测过程中非定义影响因素的分析

饲用酶制剂是应用现代生物工程技术，选用特殊的微生物菌株经发酵产生的具有催化活性的生物制剂。近年来，因其具有改善畜禽消化道功能、降低食糜黏度和抗营养性、提高饲料利用率和减少环境污染等特点．已作为环保型饲料添加剂广泛应用于畜牧业。但因为饲用酶制剂应用开发较晚，当前饲用酶制剂酶活测定方法除了植酸酶外，其他酶制剂都还没有一个全国通用的标准方法。虽然随着酶制剂工业的发展．酶活检测水平已得到了相应的提高．对于酶活检测中的一些重要因素，人们在酶活定义中已经进行了明确的规定，例如温度、pH值、时间、底物等，并且对于这些因素在酶活测定过程中对结果的影响程度．以及这些因素不同值下的对比关系，广大科研工作者已经进行了大量而深入的研究。     

响应面法优化产植酸酶黑曲霉L2-2的培养基和培养条件

采用中心组合设计和Box-Behnken设计,分别对影响植酸酶产生菌L2-2培养基主要成分和培养条件进行优化,经响应面分析,得到培养基中的3个因素葡萄糖、硫酸铵、植酸钠的最佳组合为:葡萄糖2.57%,植酸钠0.24%,硫酸铵0.30%;培养条件中的3个因素pH、温度、发酵周期的最佳组合为:pH 5.6,温度31.1℃,发酵周期112.8 h。经优化后,黑曲霉L2-2的植酸酶酶活可达15.73 U/mL。     

吸附剂膨润土对植酸酶活性的影响

在水溶液中研究了不同酶加入量、作用时间、pH、热处理条件下，膨润土对植酸酶活性的影响。结果表明，膨润土对植酸酶活性无破坏作用；在植酸酶一般添加量时，膨润土有催化酶活性作用，随着酶加入量增加膨润土对释放的磷有吸附作用，这种吸附作用不受作用时间影响，随着pH值升高吸附减少；在80℃湿热处理时，膨润土对酶活性有保护作用。     

植酸酶在畜禽消化道内的活性变化与定点释放

利用微生物植酸酶替代畜禽日粮中的磷酸氢钙已得到普遍应用,但植酸酶活性受多种因素影响,仍不能替代畜禽日粮中的全部磷酸氢钙。本文从植酸酶的酶学特性出发,通过总结畜禽消化道pH、蛋白水解酶和金属离子等因素对植酸酶活性的影响,探讨植酸酶的适宜作用位点,进而为植酸酶在畜禽消化道内实施定点释放提供参考。