蓖麻蚕后部丝腺体5SRNA的全核苷酸顺序(摘要)

我们用Sanger等人~(32)p—前标记的方法,测定了蓖麻蚕后部丝腺体甘氨酸转移核糖核酸的全结构.为了快速和准确地测定不含修饰成分和修饰成分少的RNA的一级结构,我们除了仍部分使用前标记指纹图谱法外,结合使用Donis一Keller等人的凝胶直读法和Stanley及Vassilenko末端鉴法,并作了一些改进,测定了蓖麻蚕后部丝腺体5SRNA的全核苷酸顺序.取五龄盛食期蓖麻蚕(白黄种)后部丝腺体,抽提小分子RNA,将小分子RNA用碱性磷酸单酯酶处理,脱去5、—P,然后分别将单酯酶处理过的未处理过的小分子RNA在10%聚丙烯酸胺平板凝胶中进行电泳,分离制备5脱磷和不脱磷的5SRNA,备用.     

三眠蚕诱导剂SM-1对家蚕丝蛋白合成调控机理的研究——Ⅰ.SM—1对~3H-甘氨酸参入丝蛋白速率和对后部丝腺等有关器官的细胞亚显微结构的影响

本文从3H-甘氨酸参入丝心蛋白的速率和某些有关器官的细胞亚显微结构的变化等方面.初步探讨了3眠蚕诱导剂SM—1对家蚕丝蛋白合成的调控机理.试验结果表明:(1)SM—1处理后.对丝腺体的成长有明显的促进作用.同日龄幼虫的后部丝腺干重,处理组较对照组高10倍左右,(2)SM—1处理后,3H-甘氨酸参入丝心蛋白的速率明显增快.最高参入速度比对照组提早3—4天,处理组的参入速度,最高峰时可较对照组高5倍左右;(3)与丝蛋白合成密切有关的一些细胞的亚显微结构发生明显变化.后部丝腺细胞中粗面内质网增加,核糖体和高尔基体明显增多,核的动态变化更为显著,脂肪体中贮存颗粒亦发生有规则的变化.     

绢丝腺的丝蛋白质合成(二)

3.作为遗传情报的DNA蚕的DNA是10~(11)道尔顿大的巨大分子,从胚子发生在器官分化开始到幼虫终龄为止,后部丝腺的染色体DNA,在现行品种(多丝量系)复制30回,到胚子反转24小时后,此间后部丝腺细胞分裂10回,以后不伴细胞分裂,核分裂的DNA复制20回,结果最后复制(5龄第3目前后)终了时的后部丝腺细胞,成为近百万的多倍体.这在形态学上似与分枝状之核对应.丝素基因在每染色     

蓖麻蚕线粒体基因组中nd1及其侧翼tRNA基因的克隆与结构分析

按KoichiroTamura等 (1988)的方法制备出蓖麻蚕线粒体DNA ,用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶解后 ,以pSK(+)(Ampr)为载体进行克隆 ,获得 1个 3 3kb的克隆片段。测序结果表明 ,所测序列包括部分 16SrRNA、完整的tRNA Leu ,nd1和tRNA Ser基因。其中 16SrRNA(3’端部分 )、nd1基因与家蚕具有很高的同源性。同时以nd1基因为依据构建了 17种动物的分子进化树 ,显示出蓖麻蚕与家蚕、野蚕有最近的演化关系。根据tRNA Leu和tRNA Ser基因的一级结构 ,推定了可能的二级结构 ,并与家蚕进行了比较。     

家蚕丝素基因表达水平的定量分析

采用实时定量RT-PCR方法,对丝素轻链基因(fib-L)、丝素重链基因(fib-H)、P25基因在家蚕幼虫不同组织和不同发育时期的表达进行了定量分析。结果发现3种丝素基因除主要在5龄幼虫的后部丝腺中表达外,在其它组织如脂肪体和中部丝腺中也有一定程度的表达;在4龄眠期的后部丝腺中3种丝素基因也有一定的表达水平,其中fib-L在这一时期的表达量较高。同时发现在5龄第3天和第5天的后部丝腺中,fib-H、fib-L与P25在mR-NA水平上的摩尔比分别为9∶18∶1和19∶32∶1,推测丝素基因的表达可能具有转录后调控,此结果说明家蚕丝素基因的表达可能具有更加精细的调控机制。     

三眠蚕诱导剂SM-1对家蚕丝蛋白合成调控机理的研究——Ⅱ.SM-1对后部丝腺DNA合成速率和核酸含量的影响

本文探讨三眼蚕诱导剂SM一1对家蚕丝蛋白合成的调控机理.试验结果表明:(1)sM-1处理后,家蚕后部丝腺DNA中~3H-胸腺嘧啶核苷的参入速率明显增快.SM一1诱导三眠蚕在四龄第2天~3H-胸腺嘧啶核苷的参入量最高,比同时的对照高近1倍;五龄第2天SM—1处理区,在五龄第3天~H-胸腺嘧啶核苷的参入速率有所增快.(2)SM-1诱导的三眠蚕,后丝腺DNA和RNA含量的高峰比对照提前4-6天出现,且其末龄(四龄)DNA和RNA含量的增减趋势与对照末龄(五龄)DNV和RNA含量的增减趋势非常相似.(3)五龄前期用SM一1处理家蚕幼虫,对后丝腺DNA和RNA含量增加具有暂时的促进作用.     

家蚕后部丝腺细胞数与茧质性状关系的研究

采用OLYMPUS位相差显微镜(10×20)观察计数家蚕后部丝腺细胞数,结果得知:家蚕后部丝腺一侧细胞数在180—260个之间,标准差大多在5—25个之间;不同品种后部丝腺细胞数存在极明显差异;同一品种雌雄间差异不显著,其细胞数的分布属正态分布;同一头家蚕的两条后部丝腺的细胞数,少数个体存在一定的开差。后部丝腺细胞数与茧质性状的线性回归及离回归方差均达到极显著水平;后部丝腺细胞数杂种优势率与茧质件状杂种优势率大多没有显著的相关关系;说明后部丝腺细胞的多少是丝素蛋白产量高低的一个条件,而每个细胞合成、分泌丝素蛋白的能力强弱是产量高低的另一条件。     

印度的丝绸业

<正> 一、印度的丝绸业1.概况:印度的丝绸业有悠久的历史,是传统工业之一,是世界上唯一拥有家蚕丝、柞蚕丝、蓖麻蚕丝和姆加丝四个品种的国家。1986年,印度产丝8,785吨,比上一年增加12.4%,跃居世界产丝国的第二位,超     

蓖麻蚕简易上簇法研究（摘要）

我们以降低蓖麻蚕生产的成本，提高经济效益为目的，从1990年开始，进行蓖麻蚕饲养方法及简易上簇(制作平板丝)方法的研究，现将平板丝制作方法简要介绍如下。     

家蚕5龄幼虫不同时期中部丝腺细胞蛋白质双向电泳分析

对5龄家蚕不同发育时期的中部丝腺细胞蛋白质变化进行分析研究,有利于发现与丝胶蛋白分泌有关的功能蛋白质。采用蛋白质双向电泳和图像分析技术,发现同一区段的家蚕中部丝腺细胞在5龄第2天、第4天和熟蚕期的蛋白质组成具有显著差异:中部丝腺前部区段5龄第2天表达的特异性蛋白质斑点有8个,第4天有16个,熟蚕期有24个;中部区段5龄第2天表达的特异性蛋白质斑点有9个,第4天有33个,熟蚕期有30个;后部区段5龄第2天表达的特异性蛋白质斑点有10个,第4天有7个,熟蚕期有25个。     

关于蓖麻蚕茧的生产发展问题——蓖麻蚕基地建议及科学开发学术讨论会上的发言

蓖麻蚕(包括木薯蚕等)已成为我国蚕业中的一个种类.在五十年代初期,生物学家朱洗先生曾大力提倡过,但至今还为数不多.主要是经济效益较低.也即蓖麻蚕茧的实用价值低于桑,柞蚕的下脚茧.而且蓖麻茧丝染色亲和力差等.以致蓖麻绢丝与用桑,柞蚕下脚茧为原料的桑,柞绢丝竞争力较差.但目前由于绢丝和用短丝混纺的混     

提高母黄牛冷配情期受胎率的几点体会

<正> 为了提高母黄牛冷配情期受胎率,我县在多年耕牛改良工作实践中,注意到下列几个技术问题,现提出来供同行参考。 (一)掌握卵泡发育规律,根据笔者资料统计,母黄牛卵泡发育周期平均为21.74±0.39(10—33)天。其中分布在18—25天(20.82±0.2天)占71.56％,分布在10—17天和26—33天者不足三分之一。卵泡从第1期(出现期)发育至第3期(成熟期)的持续时间平均为27.93±0.72小时(6—53小时)。卵泡在第1期或第2期(增长期)时输精,情期受胎率分别为31.3％(10/32)与39.0％     

蓖麻蚕5龄期间营养成分及活性成分变化研究

为了探明不同蓖麻蚕品种在5龄蚕期间各种营养和活性成分的变化规律,以B2、朝白、高白、桂B、南一、江广6个蓖麻蚕品种为原料,研究5龄起蚕第1天、第2天、第3天、第4天、第5天的粗脂肪、粗蛋白、氨基酸以及多酚、黄酮、多糖、生物碱、DNJ含量的变化。不同蓖麻蚕品种在5龄蚕期间粗脂肪含量均呈现先上升后下降的趋势,第4天达到最高值;粗蛋白含量在第2或第3天达到最高值,然后开始下降;氨基酸含量呈先上升后下降,然后再升高的现象,通常在5龄的第2或第3天达到最高值,然后下降,第5天又上升;在活性成分方面,不同品种蓖麻蚕在5龄期间,多酚、黄酮、生物碱、DNJ含量基本呈现先上升后下降,又上升的趋势,并且在第2或3天达到最高值,然后下降,第5天后又上升,而且不同蓖麻蚕品种间变化差异较大,变化规律不明显;不同品种蓖麻蚕在5龄期间,多糖含量基本是先下降后上升,在第1天和第5天多糖含量较高,不同品种间变化差异较大。根据试验结果分析并考虑饲养成本,建议在对5龄蓖麻蚕开发应用时间以5龄蚕的第2天或第3天为宜。     

蓖麻蚕线粒体cox2基因的克隆、序列测定和分子系统学分析

利用兼并性引物克隆出蓖麻蚕线粒体cox2基因、tRNA Leu基因和cox1基因的部分片段。cox2基因编码框包含 6 85个核苷酸 ,编码 2 2 8个氨基酸的蛋白质 ;起始密码子为ATG ,终止密码子仅有 1个T组成 ;蓖麻蚕mtDNA的cox2基因中富含AT ,含量为 75 77% ,GC的含量为 2 4 2 3%。通过同源性比较 ,发现蓖麻蚕的cox2与柞蚕cox2同源性最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别是 89 0 %和 96 0 %。根据cox2氨基酸序列进行了 12种昆虫的分子系统学分析探讨。     

不同产丝量家蚕品系后部丝腺的蛋白质组学分析

家蚕幼虫后部丝腺是合成和分泌丝素蛋白的重要器官。为从蛋白质水平探究不同家蚕品系产丝量差异的原因,应用蛋白质组学研究方法,选取3个产丝量有较大差异的家蚕品系Ndx、大造和21-872为材料,通过双向电泳和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对各品系5龄第5天幼虫后部丝腺表达的差异蛋白进行鉴定,查找与丝蛋白合成相关的蛋白质。结果表明,茧丝突变品系Ndx后部丝腺的蛋白质表达水平与普通丝量品系大造和高丝量品系21-872有差异,差异表达蛋白种类主要为应激反应相关蛋白、能量相关蛋白、蛋白质合成相关蛋白和一些酶类,其中核糖体磷酸化蛋白P0和P2、蛋白质二硫化物异构酶、丝素轻链蛋白Fib-L以及丝素蛋白P25等在Ndx后部丝腺的含量明显低于其它2个品系。推测在茧丝突变品系Ndx的后部丝腺中,上述蛋白质表达量的变化可能是导致其不能正常吐丝结茧的原因。     

红麻地放养蓖麻蚕试验小结

我县种植红麻已有悠久历史,面积大,是省红麻生产基地,每年种植面积10—15万亩.1985年全县种40万亩,每年7—9月份红麻叶自然落叶,白白地浪费掉.蓖麻蚕在该时间缺饲料,直接影响了蓖麻蚕事业的发展.赤眼蜂因缺寄生卵不能大量繁殖大面积应用.为了达到红麻叶、蓖麻蚕、赤眼蜂多层次的综合循环利用,发挥更大的经济效益.为此,我所从1982年至今,利用红麻叶喂养蓖麻蚕已试验成功.但蓖麻蚕在该时     

PI3K/AKT/TORC1信号通路对丝素蛋白合成转录因子SGF1表达的影响

SGF1(silk gland factor 1)是一种转录调控因子,属于Fox家族的Fox A亚家族成员,能够启动丝素基因的表达,合成丝素蛋白。已知果蝇和其他高等动物中的PI3K/AKT/TORC1信号通路可以调控Fox转录蛋白的表达。为了探究家蚕幼虫后部丝腺(PSG)中PI3K/AKT/TORC1信号通路对SGF1表达水平的影响,对4龄第4天和5龄第7天家蚕幼虫分别注射信号通路抑制剂Wort、Rapa和LY294,24 h后解剖取出后部丝腺,一组用于免疫组织化学染色实验,另一组用于提取蛋白质进行Western blot检测。免疫组织化学染色实验表明,与对照组相比,注射3种信号通路抑制剂的家蚕幼虫后部丝腺组织的绿色荧光亮度明显减弱;Western blot检测表明,与对照组相比,实验组家蚕幼虫后部丝腺的蛋白质浓度有所下降。综合以上结果初步得出PI3K/AKT/TORC1信号通路抑制剂处理均可降低家蚕幼虫后部丝腺中SGF1表达的结论,即提示可以通过上游信号通路PI3K/AKT/TORC1影响SGF1的表达水平,进而调控丝素蛋白的合成。     

保幼激素类似物对天蚕后部丝腺丝蛋白合成的影响

保幼激素类似物具有明显的增丝作用,天蚕方面,前人曾以ZR515做过初步探索[1]。我们业已证实,保幼激素类似物（methoprene）对天蚕有明显的增丝效果,为探明其增丝的生化机理,笔者以3种浓度的methoprene处理5龄两个不同时期的天蚕,比较分析了激素处理后,后部丝腺中核酸含量及可溶性蛋白组成与含量的变化。1材料和方法1．1激素处理先将methoprene（日本制药株式会社产）用丙酮稀释成一定浓度,分别以5、10、15ng／头的剂量涂布于5龄第4或第8天的天蚕的第6～7腹节的腹面,同时以涂布等量的丙酮为对照。1．2后部丝腺的解剖与制样激素处理…     

柳蚕卵黄原蛋白(Vg)cDNA 3'端的克隆及序列分析

柳蚕(Actias selene Hubner)是野生泌丝昆虫.从柳蚕雌蛹脂肪体中提取总RNA,根据已经解析出的其它泌丝昆虫的卵黄原蛋白cDNA序列设计特异性引物,对柳蚕卵黄原蛋白cDNA 3'端进行RACE(rapid ampliftcation of eDNA ends)扩增,经克隆和测序得到了一条1 072 bp的cDNA片段,该序列与柞蚕(Antheraea pernyi)、天蚕(An.theraea yamamai)、野桑蚕(Bombyx mandarina)、家蚕(Bombyx mori)、樗蚕(Samia cynthia pryeri)、蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricini)、樟蚕(Saturnia japonica)相应序列的同源性分别为82.5%、82.4%、67.0%、63.2%、80.3%、78.5%、81.0%.同源性分析表明,昆虫卵黄原蛋白的一级结构在进化上具有较高的保守性.     

生物工程在蚕业上的应用前景

一、有用基因的分离及克隆高等生物目的基因的分离及其克隆操作,可以说是基因工程的基本功.蚕业方面,蚕丝丝胶蛋白基因、丝心蛋白(丝素)基因、丝腺肌动蛋白基因、卵壳蛋白基因、脂蛋白基因、丝腺一些tRNA基因、rRNA基因、核多角体病毒(NPV)的多角体蛋白基因等等都已被分离和克隆.