小麦单倍体无性系抗镰刀菌毒素细胞系的筛选

１９８９～１９９２年以禾谷镰刀菌Ｆ＿４号菌种的粗毒素为选择剂，采用多步正筛选法，从来源于同一个花粉胚的单倍体细胞无性系Ｈ＿（１６）中筛选出三个抗性细胞系──Ｈ，Ｈ和Ｈ。与亲本系相比，这些变异系具有较强的抗毒素毒害能力，在继代培养６次后，其抗性性状表现稳定。     

大蒜抗叶枯病变异系的离体筛选及其抗性分析

【目的】利用病菌粗毒素离体筛选大蒜抗叶枯病变异系,建立抗病变异系离体筛选方法。【方法】以蒜瓣茎盘为外植体诱导愈伤组织;以大蒜叶枯病菌培养滤液制取的粗毒素为筛选剂,离体筛选大蒜抗叶枯病变异系;通过接种病菌粗毒素和病菌孢子鉴定变异株的抗病性,分析变异株的防御酶活性。【结果】大蒜叶枯病菌粗毒素对大蒜愈伤组织增殖有显著抑制作用,抑制作用随病菌粗毒素质量分数的增加而增强,不同大蒜品种愈伤组织对病菌粗毒素的抗性不同;利用不同体积分数的病菌粗毒素分步筛选分别获得大蒜品种G039变异系苗12株,G073变异系苗2株,它们对大蒜叶枯病菌粗毒素具有稳定的抗性。经病菌孢子悬浮液接种鉴定,变异系苗较其对照抗病性提高。大蒜抗叶枯病变异系苗接种病菌后叶片过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和苯丙氨酸解胺酶（PAL）的活性在短时间内即达到峰值,且与抗病品种G064接近或更高,而感病品种G039的酶活性则明显低于前两者。【结论】利用不同体积分数的大蒜叶枯病菌粗毒素分步筛选可以获得大蒜抗叶枯病变异系,适宜大蒜抗叶枯病变异系分步筛选的上限粗毒素体积分数为30%;POD、PPO和PAL活性可作为大蒜抗叶枯病鉴定的生化指标。     

小麦禾谷镰刀菌毒素抗性系的筛选及抗性特性

以稳定生长的小麦（抗盐０３×Ｎｏ１８）Ｆ１花药愈伤组织为材料，小麦强致病禾谷镰刀菌的粗毒素为选择剂，进行抗毒素变异细胞系的离体筛选。结果从多步正筛选系统和一步正筛选系统分别获得抗性变异细胞系ＫＮｒ－ａ和ＫＮｒ－ｂ．抗性系的毒素抗性具有显著提高，且其细胞膜透性、硝酸还原酶活性、苯丙氨酸解氨酶活性、游离氨基酸组成均发生了明显变化。据此提出了细胞水平上禾谷镰刀菌毒素作用的机理及抗性变异细胞系对毒素表现出一定抗性的可能原因     

小麦单倍体无性系抗镰刀菌毒素细胞系的筛选

１９８９￣１９９２年以禾谷镰刀菌Ｆ４号菌种的粗毒素为选择剂，采用多步正筛选法，从来源同一个花粉胚的单倍体细胞无性系Ｈ１６中筛选出三个抗性细胞系－Ｈ１６＾ｒ１，Ｈ１６＾ｒ３和Ｈ１５＾ｒ５。与亲本系相比，这些变异体系具有较强的抗毒素毒害能力，在继代培养６次后，其抗性性状表现稳定。     

小麦未熟胚离体培养的研究—再生植株后代主要农艺性状变…

在已有研究的基础上，进一步研究胚培再生植株后代主要农艺性状变异的可遗传性及在小麦品种改良中利用的前景，结果表明，早熟及大粒性有很强的遗传力，株高也是可遗传的，所有性状在ＩＥ３代趋于稳定，ＩＥ４代完全稳定，某些优良的变异材料可直接应用于生产。     

西瓜离体培养及再生植株变异的分子检测

２－４ｄ苗龄的西瓜子叶在１－５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ条件下,均能形成愈伤组织,与低浓度ＩＡＡ配合使用,愈伤组织诱导率能大幅度提高,芽分化率可达６０％以上。在几种生长调节物质中,以ＫＴ对促进茎伸长,ＩＡＡ对促进根的分化最为有利。用ＲＡＰＤ技术分析再生植株呈ＤＮＡ多态性。     

利用离体技术鉴定小麦根腐病抗性研究

通过不同处理的离体试验及田间对比试验,对离体鉴定技术应用于小麦抗叶部根腐病(H.sativum)育种的可行性进行了较深入的研究,试验证明:应用离体技术鉴定小麦叶部根腐病抗性结果准确、速度快,而且不受环境条件限制。同时,采用离体鉴定的方法对参试的2632份材料进行抗性评价,从中筛选出8份高抗和60份中抗的材料,其中17分来自人工合成六倍体小麦,51份来自普通小麦     

彩色辣椒子叶离体再生培养基的筛选

以5种彩椒为材料,以MS无机物 B5有机物 6-BA4mg／L IAA1mg／L AgNO33mg／L 琼脂7g／L 蔗糖30g／L为基本培养基,添加椰子汁、不同种类的氨基酸等,筛选各品种适宜的诱导培养基。结果表明,培养基中添加L-丝氨酸1．0mg／L 甘氨酸1．0mg／L或GA,0．5mg／L L-苯丙氨酸2．0mg／L 氨基丁酸2．0mg／L有利于诱导芽再生以及其后芽伸长、生根成苗。前者有利于黄欧宝、桔西亚两个品种的诱导和再生,后者适于白公主、多米、紫贵人3个品种的诱导和再生。     

小麦成熟胚离体培养研究

以美国小麦品种Overley成熟胚作为外植体进行离体培养,研究外源激素对小麦成熟胚诱导愈伤组织、分化出苗以及试管苗增殖的影响。试验结果表明,在MS培养基中添加2,4-D3mg·L-1愈伤组织诱导频率较高,成愈率为84.0%;在添加有KT2～3mg·L-1的MS分化培养基中愈伤组织分化率较高,可达85%以上;将试管苗转接至添加0.2mg·L-1的NAA和0.5～2.0mg·L-1的6-BA的培养基中,试管苗有一定的分化增殖,但最高分化率仅为33.3%,增殖系数2.05。     

甘蔗高产高糖细胞系筛选研究 Ⅰ.甘蔗抗磷酸盐变异系的筛选

以磷酸盐为选择剂，采用多步正筛选系统，从高产低糖的甘蔗品系福农８６／１７中筛选抗性细胞系．与对照相比，变异系具有很强的抗选择剂毒害的能力，且对其他种类的磷酸盐也具有较强的抗性．在不含选择剂的培养基上继代３次后，其抗性表现稳定．田间种植观察表明，抗性细胞系植株群体含糖分较高，对照系植株群体含糖分较低．文中还对该品系愈伤组织的诱导方法进行了探讨     

红景天甙体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡研究

【目的】探讨红景天甙(Salidroside)体外诱导人肝癌QGY-7703细胞凋亡的作用及其可能的机制。【方法】以体外培养的人肝癌QGY-7703细胞作为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测红景天甙对QGY-7703细胞生长的抑制作用,采用吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光双染、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术,分析红景天甙对QGY-7703细胞凋亡的诱导作用;采用Western blot免疫印迹法探讨红景天甙诱导QGY-7703细胞凋亡的可能机制。【结果】MTT比色法试验结果表明,0.01,0.1,1,10和100μg/mL红景天甙对QGY-7703细胞生长均有不同程度的抑制作用,细胞生长抑制率分别为13.2%,21.9%,31.4%,46.8%和60.9%,半数抑制质量浓度(IC50)为18.56μg/mL;用10μg/mL红景天甙处理QGY-7703细胞48 h,AO/EB荧光双染后,可观察到个别QGY-7703细胞呈现亮绿色或橘红色,表明细胞发生了凋亡;琼脂糖凝胶电泳结果显示,10μg/mL红景天甙作用QGY-7703细胞24,48和72 h均可导致细胞核内DNA产生有序断裂,形成DNA梯形带;流式细胞术试验结果表明,10μg/mL红景天甙的加入量为100和200μL时,QGY-7703细胞凋亡数分别为178和331个,相应的凋亡率分别为1.8%和3.5%,阴性对照组(10μg/mL红景天甙加入量为0μL)凋亡细胞数为105个,凋亡率仅为1.1%;Western blot免疫印迹分析结果表明,红景天甙下调了Bcl-2和PCNA蛋白的表达量,而使凋亡活化基因Bax与肿瘤抑制基因p53的蛋白表达量增高。【结论】红景天甙对体外培养的QGY-7703细胞具有明显的生长抑制作用和诱导凋亡作用,其诱导凋亡作用与Bcl-2家族成员、p53、Bax和PCNA基因调控有关。     

提高非洲菊试管苗叶片再生频率的研究

以213品种试管苗叶片为外植体,于培养基中添加一定浓度的硝酸银溶液后,其品种的分化频率有较大提高,但以0.5~2.0 mg/L处理较为适宜。在该浓度范围内,对该品种不同苗龄的外植体进行4种不同方式的处理(D、Z、S、B),发现21 d的试管苗以S法接入最好,分化频率可以维持在75%,比对照提高了近2.4倍。     

节瓜抗枯萎病变异体离体筛选研究初报

利用镰刀菌酸(FA)为胁迫剂,以节瓜不定芽为筛选材料,进行节瓜抗枯萎病变异体离体筛选技术的研究,初步试验结果表明FA胁迫的适宜浓度为75~100 mg/L。经过筛选的细胞系对FA的抗性较未经筛选的细胞系明显增强。初步建立了节瓜抗性变异体离体筛选体系,获得了抗FA变异体再生植株的自交种子。     

小麦穗离体培养下干物质及锌元素的积累规律

以花后2 d的济麦20为试验材料,利用离体穗培养的方法,研究了低锌(19.5μg/mL Zn)和高锌(195μg/mL Zn)处理下离体穗各器官干物质及锌元素的积累规律,以探讨锌对籽粒建成和籽粒锌积累的影响。结果表明,随培养天数的增加,离体穗干物质积累总量呈增加趋势。高锌处理有利于倒二节、穗下节、旗叶、旗叶鞘、穗轴和颖壳干物质的积累,其籽粒干物质量却明显降低,仅为低锌处理的十分之一。因此,高锌处理离体穗干物质积累总量低于低锌处理。随培养天数的增加,离体穗各器官锌含量呈增加趋势,且高锌处理下各器官锌含量均明显高于低锌处理。不同器官锌含量存在差异,表现为旗叶较高,而籽粒较低。随培养天数的增加,离体穗锌积累量呈"快-慢-快"的递增趋势,高锌处理除籽粒外其他器官锌的积累量远高于低锌处理。低锌处理下锌主要积累于颖壳、籽粒和旗叶,籽粒锌积累量占总量的20%;而高锌处理下锌主要积累于颖壳和旗叶,在籽粒中积累较少,仅占总积累量的3%。     

禾谷镰刀菌毒素对小麦花药培养特性的影响研究

用不同浓度的禾谷镰刀菌毒素对离体培养的小麦花药进行胁迫。结果表明,在低浓度(质量浓度)时毒素具有类激素活性效应,能够促进小麦花药组织脱分化,形成愈伤组织;高浓度时毒素表现毒害作用,抑制花药的脱分化和愈伤组织的形成。当毒素质量浓度大于0.5g/L时,随着胁迫浓度的增加,毒素的毒害作用增强,小麦花药的脱分化和形成愈伤组织的能力迅速下降,表现在降低花药反应率和愈伤组织诱导率2个方面。同时毒素的这种效应,因供试材料基因背景的不同而有一定差异。比较而言,含感病基因的杂种花药对毒素敏感。     

Studies on Single Cell Culture in vitro in Wheat--The variation of grain protein content and its fractions from regenerated plants

On the basis of previous studies dealing with the variation of major agronomic and yield characteristics of regenerated plants derived from single cell culture in vitro of common wheat (Triticum aestivum L.Cultivar NE 7742),the grain protein content and its fractions from regenerated plants with stable agronomic characteristics were studied from 1992 to 1995.The results showed that the variation of grain protein content and its fractions in somaclones from single cell culture in vitro were very significant and the range was very wide (11.53-17.70%).Several types of variation were found in the studies,espercially the type with higher protein content than that of cultivar NE 7742(non-culture parent).Among them.-20.69% of lines the grain protein content was significantly higher than that of NE 7742 and combined with high yielding potential.The tendency of variation of the four protein fractions showed that the variation of albumin was not obvious and maintained the same level as NE7742,the content of gliadin increased in some somaclones and decreased in others.However,the percentages both globulin and glutenin tended to increase.The variation of total amount of structural protein and the ratio between globulin and glutenin tended to increase.the variation of total amount of structural protein and the ratio between globulin and albumm was mainly influenced by globulin under the condition of culture in vitro.The variation of total amount of storage protein and the ratio between gliadin and glutenin was mainly by glutenin.The results mentioned above bemonstrated that the induction and screening of somaclonal variation could be an effective way in wheat improvement in combining high protein content with high yield.     

利用组织培养技术筛选辣椒抗疫病变异体

选用“2001”,“2056”,“2031”3个辣椒品种作为试材,以其子叶作为外植体诱导愈伤组织,以辣椒疫病病原菌培养滤液制取粗毒素作为筛选剂,筛选辣椒抗疫病细胞变异系。结果表明,辣椒疫病病原菌粗毒素对辣椒子叶愈伤组织的诱导、生长及不定芽的分化具有显著的抑制作用,抑制作用随着粗毒素浓度的增加而增加,且不同辣椒品种愈伤组织对毒素的忍耐力不同。