绵羊胚胎移植产业化技术应用研究

为了进一步提高绵羊胚胎移植的产业化水平,对绵羊胚胎移植过程中的发情鉴定技术、供体和受体发情同期化调控技术、供体羊配种方法、超数排卵技术、输卵管胚胎移植技术等关键技术进行了进一步研究改进。在此基础上进行了推广验证,结果表明:绵羊每只每次超排平均获得可用胚胎8.1枚;绵羊胚胎移植受胎率60.5%;产羔率56.0%。这一结果比国家“十五”期间的“万枚胚胎工程”产羔率提高了10%,进一步提高了绵羊胚胎移植的产业化水平。     

提高牛胚胎移植效果的技术措施

胚胎移植已成为养殖场必要的育种手段之一。了解包括供(受)体牛选择、同情发情、超数排卵、胚胎采集、胚胎分割与移植在内的连续不同的技术环节,有助于胚胎移植技术体系的建立与优化。本文综述了提高牛胚胎移植效果技术的原理及方法等,以促进该技术在牛育种中的广泛应用。     

对牛胚胎移植的研究及认识

目前在全世界范围内,为扩大优秀家畜资源,继家畜人工授精后,牛胚胎移植在生产中的应用已经得到广泛的认可。自1951年美国第一头胚胎移植牛诞生以来,该项技术逐渐完善,1975年在美国丹佛市成立了国际胚胎移植学会,1976年牛的非手术移植获得成功,使该项技术在生产中的应用更易于操作,随之在1977年进入了商业化应用阶段。目前据不完全统计、全世界年产胚胎移植牛超过35万头,美国、法国等发达国家,每年参加后裔测定的青年公牛80％来自胚胎移植牛所产的后代。我国牛     

我国奶牛胚胎移植的现状及问题

<正>1975年我国开始进行奶牛胚胎移植的研究,经过十几年摸索、试验及引进专家、技术、设备后,目前已初步形成了一支能基本掌握牛胚胎移植全套技术的专业队伍.但从总体上看,我国奶牛胚胎移植技术发展缓慢,水平不高,效果不好,还不能应用于生产.本文就当前我国奶牛胚胎移植的现状、存在问题作一综述.     

犬的胚胎移植初步试验

试验摸索了犬输卵管和子宫角胚胎移植的方法和技术,为犬转基因和克隆研究提供技术参考,同时了解输卵管胚胎移植和子宫角胚胎移植对移植成功率的差异.通过对同期发情同步配种的供体北京犬进行输卵管和子宫角冲卵、受体北京犬输卵管和子宫角鲜胚移植,结果在8只受体犬中有1只犬于手术后成功怀孕并顺利产下1头胚胎移植雄性幼犬.子宫角回收法的胚胎回收率稍低于输卵管回收法.     

奶牛胚胎移植关键技术及应用前景

奶牛胚胎移植是快速扩繁高产奶牛的最佳途径。介绍了牛胚胎移植的最新发展关键技术,并分析了牛的同期发情、胚胎冷冻保存等技术在动物育种上的应用前景。     

羊胚胎移植技术及其应用

胚胎移植,又称借腹怀胎、受精卵移植,是通过超数排卵技术获得品种优良母畜的早期胚胎,同时对受体母畜进行同期发情处理,使其处于发情期的同一阶段,将早期胚胎移植到生理状态相同的受体母畜生殖道或子宫内,使之继续发育成独立个体的生物繁殖技术。胚胎移植是继人工授精技术之后的又一项加快家畜扩大繁殖的先进技术,几十年来在羊纯种繁殖和快速扩繁等生产中得到了广泛的应用。本文就羊胚胎移植中的技术环节及其应用现状进行讨论,以期对该项技术在生产中的规范应用提供一定的理论指导。     

提高冷冻胚胎移植受胎率的综合措施

自1951年美国诞生第一头胚胎移植牛以来，胚胎移植技术在奶牛方面得到了很快的发展并被直接应用于奶牛的育种和商业运作。1976年奶牛的非手术法移植获得成功，简化了操作程序，减少了因手术对供、受体牛的伤害，使奶牛的胚胎移植迅速得到推广和商业化应用。许多国家相继成立了奶牛胚胎移植公司，进行胚胎的进出口业务和技术服务。胚胎移植妊娠率的高低是决定移植成本的主要技术指标，     

提高牛羊胚胎移植效率的因素分析

胚胎移植技术对于动物繁衍生息至关重要.随着胚胎移植效率的不断提高,增加繁殖数量,提高繁殖质量,对于我国优秀品种家畜的繁衍具有重要意义.基于此,通过开展牛、羊胚胎移植试验,分析提高牛羊胚胎移植效率的因素,为我国牛羊的生产和繁殖提供一定的依据和理论参考.     

小鼠非手术胚胎移植方法

<正>小鼠作为发育和生殖生物学研究中最常见的模式动物,其研究的主要环节离不开胚胎移植技术。小鼠非手术胚胎移植法是将供体小鼠的胚胎经子宫颈移植到受体小鼠子宫内的一种移植方法。它与手术法相比,简单快捷,对小鼠的损伤小,大大简化了胚胎移植的操作过程。早在1951年,R.A.Beatty首先对动物非手术胚胎移植法进行了报道,随后L.Marsk、T.     

中国荷斯坦牛冷冻胚胎分割移植试验研究

牛胚胎冷冻的成功，使胚胎移植技术不受时间、地域的限制，并且可以做到对受体进行选择，从而可提高移植妊娠率；牛胚胎分割的成功，是增加胚胎数目和生产同卵双犊或多犊、获得更多牛犊的一个有效方法。如果将胚胎冷冻和胚胎分割技术结合起来，那未就可以达到既增加胚胎数目，降低胚胎移植成本，又利于胚胎移植技术在生产中推广应用的双重目的，为此开展此项研究。将用１０％甘油为冷冻剂，８枚７日龄中国荷斯坦奶牛的冷冻胚胎，在３５℃水浴解冻，用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液脱除抗冻剂，７枚可用胚胎用简单方法分割成１４枚半胚，将裸半胚成对移植于与胚胎日龄同步的７头受体牛。结果３头妊娠，移植妊娠率为４２．９％（３／７），共产５头牛犊，其中２头产同卵双犊，半胚产犊率为３５．７％（５／１４），按整胚计算产犊率为７１．４％（５／７），较同期未分割的冷冻胚胎的产犊率３７．８％（１７／４５）提高３３．６个百分点。     

采胚方法对波尔山羊胚胎移植效果的影响

采用2种采胚方法研究了64只波尔山羊的胚胎移植效果。结果表明:输卵管采胚法的胚胎回收率极显著高于(P<0.01)子宫角采胚法,且前者的获胚数与可用胚数均显著高于(P<0.05)后者,而两者的黄体数则差异不显著(P>0.05),说明采用输卵管采胚法所采集的胚胎数量与质量均优于子宫角采胚法;而子宫角移胚法的受体妊娠率及产羔率均极显著高于(P<0.01)输卵管移胚法。试验还表明,输卵管采胚法对处理供体术后的发情率有一定的不良影响,故在山羊胚胎移植中应优先采用子宫角采胚法回收胚胎。     

不同因素对西藏阿旺绵羊胚胎冷冻与移植效果的影响

为探究西藏阿旺绵羊推行胚胎移植及胚胎冷冻技术的可行性,以阿旺绵羊为供体,澳湖羊为受体,探讨发情期内不同月份对阿旺绵羊超排效果的影响、不同发育阶段鲜胚和移植数量对母羊受胎率及产羔率的影响,以及冷冻方法对胚胎移植的影响。结果显示：发情期7月超排组平均可用胚数(3.95±4.23)显著低于10月超排组(5.45±4.03);阿旺绵羊胚胎移植2枚桑椹胚的受体妊娠率最高,达到81.81%,产羔率达57.58%,具有显著性差异;阿旺绵羊胚胎程序化冷冻组受体妊娠率为35.48%,显著优于玻璃化冷冻组受体妊娠率13.63%。以上结果表明,西藏推行阿旺绵羊胚胎移植技术的可行性较高。     

培养用液对小鼠胚胎移植效果的影响

为提高小鼠胚胎移植的成功率,探索了合适的胚胎培养用液,研究了原核移植和囊胚移植对产仔率的影响.结果表明,CZB培养液适合ICR小鼠原核胚胎培养,囊胚发育率达到90.67%,囊胚移植的产仔率为53.33%,高于原核移植的34%.受体和供体不必同期处理,前者可比后者晚1 d处理.     

影响山羊胚胎移植效果的因素初探

为探讨最佳的胚胎移植方案,提高胚胎移植效率,试验以不同受体山羊为研究对象,比较了不同受体品种、移植胚胎数目、不同季节等因素对胚胎移植效果的影响。结果表明:不同品种受体和移植季节对胚胎移植效果影响不显著(P>0.05);胚胎移植数目对妊娠率没有显著影响(P>0.05),但移植一枚胚胎的胚胎受孕率显著高于移植二枚和三枚胚胎(P<0.01)。     

体细胞核移植法获得转人乳铁蛋白基因克隆山羊妊娠的研究(英文)

[Objective] The aim of this study is to understand the effects of donor cell type,embryo stage,number and transfer position on the efficiency of goat transgenic clone.[Method] Using somatic cell nuclear transfer technology,the single goat fetal fibroblasts(GFF)and mammary gland epithelial cells(GMGE)harboring human lactoferrin(hLF)gene were transferred to the enucleated oocyte.Reconstructed karyoplast-cytoplast couplets were fused,activated,and cultured in vitro.Embryos at 2-8 cell stage were transferred into oviduct of synchronized recipients,and blastocysts were transferred into uterine horn.[Result] The pregnancy rate was similar between GFF and GMGE(oviduct transfer:26.47% vs.20.00%),and between oviduct transfer and uterine horn transfer(26.47% vs.25.00%)for GFF group;pregnancy rate in the group with the mean number of embryo transferred per recipient of 21.2 was significantly higher than in those the 5.93 group and 9.64 group(40.00% vs.26.67% and 21.43%).[Conclusion] These results indicate that pregnancy rate of goat transgenic clone couldn't be affected by donor cell type,embryo stage and transfer position but be done by the number of embryo transferred per recipient.In addition,the study also suggests the feasibility of making transgenic goat using GMGE as donor cells.     

Pregnancies Resulting from Transgenic Embryos with Human Lactoferrin Gene Produced by Somatic Cell Nuclear Transfer

[Objective] The aim of this study is to understand the effects of donor cell type,embryo stage,number and transfer position on the efficiency of goat transgenic clone.[Method] Using somatic cell nuclear transfer technology,the single goat fetal fibroblasts(GFF)and mammary gland epithelial cells(GMGE)harboring human lactoferrin(hLF)gene were transferred to the enucleated oocyte.Reconstructed karyoplast-cytoplast couplets were fused,activated,and cultured in vitro.Embryos at 2-8 cell stage were transferred into oviduct of synchronized recipients,and blastocysts were transferred into uterine horn.[Result] The pregnancy rate was similar between GFF and GMGE(oviduct transfer:26.47% vs.20.00%),and between oviduct transfer and uterine horn transfer(26.47% vs.25.00%)for GFF group;pregnancy rate in the group with the mean number of embryo transferred per recipient of 21.2 was significantly higher than in those the 5.93 group and 9.64 group(40.00% vs.26.67% and 21.43%).[Conclusion] These results indicate that pregnancy rate of goat transgenic clone couldn't be affected by donor cell type,embryo stage and transfer position but be done by the number of embryo transferred per recipient.In addition,the study also suggests the feasibility of making transgenic goat using GMGE as donor cells.     

应用Logistic回归分析山羊胚胎移植妊娠率影响因素的研究

选用30只波尔山羊作供体,89只奶山羊作受体进行胚胎移植,采用LOGISTIC回归分析影响受体妊娠率的影响因素。结果表明:受体发情状况和移植方式对妊娠率产生决定性作用,胚胎发育阶段也会极显著影响妊娠率。LOGISTIC回归分析可有效的应用于繁殖类试验。     

体细胞核移植法获得转人乳铁蛋白基因克隆山羊妊娠的研究

[目的]探讨供体细胞类型、移植胚胎发育阶段、数量及部位对山羊转基因克隆效率的影响。[方法]利用体细胞核移植技术将转染人乳铁蛋白基因hLF的山羊胎儿成纤维细胞(GFF)和乳腺上皮细胞(GMGE)移植到MII期去核卵母细胞内,经电融合、激活、体外培养后,2~8细胞期克隆胚被移植到同期发情山羊的输卵管内,囊胚被移植到子宫角内。[结果]GFF与GMGE的妊娠率相近(输卵管移植妊娠率分别为26.47%及20.00%);在GFF,输卵管移植的妊娠率与子宫角内移植妊娠率接近(分别为26.47%及25.00%),输卵管移植胚胎平均数为21.2组的妊娠率显著高于5.93组和9.64组(40.00%及26.67%,21.43%)。[结论]供体细胞类型、移植胚胎的发育阶段及移植部位对山羊转基因克隆效率的影响不大,但对于输卵管移植,受体羊移植胚胎数量对妊娠率有明显的影响。此外,该研究还提示了利用成年羊乳腺上皮细胞制作转基因动物的可行性。     

安哥拉山羊胚胎的手术回收和移植

对３５只安哥拉山羊超排处理，配种后第３天放置阴道海绵栓，第６日由子宫手术回收胚胎。３１只发情配种的供体，共回收胚胎２０４枚，平均每只供体获可用胚４．３±３．９６枚。其中卵巢有功能黄体无大卵泡的６只供体，回收胚胎５１枚，回收率为８７．１５％±１５．９８％，平均每只获可用胚８．１±２．９６枚。卵巢上有大卵泡、或子宫及输卵管有病变者可使回收率和可用胚胎数严重降低。由于配种后放置了阴道栓，８只有黄体退化倾向的供体，平均每只仍获得可用胚４．６枚。移植桑椹胚和囊胚的５１只受体，３６只妊娠，妊娠率为７０．６％．移植４～１６细胞胚胎的对照组，妊娠率为５１．６％．本研究还证明，移植单胚较移植双胚的胚胎成羔率提高２８％以上