几种鸡新城疫弱毒疫苗的免疫效力试验

鸡新城疫是我国养鸡业中危害最大的疾病之一,也是影响禽产品国际贸易最 重要的禽类传染病.长期的疫病防制工作中,我们发现不管是在规模化的养殖场,还是在农 村中的个体养殖户,新城疫的防制一旦失败,鸡场所遭受的损失都是非常大的,有时则是毁 灭性的.鸡新城疫除其本身能造成鸡群严重的发病和死亡外,还常常并发或继发其他疫病的感染,此时造成的经济损失比单独发生时更加严重 [1] ,因此人们对该病的防制极其重视.     

变异型鸡传染性支气管炎病毒的分离和疫苗免疫效力分析

1999年10月至2000年4月期间,某地区饲养的肉仔鸡批批都出现相同的临床症状,表现为新出壳不久的雏鸡散发性气管罗音.10日龄左右发病率明显升高或迅速蔓延全群,病鸡精神沉郁,畏寒怕冷,食欲下降,呼吸困难,张口喘气,咳嗽,甩鼻,并出现明显的气管罗音,但有些批次或鸡场中雏鸡的发病则为20～35日龄.由于继发性的细菌感染造成病鸡的死淘率明显上升,多种抗菌药物治疗无效,试用多种疫苗或改变免疫程序也没有明显的效果.这种现象持续了几个月,使该地区的肉仔鸡饲养者蒙受了极大的损失.由于出现上述表现的原因复杂、疫病种类繁多[4],因此必须对该地区鸡群进行全面调查取样和病原分离,以找到发病的病因及其控制的方法.现将试验过程和结果总结如下.     

鸡传染性支气管炎病毒（IBV）地方SF株弱毒疫苗免疫期检验

禽传染性支气管炎（IB）是由冠状病毒科禽传染性支气管病毒引起的一种常见多发的急性高度接触性传染病,本病由Schalk等首次在美国报道,其病原血清型众多,同毒株之间又有组织亲嗜性的差异,表现为呼吸型、肾型、肠型、腺胃型等阻”。自1982年以来,肾型传染性支气管炎在我国广泛流行,     

鸡ND-IB-IBD三联弱毒冻干疫苗效力试验

本研究对研制的鸡ND-IB-IBD三联弱毒冻干疫苗进行了效力检验,结果表明该疫苗7 d可产生对ND和IB的免疫力,14 d对ND和IB强毒攻击保护率均为100%;对IBD的保护率为70%,可以有效预防鸡ND、IB和IBD三种传染病的发生。     

新城疫病毒弱毒疫苗的免疫研究

新城疫病毒长春株（ＮＤＶ ＣＣ株）经生物学及分子生物学特性研究证明为新城疫病毒弱毒株,以ＮＤＶ ＣＣ毒株制成弱毒疫苗,采用饮水、滴鼻和肌肉注射免疫等方式,分别免疫７日龄雏鸡,免疫鸡未出现不良反应。免疫后７ｄＨＩ效价为２＾５以上,６０ｄ后均能维持较高的ＨＩ值,免疫后１４ｄ用ＮＤＶ强毒攻击,其保护率可达到１００％（１０／１０）。     

鸡传染性支气管炎弱毒疫苗株安全性和免疫效力初步评价

通过对QX基因型IBV分离株SDZB0808进行鸡胚连续100次传代致弱后获得子代病毒P100。为了明确P100的的致弱效果和免疫原性,对其进行了安全性和免疫效力评价。安全性试验结果显示,P100以105.5 EID50/只的剂量对3日龄的SPF鸡进行免疫后试验,与正常对照组相比没有明显临床症状和病理变化,气管和肾脏组织也没有病理组织损伤。免疫效力试验结果发现,P100以104.5 EID50/只的剂量免疫3日龄SPF鸡,14d后对同源强毒SDZB0808和异源强毒SDIB821/2012的攻击都具有100%的临床保护,病理组织学检查发现P100免疫攻毒组试验鸡气管和肾脏与正常对照没有差异,排毒检测结果显示P100免疫攻毒组试验鸡内脏组织病毒检出率大大低于攻毒对照组。本研究结果表明P100对SPF鸡具有良好的安全性和免疫效力,可以作为IBV弱毒疫苗候选株。     

鸡新城疫克隆—30弱毒苗免疫效力试验

鸡新城疫病毒克－３０朱，系采用国外标准的鸡新城疫Ⅳ克隆化弱毒株，用鸡胚尿囊液制成的冻干活疫苗。滴鼻、点眼接种７日龄雏鸡后，５－７天产生免疫力，保护率达９０－１００５，免疫期可达４０天以上。在２０几个省市免疫接种３千余万只鸡，均获得满意结果。     

以传染性支气管炎疫苗株和比利时致肾病变异株免疫的鸡…

以传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）疫苗株和ＩＢＶ致肾病变（ＮＩＢＶ）分离株免疫鸡后，进行静脉和气雾攻毒以评价气管和肾脏的交叉保护力。以４株比利时ＮＩＢＶ分离株和意大利ＮＩＢＶ ＡＺ２３．７４株作静脉攻毒。由经比利时参考株Ｂ１６４８攻毒后于不同时间采集的气管样品表明，经血清学紧密相关的比利时ＮＩＢＶ野毒免疫的鸡的气管有较强的保护力，而经Ｈ１２０、Ｈ５２和Ｄ２７４三个疫苗株以及异源ＡＺ２３．７４株免疫的鸡     

禽传染性支气管炎脂质体、壳聚糖/DNA疫苗免疫效果比较研究

将制备的禽传染性支气管炎脂质体／DNA疫苗和壳聚糖／DNA疫苗，分别以肌肉注射（i．m）和滴鼻、点眼（i．n）两种途径免疫健康雏鸡，以裸DNA疫苗为对照，采用流式细胞仪（FACS）及间接ELISA分别对免疫鸡外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数及特异性IBV血清抗体IgG的动态变化进行检测，并于免疫后35d进行攻毒，结果显示：（1）CD4^＋T淋巴细胞数，所有试验组在免疫后1～3周左右均高于对照组（P〈0．01或P〈0．05），各试验组间，脂质体／DNA疫苗肌肉注射途径在免疫后10d后高于壳聚糖／DNA疫苗，但仅在第15天差异显著（P〈0．05），而滴鼻、点眼途径则相反；（2）所有试验组CD8^＋T淋巴细胞数仅在免疫后第15天与对照组差异显著（P〈0．05），各试验组间无显著差异；（3）所有组间特异性IBV血清抗体IgG动态变化差异不显著；攻毒后脂质体／DNA疫苗肌肉注射组无鸡只死亡，其他试验组有4％或8％死亡率，均显著低于对照组（12％）。由此可见，脂质体和壳聚糖均为DNA疫苗良好的佐剂或载体，且脂质体／DNA疫苗肌肉注射的免疫效果优于壳聚糖／DNA疫苗。     

猪支原体肺炎活疫苗(RM48株)的最小免疫剂量测定及活菌滴度与免疫保护率平行关系试验

为确定猪支原体肺炎活疫苗(RM48株)的最小免疫剂量,使用两批该疫苗(活菌滴度均为108CCU/m L)分别用原倍、10倍、100倍和1000倍稀释,以胸腔注射和鼻腔接种两种方式各免疫4头仔猪,45 d后攻毒,70 d后剖杀观察结果。结果表明其中一批疫苗4个稀释度胸腔注射组的攻毒保护率分别为78%、77.6%、68.8%和55.2%,鼻腔接种组分别为70.6%、68.1%、58.4%和18.4%;另一批的胸腔注射组攻毒保护率分别为80.6%、78.8%、67.6%和52.4%,鼻腔接种组分别为71.6%、68.4%、53.5%和28.4%。按照判定标准,可将该疫苗的胸腔注射接种最小免疫剂量确定为106CCU/头,鼻腔接种最小免疫剂量确定107CCU/头,同时结果也证明免疫保护率与活菌滴度间在测定范围内具有很好的平行关系。     

中和温度对鸡新城疫、鸡传染性支气管炎二联活疫苗中鸡传染性支气管炎病毒含量影响的研究

采用分别测定每羽份疫苗成品和每0．1mL半成品胚液鸡胚半数感染量(EID50)的方法探讨了中和温度对鸡新城疫、鸡传染性支气管炎二联活疫苗中鸡传染性支气管炎病毒含量的影响。结果显示，中和温度对该二联活疫苗中鸡传染性支气管炎病毒的EID50有显著的影响。测定病毒含量时，中和条件以中和温度控制在20℃、中和时间45～60min较为合适。     

鸡新城疫La Sota株、鸡传染性支气管炎W93株二联活疫苗研究Ⅱ.接毒剂量选择试验

将鸡新城疫La Sota毒种和嗜肾型鸡传染性支气管炎W93毒种分别用生理盐水做适当稀释后，将两种病毒液等量混合，接种于同一SPF鸡胚尿囊腔内。结果表明，HBV、NDV在同一鸡胚内增殖时无互相干扰现象；收获的鸡胚液(La Sota W93)中NDV、IBV的效价分别达到相应单苗水平。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对禽流感H9亚型流行株攻毒的保护作用

为了监测鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(LaSota株+M41株+SS/94株)对H9亚型禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,采用H9亚型禽流感病毒SS/94株及2009—2010年现地分离的3株H9亚型禽流感病毒对已免疫上述三联灭活苗的SPF鸡进行攻毒试验。结果显示,试验鸡以0.3 mL/只的剂量免疫三联灭活苗后21 d,其H9亚型禽流感病毒的HI抗体效价可达8～11log2,此抗体水平可抵抗2×106EID50的H9亚型禽流感病毒SS/94株、BLCN09株、WDZ09株、YT10株的攻击,攻毒保护率均达90%(9/10)以上。可见,以SS/94株作为禽流感疫苗抗原制备的三联灭活苗具有良好的免疫原性,能使免疫鸡抵抗2009—2010年期间现地分离的多株H9亚型禽流感病毒的攻击。     

Effect of Newcastle disease and infectious bronchitis live vaccines on the immune system and production parameters of experimentally infected broiler chickens with H9N2 avian influenza

H9N2 Avian influenza (AI) is an infectious disease which considered to have low pathogenic virulence, but in the case of coinfection with other pathogens it has the potential to become a major threat to the poultry industry. Infectious bronchitis (IB) and Newcastle diseases (ND) are other common problems to the poultry industry, which there are an extensive vaccination program against these viral pathogens. To investigate the effects of administration of infectious bronchitis and Newcastle disease live vaccines (IBLVs and NDLVs) in the presence of H9N2 AI infection on the immune system and some production parameters, 180 one-day-old broiler chicks were randomly allocated into six groups with different vaccination programs including H120 IBLV, 4/91 IBLV, B1 NDLV and LaSota NDLV. At the age of 20 days, all birds of the experimental groups except the negative control group, were inoculated intra-nasally (at dose of 10⁶ EID₅₀) with H9N2 AIV. After the inoculation, gross and microscopic lesions of the immune organs, serological changes and some production parameters were examined. The findings of this study showed that coinfection of H9N2 AI with NDLVs exacerbated the gross and microscopic injuries in the immune organs; especially the bursa of Fabricius. LaSota + AIV group had the most severe lesion in the bursa of Fabricius, spleen and thymus. Furthermore, the birds of LaSota + AIV group consumed the least amount of feed and water and their final body weight were significantly (P ≤ 0.05) lower in comparison with the other groups. Interestingly, in the context of this experiment both 4/91 and H120 IB live vaccines enhanced the HI antibody titers against H9N2 AIV, but the 4/91 showed the most significant (P ≤ 0.05) increase compared to the other experimental groups.     

鸡新城疫-传染性支气管炎(M41株)二联灭活苗的免疫保护期测定

传染性支气管炎能引起鸡的急性、高度接触性的呼吸道、消化道和泌尿生殖道疾病,对我国养鸡业构成严重威胁。而新城疫也是危害我国养鸡业的重要传染病。疫苗免疫是公认的预防这2种疫病的方法。本研究利用自制的3批ND-IB二联灭活疫苗,分别对28日龄易感雏鸡和120日龄开产前母鸡进行免疫,利用HI试验测出试验鸡群的抗体值。结果表明28日龄易感雏鸡在2个月内,开产前母鸡在3个月内均受到有效保护,为本批新 支二联疫苗的实际临床免疫接种提供了依据。      

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)应用效果研究

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)(三联苗(Re-9株))为国内首个采用基因重组H9亚型禽流感疫苗株研制的新支流三联灭活疫苗.为研究疫苗上市后的实际应用效果,使用7日龄AA肉鸡和260日龄产蛋期蛋鸡评价三联苗(Re-9株)有效性.结果显示:肉鸡免疫后14 d...     

羊传染性脓疱病毒疫苗株和野毒株GIF基因比较分析

羊传染性脓疱(orf)是由羊传染性脓疱病毒(orf virus,ORFV)感染引起的绵羊和山羊的一种接触性人兽共患病。粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)/白细胞介素(IL-2)抑制因子(GIF)基因为ORFV编码中晚期病毒基因,它能够与GM-CSF、IL-2结合并且抑制二者的活性,从而抑制宿主抗病毒作用。为了比较疫苗毒株和流行毒株间GIF的差异,本试验扩增并测定了ORFV疫苗株和野毒株的GIF基因序列,比较分析了ORFV疫苗弱毒株和野毒株GIF基因的核酸水平和氨基酸水平的差异情况,以及二、三级蛋白结构。结果表明:本次测定的ORFV疫苗株与野毒GIF基因核苷酸序列相似性为94.3%,氨基酸序列相似性为92.5%,两者的蛋白三级结构预测上也有差异。本研究结果为该病的防控提供了参考依据。     

牛传染性鼻气管炎弱毒疫苗免疫抗体水平与保护效力的关系

利用微量血清中和试验和攻毒试验、牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗检测免疫后牛血清中牛传染性鼻气管炎病毒的抗体效价及其与保护效力的平衡关系。40头牛其中弱毒活疫苗免疫牛30头,对照牛（抗体阴性牛）10头,采用不同剂量免疫（10^3.5～10^6.5TCID50／mL）,按抗体效价高低将实验动物分,并用IBRV LN01／08强毒株攻击,将攻毒保护结果与攻毒时抗体效价结果平行比较分析,结果显示,当IBRV抗体效价高于1：6时,疫苗免疫可以对牛产生良好的保护效力,保护率在80％以上,低于1：6但高于1：3时,免疫苗抗体阳性牛攻毒后保护率近78％。试验结果显示牛传染性鼻气管炎活疫苗的抗体水平于保护效力之间存在一定的平行关系。