无液氮冷冻小鼠精子的研究

目前实验室通常用液氮加冷冻保护剂法保存小鼠精子,这种方法操作复杂而且会带来一定的安全隐患。通过对受精能力、胚胎发育潜能和胚胎组蛋白H3第4位赖氨酸残基位点上三甲基化(H3K4-TriM)的比较,探讨-20℃不加冷冻保护剂冷冻小鼠精子的效果。结果表明,-20℃不加冷冻保护剂冷冻的精子能通过单精子卵胞浆内注射重建受精能力,保持较好的胚胎发育潜能,不改变其早期胚胎H3K4-TriM的组蛋白修饰模式。可见,-20℃保存小鼠精子的方法简单、有效,有一定的应用价值。     

两种无冷冻保护剂冷冻精子方法的比较

小鼠卵胞浆内单精子注射(ICSI)的开展使解冻后的精子无需具有活动能力就可以使卵子受精和发育,因此多种简单的精子冻存方法被开发。从复苏后精子受精和支持胚胎发育的能力,以及DNA甲基化方面研究比较无冷冻保护剂的条件下-20℃和-196℃冻存的两种方法。结果表明,两种方法都不改变胚胎DNA甲基化状态,-196℃保存的精子的受精率和胚胎发育率降低,但是通过卵子激活可以修复受精和胚胎发育的能力。-20℃保存精子1个月不影响受精和胚胎发育能力,冻存6个月降低精子的受精和胚胎发育潜能。因此,-20℃短期保存精子是一种简单、有效且安全的方法。     

牛卵母细胞胞浆内单精子注射的研究进展

综述了牛卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection ICSI)的研究进展:ICSI的囊 胚率从1990年最早报道的1．8％提高到最新的40．1％。这要归功于技术的创新。在此分析了电脉冲仪 (piezo-electric actuator)等新技术应用的效果,讨论了前期处理精子对ICSI的影响,比较了各种激活 处理对ICSI的提高结果,同时展望了ICSI这门技术在畜牧生产和转基因研究上的应用前景。     

44例常规体外受精失败后行卵胞浆内单精子注射补救的临床分析

目的探讨对常规体外受精（IVF）周期受精完全失败患者,于受精后18～20 h行补救卵胞浆内单精子注射（ICSI）的临床价值。方法 2004年1月至2009年12月我院生殖中心常规IVF受精完全失败周期44例,于受精后18～20 h行补救ICSI。解冻复苏补救ICSI受精卵的胚胎,共移植2个周期。结果在44例常规IVF完全未受精周期中,获卵374个,补救ICSI的MII卵201个,正常受精的MII卵127个,获48个优质胚胎,7例临床妊娠,健康新生儿7名,1例单胎妊娠继续妊娠中,胎儿情况良好。解冻复苏补救ICSI受精卵2周期,结果1例妊娠,单胎,于孕早期流产。结论对常规IVF受精完全失败周期,于受精后18～20 h行补救ICSI可作为常规IVF受精失败的有效补救措施。     

季节对超数排卵兔卵母细胞数量及质量的影响

用孕马血清促性腺激素PMSG配合人绒毛膜促性腺激素hCG处理中国白兔,对4个季节超排兔卵母细胞的数量和孤雌胚胎以及卵胞浆内精子注射(ICSI)胚的体外发育能力进行了评定.结果表明.春季成熟卵母细胞的获得数量显著高于冬季(P0.05),而其他季节之间差异不显著(P0.05);两种卵子(孤雌激活和ICSI)的卵裂率不受季节影响(P0.05),但夏季两种胚胎的囊胚形成能力显著低于其他3个季节(P0.05).所以,季节既影响超数排卵兔的卵母细胞数.也影响卵母细胞的质量.     

精子提取物对绵羊显微授精受精率及胚胎发育影响的研究

将绵羊精子可溶性撮物与上不运动绵羊精人同注射于体外成熟的绵羊卵母细胞并在体外培养，结果发现，共同注射的卵母细胞卵裂率、２￣１６细胞发育率，桑椹胚发率育，囊胚发育率均显著高于对照组，其中卵母细胞卵裂率和２￣１６细胞发育率还显著高于精子单独注射组；桑椹胚，囊胚发育率明显高于精子单独注射组。     

猪冷冻精子的体外受精与单精子胞浆内注射

用猪冷冻精子进行体外受精和单精子胞浆内注射(ICSI),并研究添加L-半胱氨酸及不同成熟培养法对猪ICSI胚胎发育的影响。结果表明:用猪冷冻精子生产的ICSI胚胎卵裂率及囊胚发育率分别为68.3%和11.4%,均低于用冷冻精子进行体外受精(IVF)所获得的卵裂率和囊胚发育率(分别为76.9%和19.2%,P<0.05)。在培养液中添加1.71mmol·L~(-1) L-半胱氨酸培养3 h,无论是卵裂率、桑椹胚发育率,还是囊胚发育率,均未得到明显改善(P>0.05);采用含0.4%BSA的NCSU-23培养液进行猪卵母细胞成熟培养,ICSI胚胎卵裂率虽明显高,但各组所获胚胎发育率均无显著差异(P>0.05),表明所用卵母细胞的成熟方法并未对ICSI胚胎发育产生明显的影响;用颗粒细胞或卵丘细胞共培养ICSI胚胎后,卵裂率有明显提高(P<0.05),但各组囊胚发育率无统计学差异。     

单精子卵细胞显微注射治疗严重男性因素不育17个周期的临床分析

目的：观察应用单精子卵细胞显微注射治疗严重男性因素不育的临床效果。方法：应用单精子卵细胞显微注射法。结果：在17例患者的17个周期中，共获6例妊娠，妊娠率达35．3％。结论：对由严重男性因素引起不育的患者应用单精子卵细胞显微注射技术要比常规体外受精—胚胎移植技术获得更好的临床妊娠率。     

显微操作时间对猪ICSI胚胎早期发育的影响

为了进一步优化现有的猪卵胞质内精子注射(ICSI)体系,探讨了ICSI操作时间对猪ICSI胚胎早期发育的影响情况.结果表明,囊胚形成率随着ICSI操作时间的延长而呈现明显下降趋势,其中卵母细胞在体外4 h内完成ICSI组的囊胚形成率(5.90 %)显著低于其他3个处理(P<0.01).可见,ICSI操作时间越长,其胚胎早期发育率越低.     

缺帘鱼精子超低温保存的初步研究

筛选比较了不同保存液、保护剂、降温方式、解冻方式对缺帘鱼精液超低温保存活力的影响,初步解释了缺帘鱼精子经超低温短期保存后活力明显较鲜精低的原因.结果显示:Ringer's液作为保存液,16%二甲亚砜作为保护剂,选取五步法超低温冷冻保存精子[精子缓慢降温至-150℃→液氮面上3 cm(约-170℃),停留4 min→液氮面(约-190℃),停留1 min→液氮];40℃水浴解冻取得最好的冻后活力,解冻后精子活力为(35.2±4.5)%.     

DMA和甘油对公鸡精子冷冻保护作用的比较

比较了6%的DMA和11%的甘油冷冻洪山公鸡精液后精子在存活率、顶体完整率方面的差异.结果表明,用DMA做冷冻保护剂的颗粒型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.320±0.041和0.600±0.049,用甘油做冷冻保护剂的颗粒型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.313±0.036和0.597±0.040,两者差异不显著.用DMA做冷冻保护剂的细管型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.388±0.034和0.652±0.042,用甘油做冷冻保护剂的细管型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.433±0.054和0.750±0.048,前者在精子存活率(P＜0.05)和顶体完整率(P＜0.01)方面都显著低于后者.     

Study on Cryopreservative Effect of Three Penetrating Cryoprotectants with Three Kinds of Extenders on Rabbit Spermatozoa

Glycerol,dimethyl suffixod(DMSO) and acetamide were adopted to verify the cryoprotective ablity of penetrating cryoprotectants with three kinds of extenders for rabbit sperm.Three extenders (A,B and C) and three level of the final concentrations of glycerol and DMSO(2%,3%and 4%),and acetamide 2%,4% and 5% were used with Extender A,4% glycerol had better cryoprotective effect for rabbit sperm motility and 5% acetamide was better with Extender C.4% acetamide was better in being combined with Extender A for sperm acrosome integrity ratio,5% acetamide was better with Extender B and 2% acetamide was better with Extende C. With extender A,there was noe difference among three penetrating cryotectants for plasma membrane integrity.With Extender B,3% glycerol was better than 4% acetamide for plasma membrane integrity,and 3% glycerol with Extender C was better than 2%-4% DMSO and 2% acetamide.     

鳞翅目昆虫精子的发生和形成

长期以来对于昆虫精子的研究远落后于对卵子的研究,这主要是由于研究者将注意力集中在能够直接产生后代的雌虫上,而对精子的作用认识不足,从而未能引起应有的重视.而实际上在昆虫种群的繁衍过程中精子与卵子有着相同的重要性,为此想全面了解昆虫的生殖生理还必须加强对精子的研究.     

添加剂在猪精液冷冻保存中的应用

猪精液的冷冻保存显著影响猪精子的运动学参数,损伤精子质膜、顶体和DNA完整性,降低解冻后精子活率和受精能力.近年来,在以甘油和蛋黄作为冷冻保护剂的基础上,为了有效降低冷冻-解冻对精子的损伤,提高解冻精液的受精能力,研究人员将OEP、抗氧化剂(甲基黄嘌呤、丁羟基甲苯、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、褪黑素和维生素E等)、2-羟丙基β环糊精以及透明质酸等物质作为添加剂应用于猪精液的冷冻保存,结果表明这些物质在保护精子质膜和顶体完整性,提高解冻后精子活力、活率和受精能力等方面均有显著作用.     

"青福宝圆"小核龙眼胚胎发育研究

采用石蜡切片法研究小核龙眼胚胎发育的特点。结果表明：小核龙眼二代高接树和一代嫁接树中珠被、珠心、胚囊在不同时期存在不同程度的皱缩、瓦解现象,而正常发育的乌龙岭龙眼无此现象,这可能是导致它们小核的重要原因。同时也说明该种小核性状是可以稳定遗传给后代的。     

猪精子内阳离子在保存、冷休克和快速冷冻中的变化

在37℃保存过程中,猪精子内K~ 、Ca~( )、Mg~( )和Zn~( )的水平有所下降,而Na~ 则有所升高。冷休克和快速冷冻都能使精子内的K~ 水平降低而Na~ 、Ca~( )和Zn~( )水平升高,Mg~( )的变化不大。分析结果表明:(1)精子内离子的变化同精子膜受损伤的程度有关;(2)猪精子内似乎具有在某些低温状态下与Zn~( )和Ca~( )结合的成分。