“猪高热病”中猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒Ⅱ型的检测分析

为有效防控猪"高热病",对该病的病原进行了分析。根据GenBank中已发表的相关序列,建立并应用RT-PCR和PCR方法,对2007年6月～2009年9月期间收集于江西等地区的323份"猪高热病"病料进行了检测。结果显示PRRSV阳性率为85.14%(275/323),PCV-2阳性率为36.84%(119/323),其中PRRSV和PCV-2的混合感染率为2105%(68/323)。说明在"猪高热病"疫情中PRRSV和PCV2起了重要作用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒混合感染的检测

2005年3月,江苏某猪场仔猪发生体温升高,呼吸困难,四肢末端、耳尖发绀,站立不稳和淋巴结出血为主要症状的疾病。4头发病仔猪的淋巴结、脾、肺脏组织用RT-PCR方法分别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒为阳性,用猪瘟ELISA试剂盒检测猪瘟病毒野毒为阳性。结合本病的临床症状和病理剖检,病例确诊为猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟野毒的混合感染。     

猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒双重RT-PCR检测方法的建立

为建立一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速、鉴别诊断方法,根据GenBank中已发表的2种病毒的基因组序列,选择病毒的保守基因各设计了一对特异性检测引物,建立了可以同时鉴别检测猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的双重RT-PCR方法.该方法能从猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒分别扩增出310 bp和161 bp的特异性片段,对2种病毒混合基因组同时扩增出310 bp和161 bp的特异性片段;该方法对猪乙型脑炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的扩增结果均为阴性;该方法最低可以检出0.2 pg病毒RNA含量.本研究建立的RT-PCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,在一个PCR反应体系中就可以准确、快速鉴别检测出猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒,可以用于临床病料的快速检测.     

猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的PCR诊断

对一例临床中疑似猪瘟病毒(CSFV)或猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染病例进行了实验室PCR诊断,确诊为CSFV和PRRSV混合感染。     

重庆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒感染检测

近年来,我国南方的猪病,特别是传染性疾病对养猪业的危害越演越烈,种类在增加,复杂程度在加剧.随着养猪业集约化程度的发展,疾病成为阻碍猪场生产发展的致命障碍.生产上,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)野毒混合感染较为严重[1],是危害猪群健康的主要疾病,并导致多种新的病毒病和细菌病的暴发与流行.     

华南地区猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒检测分析

为了解华南地区猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的最新流行情况,采集了华南地区11个规模猪场各饲养阶段猪血清807份,用套式PCR(nPCR)检测猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2);采集了若干猪场2010年1月至2011年8月期间有咳嗽、喘气、消瘦及疑似PDNS等临床症状的猪血清312份,以及无临床症状猪血清104份,以nPCR检测PCV-2,以一步法反转录PCR(RT-PCR)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒。结果发现,所调查的11个规模猪场中只有5个检出PCV-1,所有猪场均检出PCV-2。PCV-2阳性率为30.61%,而PCV-1阳性率仅为4.21%;经产母猪和7周龄以上保育猪PCV阳性率最高;有临床症状的猪血清PCV-2阳性率为58.65%,PRRSV阳性率为37.82%,PCV-2阳性猪群中有39.89%的猪同时感染PRRSV;有症状猪群7月～9月的PCV-2感染率最高,而1月～3月最低;无临床症状猪血清PCV-2阳性率为27.9%,PRRSV阳性率为0.96%,PCV-2与PRRSV无混合感染。证明PCV尤其是PCV-2在华南地区仍广泛传播并流行,而且PCV-2与PRRSV混合感染致病情况较多。PCV-2的感染率与季节有一定的相关性,种猪带毒情况严重。     

实时荧光定量PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒

根据GenBank发表的猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的保守区域的序列分别设计了2对特异性引物。建立了一种快速检测CSFV和PRRSV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,并用该方法检测采集的临床疑似病料。结果表明,建立的CSFV、PRRSV-SYBR GreenⅠPCR有较好的特异性,敏感性和重复性,可以用于CSFV和PRRSV的检测。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒双重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

本研究根据PRRSV GL膜蛋白基因和CSFV多聚蛋白基因,分别设计2对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒的双重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果表明,该方法只对猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒特异性良好,不与非洲猪瘟、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒等常发猪病存在交叉反应;PRRSV和CSFV的检出下限分别为1.41拷贝/μL和1.6拷贝/μL;组内和组间Ct值变异系数都小于1.3%。对175份临床采集的样品检测,PRRSV单一阳性样品27份,CSFV单一阳性样品16份,检测双阳性样品24份。本方法敏感高、特异强,可以用于猪场的快速检测与诊断。     

河南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清抗体检测

为了解河南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟的抗体保护水平,2018年采用ELISA方法,对河南省部分一级监测网点猪场开展了猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清抗体检测。检测结果显示:猪繁殖与呼吸综合征抗体总阳性率为91.28%,猪瘟抗体总阳性率为95.87%。其中:后备猪、种公猪、经产母猪、保育猪、育肥猪血清样品的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为93.68%、93.87%、92.16%、88.93%、88.65%,猪瘟抗体阳性率分别为98.51%、98.77%、98.45%、85.71%、91.82%;祖代场、父母代场、商品场血清样品的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为94.63%、88.02%、89.46%,猪瘟抗体阳性率分别为98.40%、96.16%、91.03%。检测结果表明:河南省一级监测网点猪场的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟抗体水平较高,但保育猪群和育肥猪群偏低,需要对其加强抗体监测,以确定最佳免疫方案;商品代猪场抗体水平略低于祖代和父母代猪场,这要求畜牧兽医部门需同时加强对所有猪场的日常监督与监管。     

临床猪病中猪蓝耳病和猪瘟的检测分析

为了解临床猪病中猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟的感染情况.本研究根据 GenBank 中已发表的相关序列,建立并应用两组 RT-PCR 方法,对 2007 年 6月至2009年 7 月期间收集于江苏、江西地区的 323 份临床猪病料进行了检测.结果显示 PRRSV 阳性率为 85.14%(275/323),HCY 阳性率为 56.66%(183/323),PRRSV 和 HCV 的混合感染率为 40.87%(132/323).表明在猪临床疾病中 PRRSV 和 HCV 普遍存在,且混合感染非常严重.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和副猪嗜血杆菌的混合感染

2008年2月,广西北海某养猪场饲养的保育猪和生长育肥猪发生了以高热稽留、皮肤发绀、关节肿大为特征的急性传染病,导致30%的发病猪被淘汰。从发病猪的临床症状、病理变化及实验室检验,诊断为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和副猪嗜血杆菌的混合感染,该病的正确     

一起猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染病例分析

1病情介绍 2008年4月16日,陕西杨凌某猪场从四川购进205头仔猪,加上原有存栏架子猪121头,共存栏326头。当日运到猪场后即注射了猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联活疫苗。4月18日开始发病,至5月7日已经死亡83头,用抗生素治疗没有效果。     

百色市高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测结果分析

为评估百色市猪群高致病性猪繁殖与呼吸综合征（HP-PRRS）免疫效果,2012年—2013年在66个规模养猪场和249个农村散养户分别采集猪血清样品465份和644份,使用间接 ELISA 检测 HP-PRRSV 抗体,结果显示,现2012年 HP-PRRSV 抗体平均阳性率为68．02％,2013年 HP-PRRSV 抗体平均阳性率为75．32％;HP-PRRSV 一免抗体平均阳性率为63．91％,二免抗体平均阳性率为83．60％;HP-PRRS 灭活苗免疫抗体平均阳性率为75．42％,HP-PRRS 弱毒苗免疫抗体平均阳性率为70．86％。说明2013年 HP-PRRSV 抗体平均阳性率高于2012年,二免的抗体平均阳性率高于一免;HP-PRRS 灭活疫苗的初步使用效果良好。     

多重PCR同时检测猪圆环病毒2型,猪细小病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒

本试验建立一种可同时检测猪圆环病毒2型(PCV-2),猪细小病毒(PPV),猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),猪瘟病毒(CSFV)4种病毒的多重PCR方法.对于每一种特定的病毒,用4对寡核苷酸引物均能特异扩增其目的片段.以含有病毒目的片段的质粒为模板,测定了多重PCR的检测灵敏度,PRRSV和CSFV检测最低限是48 pg,而PPV和PCV-2为0.48 pg.利用建立的多重PCR方法对具有产自有繁殖障碍母猪的仔猪或具有呼吸障碍症状的76个仔猪样本进行检测.检出了4种病毒的存在,其中26个样本(34.2%)同时感染了2种以上病毒.结果表明多重PCR方法检测猪混合感染的病毒,是一种快速、灵敏、低成本、高效率的病原学诊断工具.     

猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒一步法双重荧光RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立猪瘟病毒(CSV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)现场快速鉴别检测方法,参照GenBank中CSV和PRRSV特异性基因序列,设计特异引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测CSV和PRRSV的一步法荧光RT-PCR方法,并验证了该方法的特异性、敏感性、重复性。结果显示,该方法检测CSV和PRRSV的灵敏度分别可达0.25和1.99 TCID_(50)/100μL,对猪细小病毒(PPV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。本试验建立的TaqMan一步法荧光定量RT-PCR检测方法,可对CSV和PRRSV进行快速诊断,适合现场检测。     

猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的诊断

2007年,山东4个养猪场暴发了多起母猪妊娠后流产,1月龄仔猪大量死亡为主要特征的传染病。对送检的病猪进行了病原分离、病理组织切片观察、免疫荧光检测及动物试验,结合流行病学、临床症状,确诊该养猪场混和感染了猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒,为控制猪病提供了重要的依据。     

捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立同时检测猪捷申病毒(PTV)、猪瘟病毒(csFv)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRSV)的多重RT-PCR (mRT-PCR)检测方法,本研究以PRRSV ORF6基因、CSFV Ems基因和PTV 5＇-UTR基因为对象,建立检测3种病毒的mRT-PCR方法.特异性试验表明,该方法可以特异扩增3种病毒的基因,对大肠杆菌、猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒和猪流感病毒呈阴性反应;敏感性试验表明,PRRSV、CSFV和PTV的最低核酸检出量分别为7.11×102拷贝、7.81×103拷贝和8.43×102拷贝,略低于单一RT-PCR敏感性;应用该方法对69份送检样品进行检测,其中PRRSV、CSFV和PTV单纯感染检出率分别为28.99％、27.54％和56.52％,PRRSV和CSFV混合感染检出率为4.35％,PRRSV和PTV的混合感染检出率为11.59％,CSFV和PTV的混合感染检出率为13.04％,3种病毒的混合感染检出率为8.70％,与单一RT-PCR检测结果符合率为98.6％.本研究建立的检测方法快速简便,可以用于疾病的初步筛选,对临床早期诊断和流行病学调查具有重要意义.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床症状表现为母猪繁殖性能下降、不孕、流产等。感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后病理及组织学变化往往不太典型,而且易与其它病原感染所引起的病理变化相混淆,给该病的诊断带来一定困难,因此,对于PRRSV的确诊有赖于实验室诊断,不同的诊断方法敏感性、特异性及成本方面存在差异,而现有的血清学方法无法区分疫苗抗体和野毒抗体。作者就PRRSV抗原或抗体的检测技术（如病毒分离、RT-PCR、免疫过氧化物酶技术、酶联免疫吸附试验等）的研究现状作一简单的概述。     

基于多重PCR的寡核苷酸基因芯片检测猪瘟病毒,猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒及猪圆环病毒1型和2型

为了建立一种可同时检测区分猪瘟病毒(CSFV),猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的寡核苷酸基因芯片方法,本研究针对每种病毒设计了4条～6条寡核苷酸探针,检测低限为1.6×104PCV-2拷贝数/μL,1.6×104CSFV拷贝数/μL,1.6×105PRRSV拷贝数/μL,比琼脂糖凝胶灵敏约10倍。利用建立的寡核苷酸基因芯片方法对76个仔猪样本进行了检测,检出了3种病毒的存在,其中25个样本(32.9%)同时感染了2种以上病毒。结果表明寡核苷酸基因芯片检测是一种快速、灵敏和高效的猪只混合感染病毒的病原学诊断方法。