脂多糖刺激对断奶仔猪肌肉炎症和蛋白质降解相关基因表达的影响

本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激后不同时间断奶仔猪肌肉炎症和肌肉蛋白质降解相关基因表达的变化规律。选择42头(7.1±0.9)kg杜×长×大三元杂断奶仔猪,按注射LPS之前(0 h)和注射LPS后1、2、4、8、12、24 h随机分为7个处理,每个处理6头猪。预试14 d后,腹腔注射100μg/kg体重的LPS。按以上时间点将仔猪屠宰,取背最长肌样品待测。结果表明:背最长肌炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6的mRNA表达量在注射LPS 1～2 h后达到峰值;Toll样受体4信号通路关键基因Toll样受体4(TLR4)、骨髓分化因子88(MyD88),核苷酸结合寡聚域信号通路关键基因核苷酸结合寡聚域2(NOD2)、受体互作蛋白激酶2(RIPK2)的mRNA表达量在注射LPS 2～4 h后达到峰值;肌肉蛋白质降解相关基因叉头转录因子-1(FOXO-1)、FOXO-4、肌肉环指蛋白1(MuRF1)、肌萎缩F-box(MAFbx)的mRNA表达量在注射LPS 12 h后达到峰值。可见,LPS刺激诱导肌肉释放大量炎性细胞因子,使TLR4和NOD炎症信号通路关键基因及肌肉蛋白质降解相关基因mRNA显著表达。     

香菇多糖对脂多糖刺激断奶仔猪肌肉组织炎症反应及蛋白质降解相关基因表达的影响

本试验的目的是探究香菇多糖(LNT)对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪肌肉组织炎症反应及蛋白质降解相关基因表达的影响。试验选取24头体重(7.84±0.21) kg的健康三元杂交断奶仔猪,按照体重近似原则随机分为2组:对照组(12头)和香菇多糖组(12头)。对照组饲喂基础饲粮,香菇多糖组饲喂基础饲粮+0.02%香菇多糖。饲喂28 d后,每组选6头猪腹膜注射100μg/kg BW的LPS,剩下的6头则等量注射0.9%生理盐水,4 h后将仔猪麻醉、屠宰,取肌肉样品检测Toll样受体4(TLR4)、核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)以及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)/叉头转录因子(FOXO)信号通路相关基因mRNA表达量。结果显示:1)注射LPS后,仔猪TLR4、骨髓分化因子88(MyD88)、NOD2、受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(RIPK2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在背最长肌和腓肠肌中的mRNA表达量均显著上调(P0.05),且核转录因子-κB(NF-κB)在腓肠肌中的mRNA表达量显著上调(P0.05)。而添加香菇多糖后,背最长肌中MyD88、TNF-α和腓肠肌中TLR4、RIPK2、NF-κB的mRNA表达量显著上调(P0.05)。2)注射LPS后,仔猪背最长肌和腓肠肌中FOXO1和肌肉环指蛋白1(MuRF1)的mRNA表达量显著上调(P0.05),Akt1的mRNA表达量显著下调(P0.05)。而添加香菇多糖后,腓肠肌中肌萎缩F-box(MAFbx)的mRNA表达量显著下调(P0.05)。以上结果表明,在断奶仔猪饲粮中添加0.02%香菇多糖可能在应激急性期通过进一步激活LPS刺激导致的断奶仔猪肌肉组织中的TLR4和NOD信号通路来加强机体免疫力,同时通过调节Akt/FOXO信号通路相关基因表达来减缓肌肉蛋白质的降解。     

甘氨酸对脂多糖应激引起的断奶仔猪肝脏炎症的缓解作用研究

本试验旨在研究日粮中添加甘氨酸(Gly)对脂多糖(LPS)刺激的仔猪血细胞分类计数及肝脏炎症相关通路基因表达的调控作用。本试验选用21日龄、体重(7.17±0.41)kg的24头杜×长×大断奶仔猪,采用完全随机区组试验设计分为4个处理,分别为对照组、LPS组、1%Gly组和2%Gly组,每个处理6个栏,每栏1头猪。在试验第28天,后3个处理组的仔猪均腹膜注射100μg/kg体重的LPS,对照组仔猪注射等量的生理盐水,4 h后对仔猪进行采血和屠宰,采集肝脏样品。结果显示:日粮中添加Gly可以提高仔猪血液中白细胞和血小板数量(P0.05),还可以降低肝脏形态学损伤以及炎症相关通路基因MyD88、NOD1、NOD2以及RIP2的表达量(P0.05)。以上结果表明Gly可以缓解LPS刺激导致的仔猪肝脏炎症。     

脂多糖刺激后不同时间断奶仔猪空肠上皮细胞铁死亡的变化规律

本试验旨在探究用脂多糖(LPS)刺激后不同时间断奶仔猪空肠上皮细胞发生铁死亡的变化规律。选取体重和遗传基础相近的21日龄杜×长×大断奶仔猪42头,饲喂基础饲粮14 d后,空腹注射LPS,按100μg/kg BW注射LPS后不同时间随机分为7个处理,分别于0、1、2、4、8、12、24 h屠宰取样,测定空肠上皮细胞铁死亡相关基因mRNA表达量以及抗氧化水平。结果表明:在LPS刺激后8 h,空肠上皮细胞铁死亡关键基因膜蛋白转铁蛋白受体1(TFR1)、热休克蛋白B1(HSPB1)、铁反应元件结合蛋白2(IREB2)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA表达量最高(P<0.05);在LPS刺激后2 h,胱氨酸/谷氨酸反向转运体亚基(SLC7A11)的mRNA表达量最高(P<0.05);在LPS刺激后8、12、24 h,空肠上皮细胞总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均显著降低(P<0.05);在LPS刺激后8 h,谷胱甘肽(GSH)含量最低(P<0.05)。由此可见,在LPS刺激后8 h,断奶仔猪空肠上皮细胞铁死亡发生程度最为严重。     

α-酮戊二酸对脂多糖应激仔猪血浆胰岛素、氨基酸含量及腓肠肌mTOR信号传导途径的影响

本试验研究了α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,AKG)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)应激仔猪血浆胰岛素、氨基酸浓度及腓肠肌mTOR、p70S6K表达及磷酸化水平的影响.选用18头健康的(24±1)日龄断奶仔猪,随机分成3个处理(对照组、LPS组、AKG-LPS组),每个处理6个重复.各组基础饲粮一致,对照组和LPS组饲喂基础饲粮,AKG-LPS组饲喂基础饲粮+1% AKG.试验期为16 d,于第10、12、14和16天清晨,LPS组和AKG-LPS组仔猪分别腹膜注射80 μg/kg的LPS.第16天注射LPS 3 h后,前腔静脉采血.第17天屠宰取腓肠肌待测.LPS应激可提高仔猪血浆谷氨酸(glutamic acid,Glu)浓度(P<0.10),降低血浆胰岛素水平及腓肠肌P-mTOR/T-mTOR和P-p70S6K/T-p70S6K的值(P<0.05);饲粮中添加1% AKG可缓解应激仔猪血浆Glu浓度升高(P<0.05)、胰岛素水平(P<0.10)及腓肠肌P-mTOR/T-mTOR和P-p70S6K/T-p70S6K的值降低(P<0.05).由此可见,1% AKG可缓解LPS应激造成的血浆胰岛素降低和Glu浓度的升高,显著改善LPS应激导致的腓肠肌mTOR和p70S6K磷酸化水平的降低.     

脂多糖刺激后不同时间点断奶仔猪肠道中凋亡和自噬信号通路的动态变化

本试验旨在研究脂多糖（LPS）刺激后不同时间点断奶仔猪空肠中凋亡和自噬相关基因表达的变化。选取42头21日龄、体重（7.09±0.90） kg的杜×长×大断奶仔猪，按照注射LPS后时间点的不同随机分成7个处理，每个处理6个重复，每个重复1头猪。预试14 d后，仔猪腹膜注射100μg/kg BW的LPS，分别在注射前（0 h）和注射后1、2、4、8、12、24 h屠宰仔猪，取空肠样品，检测凋亡和自噬相关基因的表达。结果表明：与注射前相比，LPS刺激后，Fas配体（Fasl）的mRNA相对表达量在12和24 h均显著升高（P <0.05）; B淋巴细胞瘤XL蛋白（Bcl-xl）的mRNA相对表达量在2 h显著下降（P <0.05）；半胱天冬蛋白酶3(Caspase 3)的mRNA相对表达量在2 h显著升高（P<0.05）;Bcl-2相关X蛋白（Bax）的mRNA相对表达量在12 h极显著升高（P<0.01）；哺乳动物雷帕毒素靶蛋白（mTOR）的mRNA相对表达量在1和2 h显著下降（P<0.05）；关键调控因子自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Unc-51激...     

谷氨酰胺对脂多糖应激仔猪生长性能及血清生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮中添加谷氨酰胺(Gln)对断奶仔猪不同阶段生长性能的影响,以及其对脂多糖(LPS)诱导肠道损伤后断奶仔猪血清生化指标和生长性能的影响。选用24头28日龄健康的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分为3组,每组8个重复,每个重复1头猪。对照组和LPS组饲喂基础饲粮,Gln+LPS组饲喂添加了1%的外源性Gln的基础饲粮;在试验第22、25、28、30天,LPS组和Gln+LPS组腹腔注射100μg/kg BW LPS,对照组则注射相同剂量的生理盐水。试验期30 d。结果表明:1)LPS处理前(试验第1~21天),与对照组相比,Gln+LPS组显著提高了试验第1~7天断奶仔猪的平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)(P0.05),显著提高了试验第8~14天和第1~21天断奶仔猪的ADFI(P0.05)。2)LPS处理后(试验第22~30天),对照组断奶仔猪的ADFI、ADG、第30天体重均显著高于LPS组和Gln+LPS组(P0.05),Gln+LPS组断奶仔猪的ADFI、ADG、第30天体重均高于LPS组(P0.05)。3)LPS组断奶仔猪的小肠长度显著低于对照组和Gln+LPS组(P0.05),而对照组和Gln+LPS组之间无显著差异(P0.05)。4)与对照组相比,Gln+LPS组断奶仔猪的血清高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量和碱性磷酸酶(ALP)活性显著降低(P0.05),而Gln+LPS组与LPS组之间无显著差异(P0.05);Gln+LPS组和LPS组断奶仔猪的血清免疫球蛋白M(Ig M)含量显著提高(P0.05)。由此可见,饲粮中添加1%的Gln能够显著提高仔猪断奶后第1~7天的生长性能,之后效果不明显。饲粮中添加1%的Gln能够调节应激仔猪的血清生化指标,改善其生长性能和小肠长度,从而缓解仔猪断奶应激。     

刺五加多糖对脂多糖免疫应激断奶仔猪生长性能和血液生理生化指标的影响

本试验旨在探讨饲粮中添加刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)对脂多糖(LPS)免疫应激断奶仔猪生长性能和血液生理生化指标的影响。试验采用2×2两因素设计,即饲粮处理(添加0或800 mg/kg ASPS)和免疫应激处理(注射LPS或生理盐水)。将64头(28±3)日龄、平均体重为(7.22±0.46)kg的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪随机分为4个处理,其中处理1和2饲喂基础饲粮(添加0 mg/kg ASPS),处理3和4饲喂试验饲粮(添加800 mg/kg ASPS),试验第14和21天,处理2和4仔猪腹腔注射100μg/kg BWLPS,处理1和3仔猪腹腔注射等量生理盐水。注射后3 h采血,测定血液生理生化指标。试验期21 d。结果表明:试验1～14 d,饲喂ASPS对未注射LPS的仔猪生长性能无显著影响(P>0.05);试验15～21 d,饲喂ASPS显著增加仔猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)(P<0.05),且饲喂ASPS使注射LPS的仔猪ADG和ADFI显著增加(P<0.05),但对注射生理盐水的仔猪无显著影响(P>0.05)。饲喂ASPS对仔猪ADG的影响与LPS刺激存在显著互作关系(P<0.05)。试验第14天,饲喂ASPS显著提高了仔猪外周血淋巴细胞数量(P<0.05),对外周血淋巴细胞数量的影响与LPS刺激存在显著的互作关系(P<0.05),且饲喂ASPS能显著增加注射LPS的仔猪外周血淋巴细胞数量(P<0.05),但对注射生理盐水的仔猪无显著影响(P>0.05)。试验第14和21天,饲喂ASPS显著降低了仔猪血浆α-酸性糖蛋白(α-AGP)、葡萄糖、前列腺素E2(PGE2)含量(P<0.05),显著提高了血浆白细胞介素-2(IL-2)含量(P<0.05),且其对α-AGP、IL-2、PGE2含量的影响与LPS刺激存在显著的互作关系(P<0.05),饲喂ASPS能显著降低注射LPS的仔猪血浆α-AGP、PGE2含量(P<0.05),但对注射生理盐水的仔猪无显著影响(P>0.05)。由此可见,饲喂ASPS对非免疫应激断奶仔猪的生长性能无影响,但可以缓解免疫应激断奶仔猪的生长抑制,ASPS缓解免疫应激断奶仔猪生长抑制与降低其血浆α-AGP和PGE2含量,提高外周血淋巴细胞数量和血浆IL-2含量有关。     

脂多糖刺激对仔猪肠道、肝脏和肌肉组织NODs信号通路关键基因及其负调控因子mRNA表达的影响

本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激对仔猪核苷酸结合寡聚化结构域蛋白(NODs)信号通路关键基因及其负调控因子m RNA表达的影响。选取12头杜×长×大断奶仔猪,分成2个处理组,每个处理组6个重复。试验组注射100μg/kg体重的LPS,对照组注射等量的生理盐水。注射LPS或生理盐水4 h后,屠宰仔猪,取空肠、回肠、肝脏、背最长肌和腓肠肌,应用实时荧光定量PCR技术测定NODs信号通路关键基因及其负调控因子m RNA表达水平,包括NOD1、NOD2、受体相互作用蛋白激酶2(RIPK2)、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、矢车菊苷β1(ACAP1)和Erbb2相互作用蛋白(ERBB2IP)m RNA表达水平。结果表明:与对照组相比,LPS刺激显著提高了肝脏NOD1、NOD2、RIPK2、NF-κB和TNF-α,背最长肌NOD2、RIPK2和TNF-α,腓肠肌NOD2、RIPK2、NF-κB和TNF-α,空肠RIPK2和TNF-α的m RNA表达量(P0.05),LPS刺激有提高回肠RIPK2和NF-κB m RNA表达量的趋势(P0.10);同时,LPS刺激显著降低了空肠ACAP1和ERBB2IP,回肠和肝脏ACAP1的m RNA的表达量(P0.05)。这表明,LPS激活仔猪肠道、肝脏和肌肉组织中NODs信号通路关键基因的表达,而抑制其负调控因子ACAP1和ERBB2IP的表达。     

脂多糖对断奶仔猪外周血免疫细胞和免疫器官中PPARγ mRNA表达水平的影响

研究脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)对断奶仔猪外周血白细胞、胸腺、脾脏和肠道淋巴结过氧化物酶体增殖物活化受体(PPARγ) mRNA表达水平的影响,探讨免疫应激是否影响免疫细胞和免疫器官PPARγ mRNA的表达.选取12头健康的(21±1)d断奶仔猪,分成2个处理,每个处理6个重复.试验组注射100μg/kg BW的LPS,对照组注射等量的生理盐水.于注射LPS后1.5和3h,采血分离血浆、白细胞;注射LPS后3h屠宰仔猪,取胸腺、脾脏和肠道淋巴结进行相关检测.结果表明:(1)LPS刺激后1.5和3h,肿瘤坏死因子TNF-α和皮质醇含量均急剧上升(P<0.001);LPS刺激后3h,胰岛素含量显著下降(P<0.001),胰高血糖素含量显著上升(P<0.001).此外,LPS刺激也导致血液生化指标发生了显著变化.这表明LPS刺激导致机体处于急性免疫应激状态.(2)LPS刺激导致外周血白细胞(P<0.001)、胸腺(P<0.05)和肠道淋巴结(P<0.05)的PPARγ mRNA表达量显著升高,表明免疫应激诱导了免疫细胞和免疫器官中PPARγ mRNA的表达.提示PPARγ可能参与仔猪免疫应激的调控,可能成为缓解免疫应激的一个新靶点.     

复合植物精油对脂多糖诱导的断奶仔猪免疫应激的影响

试验旨在研究复合植物精油（OCT）对脂多糖（LPS）诱导的断奶仔猪的免疫应激的影响。试验选取28日龄左右的杜×长×大三元杂交仔猪，随机分成3个处理组：对照组（基础日粮，注射生理盐水），LPS组（基础日粮，注射LPS），OCT组（基础日粮+50 mg/kg OCT，注射LPS）。每组8个重复，每个重复1头猪。于试验第21天注射LPS（100 μg/kg体重）或等体积的生理盐水，注射3 h后前腔静脉采血进行白细胞分类计数；6 h后屠宰，取胸腺、脾脏，-80℃保存，用于测量胸腺、脾脏免疫相关基因白介素-4（IL-4）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、核因子（NF-κB）以及转录相关基因转录激活因子3（STAT3）的基因相对表达量。结果表明：①与对照组相比，LPS刺激降低了仔猪血液中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及嗜酸性粒细胞数量（P<0.05）；与LPS组相比，日粮中添加OCT提高了白细胞的数量（P<0.05）；②与对照组相比，LPS刺激上调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3 mRNA水平（P<0.05），下调了脾脏IL-4、TNF-α及胸腺IL-4、TNF-α、NF-κB mRNA水平（P<0.05）；与LPS组相比，添加OCT下调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3 mRNA水平（P<0.05）；上调了胸腺IL-4、IL-10、TNF-α、NF-κB的mRNA水平（P<0.05）。综合上述结果，LPS诱导发生了仔猪免疫应激，OCT在一定程度具有缓解作用。     

日粮中添加恩拉霉素和脂多糖攻毒对断奶仔猪生产性能和血清生化指标的影响

本试验旨在研究在正常与免疫应激条件下添加恩拉霉素对仔猪的作用效果及安全性。将36头21日龄断奶、健康、DLY阉公仔猪随机分为3个处理,每个处理12个重复;分别饲喂基础日粮及在基础日粮中添加5、80 mg/kg恩拉霉素日粮(加药期),21 d后,各组均饲喂基础日粮(停药期),7 d后,每处理随机取出6头仔猪腹腔注射LPS 200μg/kg体重(应激期),剩余6头仔猪腹腔注射等量生理盐水。分别于应激前和应激后2.5 h、3 d采血。结果表明:日粮添加5 mg/kg和80 mg/kg恩拉霉素不同程度提高0～7、8～14、15～21 d和0～21 d仔猪的日增重和采食量,而对饲料增重比无影响;前期添加恩拉霉素组仔猪的生产性能在停药期仍略优于对照组;LPS应激导致仔猪平均日增重和平均日采食量显著下降(P<0.05);加药期添加恩拉霉素可显著提高应激期仔猪平均日采食量(P<0.05)。注射LPS前,各组血清理化指标没有显著差异(P>0.05);注射LPS 2.5 h后,血清丙二醛、皮质醇和IGF-1的含量显著提高(P<0.05);注射LPS3 d后,血清IGF-1浓度显著提高(P<0.01),NO浓度显著降低(P<0.01),皮质醇浓度有提高的趋势(P<0.1);日粮添加恩拉霉素显著降低了血清中IGF-1的浓度(P<0.01),与LPS具有显著互作效应(P<0.05)。     

菊粉对断奶仔猪生长性能、养分表观消化率及抗氧化能力的影响

本试验旨在研究饲粮添加不同水平菊粉对断奶仔猪生长性能、养分表观消化率及抗氧化能力的影响。选取32头平均体重为(7.10±0.20)kg的杜长大(DLY)断奶仔猪,随机分为4组,每组8个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加2.5、5.0和10.0 g/kg的菊粉(等量替代基础饲粮中的玉米)。试验期21 d。结果表明,与对照组相比:1)饲粮添加2.5、5.0和10.0 g/kg菊粉对断奶仔猪平均日采食量和平均日增重无显著影响(P>0.05),饲粮添加2.5、5.0和10.0 g/kg菊粉可显著提高断奶仔猪粗灰分表观消化率(P<0.05),饲粮添加2.5和5.0 g/kg菊粉可显著提高断奶仔猪粗蛋白质表观消化率(P<0.05)。2)饲粮添加2.5 g/kg菊粉可显著提高血清中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性(P<0.05);饲粮添加2.5、5.0和10.0 g/kg菊粉可显著降低肝脏中丙二醛(MDA)含量(P<0.05);饲粮添加2.5和5.0 g/kg菊粉可显著提高空肠中过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),饲粮添加2.5和5.0 g/kg菊粉可显著降低回肠中MDA含量(P<0.05),饲粮添加2.5 g/kg菊粉可显著提高十二指肠中CAT活性(P<0.05)。3)饲粮添加2.5、5.0和10.0 g/kg菊粉可显著提高肝脏中核因子E2相关因子2(Nrf2)的mRNA相对表达量(P<0.05),饲粮添加5.0和10.0 g/kg菊粉可显著提高肝脏中血红素氧合酶-1(HO-1)的mRNA相对表达量(P<0.05)。4)饲粮添加2.5、5.0和10.0 g/kg菊粉可显著提高十二指肠中HO-1的mRNA相对表达量和空肠中Nrf2的mRNA相对表达量(P<0.05),饲粮添加2.5和5.0 g/kg菊粉可显著提高回肠中HO-1和Nrf2的mRNA相对表达量(P<0.05),饲粮添加2.5 g/kg菊粉可显著提高空肠中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)的mRNA相对表达量(P<0.05),饲粮添加10.0 g/kg菊粉可显著提高空肠中HO-1和Keap1的mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,饲粮添加菊粉对断奶仔猪生长性能无显著影响,但可改善养分表观消化率,提高抗氧化能力。本试验条件下,断奶仔猪饲粮中菊粉适宜添加水平为2.5 g/kg。     

丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道屏障功能和血清细胞因子含量的影响

本试验旨在研究饲粮中添加丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道屏障功能和血清细胞因子含量的影响。试验采用单因子设计,选择28日龄、体重相近、健康状况良好的"杜×长×大"断奶仔猪12头,按完全随机区组设计分为2个组,每组6个重复,单栏饲养。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮+5×10~5CFU/g丁酸梭菌。试验预试期3 d,正试期14 d。结果表明:与对照组相比,试验组仔猪平均日增重显著提高7.83%(P0.05)、料重比降低5.26%(P0.05);试验组仔猪空肠NOD样受体蛋白(NLRP)3(P0.05)、NLRP6(P0.05)、NLRP12(P0.01)、封闭蛋白1(claudin-1)(P0.01)和紧密连接蛋白2(ZO-2)(P0.05)的mRNA相对表达水平显著或极显著上调,回肠claudin-1和ZO-2的mRNA相对表达水平极显著上调(P0.01);试验组仔猪空肠和回肠中乳酸杆菌数量显著提高(P0.05),空肠中大肠杆菌数量降低2.49%(P0.05),回肠中大肠杆菌数量显著降低(P0.05);试验组仔猪血清白细胞介素(IL)-1β含量降低5.47%、IL-10含量提高25.43%(P0.05)。综上所述,饲粮中添加丁酸梭菌能提高仔猪小肠屏障功能,调节机体免疫和肠道菌群平衡,促进仔猪生长。     

甘氨酸对脂多糖刺激仔猪肝脏能量代谢及相关基因表达的调控作用

本试验旨在研究甘氨酸(Gly)对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪肝脏能量代谢、能量代谢关键酶和相关调节因子mRNA表达的调控作用。选取24头杜×长×大仔猪,分成4个组,每组6个重复。4个组分别为:1)对照组(基础饲粮);2)LPS组(LPS+基础饲粮);3)1.0%Gly组(LPS+基础饲粮+1.0%Gly);4)2.0%Gly组(LPS+基础饲粮+2.0%Gly)。试验第28天,试验组仔猪腹膜注射100μg/kg BW的LPS,对照组注射等量的生理盐水。试验猪于注射LPS或生理盐水4 h后屠宰,取肝脏样品待测。结果表明:1)与LPS组相比,1.0%Gly显著提高了仔猪肝脏三磷酸腺苷(ATP)浓度和能荷(EC)水平(P0.05),显著降低了一磷酸腺苷(AMP)/ATP值(P0.05),并有降低AMP浓度的趋势(P0.10);2.0%Gly有降低AMP/ATP值的趋势(P0.10)。2)与LPS组相比,1.0%Gly显著降低了仔猪肝脏己糖激酶2(Hexok2)和柠檬酸合成酶(CS)的mRNA表达量(P0.05);2.0%Gly显著降低了肝脏Hexok2和丙酮酸激酶(PK)的mRNA表达量(P0.05),并有降低肝脏CS mRNA表达量的趋势(P0.10)。3)与LPS组相比,1.0%Gly显著提高了仔猪肝脏腺甘酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)的mRNA表达量(P0.05)。综上所述,饲粮中添加Gly能够改善LPS刺激引起的断奶仔猪肝脏能量代谢紊乱,调控糖酵解和三羧酸循环等代谢途径中相关酶的表达。     

lncRNA-47491、lncRNA-49770和lncRNA-51636在发生炎症反应仔猪肝脏和脾脏中的表达分析

本试验旨在研究脂多糖(LPS)诱导仔猪发生炎症反应时肝脏和脾脏炎性细胞因子和lncRNA-47491、lncRNA-49770、lncRNA-51636表达的变化。选取8头21日龄、体重(7.15±0.42)kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,随机分为对照组、LPS组,每个处理4个重复,每个重复1头猪。预试14 d后,LPS组和对照组腹腔分别注射100μg/kg体重的LPS、生理盐水,4 h后屠宰并取肝脏和脾脏组织样待测。结果表明:与对照组相比,LPS刺激使肝脏和脾脏中炎性细胞因子的mRNA表达量显著上调;LPS诱导的炎症反应中lncRNA-47491、lncRNA-49770和lncRNA-51636的表达量均显著上调;对lncRNA调控的顺式靶标基因的预测结果显示,lncRNA-47491和lncRNA-51636的靶基因有TMEM235、PGS1、TK1等,lncRNA-49770的靶基因有SRRM2、CLDN6、TNFRSF12A等,且这些基因均与炎症相关。综上,lncRNA-47491、lncRNA-49770及lncRNA-51636可能参与了机体的炎症反应,且靶标基因的预测提示其可能发挥不同的调控作用。     

Expression of Toll-like receptors and downstream genes in lipopolysaccharide-induced porcine alveolar macrophages

The aim of the present study was to determine the age-related kinetic changes of Toll-like receptors (TLRs) and downstream genes expression, and secretion of cytokine in lipopolysaccharide (LPS) stimulated porcine alveolar macrophages (AM). For this purpose, AMs were isolated from 5-day-old newborn piglets and 120-day-old young pigs. mRNA expression and cytokine measurement was determined by quantitative real-time PCR and ELISA, respectively. First, AMs were incubated for 24 h in the absence or presence of increasing concentrations of LPS. Results showed the up-regulation of TLRs 2, 4, 5 and 9 mRNA from all concentrations of LPS used, as compared to non-stimulated cells, and TLR4 was the highest expression in both ages (P<0.05). Furthermore, quantitative analysis demonstrated increased expression of mRNAs encoding TLRs 2, 4, 5 and 9, LBP, CD14, MD2, MyD88, IRAK4 and TRAF6 in both ages in a time-dependant manner (P<0.05). Overall, LPS inducible mRNA for TLR4, LBP, CD14 and MyD88 had higher expression in newborn piglets compared with those of young pigs (P<0.05). The level of cytokine protein IL6 and TNFα in supernatant fluid significantly varied with time of incubation and age of animals. Their concentration increased immediately at 1 h after LPS stimulation and remained significantly higher up to 48 h in both ages. Production of pro-inflammatory cytokine protein IL6 and TNFα in supernatant was significantly higher in young pigs than those of piglets. This study suggests that differential age-related changes in the expression of TLRs and downstream genes, and pro-inflammatory cytokine could contribute to a different age-related innate immune response during pulmonary infection. Further investigation is warranted to determine the precise effects of LPS on porcine AMs by means of a functional study across a wider age range.