围产期酮病牛脂联素mRNA和甘油三酯脂肪酶mRNA的表达

选择自然发生酮病牛10头、正常对照组奶牛（健康牛）10头。分别采取酮病牛和产后不同时期的奶牛尾部皮下脂肪组织,应用荧光定量PCR法检测脂联素（ADPN）mRNA与甘油三酯脂肪酶（HSL）mRNA表达的状况。酮病牛与对照组（健康）牛分别颈静脉采血,测定葡萄糖（GLU）、游离脂肪酸（NEFA）、β羟丁酸（BHBA）、甘油三酯（TG）以及胰岛素（INS）、胰高血糖素（GN）等相关指标。结果表明：酮病奶牛血糖显著降低,血浆NEFA和BHBA、血清INS降低和INS/GN变小;酮病奶牛HSLmRNA的表达低于围产期健康奶牛产后14d和产后28d,但ADPN mRNA却极显著地高于围产期健康奶牛产后的各生理时期,表明酮病牛因能量代谢紊乱脂肪动员产物NEFA和BHBA的增多,激发导致ADPN mRNA的表达,但ADPN mRNA的表达增加到一定量时反而会降低HSL mRNA的表达,说明ADPN参与了脂肪代谢的调节。     

健康奶牛围产期脂肪组织ADPN mRNA和HSLmRNA丰度

为探讨脂联素(ADPN)与激素敏感脂肪酶(HSL)对围产期奶牛脂肪动员的影响及其相互关系,随机选取围产期健康奶牛10头,分别于产前28天、产前14天、产后1天、产后14天和产后28天,应用荧光定量RT-PCR法检测其脂肪组织ADPN mRNA和HSL mRNA丰度。结果表明:在围产期,随着分娩日龄的临近,其脂肪组织的HSL mRNA水平随着ADPN mRNA丰度的降低而下降,产后则随其升高而上升,初步推测脂联素可能是通过调控脂肪HSL mRNA的表达和分泌来调节围产期奶牛脂肪的。     

不同能量摄入水平对围产期奶牛脂肪组织Leptin mRNA和HSL mRNA表达的影响

选用围产期健康奶牛30头随机均分为3组,其中组为对照组,组和组为试验组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组于产前28d开始分别饲喂中国奶牛饲养标准(2000)标准日粮(能量摄入100%组)、标准日粮增加20%日粮(能量摄入120%组)和标准日粮减少20%日粮(能量摄入80%组),产后各组奶牛均饲喂同一标准日粮至56 d。试验各组奶牛分别于产前28、14 d、产后1、14、28、56 d尾根部手术采取脂肪样品,采用荧光RT-PCR法对脂肪组织Leptin mRNA及HSL mRNA表达水平进行定量分析。结果表明,不同能量摄入水平显著影响脂肪组织Leptin mRNA和HSL mR-NA表达。低能饲喂明显提高了脂肪组织中Leptin mRNA表达,降低了HSL mRNA表达;高能饲喂明显降低了脂肪组织中Leptin mRNA表达,提高了HSL mRNA表达。     

NEFA和BHBA对体外培养的脂肪细胞HSL、ADPN mRNA表达的影响

在体外培养的牛脂肪组织和脂肪细胞中,分别添加5个浓度梯度的NEFA和BHBA,均设3个重复,通过荧光定量PCR技术,观测不同浓度的NEFA和BHBA对牛脂肪细胞ADPN mRNA与HSL mRNA丰度的影响。结果表明:NEFA在一定浓度范围内(0.2~0.8 nmol/L)对ADPN mRNA表达有显著促进作用并呈剂量依赖性,而高浓度(>1.6 nmol/L)时又显著下调其表达;0.2~0.8 nmol/L NEFA对HSL mRNA的表达有抑制作用,呈剂量依赖性,但在高浓度时(>0.8 nmol/L)反而促进了其表达(P<0.05)。低浓度的BHBA对HSL mRNA的表达无显著抑制作用,高浓度(1.2 mmol/L)的BHBA显著下调HSL mRNA的表达,并呈剂量依赖性;低浓度(<0.6mmol/L)的BHBA对ADPN mRNA的表达无明显作用,但高浓度的BHBA(>0.6 mmol/L)对ADPN mRNA的表达具有明显的抑制作用(P<0.05)。结论:代谢中间产物可通过促进ADPN mRNA或抑制HSL mRNA的表达来调节脂肪代谢。     

胰岛素、胰高血糖素对体外培养的牛脂肪细胞HSL mRNA和ADPN mRNA丰度的影响

试验在单层培养的新生犊牛脂肪细胞中,分别添加胰岛素（INS）与胰高血糖素（GN）,每个激素设置6个梯度3个重复,通过荧光定量PCR技术,观测2种激素对ADPN mRNA与HSL mRNA丰度的影响。结果表明,胰岛素抑制了脂肪细胞ADPN mRNA与HSL mRNA的表达,胰高血糖素促进了ADPN mRNA与HSL mRNA的表达,且ADPNmRNA与HSL mRNA存在相关性。     

脂联素对体外培养新生牛脂肪细胞ADPN、HSL mRNA表达的影响

取单层生长状态良好的犊牛脂肪细胞,分别添加0、2.5、5、15、30、50、100 μg/mL外源牛重组脂联素（adiponectin,ADPN）,培养12 h后提取总RNA,采用荧光定量PCR方法检测外源脂联素对脂肪细胞ADPN mRNA和HSL mRNA表达水平的影响。结果显示,随着ADPN添加量的增多,ADPN mRNA相对表达量呈下降趋势;添加ADPN 15 μg/mL时,HSL mRNA的表达量达到峰值,之后呈下降趋势。结果表明体外培养的脂肪细胞中ADPN mRNA表达量受自身的负调节,而添加适量的ADPN可刺激脂肪细胞HSL mRNA的表达。     

日粮能量水平对延边黄牛肌内脂肪含量与脂联素表达水平的影响

选取24头1.5岁健康延边黄牛,随机分成3个组,每组8头,育肥期120d,采用荧光定量RT-PCR法检测肉牛脂肪组织ADPN mRNA水平,用索氏浸提法测定肌内脂肪的含量,探讨牛脂联素与肌内脂肪沉积的关系。结果显示:高能日粮水平能促进ADPN mRNA水平增高,饲喂同一能量水平日粮,ADPN mRNA水平随着育肥日龄增加有增加趋势。经相关分析检验,延边黄牛脂肪组织ADPN mRNA水平与肌内脂肪含量呈正相关关系(P0.001)。     

乳牛前脂肪细胞原代培养过程中ADPN基因和HSL基因表达水平的检测

选取犊牛大网膜脂肪组织，进行牛前脂肪细胞的单层贴壁培养，在细胞接种后第4、6、8、10、12、14、16d分别提取细胞总RNA，采用实时荧光定量RT—PCR方法，检测了体外培养的犊牛前脂肪细胞不同时期ADPN基因mRNA和HSL基因mRNA的表达情况。结果表明，单层培养的脂肪细胞在第4、6、8、10、12、14、16d，ADPN基因mRNA的表达水平呈先下降后升高的趋势，而HSL基因mRNA的表达水平则呈下降趋势。     

围产期奶牛的脂肪分解供能与脂肪组织重构

脂肪分解是围产期奶牛提供能量和缓解能量负平衡的一种重要方式。产后过度的脂肪分解可能伴随着急剧的脂肪组织重构,使奶牛的代谢压力增加,导致脂肪肝和酮病等营养代谢病。本文总结了围产期奶牛脂肪分解供能代谢过程及其主要调控因素,从脂肪细胞组成改变、细胞外基质变化、巨噬细胞浸润和血管新生4个方面阐述了围产期奶牛脂肪快速分解过程中脂肪组织重构的特点,并剖析了这些生物过程影响围产期奶牛健康和生产性能的机制。     

不同能量摄入对围产期奶牛脂肪组织胰岛素受体mRNA丰度的影响

将年龄、胎次相同,年产奶量大于5000kg的围产期健康奶牛30头随机分为3组,每组10头。按照中国奶牛饲养标准(2000),低能组饲喂减少20%日粮(能量摄入80%组),对照组饲喂标准日粮(能量摄入100%组),高能组饲喂增加20%日粮(能量摄入120%组),试验从产前14天开始至产后28天结束,产后各组奶牛均饲喂标准日粮。采用半定量RTPCR方法检测了不同能量摄入对围产期奶牛脂肪组织胰岛素受体(InsR)mRNA丰度的影响。结果表明:各组脂肪InsRmRNA相对表达量从产前14天至产后28天均呈现先升高后降低的趋势,产后14天达到最大值,且产后高于产前;低能组产前InsRmRNA相对表达量低于高能组和正常组,产后1天至产后28天高于高能组和正常组,产后14天显著高于高能组(P<0.01)。可见,干乳期低能饲喂奶牛,产后脂肪InsRmRNA表达增加,提示产前适当降低能量摄入水平,有利于胰岛素抑制泌乳初期脂肪动员作用的发挥。     

葡萄糖对体外培养的牛脂肪细胞HSL mRNA和ADPN mRNA丰度的影响

在体外牛脂肪细胞培养介质中分别添加0,5,10,15,20,25 mmol/L等不同梯度的葡萄糖,各浓度组均设置3个重复,应用荧光定量PCR技术,观测不同浓度的葡萄糖对体外单层培养的牛脂肪细胞脂联素（ADPN）mRNA与甘油三酯脂肪酶（HSL）mRNA丰度的影响。结果表明,葡萄糖可抑制牛脂肪细胞ADPN mRNA的表达,并促进HSL mRNA的表达。     

浅析奶牛产后葡萄糖代谢失衡理论

奶牛围产期代谢紊乱是影响奶牛健康和生产性能的主要因素,探寻奶牛围产期营养代谢调控作用和机理是保证奶牛健康,提高生产性能,保证牧场经济效益的重要基础。本文深入分析了奶牛围产期能量代谢的调控机理,指出奶牛产后葡萄糖代谢失衡是引起奶牛围产期代谢紊乱的根本原因,并进行了详细论述。充分认识奶牛产后葡萄糖代谢失衡理论,对奶牛脂肪肝病、酮病及产后失重的预防和治疗具有指导意义,对奶业的健康发展具有重要意义。     

亚临床酮病对泌乳早期奶牛繁殖性能的影响

为探究围产期亚临床酮病与泌乳奶牛繁殖性能及卵泡发育之间的关系,本试验选择了黑龙江省某大型集约化牛场开展试验,根据产后血酮水平确定亚临床酮病组和健康组奶牛共80头,该牛场亚临床酮病发生率为71%;两组奶牛跟踪到产后50 d进行直肠检查和B超检查了解卵泡发育状况,并记录繁殖性能数据。结果显示:与健康组奶牛相比,亚临床酮病组奶牛产后首次发情天数延长10 d,产后60 d内发情次数少0.58次;产后50 d子宫复旧不全高15%,与亚临床酮病呈显著正相关(R^2=8.74);产后60 d卵泡直径小3 mm(P<0.05)。结论:该牛场奶牛亚临床酮病发病率较高,是引起奶牛产后繁殖障碍的风险因素,也是造成卵泡发育受阻的不良因素,会导致奶牛繁殖力下降。     

不同能量水平对围产期奶牛脂肪动员的影响

将围产期健康奶牛30头随机分为3组,分别于产前第28天开始饲喂标准日粮、标准日粮增加20%日粮和标准日粮减少20%日粮,产后各组奶牛均饲喂标准泌乳日粮,至产后第56天结束,观察干奶期不同能量摄入水平对围产期健康奶牛血液甘油三酯(TG)、非脂化酯肪酸(NEFA)和总酮体浓度的影响。结果表明:产前低能饲喂可以降低产后奶牛血液TG、NEFA和总酮体浓度。提示干乳期能量摄入水平是影响和调节产后能量平衡状态的重要因素。     

维产康降低荷斯坦奶牛酮病发生率效果的研究

高产奶牛产后体内经常会出现能量负平衡,从而引起多种代谢性疾病,进而降低产奶性能。本试验探讨了维产康对围产期奶牛酮病发生率的影响。试验将围产期奶牛随机分为试验组和对照组。产前3周开始,试验组奶牛饲喂添加维产康(100 g/天)的全混合日粮,持续至产后2周。试验结果显示,对照组与试验组牛只酮病(亚临床和临床)发生率分别为25.0%和11.1%(P0.05)。得出结论,维产康可以有效降低围产期奶牛酮病的发生率。     

不同能量水平对围产期奶牛脂肪动员的影响

将围产期健康奶牛30头随机分为三组,分别于产前第28d开始饲喂标准日粮(能量摄入100%组)、标准日粮增加20%日粮(能量摄入120%组)和标准日粮减少20%日粮(能量摄入80%组),产后各组奶牛均饲喂标准泌乳日粮,至产后第56d结束,观察干奶期不同能量摄入水平对围产期健康奶牛血液甘油三酯、非酯化脂肪酸和总酮体浓度的影响。实验结果表明,产前低能饲喂可以降低产后奶牛血液甘油三酯、非酯化脂肪酸和总酮体浓度。提示干乳期能量摄入水平是影响和调节产后能量平衡状态的重要因素。     

围产期奶牛炎性反应与代谢紊乱

正围产期(产前21 d至产后21 d)是奶牛疾病的高发期。大约75%的奶牛疾病发生在围产期,特别是分娩后3周内[1]。奶牛代谢性疾病(酮病、脂肪肝等)和感染性疾病(子宫炎、乳房炎等)在围产期高发并相互影响,共同构成围产期奶牛的健康风险。鉴于围产期疾病的重要性,深入研究其病因学,并找出应对策略显得尤为重要。尽管超过50%的奶牛在围产期至少存在一种类型的亚临床紊乱,     

脂联素对酮病奶牛中性粒细胞自噬相关基因mRNA表达的影响

通过模拟向高BHBA的中性粒细胞培养液中添加不同质量浓度的脂联素(ADPN),运用荧光定量PCR技术,分别检测中性粒细胞自噬相关基因mRNA的表达水平。结果显示:添加高BHBA(4.8mol/L)的中性粒细胞培养6h后,与对照组相比,自噬相关基因LC3B、Beclin、ULK1的mRNA表达水平显著升高(P<0.01),SQSTM1(p62)、mTOR的mRNA表达水平显著下降(P<0.01);添加不同质量浓度的ADPN(25,50,100μg/L)后,相对于高BHBA组,中性粒细胞自噬相关基因LC3B、Beclin、ULK1的mRNA表达水平显著下调,且在ADPN 50μg/L时,具有极显著差异性(P<0.01);此外SQSTM1、mTOR的mRNA表达水平显著升高。结果表明:BHBA可增加中性粒细胞自噬相关基因的表达,ADPN可抑制高BHBA引起的中性粒细胞细胞程序性死亡,进一步说明ADPN对调控酮病奶牛中性粒细胞免疫抑制具有重要的价值意义。     

围产期患高发代谢病奶牛T_4、T_3、TSH、I含量动态变化的研究

试验以处于围产期的68头奶牛(以健康经产牛为对照组,患酮病、脂肪肝、胎衣不下牛为试验组)为研究对象,在奶牛产前第15,8,1天和产后第1,8,15,22天分别采集颈静脉血检测血清中甲状腺激素[四碘甲腺原氨酸(T4)和三碘甲腺原氨酸(T3)]、促甲状腺激素(TSH)、碘(I)的含量。结果表明:健康的经产牛围产期血清中T4、T3、TSH、I均呈现波浪式动态变化,最高值分别出现在产前第1天、产后第22天、产后第1天、产前第15天;TSH最低值出现在产前第15天,其他检测指标最低值出现在产后第1天。患酮病的奶牛和患脂肪肝的奶牛围产期处于缺碘状态,其产后甲状腺机能出现减退;患脂肪肝期间同时伴发甲状腺功能减退症;患胎衣不下的奶牛围产期碘含量低于正常值,其产犊前后伴发亚临床甲状腺功能减退症。数据统计结果显示:奶牛血清中T4与TSH、T3、I的相关系数分别为-0.749,0.535,0.691;T3与TSH、I的相关系数分别为-0.502,0.457。     

奶牛产后卧地不起的病因分类

本文分析了临床上引起奶牛产后卧地不起的病因,如奶牛产后低血钙、产后败血症、产后急性乳房炎、产后闭孔神经损伤、酮病、产后急性瘤胃酸中毒等引起的卧地不起。并针对性提出了治疗措施,重视围产期饲养、平衡日粮中各类矿物质和微量元素、加强运动,使病牛尽快康复,降低牧场经济损失。