日粮共轭亚油酸对黄羽肉鸡腹脂沉积的影响及机理研究

选择1日龄黄羽肉鸡60只,随机分成2组。在实验组中添加3%共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA),对照组日粮中添加3%的食用菜籽油。49日龄屠宰,采集腹部脂肪组织。用RT-PCR方法,以β-actin为内标,相对定量测定腹脂中鸡生长激素受体（cGHR）、胰岛素样生长因子-1（cIGF-1）、胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（cIGF-ⅠR）、过氧化物增殖剂活化受体γ（cPPARγ）、脂联素（cAdiponectin）及其Ⅰ型受体（cAdipoⅠR）的mRNA丰度。结果显示：CLA处理使肉鸡的腹脂沉积下降了20.93%（P<0.05）,分别使腹脂中鸡cGHR mRNA和cPPARγ mRNA降低了24.74%（P<0.05）和66.52%（P<0.01）;而对cIGF-1、cIGF-ⅠR、cAdiponectin、cAdipoⅠR 基因表达无显著影响（P>0.05）;数据提示：CLA降低肉鸡脂肪沉积的作用可能通过GH途径和PPARγ通路介导,而与IGF-1和（或）GH-IGF-1途径、Adiponectin 的作用无关。     

皖西白鹅肝脏中GHR，IGF-1和 IGF-1R基因的表达及与朗德鹅的比较

选择90日龄的皖西白鹅和朗德鹅各20只,取肝脏组织。采用半定量逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）的方法,以β-actin为内标,对肝脏组织中生长激素受体（GHR）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、胰岛素样生长因子-1型受体（IGF-1R）的mRNA表达量分别进行比较分析,并分别与鹅的肝脏重及肝重率进行相关性分析。结果表明：皖西白鹅的肝脏重和肝重率都显著大于朗德鹅（p<0.05）;皖西白鹅肝脏中IGF-1的mRNA表达明显高于朗德鹅（p<0.01）;而GHR、IGF-1R mRNA在两品种间没有显著差异。体重与肝脏重显著正相关（r = 0.35,p<0.05）,肝重率与肝脏中IGF-1的mRNA的表达显著正相关（r = 0.67,p<0.01）,而与GHR、IGF-1R mRNA没有显著的相关性。结果提示：（1）90日龄的皖西白鹅肝脏生长优于朗德鹅;（2）两品种鹅肝脏生长的差异可能与肝脏中IGF-1 mRNA表达的差异有关。     

维生素A对高脂饲喂小鼠脂肪降解及胆固醇清除的影响

研究维生素A（VA）对高脂饲喂条件下小鼠（Mus musculus）肝脏中脂肪降解相关基因mRNA表达和血清胆固醇含量的影响,探索其是否可促进小鼠体内脂肪降解及胆固醇清除。通过石蜡切片观察高脂饲喂小鼠肝脏中脂滴分布;利用Real-timePCR检测小鼠肝脏各相关基因mRNA表达量;采用试剂盒测定血清胆固醇含量。结果显示,第1～3天VA处理组与对照组小鼠体重差异不显著（P〉0.05）;第4、9、27天,VA处理组小鼠体重显著低于对照组（P〈0.05）;VA处理组皮下脂肪（0.1890&#177;0.0056）g与腹膜下脂肪垫（0.3862&#177;0.0053）g重量极显著低于对照组（0.2620&#177;0.0020）g与（0.4867&#177;0.0052）g重量（P〈0.01）;切片观察肝脏充脂细胞数量明显减少;VA处理组小鼠肝脏清道夫受体B族Ⅰ型（（SR-BⅠ）、激素敏感脂酶（HSL）基因mRNA表达量极显著高于对照组（P〈0.01）;过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPARγ）、固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）基因表达量显著低于对照组（P〈0.05）;甘油三酯水解酶（TGH）基因表达量显著高于对照组（P〈0.05）;VA处理组小鼠血清胆固醇（CHO）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）浓度均极显著低于对照组CHO及HDL-C浓度（P〈0.01）。说明VA可通过SR-BⅠ促进脂肪降解和血清中HDL-C清除。     

半胱胺对肥育后期猪脂肪组织沉积的影响

选用体重55kg左右的肥育后期杜×(长×梅)三元商品猪80头,随机分成实验组和对照组,实验组在基础日粮中添加600 mg/kg半胱胺盐酸盐.35 d后进行屠宰实验,并采集血样、背部皮下脂肪组织和下丘脑.用放射免疫法测定血清胰岛素(insulin)、瘦素(leptin)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,用RT-PCR方法,以18S rRNA作内标,定量分析脂肪组织中生长激素受体(GH-R)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-IR)和leptin mRNA丰度以及下丘脑Ob基因b型受体(Ob-Rb)基因表达.结果显示半胱胺分别使猪的体重和日增重提高1.54%(P＜0.05)和4.83%(P＜0.05),分别使胴体脂率和6、7肋背膘厚下降14.90%(P＜0.05)和20.14%(P＜0.05).实验组血清中leptin水平下降39.33%(P＜0.05),血清中TNF-α水平升高25.00%(P＜0.05),但血清中insulin水平在二组间没有差异.实验猪脂肪细胞leptinmRNA丰度比对照猪减少15.02%(P＜0.05);实验猪脂肪细胞GH-R、IGF-1、IGF-IRmRNA丰度以及下丘脑leptin-RbmRNA丰度与对照猪无显著差异.表明半胱胺可抑制猪肥育后期的体脂沉积,改善胴体品质,而这种作用并不是通过改变脂肪组织中GH-R、IGF-1和IGF-IR的表达来实现的.     

鸡生长轴相关基因的研究进展

摘要：神经内分泌生长轴，又称脑垂体生长轴，在动物的生长发育过程中发挥重要的调节作用。下丘脑分泌的生长抑素(somatostatin, SS)和生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)、垂体分泌的鸡生长激素(chicken growth hormone, cGH )、靶器官（如肝脏）分泌的鸡生长激素受体(chicken growth hormone receptor, cGHR)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ, IGF-Ⅰ)，以及下丘脑-垂体-靶器官作用通路构成了鸡生长轴的基本内容。介绍了近几年来鸡生长轴的各激素（因子）及其受体的基因研究，以及相互间的作用机制，以进一步探索家禽的生长调控机理。     

胰岛素可逆性抑制牛脂肪细胞脂联素mRNA的表达

本研究从中国荷斯坦新生公犊的脂肪组织中分离培养前脂肪细胞,体外诱导分化9 d后,细胞变圆出现大量脂滴成为脂肪细胞,伴随着前脂肪细胞标志基因前脂肪细胞因子-1(preadipocyte factor-1,Pref-1)的表达消失和脂肪细胞标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)mRNA高丰度表达.利用半定量RT-PCR技术研究胰岛素对脂联素mRNA表达水平的影响,发现1 nmol/L胰岛素对脂联素mRNA的表达水平没有影响(p＞0.05),10 nmol/L、100 nmol/L和1000 nmol/L胰岛素分别能显著抑制脂联素mRNA 48.7%、61.4%和61.9%的表达(P<0.05).进一步研究发现,100 nmol/L胰岛素处理脂肪细胞24 h内呈时间依赖性抑制脂联素mRNA的表达,这种抑制效应随胰岛素的除去脂联素的转录水平24 h后恢复到对照水平,用LY294002抑制磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K/Akt)信号通路后,胰岛素对脂联素的转录没有影响.结果提示,体外胰岛素在脂肪细胞中能通过PI3K/Akt信号通路可逆性抑制脂联素mRNA的表达.     

鸡C/EBPα基因的多态性与生长和体组成性状的相关研究

CCAAT增强子结合蛋白α（CCAAT/enhancer-binding protein α,C/EBPα）在脂肪细胞分化过程中起重要作用,是生长和体组成性状的重要候选基因。以东北农业大学肉鸡（Gallusgallus）高、低腹脂双向选择品系的第9、10世代肉仔鸡为材料,采用测序方法对鸡C/EBPα基因的部分5′侧翼区、编码区和部分3′侧翼区序列进行多态性检测,研究该基因多态性与鸡生长和体组成性状之间的关系。研究发现在C/EBPα基因编码区552bp位置存在一个沉默突变c.＊552G〉A。统计分析结果表明,该突变对肉鸡的腹脂重、腹脂率、肝脏重、肝脏率、胫围、胫骨重等性状具有显著影响（P〈0.05）。相对于GG基因型个体,AA基因型个体具有较高的腹脂重和腹脂率（P〈0.05）;对于肝脏重、肝脏率、胫围、胫骨重等性状,GG基因型个体则显著高于AA基因型个体（P〈0.05）。初步推断C/EBPα基因可能是控制腹脂沉积、骨骼生长发育的主效基因或与主效基因紧密连锁。     

奶山羊围产期添加烟酰胺对羔羊腹脂脂质代谢的影响

烟酰胺可调控脂质代谢,但母体添加烟酰胺是否会调控子代脂质代谢尚不清楚,本实验旨在探究奶山羊(Capra hircus)围产期添加烟酰胺对子代脂质代谢的影响及其机制。选取15只围产期奶山羊(产前21 d),按配对设计原则分为3组,分别为对照组(C组)、产后1~28 d添加烟酰胺组(P组)和产前21 d至产后28 d添加烟酰胺组(EP组),所产羔羊分别为L_C组、L_P组和L_(EP)组(L_C组为对照组羔羊,L_P组为围产后期添加烟酰胺组羔羊,L_(EP)组为围产全期添加烟酰胺组羔羊)。于羔羊14、28日龄,晨饲后3 h颈静脉采血,检测血浆甘油三酯(triglyceride,TG)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)、总胆固醇(total cholesterol,TC)含量和脂肪酶活性;羔羊28日龄屠宰,采集腹腔脂肪组织,检测腹脂TG、FFA、TC含量和脂代谢关键基因表达量。结果表明,L_(EP)组28日龄羔羊血浆TG含量、腹脂TG含量、甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase mitochondrial,GPAM)、磷酸甘油酰基转移酶6(1-acylglycerol-3-phosphate acyltransferases6,AGPAT6)表达量极显著高于L_C组(P0.01),腹脂FFA含量、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂α(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivatorα,PGC1α)、固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulating element binding protein-1,SREBP-1)、脂肪酸合酶(fatty acid synthetase,FAS)基因表达量显著高于L_C组(P0.05)。L_P组羔羊腹脂TG含量、AGPAT6基因表达量极显著高于L_C组(P0.01)。综上,奶山羊围产期添加烟酰胺可通过提高羔羊脂肪合成代谢促进腹脂脂质沉积。本研究结果为研究母体添加烟酰胺对羔羊生长发育的影响提供了资料。     

能量对初情期前母猪卵巢和子宫IGF-1R和EGFR mRNA表达的影响

本实验采用9头“军牧1号”,随机分成三组,分别饲喂高、中、低三个能量组饲料,预饲7日后,进入试验期,试验期维持14日,取下每头母猪卵巢和子宫并用液氮保存。实验结果：在卵巢上,高能组猪IGF-1R、EGFR mRNA的表达量水平显著高于低能组和中能组的表达量（P＜0.05）,低能组猪卵巢上这两种生长因子受体表达量要显著低于中能组的( P＜0.05)。在子宫上,高能组猪IGF-1R、EGFR mRNA的表达量要显著高于中、低能组的表达量( P＜0.05),低能组上这两种生长因子受体表达量要低于中能组的,但差异不显著( P＞0.05)。结果表明：日粮能量水平显著影响初情期前母猪卵巢上两种生长因子受体的表达,高能量对表达有促进作用,有利于两种生长因子作用的发挥,从而利于生殖系统的生长发育;因此,IGF-1R和EGFR可能参与介导能量摄入对初情期前母猪生殖系统发育的影响。     

IGF-Ⅰ、GH和CLA对脂肪前体细胞增殖、分化和基因表达的影响

为探讨类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、生长激素(GH)和共轭亚油酸(CLA)对不同部位来源脂肪前体细胞的增殖和分化程度的影响,以大鼠(Rattus norveaicus)为实验模型,分别从附睾及皮下脂肪组织分离得到脂肪前体细胞,并在不同浓度的IGF-Ⅰ、GH和CLA处理后,用MTT法检测脂肪前体细胞的增殖,用油红O染色法检测脂肪前体细胞的分化聚脂程度。实验结果表明,各剂量IGF-Ⅰ和CLA均能够显著地促进大鼠附睾及皮下脂肪前体细胞的增殖与分化,但GH对大鼠附睾及皮下脂肪前体细胞的增殖与分化均无明显作用。为进一步观察IGF-Ⅰ和CLA对皮下脂肪组织的作用机制,实验采用半定量RT-PCR法检测细胞中PPARγ和C/EBPα基因表达水平,结果发现,100ng/mL IGF-I可显著上调大鼠脂肪前体细胞中PPARγ与C/EBPα基因表达水平;48ng/m LGH和100μmol/L CLA可显著促进PPARγ基因表达,但对C/EBPα mRNA表达无显著影响。结果示IGF-I可能主要通过上调PPARγ与C/EBPα基因的高水平表达进而促进大鼠脂肪前体细胞的分化,而CLA对脂肪前体细胞的作用在上调PPARγ的表达的同时,还作为PPARγ的配体激活该受体而发挥作用。