浅谈“瘦肉精”的ELISA检测

瘦肉精的ELISA(酶联免疫吸附法)检测,是目前国内比较普遍的检测方法之一,由于其检测周期短,准确率高,所以运用范围也比较广。而在实验过程中,人为操作的方式、实验本身具有相对的不确定性而产生的各种偏差、或者其它种种原因等均可影响对实验结果。本人在瘦肉精的ELISA检测方面有6年多的     

影响“瘦肉精”残留快速检测假阳性的原因分析

近年来,随着我国对食品安全的进一步重视,"瘦肉精"的监督监测力度日益加大。然而在"瘦肉精"快速检测过程中,由于试剂盒及检测方法本身的缺陷,常常会出现一些假阳性。笔者在实验过程中曾多次遇到快速检测呈阳性,而通过色谱法确证又呈阴性的情况。鉴于此,现就影响"瘦肉精"快速检测假阳性的原因总结如下。     

盐酸克仑特罗ELISA检测假阳性的原因分析

盐酸克伦特罗(Hydrochloride Clenbute-rol)是人工合成的β-肾上腺素能受体兴奋剂之一,学名α-[(叔丁胺基)甲基]-4-氨基-3,5-二氯苯甲醇盐酸盐。医学上常用于防治哮喘性慢性支气管炎、肺气肿等呼吸系统疾病,又称克喘素。克伦特罗在动物体内能够改变营养物质的代谢途径,促进动物     

浅析荧光PCR检测出现假阳性和假阴性的原因

荧光PCR技术的高敏感性导致检测结果易出现假阳性和假阴性。阳性样本和阳性对照污染是导致假阳性的原因;RNA酶降解核酸是导致假阴性的重要原因。避免出现假阳性和假阴性检测结果需从实验室设置和管理、操作人员和试验器材管控入手。     

ELISA检测中出现假阴性探讨

本文应用酶免疫试验（ＥＬＩＳＡ）、反向间接血凝试验（ＲＩＨＡ）和中和试验（ＮＴ）三种方法对６份疑似ＨＢＶ感染的待测血清进行测定，借此探讨ＥＬＩＳＡ检测中出现假阴性现象，认为假阴性是由检测前滞现象引起。     

用夹心ELISA方法检测猪瘟病原

猪瘟(HC)是由猪瘟病毒(HCV)引起的猪的一种急性传染病,发病率和死亡率都很高,流行广泛,传播迅速,危害极大,给养猪场、户造成了很大的经济损失,至今尚无有效的治疗药物和治疗方法。我国从20世纪50年代开始,采取以预防为主的免疫注射措施,对控制猪瘟起到了至关重要的作用。近年来,由于不断从国外引进种猪,加上国内生猪的交易、流通逐渐加大,疫苗使用不当造成免疫抑制或失败等等因素,使猪瘟在我省各地仍时有发生,而且大多表现为非典型性、慢性及隐性感染状况,给猪瘟的诊断和确诊带来了一定的困难。从2001年开始,河南省兽医防治站引进了美国I…     

“瘦肉精”ELISA检测过程中常见问题的分析

"瘦肉精"是盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和齐帕特罗等β-肾上腺激动剂类药物的俗称。它虽然能增加猪的瘦肉率,减少脂肪沉积,但人食用了含有"瘦肉精"的猪肉或内脏后会出现心律失常、肌肉震颤等症状,严重危害人的身体健康。所以我国政府对β-肾上腺激动剂类药物的非法使用高度重视,1997年3月25日,我国农业部发布了《关于严禁非法使用兽药的通知》(农牧发〔1997〕3号)     

"瘦肉精"检测要注意药物引起假阳性现象

2003年12月26日,我单位接到邻近市兽医防疫检疫站的通知,称该市当天从我市某镇购入待宰的37头生猪被检出含有“瘦肉精”(盐酸克伦特罗)。我们接通知后立即对有关人员展开调查,首先向经手的兽医检疫人员查询,得知该批猪来自两位畜主。我们即到其中一个畜主的猪舍对其大猪进行尿样抽检(另一畜主无存栏大猪),用酶联免疫吸附法检测“瘦肉精”结果呈阳性。经了解,两畜主使用的都是同一饲料店自行混合的同一种特大猪饲料。饲料店负责人表示该批饲料是用广州市某动物营养保健有限公司生产的大猪复合预混料与玉米、豆粕等混合而成的。该饮料正在试用…     

“瘦肉精”阳性检出率下降

确保人民群众吃上安全、质优的畜产品，加强畜牧业投入品监督管理，从源头上确保畜产品质量安全是关键。江西各地以禁用兽药为重点，整顿和规范兽药及兽用生物制品经营秩序，坚决打击非法生产销售兽药产品行为。全省兽药生产企业GMP认证率达到了100％。以“瘦肉精”等违禁药品为重点，开展专项整治工作，重点查处和打击在饲料生产、经营过程中和饲养环节添加“瘦肉精”等违禁药品的行为，     

用ELISA方法检测猪血清中PRRSV抗体

应用ELISA方法对信阳市10县区86个规模养殖场未进行PRRSV免疫接种的1 329份血清进行PRRSV抗体检测。结果显示,平均阳性率为49.5%,其中阳性率最高县区为65.9%。阳性率最低县区为27.8%;长白猪感染率最高为56.3%,本地淮南猪感染率最低为30%;小规模猪场感染率较高,大规模猪场感染较低。不同年龄段猪的感染率差异不大。     

用ELISA检测牛副结核抗体时消除假阳性反应的方法

在前一报告中,采用副结核菌原生质抗原进行ELISA捡测牛副结核抗体时,由于副结核分枝杆菌与其他许多分支杆菌具有类属的抗原性,因此常出现假阳性反应而干扰对副结核抗体的检测。为此,我们参考Y. Yokomizo的方法,利用草分枝杆菌对待检血     

用金标法和酶标法检测生猪“瘦肉精”残留

广东省东莞市虎门镇是生猪消费大镇,定点屠宰场日屠宰量达到了600多头。九成以上的生猪靠众多的商贩由省内外多个地区购入,来源复杂,质量难以保证。2005年我镇屠宰场待宰生猪"瘦肉精"阳性检出率达到了7.5%。     

ELISA法与HI法检测鸡新城疫抗体的比较及ELISA阴、阳性临界点对临床检测结果的影响

应用商品化酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）试剂盒和血球凝集抑制（ＨＩ）试验同时测定１８７份常规鸡新城疫（ＮＤ）抗体血样。结果显示,二种方法的抗体效价呈显著相关,其相关系数为０．８３。在此基础上,以ＨＩ法为标准方法对ＥＬＩＳＡ的临床检测结果进行了分析。ＨＩ法的测定结果表明,该试验群的抗体阳性率为５４．５％。按试剂盒提供的阴、阳性临界点判定结果,ＥＬＩＳＡ的相对灵敏度为９７．１％,相对特异性为６１．２％,反映总体测试能力的指标即检测准确率为８０．７％,Ｙｏｕｄｅｎ指数为０．５８;而具临床指导意义的指标即阴、阳性结果预测值分别为９４．５％和７５％。本试验还根据上述指标应用了一种改进的ＴＧ－ＲＯＣ分析方法（Ｔｗｏ－ＧｒａｐｈＲｅｃｅｉｖｅｒＯｐｅｒａｔｉｎｇＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）,对如何选择合适的ＥＬＩＳＡ临界点进行了分析。结果显示,在不同条件下,ＥＬＩＳＡ试剂盒所提供的临界点并非都是最佳的,使用者可根据检测目的采用ＴＧ－ＲＯＣ法进行调整;同时也证实ＥＬＩＳＡ法是一种敏感、特异、快速、简便的血清学方法,可以大批量样品检测时采用。     

ELISA检测牛结核抗体时假阳性反应的消除

以草分枝杆菌作为吸收抗原处理待检血清 ,吸收其中的非特异性类属抗体 ,提高了牛结核 EL ISA的特异性     

ELISA方法检测犬瘟热抗体初探

本实验以细胞培养犬瘟热病毒作为包被抗原,建立了检测犬瘟热病毒血清抗体的间接ELISA方法。该检测方法抗原最佳包被浓度为5μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100。阻断实验、敏感性实验等结果表明该方法特异性强、重复性较好,可用于犬瘟热血清抗体的定量和定性检测。     

有机相萃取法消除ELISA检测AFB1假阳性的研究

近年来，饲料质量检验部门广泛采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测饲料中黄曲霉毒素B1（AFB1）（GB/T17480-1998），但由于目前的饲料产品中添加了一定量的重金属离子及其它营养增强剂，采用国标中的提取方法易出现假阳性结果。利用有机相萃取法可有效地消除假阳性。     

有机相萃取法消除ELISA检测AFB_1假阳性的研究

近年来,饲料质量检验部门广泛采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测饲料中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)(GB/T17480—1998),但由于目前的饲料产品中添加了一定量的重金属离子及其它营养增强剂,采用国标中的提取方法易出现假阳性结果。利用有机相萃取法可有效地消除假阳性。     

浅谈“瘦肉精”检测方法及其应用

瘦肉精危害大,体现在瘦肉精被人体食用后,将快速被人体吸收,且消除难度较大。而且,作用于人体的瘦肉精,严重影响心肺功能,常导致肌细胞坏死,损伤心脏机能,导致病人头晕、恶心、心跳过速,肌肉震颤等等,病情较严重的。甚至由此心脏骤停,最终昏迷而死亡。目前,检测瘦肉精的方法,有胶体金试纸条检测法、酶联免疫吸附实验、高效液相色谱法、气相色谱-质谱法等,比较这几种检测方法,就应用情况做系统分析,以供参考和借鉴。     

用ELISA方法检测口蹄疫抗体消长规律和免疫效果

<正>口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是当今最为严重的家畜传染病之一。FMD的病原为口蹄疫病毒(FMDV),该病毒属小RNA病毒科口蹄疫病毒属,有A、O、C、SATⅠ、SATⅡ、SATⅢ及AsiaⅠ共7个血清型及65个以上的亚型,其中O型流行最广,国际上仍时有发生。口蹄疫一旦发生,不但会造成大批小猪死亡,还要采取扑杀封锁等措施,影响国内国际猪肉及其产品的贸易和人民群众的正常生活,给农牧业生产造成极大