公兔精液冷冻保存的研究

本研究着重对公兔精液冷冻保存所用的防冻剂的选择及其用量、精液的稀释方法、平衡时间、降温速度及解冻温度等方面进行了一系列试验研究,最后进行输精试验,以验证试验效果。公兔采精用假阴道法,采精后立即检查精液一般性状,精子活率达0.7以上始供试验用。稀释液用 Tris 缓冲液为基础液,其成份为:Tris2.52克,葡萄糖1.05克,柠檬酸1.41克,蒸馏水84毫升,卵黄16毫升。稀释液中的防冻剂以 DMSO 和甘油并用效果较好。当 DMSO 最终浓度从0增至9%时,解冻后精子活率亦随之而提高;当甘油最终浓度为1.25、2.5和3.75%时,解冻后精子活率较好,三者间无明显差异(P>0.05),最终浓度为0和5%时,冻后精子活率则比以上三者有明显的下降(P<0.05)。解冻后精子顶体完好率则随着 DMSO 或甘油浓度的增加而下降。以冻后精子活率和顶体完好率这两个因素综合衡量,DMSO 和甘油的最终浓度分别以4.5%和1.25%效果较好。稀释精液时,采用两次稀释法的冷冻效果比一次稀释法的好。但两者差异不显著(P>0.05)。平衡时间以0.5—1小时效果较好,而2小时和3小时的效果较差。冷冻精液时,在-25—-50℃间的降温速度以每分钟下降3—8℃效果较好,如超过11℃,解冻后精子活率则有下降的趋势。颗粒冻精在40—50℃进行干解冻的效果比30℃和60℃的好。输精时,母兔先静注 HCG50—100单位以诱发排卵,输精量为0.5—0.8毫升。输精母兔230头,情期受胎率73.9%,平均每窝产仔数4.4头。     

用0.25 mL细管冷冻保存猪精液

研究旨在建立优化的猪精液冷冻保存方法.实验表明,采用ZORLESCO(ZO)液对猪精液进行预稀释,室温平衡1 h.加入冷冻Ⅰ液后于5℃水浴平衡1.5 h,再加入冷冻Ⅱ液平衡2 h后装入0.25 mL细管,液氮面上3cm处平衡10 min投入液氮,采用37℃水浴解冻30 s,可获得最佳冷冻效果.解冻后的精子活力平均为0.58±0.03,质膜完整率为(63.2±1.2)%,顶体完整率为(51.4±2.6)%;精子畸形率最低,仅为(14.0±3.0)%.     

食蟹猴阴茎电刺激采精及精液特征的初步研究

采用阴茎电刺激采精法对食蟹猴进行采精,电刺激参数设为电压从32～56V,频率25～30Hz范围调整,波宽固定为10ms,电刺激时间1～10s,在非麻醉情况下成功采精,采精量为(0.20±0.16)mL。在采精过程中没有发现阴茎损伤。对食蟹猴精液特征进行研究,结果发现精子的活力为(88.37±9.33)%,精子密度为(2169.79±1922.38)×106个/mL。扫描电子显微镜观察,精子的形态特点是头部的长径比较短而显两端较钝圆的卵圆形,长(6.58±0.28)μm,宽(4.12±0.20)μm;尾部中段长(13.47±0.36)μm,主段和末段长(67.08±1.52)μm。平均死活精子率9.1%,平均精子畸形率为13.1%,平均精子顶体异常率为3.3%。     

带精浆直接稀释法探讨猪精液低温(4℃)保存的可行性

为研制更为简易、高效的保存稀释液配方及操作程序,探讨4℃条件下稀释保存猪精液的可行性,本实验首次采用带精浆直接稀释法对猪精液的低温保存技术进行了研究.结果表明,在4℃条件下,用Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖)和Ⅳ液(葡萄糖-卵黄-乳糖)保存猪精液,精子的存活时间和活率分别为144 h、0.517和132 h、0.510,而Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)和Ⅲ液(葡萄糖-卵黄-乳糖-柠檬酸钠)精子活率保持0.5以上不到24 h.随着保存时间的延长,四种稀释液中保存的精子活率和顶体完整率均逐步下降,其中Ⅱ液和Ⅳ液均分别在48 h和24 h内下降较快,以后则呈缓慢下降趋势.综上所述,在低温条件下,采用Ⅱ液和Ⅳ液稀释保存猪精液,其精子活率能分别在144 h和132 h内保持0.5以上;所研制配方(Ⅱ液和Ⅳ液)组分简单、配制方便;采用带精浆直接稀释法低温保存猪精液可行,且操作程序简易.     

星斑川鲽精子冷冻保存与生理特性分析

针对星斑川鲽(Platichthys stellatus)养殖群体中雄性个体较雌性小,产精液量低,限制了人工繁殖育苗和杂交育种开展等问题,本研究以性成熟的星斑川鲽为实验材料,对精子稀释液成分、稀释液渗透压、激活海水适宜温度和冷冻精液的适宜稀释比例等进行筛选,并用冷冻精液和鲜精分别与星斑川鲽卵进行受精和孵化实验,实验结果利用SPSS软件中单因素方差分析法和Student-Newman-Keuls进行比较分析。结果表明,利用Ts-2(37.65 g/L蔗糖+10.01 g/L KHCO3+1.21 g/L Tris碱)和SFs-4(60 g/L葡萄糖+10.01 g/L KHCO3+1.21 g/L Tris碱)冷冻保存的精子活力最高,分别为(56.67±5.78)%和(66.67±5.77)%。利用计算机辅助精子分析(computer assisted sperm analysis,CASA)系统对星斑川鲽精子进行分析,测定了用Ts-2和SFs-4保存的冷冻精液中精子运动方式的各项参数。结果显示,测定的各项参数(曲线运动速度(curvilinear velocity,VCL)、直线运动速度(straight line velocity,VSL)、平均鞭打频率(beat cross frequency,BCF)、运动的直线性(linearity,LIN)和运动的前向性(straightness,STR)表明,利用SFs-4保存的精子各项运动参数明显高于Ts-2。利用蔗糖、KHCO3和Tris碱配制不同渗透压稀释液中,在渗透压为319.94 Pa时,精子活力最高,为(61.67±5.00)%,与鲜精相比无显著差异(P0.05)。利用3~18℃海水激活精子,结果显示,当激活海水温度在12℃时精子活力最高,与鲜精相比无显著性差异(P0.05),而其他温度下显著低于鲜精活力(P0.05)。将解冻后的精液稀释10~40倍,与星斑川鲽卵受精,结果显示,在稀释20倍后冷冻精液的受精率最高。本研究利用Ts-2+20%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)和SFs-4+20%DMSO对星斑川鲽精子成功进行冷冻保存,为星斑川鲽精子冷冻保存、种质库的建立和应用提供理论和技术依据。     

兔精液冷冻保存的初步研究

以家兔为试验动物,从精液解冻后的精子活率和复苏率2个指标,分别对3种稀释液(1:T ris0.25 m o l/L 蔗糖0.1 m o l/L 柠檬酸钠83 mm o l/L 卵黄10% 二甲基亚砜(DM SO)15%;2:配方1 葡萄糖0.47 mm o l/L;3:T ris 0.29 m o l/L 葡萄糖0.71 mm o l/L 柠檬酸钠67 mm o l/L 卵黄20% 甘油4%)、两种抗冻剂(甘油4%、DM SO 15%)、4°C下平衡时间(30、60、120、180 m in)三个方面进行了比较试验。公兔采精用假阴道法,采精后立即检查精子活率,达0.60以上的供试验用。结果表明:(1)3种稀释液中,用稀释液2稀释的精液,精子解冻后活率和复苏率显著高于稀释液1和稀释液3(精子活率:0.153 vs 0.103、0.109;复苏率:0.205 vs 0.137、0.147,P<0.01),而稀释液1和稀释液3之间差异不显著(P>0.05);(2)在稀释液2中,分别用4%甘油和15%DM SO作防冻剂,两者的精子解冻后活率之间(0.193 vs 0.261,P<0.01),复苏率之间(0.250 vs 0.340,P<0.01)差异极显著;(3)在4°C下平衡30、60、120、180 m in,结果发现,在30~60 m in之间,解冻后精子活率之间(0.261 vs 0.249),复苏率之间(0.340 vs 0.325)差异均不显著(P>0.05),但是随着平衡时间(120~180 m in)的增加,精子活率明显降低,精子几乎死亡。结论:采用稀释液2的配方,在4°C下平衡30~60 m in,可获得较好的兔精液冷冻保存效果。     

奶牛X性控冻精应用研究

利用SX-MOFLO精子分离设备分离奶牛XY精子,将分离后的奶牛X精子冷冻保存。探讨奶牛X性控冻精解冻后存活时间、不同方法进行人工授精的受胎率,为奶牛X性控冻精的大规模推广应用提供依据。方法与结果:(1)取不同种公牛、不同批次的X性控冻精及普通冻精解冻后倒入5 mL试管内摇匀,至37°C水浴锅中,每2 h检测一次精子活力,4 h后每小时检测一次精子活力,直至无运动精子。结果奶牛X性控冻精存活时间为5~12 h,比同种普通精子的存活时间短2~10 h。(2)应用奶牛X性控冻精人工授精的母牛的情期受胎率(59.4%=342/576)与普通冻精的情期受胎率(60.6%=129/213)相比,无显著差异(P>0.05)。奶牛X性控冻精母犊出生准确率93.3%(319/342),极显著地高于普通冻精48.8%(63/129)的母犊率(P<0.001)。且应用奶牛X性控冻精人工授精后的青年牛的情期受胎率(6 5.6%=2 4 0/3 6 6)极显著的高于经产牛的情期受胎率(4 8.6%=1 0 2/2 1 0)(P<0.001)。(3)在母牛发情结束后6~8 h左右进行人工授精,其情期受胎率为67.1%(116/173),显著地高于在母牛发情开始后8~1 2 h进行人工授精5 6.1%(2 2 6/4 0 3)的情期受胎率(P<0.0 1)。(4)在准确判断母牛卵巢上卵泡发育状态的前提下,将精液全部输至发育侧子宫角大弯处,其情期受胎率62.7%(289/461),高于母牛每侧子宫角输1/2支X性控冻精46.1%(53/115)的情期受胎率,但二者之间差异不显著(P<0.05)。研究结果表明应用奶牛X性控冻精进行人工授精,其受胎率与奶牛的经产与否、授精时间和输精部位有关。     

带精浆直接稀释法探讨猪精液低温(4°C)保存的可行性

为研制更为简易、高效的保存稀释液配方及操作程序,探讨4°C条件下稀释保存猪精液的可行性,本实验首次采用带精浆直接稀释法对猪精液的低温保存技术进行了研究。结果表明,在4°C条件下,用Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖)和Ⅳ液(葡萄糖-卵黄-乳糖)保存猪精液,精子的存活时间和活率分别为144 h、0.517和132 h、0.510,而Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)和Ⅲ液(葡萄糖-卵黄-乳糖-柠檬酸钠)精子活率保持0.5以上不到24 h。随着保存时间的延长,四种稀释液中保存的精子活率和顶体完整率均逐步下降,其中Ⅱ液和Ⅳ液均分别在48 h和24 h内下降较快,以后则呈缓慢下降趋势。综上所述,在低温条件下,采用Ⅱ液和Ⅳ液稀释保存猪精液,其精子活率能分别在144 h和132 h内保持0.5以上;所研制配方(Ⅱ液和Ⅳ液)组分简单、配制方便;采用带精浆直接稀释法低温保存猪精液可行,且操作程序简易。     

兔的人工授精研究总结

本文研究对兔的采精技术、精液性状、精液的冷冻保存和低温保存以及输精方法等问题进行了一系列试验。用自制的假阴道采精,春季西德长毛公兔平均每次滤精量0.89±0.310毫升,射出精子总数5.025±2.09亿,西德杂种公兔分别为0.66±0.322毫升和3.623±1.751亿;本地长毛公兔分别为0.8±0.324毫升和3.190±1.514亿。冬季西德长毛公兔平均每次滤精量0.675±0.175毫升,射出精子总数2.568±0.561亿;西德杂种公兔分别为0.947±0.368毫升和4.272±1.434亿。同品种但个体不同,滤精量和射出精子总数差异很大。精液冷冻保存,可用含有甘油和DMSO的Tris稀释液,在液氮中(-196℃)保存。用冷冻精液输精母兔230只,情期受胎率73.9％,平均每窝产仔数4.4只。精液低温保存试验,以用葡—柠—蛋—奶稀释液与葡—柠—蛋稀释液稀释在2～5℃中保存,效果较好,在农村中进行输精试验的结果,前者情期受胎率68.7±18.739％,后者63.72±12.987％,差异不显著(P>0.05),因后者配制较简便,目前在农村中乃推广此种。精液稀释倍数分三组,即1:10、1:15、1:20,试验结果以1:15为宜。输精时,发情母兔静注HCG50单位诱排,输精量0.5毫升,输入有效精子数1,000～1,400万,实践证明是适宜的。兔的人工授精技术已在广西14个县(市)重点推广,据不完全统计,两年来共输精母免约10万只次,抽查17,184只,平均情期受胎率62.90％,平均每窝仔数4.04只。     

栉江珧和近江牡蛎的精子超低温冷冻保存

栉江珧(Atrina pectinata)和近江牡蛎(Crassostrea rivularis)是我国重要的海产经济贝类,建立其精子冷冻保存技术及精子冷冻库,对种质资源的保护和遗传育种具有重要意义.本研究对其精子冷冻保存过程中冷冻剂种类和浓度的选择、冷冻程序、平衡时间、保存体积、精液稀释方式、保存时间等多个影响因素进行了比较筛选,并利用显微镜直接检测和曙红Y(eosin Y)染色检测结合的方式检验精子存活率.结果表明,二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)作为抗冻剂的保存效果要明显优于甘油(glycerol,Gly),终浓度为8％～10％的二甲亚砜保存效果最好,其栉江珧和近江牡蛎精子活率均可达60％以上,而甘油保护下精子活率小于40％.精液的稀释方式采用将抗冻液等分为3份,依次与精液混合,每次间隔8 min,整个过程约30 min;此种精液稀释方式与一次性混合方式相比,精子活率可提高约30％.稀释后精液需要在4℃下平衡15～25 min,平衡样品与直接冷冻样品相比,精子活率提高约50％.精液降温程序为在样品投入液氮前,于液氮面以上15 cm处停留5 min,5 cm处停留10 min,精子活率可达60％以上;而未经此降温程序直接投入液氮中的样品精子活率接近0.与此降温程序相对应的样品冷冻体积在1.0～1.4 mL范围内为宜.冷冻180 d内复苏的精子活率由90％左右(鲜精)下降至60％左右,180 d后精子活率下降至56％左右.研究结果为栉江珧和近江牡蛎精子超低温冷冻保存、双壳类种质保护和遗传育种提供了理论和技术依据.     

额尔齐斯河江鳕精子冷冻保存研究

额尔齐斯河中蕴藏着丰富的冷水鱼类种质资源,江鳕(Lota lota)是其中之一,建立其精子冷冻保存技术和精子冷冻库,对种质资源保存具有重要意义。本研究利用无机盐、葡萄糖、蔗糖、胎牛血清等配制7种精子稀释液,以5∶1的比例稀释精液,激活后观察统计精子活力。结果显示,江鳕精子仅在SS、D15和CM中具有(13.33±2.89)%~(8.33±2.88)%活力。在此基础上配制22种梯度稀释液(SS-00~SS-10和D15-0~D15-7),以同样的方法稀释和观察精子活力。结果显示,SS-0(56.67±5.77)%、SS-2(63.33±5.77)%、SS-5(53.33±5.77)%和D15-7(63.33±5.77)%中精子活力较高,与鲜精活力(76.67±5.77)%接近(P0.05)。将二甲基亚砜(DMSO)和甲醇(MeOH)以3∶2比例配制成混合抗冻剂(DM),分别以5%~12%浓度加入到精子稀释液SS-5和D15-7中,以5∶1比例稀释精液,冷冻保存精子。结果显示,冷冻前,5%DM的SS-5和D15-7中精子活力(73.33±5.77)%与鲜精无显著差异(P0.05),当DM浓度升高到10%~12%时,精子活力接近于0;冷冻后,在DM浓度为6%的SS-5中,精子活力较高为(26.67±5.77)%(P0.05);在DM浓度为7%的D15-7中,精子活力较高为(26.67±5.77)%(P0.05)。本研究结果为额尔齐斯河江鳕精子冷冻保存提供了一定的理论和技术依据。     

新蛋白构型GnRH多肽疫苗对公兔生殖性能的影响

用蛋白结构修饰后的促性腺激素释放激素并列体二聚物(G6k-GnRH-Tandem-Dimer,GnRH-TDK)2次免疫公兔,研究了该疫苗对公兔生殖性能和生长情况的影响。12只公兔随机分为免疫组和对照组,免疫组于3月龄初免,4周后加免1次。每周采用放射免疫分析法测定公兔血清睾酮水平,发现免疫组睾酮浓度从82.74±16.03ng/ml降至59.24±16.18ng/ml;观察其体重和性行为,免疫组无明显性行为,体重与对照组接近。免疫后9周屠宰公兔比较睾丸重量、体积和精液质量,进行睾丸组织学分析,发现免疫组睾丸大小、精子密度极显著(P<0.01)低于对照组,其睾丸组织结构病变明显。这些现象表明,用新蛋白构型GnRH多肽免疫后,公兔睾酮分泌减少,睾丸发育受阻,精子密度和活力降低,去势效果好,且不影响动物的生长。     

低温等离子体活化水发生设备及其应用效果试验

等离子体活化水（Plasma-Activated Water,PAW）具有广谱杀菌特性,可有效杀灭生鲜食品上的微生物,抑制其腐败变质。该研究基于介质阻挡放电等离子体发生原理设计了一套PAW发生设备,主要部件包括介质阻挡放电结构、通风散热通道、活化水流动通道、高压交流电源等。其中,介质阻挡放电结构采用圆柱形高压放电电极与平板形低压放电电极上下均匀间隙组配,不锈钢导流板与流动水膜一体化设计低压电极;圆柱形高压放电电极的散热采用双向逆流、内外散热通风双通道;高压交流电源的功率电路采用交流-直流-交流电路结构实现介质阻挡放电能量供给,控制电路可实现频率、电压、电流等参数监测与调控。将鲜切马铃薯片模拟感染大肠杆菌,并进行PAW杀菌保鲜试验,以验证所研制设备的应用效果。结果表明,在进水流量600 mL/min、电极空气间隙10 mm、物料与活化水质量比1∶20、电源电压137.4 V、杀菌时间4.72 min条件下,PAW对染菌马铃薯片的大肠杆菌杀菌率达（98.65±0.59）%,经过24 d 贮藏后,不清洗组、蒸馏水清洗组和PAW清洗组染菌马铃薯片硬度分别为（3.01±0.84）、（3.54±0.81）、（4.70±0.48）N,色差值分别为22.08±1.05、13.21±1.43、7.35±0.82,相对电导率分别为（28.00±6.43）%、（26.72±2.07）%、（17.19±2.26）%,可溶性固形物含量分别为（6.850±0.120）%、（5.430±0.006）%、（3.080±0.006）%,腐烂率分别为（87.04±1.63）%、（76.32±1.60）%、（52.09±1.41）%,PAW清洗组染菌马铃薯片品质优于不清洗组、蒸馏水清洗组,PAW杀菌保鲜效果良好。该研究可为等离体子活化水杀菌技术研发及产业化应用提供参考。     

牛体外受精胚胎冷冻保存的研究

本研究在国内条件下对牛体外受精胚胎的冷冻保存进行了系统研究。胚胎在含 4 .0mol/ L乙二醇的 PBS中停留 15～ 2 0 min,对其随后孵化无明显影响 ( 72 .2 %比 82 .4 % ,P>0 .0 5) ;当乙二醇的浓度升高到 5.0 mol/ L和 6.0 mol/ L时 ,胚胎的孵化率明显下降 ( 2 5.0 %和3.2 % ,P<0 .0 1)。在胚胎的常规冷冻保存试验中 ,当冷冻液为 1.8mol/ L乙二醇加 0 .2 0 mol/ L蔗糖时 ,- 7℃植冰后缓慢降温到 - 30℃投液氮保存的胚胎冻后存活率 ( 86.3% )和孵化率 ( 72 .5% )明显高于 ( P<0 .0 5)缓慢降温到 - 2 5℃投液氮保存的胚胎冻后存活率 ( 57.1% )和孵化率( 35.7% ) ;当冷冻液不加蔗糖时 ,胚胎的冻后存活率明显下降 ( 60 .9% ,P<0 .0 5) ,且胚胎冻后无一孵化。在胚胎的超速冷冻保存试验中 (在 - 2 3℃平衡 30 min直接置液氮保存 ) ,冷冻在冷冻液为 3.0 mol/ L乙二醇加 0 .30 mol/ L蔗糖中的胚胎冻后存活率 ( 84 .0 % )和孵化率 ( 60 .6% )明显高于冷冻液为 2 .5mol/ L乙二醇加 0 .30 mol/ L蔗糖、 2 .0 mol/ L乙二醇加 0 .30 mol/ L蔗糖和2 .0 mol/ L乙二醇加 0 .2 3mol/ L蔗糖的胚胎冻后存活率 (分别为 59.0 % ,4 3.5%和 2 5.0 % ,P<0 .0 5)和孵化率 (分别为 4 5.5% ,30 .4 %和 0 % ,P<0 .0 5) ;7日龄胚胎的冻     

硫酸铈(Ce~(4+))剂量计的改进

本文采用在硫酸铈(Ce~(4+))体系中,加入硫酸铜(Cu~(2+))的方法,改进铈(Ce~(4+))剂量体系的稳定性。实验测定Ce~(4+)/Cu~(2+)体系中,Ce~(4+)的摩尔吸光度5643±451.M~(-1).cm~(-1)。在150—4×10~4Gy范围内,用三种Ce~(4+)浓度,测定水深5厘米校准点的G(Ce~(3+))为2.20±0.04。研究表明,G(Ce~(3+))值随辐照温度的上升而线性下降,测得辐照温度修正系数为-(5.13±0.07)×10~(-3)/℃。在Ce~(4+)溶液体系中,加入0.1M Cu~(2+),使剂量体系趋于稳定。对非限束~(60)Coγ源,水中校准点吸收剂量不确定度±3.3%,重复性好于±2.5%。Ce~(4+)/Cu~(2+)适宜作为辐射加工中高剂量区的参考剂量计。     

猪卵母细胞第1极体的分离与保存

通过对屠宰场废弃的猪卵巢卵母细胞进行体外成熟培养(IVM)获得成熟卵母细胞,对体外培养成熟卵母细胞第1极体(Pb1)排出、活性及其形态学进行了统计分析;分别采用酶消化和显微操作两种方法进行了Pb1分离与采集,继而进一步结合台盼蓝细胞染色法,探讨了不同温度保存条件下Pb1存活情况.结果表明:卵泡卵母细胞IVM 40 h后发现大量高活性Pb1;显微操作分离极体效果显著优于酶消化法,且分离的Pb1活力高,完整性好.39℃条件下大多数采集的Pb1存活时间仅有4h,4℃条件下保存40 h存活率可达85.0%;-20℃保存1周达95.0%,而超低温-196℃冷冻保存1个月存活率和形态正常率分别达89.1%和97.8%.     

冻融侵蚀机理

在温带地区 ,土壤流失量的 5 0 %以上发生在冻土层解冻时期。这是由于土壤表层水分含量过多所致 ,而土壤中存在一不透水的心土层则是导致土壤表层水分含量高的主要原因。研究具有不透水层土壤的侵蚀机理 :1)冻融交替对于土壤粘聚力的影响。 2 )降水条件下 ,不透水层对土壤分散力的影响。从绘制的摩尔图可以看出每种处理下土壤的粘聚力。在冻融交替进行初期 ,土壤含水量分别为 15 %和 2 5 %。首先在 - 12℃冷冻处理 90min ,解冻 30min ,然后立即测定土壤的抗剪强度和分散力。小于 5 0kg/m2 的土壤粘聚力不受非冷冻处理或冷冻处理时水分含量的影响。降雨对于具有不透水层土壤的分散力影响很大。据研究在一滴水作用下 ,具有不透水层的黄土与不具有不透水心土层的黄土相比土壤分散力从 0 0 16± 0 0 0 6 5g升高到 0 0 5 4± 0 0 2 6 5g ;而具有不透水性层的冰碛土与不具有不透水心土层的冰碛土相比土壤分散力从 0 0 36± 0 0 0 71g升高到 0 145± 0 0 6 35g;具有不透水层的土壤基质势趋近于 0Pa ,因此造成土壤粘聚力减小 ,土壤分散力变大 ,从而引起强烈的土壤侵蚀。     

Nisin、溶菌酶和乳酸钠复合保鲜冷却羊肉的配比优化研究

为搞清Nisin、溶菌酶和乳酸钠复合保鲜冷却羊肉的交互作用,获得最佳配比,按照三因子二次正交旋转组合设计方案,用Nisin、溶菌酶和乳酸钠构成的复合保鲜剂对冷却羊肉进行处理,真空包装后贮藏于(4±1)℃环境中,一周后检测菌落总数。结果表明：三种保鲜剂的抑菌效果依次为Nisin>溶菌酶>乳酸钠;Nisin与溶菌酶之间存在极显著的交互效应(P＜0.01),而Nisin与乳酸钠、溶菌酶与乳酸钠之间存在显著的交互效应(P＜0.05);浸泡用复合保鲜剂的最佳配比为Nisin 0.34%、溶菌酶0.24%、乳酸钠2.27%。     

60Co-γ辐照模式下玉米中赤霉烯酮和品质的变化及对绵羊定时人工授精的影响

为研究经赤霉烯酮(ZEN)自然污染与⁶⁰Co-γ辐照处理后的玉米对绵羊定时人工授精中澳洲白种公羊、湖羊母羊的生殖性能的影响,本试验选取含ZEN玉米样本,分别用0、3、5、8、10 kGy剂量的⁶⁰Co-γ辐照,并测定辐照后玉米主要营养成分变化。然后分别将未污染玉米(Ⅰ对照组)、经10 kGy ⁶⁰Co-γ辐照的污染玉米(试验Ⅱ组)、污染玉米(试验Ⅲ组)饲喂定时人工授精的绵羊,检测澳洲白种公羊的精液质量,测定湖羊母羊的繁殖性能指标。结果表明,未经⁶⁰Co-γ辐照的玉米含ZEN 2 153 μg·kg^-1,在10 kGy ⁶⁰Co-γ辐照剂量下,玉米中ZEN降解率为83.7%;当⁶⁰Co-γ辐照剂量低于10 kGy时,玉米淀粉表面结构无变化,主要营养成分无显著变化。试验Ⅱ组澳洲白种公羊的采精量、精子活力、精子密度与试验Ⅲ组相比显著升高(P<0.05),与Ⅰ对照组相比无显著差异(P>0.05);试验Ⅲ组澳洲白种公羊第30天精子畸形率与试验Ⅱ组、Ⅰ对照组相比均显著升高(P<0.05),显微镜下观察可见双尾精子、双头精子、无尾精子等现象,其中双尾精子头部、尾部不完整;试验Ⅱ组湖羊母羊同期发情率、受胎率、产羔率和羔羊始重等指标与试验Ⅲ组相比显著升高(P<0.05),与Ⅰ对照组无显著差异(P>0.05)。综上,使用经10 kGy ⁶⁰Co-γ辐照后ZEN含量低于2 153 μg·kg^-1的玉米饲喂繁育绵羊,对绵羊定时人工授精无不利影响。本研究结果为⁶⁰Co-γ辐照模式下玉米中赤霉烯酮和品质的变化对绵羊定时人工授精的影响研究提供了理论依据。     

磷脂酶C-zeta基因(PLCz)多态性与中国荷斯坦公牛精液性状相关性研究

睾丸特异性磷脂酶C-zeta(PLCz)在哺乳动物的精卵融合过程及胚胎发育过程中发挥重要作用,主要是激发精卵融合过程中钙波的震荡.本实验选取3个种公牛站的424头中国荷斯坦公牛个体作为实验材料,通过提取种公牛精液中的全基因组DNA,运用DNA测序、PCR-RFLP技术对PLCz基因的全序列进行了单核苷酸多态性分析.实验发现8个新的SNPs位点,其中g.27529 T＞A和g.27597 T＞C位于内含子7,g.47969 G＞A、g.48020 T＞C、g.48079 G＞A、g.48127 G＞T和g.48384 G＞T位于内含子12,而位于外显子8的多态位点g.27768 G＞C发生突变后可以导致第337位的氨基酸丙氨酸改变为脯氨酸,故而此突变为非同义突变.此外,连锁不平衡分析表明g.27529 T＞A、g.27597 T＞C和g.27768 G＞C 3个位点完全连锁,以SNP1 g.27597T＞C代表;g.47969 G＞A、g.48020 T＞C、g.48079 G＞A、g.48127 G＞T和g.48384 G＞T 5个位点完全连锁,以SNP2 g.47969 A＞B代表.通过与公牛精液品质相关性分析表明,SNP2位点与精子畸形率显著相关(P＜0.05),SNP1则与公牛精液品质无显著关联性.然而,突变体SNP1和SNP2所构建的9种单倍型组合与公牛精液品质性状显著相关,单倍型组合TTAB的射精量(P＜0.05)、鲜精密度(P＜0.01)和冻后活力(P＜0.05)显著高于其他单倍型组合,鲜精活力显著高于单倍型组合TTBB(P＜0.05),畸形率则显著低于单倍型组合CTAB(P＜0.05).结果表明,单倍型组合TTAB可以作为中国荷斯坦公牛高精液品质的有效分子标记.