海藻酸钠/壳聚糖双层合生元微胶囊制备及储藏稳定性和控制性释放

以海藻酸钠和壳聚糖为包埋剂,在其中加入低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS),对嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)进行包埋,制备海藻酸钠/壳聚糖双层合生元微胶囊,并对其制备工艺、控制性释放和储藏稳定性进行研究.结果表明:当海藻酸钠的质量浓度为2g/100mL时,微胶囊的外观、粒径和包埋率均较好;在对得到的双层微胶囊进行人工胃肠道抗逆实验,发现双层包埋的微胶囊在人工胃液中比较稳定,S.thermophilus 基本不被释放,而当双层微胶囊在人工肠液液中到150min后微胶囊已经完全崩解,乳酸菌释放完毕.通过对游离状态和双层包埋微胶囊菌体存活率进行计算,游离状态的S.thermophilus菌悬液经过冷藏,菌体存活率下降十分明显,未添加GOS的菌悬液在第13天菌体存活率仅有0.32％,而添加GOS的菌悬液活菌存活率相对较高,可以达到14.64％;但双层微胶囊在添加和未添加GOS时,菌体存活率在整个储藏期内下降幅度均较小,在第17天时,菌体存活率依然能够达到93.64％和87.98％.     

具有益生潜力的乳酸杆菌筛选

以分离自西藏、新疆、青海地区传统自然发酵样品中的30 株可用于食品中的乳酸杆菌为研究对象，以鼠李糖乳杆菌LGG为对照，经耐酸、耐胆盐、疏水作用、静电作用和自聚能力评价，初步筛选获得16 株乳酸菌，对初筛优良菌株进行模拟胃液和模拟肠液耐受性实验。结果表明：4 株菌在模拟胃液中孵育60 min存活率大于14.44%，4 株菌在模拟胃液中孵育30 min存活率为3.91%～100.00%；16 株菌在模拟肠液中孵育5 h存活率为31.73%～112.83%；菌株Z-1为最佳抗性菌株，在模拟胃液中孵育60 min存活率为93.07%，在模拟肠液中孵育5 h存活率为106.5%，疏水率为97.52%，对氯仿和乙酸乙酯的静电作用率为97.35%和24.67%，自凝聚率为11.26%。     

乳酸菌冷冻保护剂选择的研究

乳酸菌浓缩发酵剂的制备过程中,冷冻对菌体的损伤比较明显。通过在保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌菌悬液中添加不同的保护剂并测定冷冻前后乳酸菌菌数,筛选出适用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌的保护剂。最终确定的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌保护剂配方为:蔗糖浓度为10%,脱脂乳浓度为10%,谷氨酸钠浓度为5%。菌体经冷冻处理后,冷冻存活率可达到95.00%,比不添加保护剂的菌体存活率大大提高。此配方也简单易得,完全可以满足生产需要。     

乳酸菌冷冻保护剂的选择

乳酸菌浓缩发酵剂的制备过程中,冷冻对菌体的损伤比较明显。通过在保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌菌悬液中添加不同的保护剂并测定冷冻前后乳酸菌菌数,筛选出适用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌的保护剂。最终确定的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌保护剂配方为:蔗糖浓度为10%,脱脂乳浓度为10%,谷氨酸钠浓度为5%。菌体经冷冻处理后,冷冻存活率可达到95.00%,比不添加保护剂的菌体存活率大大提高。此配方也简单易得,完全可以满足生产需要。     

乳化凝胶化法微囊化益生菌抗胁迫作用研究

本试验旨在研究基于乳化凝胶化基础上制备的微囊化布拉迪酵母菌(Saccharomyces boulardii)和粪肠球菌(Enterococcus faecium)对储藏、高温、胃液和肠液等胁迫作用的抵抗力。以未包被的菌粉为对照,高温热处理的方法为烘箱干热法,温度为110和130℃,各处理30、45和60 s;在配制好的模拟胃液和肠液中,各处理30、90和180 min。结果表明:1)常温条件下储存5个月,微囊化布拉迪酵母菌和微囊化粪肠球菌的存活率比菌粉组分别高出34.63%和19.46%。2)微囊化过程提高了益生菌,尤其是粪肠球菌在110和130℃高温下的耐受性[与菌粉组差异显著(P0.05)]。3)模拟胃液处理30 min后,与菌粉组相比,微囊化的布拉迪酵母菌和微囊化粪肠球菌存活率分别提高了59.18%和51.80%,处理180 min后,分别提高了57.76%和46.73%。4)模拟肠液处理180 min,与菌粉组相比,微囊化布拉迪酵母菌和微囊化粪肠球菌的耐受力分别提高了26.89%和21.16%。5)50 min时微囊化布拉迪酵母菌和微囊化粪肠球菌的释放率分别可达71.74%和87.47%。综合得出,基于乳化凝胶化原理上的微胶囊技术可显著增强布拉迪酵母菌和粪肠球菌对储藏、高温、胃液和肠液等体内、外不良环境的抗性。同时,表现出了体内缓慢释放的特点。     

果胶/壳聚糖合生元微胶囊制备及其体外人工胃肠道耐受性和储藏性能研究

本研究以果胶、壳聚糖为壁材，乳酸片球菌和菊粉为壁芯，运用挤压法制备果胶/壳聚糖合生元微胶囊（PC（PA-I）MCs），并以包埋率、颗粒形态、机械强度、体外胃肠道耐受性及贮藏性能等为考核指标，研究合生元微胶囊包被工艺。试验分为3组，分别为游离状态的乳酸片球菌组（PA）、单独包埋乳酸片球菌制得的微胶囊组（PC（PA）MCs），菊粉与乳酸片球菌一同包埋制得的合生元微胶囊组（PC（PA-I）MCs）。结果表明，当果胶的质量浓度为5 g/100 mL、菊粉添加量为25 mg/mL、壳聚糖质量浓度为0.8 g/100 mL时，PC（PA-I）MCs组的微胶囊外观、粒径、机械强度和包埋率较好；通过体外人工胃肠道耐受性试验发现，PC（PA-I）MCs组在体外人工胃液中比较稳定（P<0.05），在体外人工肠液中30 min开始迅速释放，到2 h后微胶囊基本完全崩解。通过4周的储藏试验比较发现，PA组乳酸片球菌在冷藏和常温下，菌体存活率下降明显，而添加菊粉的PC（PA-I）MCs组菌体存活率下降幅度较小，且PC（PA-I）MCs组的菌体存活率高于PC（PA）MCs组（P>0.05）；室温条件下PC（PA-I）MCs组的菌体存活率高于PC（PA）MCs组（P>0.05）。综上所述，以菊粉为益生元的果胶/壳聚糖微胶囊对乳酸片球菌有较好的包埋效果。     

肠溶性微生物微胶囊对断奶仔猪生产性能的影响

试验研究有益微生物微胶囊的肠溶性对断奶仔猪生产性能的影响。将有益微生物包被成微胶囊后分别置于人工胃液和人工肠液中进行肠溶性测定，结果表明，该胶囊在人工胃液中1h基本不崩解，在人工肠液中15min能释放活菌数超过90％。将该微胶囊、未包被的微生物和土霉素分别添加于饲料中，进行108头35日龄断奶仔猪40d的饲养试验，结果表明，与未包被的微生物组和土霉素组相比，微胶囊组日增质量显著提高，料肉比显著降低，且添加微胶囊组仔猪腹泻率为0。结论为该微胶囊可耐受胃液破坏，肠溶性好并可提高仔猪的生产性能，减少腹泻的发生。     

姬松茸多糖-嗜酸乳杆菌合生元微胶囊的研制

研究旨在制作一种可以通过单胃动物胃液的酸性环境并在肠液中释放的姬松茸多糖-嗜酸乳杆菌合生元.试验采用微胶囊法,以海藻酸钠和姬松茸多糖作为复合壁材包裹嗜酸乳杆菌,使用壳聚糖进行2次包被,测定微胶囊的包埋率、在人工胃液中的保护性及在人工肠液中的释放性,评估微胶囊的效果;使用牛津杯法测定合生元的抑菌效果.结果 显示,当海藻酸...     

海藻酸钠/羧甲基微胶囊对副干酪乳杆菌生存率影响的研究

为探究提高食品中副干酪乳杆菌在胃肠道存活的方法，本试验以海藻酸钠（Alg）和N，O-羧甲基壳聚糖（CMCS）为囊材，采用静电液滴法和传统挤出法分别制备海藻酸钠-羧甲基壳聚糖微胶囊|以Alg和CMCS的不同配比为影响因素，测定其包埋产率、抗酶活性、过胃肠道模拟液后的存活率以及耐储存性。对微胶囊进行傅利叶红外分析和扫描电镜分析。结果表明：静电液滴法能够明显改善微胶囊粒径大小|Alg和CMCS比例为1:1时（E-AC）微胶囊包埋产率最大，为（92.20±1.02）%。与游离的副干酪乳杆菌相比，过胃肠道模拟液后（SIF）后，E-AC微胶囊包埋的益生菌存活率显著提高（P < 0.01），存活量为（7.6±0.65) Log10 cfu/mL。综上，采用静电液滴法制备的微胶囊与传统挤出法相比粒径较小，存活率无统计学差异。储存性试验表明，E-AC在储存4周后，益生菌存活率较高。综上，Alg和CMCS为壁材制备的微胶囊在一定程度上改善了益生菌的存活率和耐储存性。 [关键词] 海藻酸钠|N,O-羧甲基壳聚糖|副干酪乳杆菌|存活率     

饲料加工和贮存过程对益生菌活性的影响

本试验研究了饲料加工和贮存过程对9株益生菌活性的影响,最终淘汰活性低的益生菌。将9株实验室分离选育出的有益益生菌分别制成单一的菌制剂添加到仔猪料中,混合机内充分混匀后,并进行制粒,最终将混合机内获得的粉料和制粒机内获得的颗粒料分别贮存60 d。结果表明,无论在饲料加工还是贮存过程中,5株芽孢杆菌始终保持着较高的存活率,因此,实验室分离选育出的5株芽孢杆菌适合饲料加工和贮存;而4株乳酸菌在饲料制粒后存活率较低,其中,嗜酸乳杆菌已检测不出活菌数,嗜热链球菌、屎肠球菌、鸡肠球菌与嗜酸乳杆菌相比在饲料混合和贮存过程中存活率较高,但活性不如芽孢杆菌。     

酸奶生产用直投式乳酸菌发酵剂研究

对酸奶常用发酵剂菌种德氏乳杆菌保加利亚乳杆菌亚种S-1、嗜热链球菌G1208的高密度细胞培养条件,低温真空冷冻干燥中抗冷冻保护剂的选择等进行了研究。结果发现,德氏乳杆菌保加利亚乳杆菌亚种S-1在改良MRS培养基中的最佳培养条件为:培养温度43℃,起始pH值6.0,最高活菌数为1.2×109cfu/mL;采用3%蔗糖+3%海藻糖+10%β-环糊精+10%甘油+1%酵母膏+10%脱脂奶作为冻干保护剂,经低温冷冻干燥后,存活率为40.8%。嗜热链球菌G1208的最佳培养条件为:培养温度37℃,起始pH值7.0,对培养基配方进行优化后,最高活菌数为1.7×109cfu/mL;采用3%海藻糖+1%酵母膏+10%脱脂奶作为保护剂经低温冷冻干燥后,存活率可达96%。     

布拉酵母菌活菌制剂制备方法的比较研究

通过对布拉酵母菌生长特性的试验,确定了制备布拉酵母菌活菌制剂的最佳生长条件,并进行了活菌制剂的制备,与喷雾干燥法相比,确定了冷冻干燥法为最佳工艺。在此工艺基础上,做了3批次冻干试验,菌种存活率达到85%以上,室温及37℃贮存3个月存活率分别为78%、54%,其肠衣微囊在模拟肠环境中50min达到完全释放。     

微囊化沙门菌SP4噬菌体的制备及其缓释特性分析

通过采用阳离子醚化淀粉/海藻酸钠/黄原胶/纳米TiO₂/壳寡糖为原料制备微囊化SP4噬菌体,为控制沙门菌感染提供生物制剂。选用沙门菌SP4噬菌体,采用液滴法来制备微囊化SP4噬菌体,并对其效价、阳离子醚化淀粉浓度、海藻酸钠浓度、黄原胶浓度、壳寡糖浓度、pH稳定性、热稳定性、模拟胃液稳定性、模拟肠液释放行为以及保存稳定性进行分析。结果显示,当阳离子醚化淀粉浓度为2.4%、海藻酸钠浓度为2%、黄原胶浓度为1%、壳寡糖浓度为0.6%时,微囊化SP4噬菌体微球外形规则,包封率为97.5%,在pH5.0~8.0、温度10~30℃、模拟胃液pH2.0、0~30 min和pH3.0、0~150 min噬菌体保持较高的生物学活性,模拟肠液中4 h,噬菌体完全释放,4℃环境下保存6周噬菌体效价无明显降低。综上表明,微囊化沙门菌SP4噬菌体显著提高了噬菌体的稳定性和缓释性能,其耐酸特性利于抵御胃酸的分解,具有应用于生物防治的潜力,为进一步采用多因素试验制备微囊化沙门菌SP4噬菌体奠定了基础。     

乳酸菌贮存过程中耐湿保护剂的筛选

为提高乳酸菌在高湿环境下的贮存稳定性,本试验采用单因素试验法对4株乳酸菌在高湿条件下的贮存效果进行测定,并采用正交方法对保护剂配方进行优化。结果表明:最佳耐湿保护剂组合为魔芋粉1%、二氧化硅1%、磷酸三钙2%、微晶纤维素2%,在贮存条件为温度28℃,湿度70%条件下贮存22 d,屎肠球菌BLCC2-0012存活率为63.40%,比不添加保护剂组存活率提高47.36%。     

驴乳和马乳蛋白质组分及其消化特性

以驴乳和马乳的蛋白质组分研究为基础，结合十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究驴乳和马乳中蛋白质的消化特性。结果表明：驴乳和马乳在模拟胃液中消化120 min时酪蛋白的消化率分别为97.9%和96.7%，在模拟肠液中消化30 min时酪蛋白的消化率分别为98.6%和97.7%，在模拟胃肠液中消化30 min时蛋白质近乎消化完全，且马乳蛋白质比驴乳蛋白质更易消化；基于驴乳和马乳酪蛋白在模拟胃液和模拟肠液中消化30 min后的结果发现，驴乳和马乳中蛋白质主要在模拟肠液中消化，且马乳蛋白质更易消化。     

应用响应面法优化副猪嗜血杆菌冻干保护剂

旨在对副猪嗜血杆菌HS1712冻干保护剂进行优化，提高菌株在冷冻干燥后的存活率。以冻干存活率为评价指标，对配方中甘油、海藻糖、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、牛血清白蛋白(BSA)等5种成分缺失，考察其对副猪嗜血杆菌冻干存活率的影响。在此基础之上，结合单因素变量试验，应用Box-Behnken响应面法对脱脂奶粉、甘油、海藻糖的添加比例进一步优化。结果表明，配方中甘油、海藻糖缺失后，副猪嗜血杆菌冻干存活率显著下降(P<0.05)。通过对Box-Behnken试验结果进行回归模型拟合，得到最佳添加比例为脱脂奶粉6.8%、甘油2.2%、海藻糖2.7%,具体配方成分及添加比例为脱脂奶粉6.8%、甘油2.2%、海藻糖2.7%、PVP 0.5%。使用优化后配方进行冻干验证，副猪嗜血杆菌HS1712平均冻干存活率为79.20%,与预测值(80.87%)无显著性差异(P>0.05),表示模型可靠。上述结果表明，优化后的冻干保护剂可显著提高副猪嗜血杆菌HS1712冷冻干燥后的存活率。     

不同酿酒酵母体外模拟胃肠道内环境适应性研究

本研究旨在考察不同酿酒酵母菌株在体外模拟胃肠道内环境的适应性,为饲用酿酒酵母的科学使用提供理论依据。试验选择4株酿酒酵母菌株Sc1、Sc2、Sc3、Sc4分别开展:(1)37℃生长试验;(2)酸性酵母膏胨葡萄糖(YPD)肉汤中适应性生长试验;(3)人工胃液耐受性试验;(4)人工肠液耐受性试验。结果显示:Sc2在37℃具有较好的生长适应性,Sc4能够达到最大活菌数;pH3.0和pH4.0的YPD肉汤中4株酿酒酵母都能正常增殖,酿酒酵母Sc2、Sc3、Sc4酸耐受性优于Sc1;各菌株的商品化活性干酵母在人工胃液和人工肠液中2h存活率均高于50%,4h存活率高于45%,Sc4在模拟人工胃液中的耐受性最好,Sc3在模拟人工肠液中的耐受性最好。综上所述,不同酿酒酵母在体外模拟胃肠道内环境的适应性不同,酿酒酵母Sc2、Sc3、Sc4比酿酒酵母Sc1具有更好的胃肠道环境耐受性。     

一株禽大肠杆菌噬菌体发酵工艺及冻干保护剂配方优化

本研究以禽大肠杆菌噬菌体Ecp-2为研究对象,对其发酵工艺进行优化,并采用正交试验筛选该噬菌体的冻干保护剂。结果表明:发酵工艺经优化后发酵液噬菌体效价可达(10~(10)pfu/mL),较原发酵工艺提高1个数量级以上。冻干保护剂配方为脱脂奶粉15%、海藻糖9%、硫代硫酸钠5%、谷氨酸钠3%,噬菌体无菌过滤液采用摸索出的最优保护剂配方进行真空冷冻干燥,存活率可达75%,冻干粉效价(10~(11)pfu/g)。冻干粉在-20℃及4℃贮存180d,效价无明显损失。本研究为提高噬菌体制剂效价及延长噬菌体制剂货架期提供数据支持。     

屎肠球菌QW256冻干保护剂优化及菌粉贮藏稳定性研究

试验旨在探究屎肠球菌QW256菌粉制备工艺。研究屎肠球菌QW256菌粉制备过程中的离心条件、保护剂与复配、菌粉贮藏稳定性等因素对菌体存活率的影响。结果显示：菌体收集的最佳离心条件为6 000 g、10 min,悬浮基质为1.9%硫代硫酸钠溶液,优化后的最佳冻干保护剂配方为甘露醇25.38 g/L、蔗糖34.65 g/L、甘氨酸4.17 g/L和抗坏血酸钠1.57 g/L;在该条件下,屎肠球菌冻干存活率达95%以上,菌粉在25℃保藏100 d的存活率达85%以上。研究表明,复合冻干保护剂的研发对屎肠球菌的冻干及贮藏稳定性具有良好的保护作用。     

一株凝结芽孢杆菌的分离鉴定及益生性研究

试验旨在分离鉴定一株来源于池塘底泥的具有益生功能的凝结芽孢杆菌,并研究其益生性能。从自然池塘底泥分离得到一株产酸能力强的杆状细菌,通过生理生化特征分析和16S rDNA序列比对,鉴定分离菌为凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）。该分离菌株对大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、无乳链球菌和嗜水气单胞菌有抑制作用;在pH 2.5的模拟胃液中处理12 h存活率为71.9%;在胆盐浓度为0.3%的模拟肠液中处理12 h,存活率为84.4%。该分离菌株可有效降解亚硝酸盐,48 h降解率达到96.80%。将270只1日龄AA肉鸡分成3个处理组,日粮分别添加0（Ⅰ组）、1.0×10⁶（Ⅱ组）和1.0×10⁷ CFU/g（Ⅲ组）剂量的凝结芽孢杆菌NJ102,试验期42 d。结果显示,Ⅱ、Ⅲ组肉鸡的平均日增重和终末体重显著高于Ⅰ组（P<0.05）,料重比显著低于Ⅰ组（P<0.05）,各组间平均日采食量差异均不显著（P>0.05）。结果表明,来源于池塘底泥的凝结芽孢杆菌NJ102有一定的抗逆性和益生能力,能改善肉鸡的生长性能,具备作为微生物饲料添加剂开发的潜力。