高粱同源四倍体与二倍体胚胎发育的比较Ⅱ：胚及胚乳发育的比较

观察了高梁同源四倍体与地倍体受精后胚及乳发育的全过程。四倍体高梁在受精后胚胎发育的进程上均较其二倍体母体滞后，而且四倍体胚胎的发育在进度上很不整齐。     

柑桔珠心胚的高频离体诱导及其发生早期的生化标记研究

用ＭＴ＋ＢＡ（１０ｍｇ／Ｌ）＋５％蔗糖诱导锦橙幼龄受精与未受精胚珠发生珠心愈伤组织，转入ＭＴ＋５％半乳糖后促进珠心愈伤组织的高频体胚发生，用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦研究珠心愈伤组织胚发生早期过氧化物酶（ＰＯＤ）同工酶的表达，发现在固体培养和悬浮培养方式中不同的分化培养基上，球形胚及球形胚形成前１０天的培养物都存原一个分培养前的胚性愈伤组织所没有酸性ＰＯＤ同工酶，该同工酶可作为胚胎发生早期的生化标记。     

多胚水稻品系APⅣ反足细胞多样性的观察

利用ＧＭＡ切片技术对多胚水稻品系ＡＰⅣ反足细胞的研究表明，ＡＰⅣ反足细胞在数目、形态、位置、分裂方式，分化的方向和功能等都存在多样性，说明反足细胞在胚囊发育中的表现是复杂的。     

供体细胞核对山羊重构胚发育能力的影响

选择不同品种的山羊交配所获的８细胞期至桑椹胚期的胚胎或重构胚发育至相同胚期的卵裂球，以ＬＲＨ注射后２６～２８ｈ回收的白山羊去核成熟卵作受体组建重构胚或再重构胚，经琼脂糖包埋，移入山羊输卵管内，培养５～６ｄ后观察发育状态。实验结果表明，杂种胚供核组建的重构胚和再重构胚发育能力明显优于纯种胚供核组建的重构胚和再重构胚，因此从细胞水平证明了杂种优势；母型ｍＲＮＡ对重构胚和再重构胚的发育起一定的调控作用。     

干细胞因子对小鼠附植前胚胎体外发育的影响

为优化胚胎体外培养体系,提高胚胎体外培养发育率和发育质量,以昆明小鼠体内受精胚、体外受精胚和孤雌激活胚为研究对象,研究不同浓度干细胞因子对小鼠不同来源胚胎体外发育的影响。结果表明:在KSOM培养液中,小鼠自然受精胚、体外受精胚和孤雌激活胚的卵裂率和桑椹胚率均无显著差异(P0.05),但IVN胚和IVF胚的囊胚发育率及囊胚细胞总数显著高于孤雌激活胚;培养液中添加不同浓度的干细胞因子对小鼠自然受精胚和孤雌激活胚的卵裂率、桑椹胚率、囊胚发育率和囊胚细胞总数都没有显著的影响(P0.05),但干细胞因子浓度为100ng·mL-1时,小鼠体外受精胚的桑椹胚率和囊胚发育率显著高于对照(P0.05)。     

供体细胞核对山羊重构胚发育能力的影响

选择不同品种的山羊交配所获的８细胞期至桑椹胚期的胚胎或重构胚发育至相同胚期的卵裂球，以ＬＲＨ注射后２６～２８ｈ回收的白山羊去核成熟卵作受体组建重构胚或再重构胚，经琼脂糖包埋，移入山羊输卵管内，培养５～６ｄ后观察发育状态。实验结果表明，杂种胚供核组建的重构胚和再重构胚发育能力明显优于纯种胚供核组建的重构胚和再重构胚，因此从细胞水平证明了杂种优势；母型ｍＲＮＡ对重构胚和再重构胚的发育起一定的调控作用。     

油松无性系雌雄配子体的形成及胚胎发育

油松雄球花于６月下旬开始分化，小孢子发生在翌年的４月２０日左右，４月底或５月初散粉．成熟的花粉粒为４个细胞．雌球花７月中旬分化，次年４月下旬或５月上旬形成大孢子母细胞，经减数分裂后，形成大孢子．雌配子体经历游离核、细胞化、颈卵器及卵细胞形成等阶段后，５月下旬受精，从传粉到受精约需１３个月．胚胎发育包括原胚、胚胎选择及发育和胚胎成熟３个阶段，历时３个半月．不同无性系在雌雄球花发端时间和大小孢子发育进程上存在较大差异，观察的５个无性系进入同一发育阶段的时间最多可相差１０ｄ，平均变幅为一周上下．该文还对新梢生长与花芽分化、胚珠和花粉败育作了讨论．     

甘薯体细胞胚胎发生遗传变异的RAPD分析

以“郑红５”等６个甘薯品种为材料,通过离体培养诱导体细胞胚胎发生与植株再生。利用ＲＡＰＤ分子标记方法,在ＤＮＡ水平上分析甘薯品种间遗传差异以及体细胞胚胎无性系的遗传变异。筛选了４５个随机引物,其中７个引物ＰＣＲ扩增后在品种间和体细胞胚胎无性系中表现ＲＡＰＤ多态性,并在相应胚性愈伤组织中检测到少数ＲＡＰＤ变异位点。证明利用ＲＡＰＤ分子标记方法鉴定甘薯体细胞胚胎发生遗传变异的可行性,以及为通过离体培养     

普通小麦×硬粒小麦种间杂交的胚胎学观察

 对普通小麦与硬粒小麦杂交时的受精情况及杂种胚和胚乳的发育情况进行了观察。获得主要结果如下：⒈普通小麦与硬粒小麦种间具有较好的可交配性。在较多子房中发生了正常的双受精作用。杂种胚和胚乳的发育，前期与亲本接近，后期进程有所减缓，但胚胎分化是完善的。同时，在部分子房中观察到受精迟缓，仅发生单受精作用或受精失败等异常情况。⒉普通小麦与硬粒小麦杂交时，少见胚和胚乳发育中途退化解体的情况。此外，杂种胚囊中助细胞和反足细胞的退化情况，与普通小麦自交时情况相似。     

东方百合杂交种胚囊发育与双受精过程细胞学观察

以东方百合索蚌(Sorbonne)和元帅(Acapulca)为试材,采用石蜡切片法和荧光显微技术研究其胚囊发育,观察花粉管生长和双受精过程,研究适合百合的授粉及进行胚抢救的时期.结果表明:百合大孢子的发育形式为贝母型,其胚囊发育最终形成育性正常的7细胞胚囊,-2级的胚囊已经发育成熟,适宜授粉受精.异花授粉后花粉管3～5d到达胚囊,并释放出2个精核进行双受精.百合胚胎发育经过合子、原胚、球形胚、子叶型最终发育成熟.胚乳发育与胚胎同步,属于核型胚乳,在形成球形胚后胚乳细胞逐渐形成细胞壁.授粉后45d进行胚抢救较好.     

用玻璃化冷冻保存山羊胚胎的研究

试验用玻璃化冷冻保存山羊胚胎１４２枚，其中３５枚移植受体１３只，妊娠率和产羔率分别为６１．５％（８／１３）和４０％（１４／３５）；１０７枚（桑椹胚４４枚和囊胚６３枚）在液氮中保存３和４．５年后解冻与培养。结果表明，桑椹胚形态和发育正常率分别为４７％（２１／４４）和３８．６％（１７／４４），囊胚分别为６３．５％（４０／６３）和４７．６％（３０／６３）。囊胚解冻后形态正常率和发育率显著高于桑椹胚（Ｐ＜０．０５）。     

羊胚胎生产和胚胎移植

综述了绵羊和山羊胚胎生产和胚胎移植各项技术的研究进展，包括超数排卵、体内受精与发育；成熟卵泡卵母细胞与腔前卵泡卵母细胞的体外成熟、体外受精与发育；利用极体生产胚胎以及利用胚胎生产胚胎的胚胎分割与细胞核移植克隆技术；胚胎的回收、检胚与胚胎分级，以及供体与受体的同期发情处理和胚胎移植技术。     

小鼠电融合胚胎发育影响因素的研究

电融合技术，是获得四倍体胚胎的主要手段．本试验研究了各种不同因素，对小鼠电融合胚发育的影响．结果表明，电刺激前后，使用不同的操作液对融合胚发育有影响．电刺激前使用Ｍ２液、电刺激后在Ｗｈｉｔｔｅｎ氏液中融合，然后转入ＣＺＢ液中培养，这一操作体系（Ｍ／Ｗ—ＣＺＢ）效果最好，融合胚的囊胚发育率为８０．５％，显著高于Ｍ／Ｗ—Ｗ，Ｗ／Ｗ—Ｗ，Ｗ／Ｗ—ＣＺＢ组，后者的囊胚发育率分别为０，０，５４．５％（Ｐ＜０．０５）．试验还发现，刺激强度为１．０ｋｖ／ｃｍ，８０μｓ；１．０ｋｖ／ｃｍ．４０μｓ和０．８ｋｙ／ｃｍ，８０μｓ时，融合囊胚的发育率分别为７９．０，８１．９和７１．１％．ＨＣＧ注射后４７ｈ、４８ｈ的２—细胞胚胎的融合胚发育率，显著高于（Ｐ＜０．０１）ＨＣＧ注射后４２ｈ、４４ｈ和４６ｈ的，囊胚发育率分别为８２．９，８０．６，０，０和２２．８％．     

‘塔1’芦柑无核机理探讨

胚乳退化继而诱发胚胎中途败育是导致‘塔１’无核芦突变体形成的主要原因。‘塔１’芦柑雌配子体初期发育正常,并能顺利完成授粉受精过程,胚肥能发育到球形胚,早心形胚。     

桂花胚和胚乳发育过程的研究

采用石蜡切片法，观察了桂花胚和胚乳的发育过程。结果表明，桂花胚胎发生类型为柳叶菜型。其卵细胞受精后，合子经过一段时间休眠，于10月中，下旬才进行第1次分裂，合子分裂通常发生在初生胚乳核分裂之后，合子经棒形胚，球形胚，心形胚，至果实成熟时发育为鱼雷胚。心形胚时期，胚柄最为发达。桂花的胚乳发育类型为细胞型。二核胚囊时，珠被内层特化为珠被绒毡层，球形胚时，珠被绒毡层细胞发生形变，最后构成种皮的最内层。     

不同发育时期鼠胚对一步细管内冷冻一解冻耐受性的研究

本试验采用一步添加防冻剂（１０％甘油）、１２．５％蔗糖一步细管内脱除甘油，３７℃温水快速解冻法，对３９３枚处于不同发育时期的优良胚胎做了冷冻研究，旨在探索不同发育时期的胚胎对一步细管内冷冻解冻耐受性存在的差异，为哺乳动物胚胎冷冻和移植提供资料。解冻后体外培养结果表明，晚期桑椹胚（包括致密桑椹胚和致密后桑椹胚两个阶段）的抗冻能力最强，体外发育率致密桑椹胚为８０．０％（３２／４０）、致密后桑椹胚为７８．０％（３２／４１）；早期桑椹胚和早期囊胚次之，体外发育率为６２．２％（２８／４５）和６６．１％（３９／５９）；囊胚和扩展囊胚的抗冻能力最低，体外发育率仅为５１．６％（３１／６０）和５４．５％（１８／３３）。     

K型小麦雄性不育系诱导单倍体胚的胚胎学观察

从胚胎学方面研究了粘果山羊草细胞质的小麦雄性不育系Ｋ８３（２１）３５Ａ与保持系８３（２１）３５Ｂ杂交的双受精过程，胚和胚乳的发育特点，以及单倍体胚和孪生发生的规律。结果表明：双受精过程、胚和胚乳的发育与普通小麦自交相似。ｎ型单倍胚来自助细胞的孤雌生殖；ｎ－ｎ型双胚中的单倍体胚来自助细胞，二倍体胚来自受精卵。适当延迟授粉，能提高单倍体发生的频率。     

安格斯（Angus）牛冻胚洲际间引种试验

用安格斯牛７日龄冻胚１６枚，在液氮中保存８９４ｄ后，用３６℃水浴解冻（２５Ｓ），全部回收。在室温２７℃条件下，用１０％蔗糖一步脱除抗冻剂（甘油）１０ｍｉｎ后，移入２０％犊牛血清ＰＢＳ１０ｍｉｎ，再移人同样浓度的犊牛血清ＰＢＳ中１０ｍｉｎ，按常规形态鉴定方法．对胚胎评级，１０枚为可用胚胎，解冻后胚胎可用率为６２．５％，将１０枚可用胚胎用非手术法，移入发情周期与胚胎发育期同步的５头受体牛，结果２头妊娠，移植妊娠率为４０％。妊娠足月后，２头受体牛各产公犊１头，试验结果表明，在液氮中保存８９４ｄ之久的安格斯牛冻胚，进行洲际间引种能够成功，这也是安格斯牛冻胚洲际间引种，在我国首次获得成功。     

奶牛胚胎一步冷冻保存的研究

用ＦＳＨ－ＰＧＦ＿（２α）超排黑白花奶牛２２头，以非手术方法采得７～８日龄胚胎６８枚，其中４５枚胚胎用于一步冷冻试验。水浴解冻后共回收４０枚胚胎。用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖一步除去保护剂，胚胎形态完好率为９０％（３６／４０）；荧光染色阳性率为８７．５％（７／８）；体外培养发育率为７５％（６／８）；冻胚移植受体妊娠率为４３．５％（１０／２３）。     

超速冷冻8—细胞鼠胚

用３．５Ｍ和２．５Ｍ ＤＭＳＯ作冷冻保护剂进行超速冷冻８－细胞鼠胚。用前者作保护剂的鼠胚，无论在体外培养和体内发育的情况都好于后者。前者中的８－细胞鼠胚解冻后的存活率为７８．９％；存活胚胎体外发育到囊胚的比率为８３．４％，体内附植率为６３．９％，胎儿形成率为４３．２％。实验证明，超速冷冻保护存胚胎是一种省时，省力，省钱的好方法。