棉田线虫种类调查研究初报

本研究旨在明确我国主要棉区棉田线虫种类分布,为进一步探讨棉花根病与线虫危害的关系提供依据。两年来调查初步结果表明:我国重要棉区棉田植物寄生线虫种类达16个属。主要有:根结线虫属(Meloidogyne)、滑刃线虫属(Aphelen Choides)、短体线虫属(Pratylenchus)、螺旋线虫属(Helicotylenchus)、茎线虫属(Ditylenchus)和纽带线虫属(Hoplolaimus)等。我国北方棉区(晋、冀、鲁、豫、京、辽)棉田线虫主要是:螺旋线虫属(Helicotylenchus)、真滑刃线虫属(Aphelenchus)、茎囊拟茎线虫属(Beleodorus)茎线虫属(Ditylcnchus)及半寄生的矛线虫属(Dorylaimus)、未发现根结线虫和短体线虫。新疆内陆棉区棉田线虫主要是:茎线虫属(Ditylenchus)、平滑垫刃属(Psilenchus)和茎囊拟茎线虫属(Boleodorus)。南方棉区(苏、浙、皖、鄂、川)棉田线虫主要是:根结线虫属(Meloidogyne)、真滑刃线虫属(Aphelenchus)、矮化线虫属(Tylcnchorynchus)、盘旋线虫属(Rotylenchus)等,未发现螺旋线虫。     

我国苎麻根际寄生线虫调查和初步研究

2010-2011年,我们在重庆、四川、湖北、湖南、江西等地苎麻主产区进行根腐线虫病调查;采集苎麻根腐病病蔸和病土,并分别利用改良贝曼漏斗法和蔗糖离心浮选法从病根和土壤中分离植物病原线虫,根据形态特征对分离到的植物病原线虫进行鉴定.研究结果表明:1)苎麻根腐病病根及根际土壤中主要发现4种植物寄生线虫,根据形态特征,鉴定为:咖啡短体线虫(Pra-tylenchuscoffeae)、穿刺短体线虫(P.penetran)、长针属线虫(Paratylenchussp.)和丝尾属线虫(Filenchussp.);其中,后2种线虫均在苎麻园中首次报道;2)四种线虫中,咖啡短体线虫发生最为普遍,存在于大多数样品中(约91%);丝尾属线虫次之,存在于54.5%的样品中;穿刺短体线虫较少,存在于少数样品(18.2%)中;长针属线虫最少,仅在13.6%的样品中检测到.3)根际土壤中植物寄生线虫的数量,随麻园种植年限增加而增多;同时,土壤类型也对线虫生长繁殖有一定的影响.     

甘薯茎线虫病抗性鉴定方法及评价

对甘薯茎线虫病[Ditylenchus dipsaci (Kuehn) Filipjev]抗性鉴定方法：病地自然诱发鉴定法、薯片接种线虫钌红染色鉴定法、室内人工接种鉴定法进行了系统介绍和客观评价，并对甘薯品种抗甘薯茎线虫病侵入和扩展特性进行评述，提出室内人工接种鉴定与病地自然诱发鉴定相结合的鉴定模式。     

不同土壤类型和纬度大豆田植物线虫分布特征

大豆根嗣有多种植物线虫,有些为重要的植物病原线虫,可影响大豆的生长发育,甚至造成严重的经济损失.利用贝漫浅盘法收集我国9个省86块大豆田土壤线虫,分析不同土壤类型和纬度大豆根围植物线虫群体分布特征,以明确大豆田植物线虫群体结构和分布,为从线虫生态角度评价土壤健康状况、控制大豆根部病害和大豆根际微牛态研究提供参考.结果表明:大豆根围植物线虫的群体分布与土壤类型有一定的关系,有机质丰富型土壤中植物线虫群体结构相对较丰富;贫瘠型土壤中植物线虫的种类和数量相对较少;纬度对其影响不明显.共鉴定出植物线虫13个属,丝尾垫刃属(Filenchus)、短体属(Pratylenchous)、垫刃属(Tylenchus)、螺旋属(Helicotylenchus)、平滑垫刃属(Psilenchus)和茎线虫属(Ditylenchus)在黑龙江省大豆田首次发现.     

龙眼根际加德拟鞘线虫的鉴定

加德拟鞘线虫[Hemicriconemoides gaddi (Loos,1949)Chitwood & Birchfield,1957]是从福州市金山的龙眼根际土壤中分离并鉴定的.根据光学显微镜和扫描电镜的形态特征观察及形态测量,该线虫主要鉴别特征为:体环96～109个;唇环2个,不向前翘起或后倾,第1环窄于第2环;唇区顶端平圆,唇盘微隆起,被沟状口孔分隔为2个对称的肾形;口针长61.4～75.6 μm;阴门鞘无或退化;阴门至尾端距离为阴部体宽的1.7～2.4倍,尾部宽圆锥形,末端锥圆至钝圆.对H.gaddi的rDNA-ITS和28 S rDNA-D2D3区进行了测序和比对分析,并首次在Genbank登录,其序列大小分别为1008 bp和768 bp.加德拟鞘线虫为中国新纪录种,龙眼为寄主新纪录.     

茎点霉真菌Phoma adianticola引起的一种茶树新病害

对一种引起茶树芽头褐变的病原进行了分离鉴定研究。通过柯赫氏法则,成功分离得到了致病菌株。菌株PDA培养条件下的形态学和rDNA-ITS分子鉴定结果表明,此病原菌为茎点霉属真菌。按照茎点霉属真菌鉴定程序开展了鉴定研究。此菌在OA和MA培养基上培养7 d后,菌落平均直径6.0~6.4 cm;分生孢子器圆球形,具孔口,器外壁光滑或有菌丝附着;分生孢子橄榄球形,无隔,多数具2个游球,大小为4.9~6.3μm×2.1~2.8μm;NaOH颜色反应呈黄绿色。根据上述特征,初步鉴定此病原菌为Phoma adianticola。由P.adianticola引起的茶树芽头褐变可能是茶树的一种新病害。根据此菌侵染后的症状,暂将其表述为茶树褐芽病。     

我国北部及中东部地区玉米根际土壤中寄生线虫种类调查研究

对我国北部及中东部9省(直辖市)的57市(县)采集玉米根际土壤样品,从92份土样中共分离到17属植物寄生线虫,即垫刃属(Tylenchus)、丝尾垫刃属(Filenchus)、杆垫刃属(Rhabdotylenchus)、平滑垫刃属(Psilenchus)、叉针属(Boleodorus)、巴兹尔属(Basiria)、矮化属(Tylenchorhynchus)、短体属(Pratylenchus)、小环属(Criconemella)、茎属(Ditylenchus)、纽带属(Hoplolaimus)、盾属(Scutellonema)、盘旋属(Rotylenchus)、螺旋属(Helicotylenchus)、拟盘旋属(Pararotylenchus)、真滑刃属(Aphelenchus)、滑刃属(Aphelenchoides)。其中,矮化属线虫分布较广,占样本总数的58.70%;螺旋属线虫的相对丰度最大,占线虫总数的47.53%,这两属线虫为玉米根际土壤中的优势属。对不同地区线虫种群进行分析得出,螺旋属线虫为山东、安徽、江苏及河南省的优势属,矮化属线虫为黑龙江、吉林、辽宁、北京和河北省(市)的优势属,垫刃属线虫是吉林省的优势属,短体属线虫为辽宁和河南两省的优势属。     

甘薯茎线虫病的研究现状和展望

甘薯茎线虫病是由马铃薯腐烂线虫(Ditylenchus destructor)引起的,我国的南北薯区均有发生,北方薯区春作地危害更重。近年来,茎线虫病扩展较快,逐年加重,对甘薯生产构成严重威胁,已成为中国甘薯生产上最重要的病害之一。对甘薯茎线虫病的病原的生物学特性、发病机理、危害及对甘薯对茎线虫病的抗性鉴定、抗性遗传规律和综合防治等作了综述,并展望了甘薯茎线虫病的研究前景。     

海南西番莲茎腐病病原的分离与鉴定

为解决若干病原菌引起的西番莲茎基腐病症状类似,难从症状方面辨别病原菌的问题,采用经典方法即常规鉴定法,对引起海南省琼海市西番莲基腐的病原菌进行鉴定。配制选择性PDA、PDA、V-8、选择性V-84种培养基,对样本中的病原物进行分离、纯化,根据分离菌的各项形态特征描述和分离菌株的主要生长温度测定结果,以及有关文献提供的原理方法进行该分离菌鉴定。结果表明:①分离到1种疫霉菌菌株;②该菌株在选择性PDA、PDA、选择性V-8培养基生长的诸方面特征一样。菌落圆形均一,气生菌丝不丰富。孢子囊形态为侧梨形、柠檬形或椭圆形,基部钝圆,长×宽为24.5～44.3μm×22.8～34.5μm,冷冻后释放游动孢子,未见厚垣孢子。③菌株最低生长温度8～10℃,最适生长温度28℃,最高生长温度36～40℃。④28℃下,分离菌在V-8上日生长量为16.2mm,而在PDA上则为13.7mm。⑤该病原物疫霉菌属于[Phytophthora nicotianae Breda de Haan(parasitica Dastur)]。     

甘肃天祝农牧区燕麦田孢囊线虫调查及种类鉴定

为了明确甘肃天祝农牧区燕麦田孢囊线虫的发生情况及种类,2014年8-9月,采用Z字型取样法,对天祝燕麦主要种植区进行了调查。结果表明,采集到的80份燕麦根际土样中孢囊线虫发生率为44%,孢囊密度为4.3个·100g-1土样。安远镇的发生率最高,为54.2%,华藏寺的发生率最低,为14.3%。孢囊浅褐色,阔柠檬形,长571μm(447~727μm),宽449μm(375~595μm)。阴门双膜孔,膜孔长31μm(28~33μm),膜孔宽16μm(13~20μm),阴门裂长9μm(8~11μm),泡状突明显,未见阴门下桥。天祝5个乡镇孢囊线虫rDNA-ITS区片段长度均为1 045bp,经Blast比对发现,所测序列与燕麦孢囊线虫(Heterodera avenae)的ITS序列相似度达99%~100%。系统进化关系分析显示,天祝孢囊线虫与国内及国外燕麦孢囊线虫在同一个大的进化分支,与中国的燕麦孢囊线虫在同一个小的分支。因此,形态特征结合rDNA-ITS序列分析将甘肃天祝燕麦田的孢囊线虫鉴定为燕麦孢囊线虫。     

大豆根际促生菌Sneb207对不同种类线虫毒性的研究

从大豆根瘤中分离到1株根际促生菌Sneb207,经鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium).室内测定结果表明:其发酵产物对豆苗生长促生效果显著,发酵液灭菌后仍具有促生活性,具有广泛的应用价值.用该菌发酵液测定了对各种线虫的作用,结果表明毒力作用具有差异,大小顺序分别为大豆胞囊线虫、北方根结线虫、水稻干尖线虫和腐烂茎线虫.不同浓度发酵液对大豆胞囊线虫均有较好的防治作用,与无菌水对照处理有显著差异.说明细菌菌株Sneb207是控制大豆胞囊线虫病且促进大豆生长的有效因子.     

番石榴根部短尾短体线虫的鉴定

从福建省漳州市云霄县的番石榴变黑腐烂的根组织内分离和鉴定了短尾短体线虫（Pratylenchus brachyurus）。根据光学显微镜和扫描电镜对该线虫进行形态特征观察及形态测量的结果,其鉴别特征为：唇环2个,唇盘椭圆形;唇片6个,包括2个侧唇片和4个近圆形亚中唇片,侧器孔窄圆形、位于唇盘两侧;口针长15.3~19.9 μm,口针基部球圆形;单卵巢直伸,受精囊不明显,后阴子宫囊长度略小于阴门处体宽,阴门位于虫体长度的83％~86％;尾宽圆锥形,腹面环纹16~21条,末端光滑、宽圆。对该线虫rDNA-ITS和28S rDNA-D2D3区进行扩增、测序与比对分析,其序列大小分别为730 bp和779~780 bp,与已登录的短尾短体线虫相应序列的相似度分别为89％~93％和97％~99％,D2D3序列比ITS序列更适于P. brachyurus分子鉴定。根据对病根组织内线虫的分离和染色观察,证实了短尾短体线虫能侵染番石榴根系并引起根表皮产生褐色斑痕和变黑腐烂等症状,这是首次在中国的番石榴上发现该线虫。     

黑土区轮作系统大豆田土壤线虫种群结构研究

线虫是土壤动物中最丰富的组成成分,可以通过取食植物组织和微生物进行养分再循环和促进矿物质分解,为植物根系更好的吸收提供养分.本文主要针对中国科学院海伦农业生态实验站长期定位实验区不同轮作系统大豆田土壤线虫进行研究,以期了解轮作系统大豆田线虫分布特征及种群结构动态变化,为进一步从生态角度揭示轮作系统下土地利用状况提供材料.取样茬口分别为大豆连作(CS,15a)、麦豆麦豆迎茬(WSWS,15a)和麦米豆轮作(WMS,15a).大豆田共鉴定出8目19科43属线虫.线虫种类分布茬口间存在差异,有29属线虫是各茬口所共有的,其余的14种线虫各茬口分布不同,这与取样茬口和土壤环境等因素有关.在取样时期内,随着生育期的推进,大豆连作田土壤线虫总数呈现先高后低的趋势,轮作和迎茬田都呈逐渐升高的趋势.茎属Ditylenchus、拟丽突属Acrobeloides、中杆属Mesorhabditis、原杆属Protorhabditis、盆咽属Panagrolaimus、丝尾垫刃属Filenchus和具脊垫刃属Codenchus线虫分布受到茬口影响,达到显著差异水平.     

山东花生茎腐病病原菌研究

从山东省多地采集的花生茎腐病株上分离到15个茎腐病菌株,选取6个典型菌株,对病原菌进行形态特征、致病性、生物学特性研究。核糖体DNA-ITS序列分析表明,6个菌株的核糖体DNA-ITS序列同源性高达99%。根据病原菌的形态特征、核糖体DNA-ITS序列同源性比较,确认供试6个菌株为同一种病原菌,与GenBank中可可毛色二孢属（Ｌasiodiplodia）（Diplodia的同物异名）的同源性高达99%以上。根据6个菌株的形态特征、致病性测定结果及生物学特性,并结合核糖体DNA-ITS序列分析,将山东花生茎腐病的病原鉴定为棉色二孢菌（Diplodia gossypina )。     

橡胶树灵芝茎腐病病原菌鉴定及其生物学特性测定

在海南省澄迈等地的橡胶树林地发现一种新的茎腐病,由灵芝属的一种木腐菌侵染橡胶树活立木的茎干引起,株发病率约为1%~2%,田间发生茎腐病的断干橡胶树植株,新抽枝条上的叶片失绿,无光泽,变黄后脱落,后期树冠稀疏,生长不良、枯枝,病树茎干木质部组织白腐,重病植株整株枯死。对该病害的病原菌进行致病性测定、形态学特征鉴定,并建立ITS、LSU和SSU多基因系统发育树。结合形态学鉴定和多基因系统发育树鉴定结果,海南橡胶树灵芝茎腐病的病原菌鉴定为南方灵芝[Ganoderma austral (Fr.) Pat.]。生物学特性测定结果表明,该菌的菌丝最适生长条件为：温度30 ℃,pH 6.0,黑暗条件,马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基培养。     

橡胶树RRIM600品系的内生真菌多样性

从海南省儋州市的橡胶树RRIM600品系上,采集花、叶、枝、果、根组织分离内生真菌,共分离了504个组织块,获得内生真菌545株.根据形态特征对482株产生孢子的菌株进行鉴定,分别归入21个属,大部分为半知菌,共19属,其中丝孢纲真菌12属,腔孢纲真菌7属;少数为子囊菌,共2属.初步研究结果表明:拟茎点霉属(Phmopsis)为橡胶树5种组织中的优势属,刺盘孢属(Colletorichum)为叶片组织中的优势属,侧多隔孢属(Pleurophragmium)为根组织中的优势属.这5种组织中的内生真菌定殖率为50%～100%、分离率为0.74～1.52.内生真菌群落组成的相似性比较结果表明,部分内生真菌具有一定的组织偏好性.     

中国新纪录种——东京伞滑刃线虫(Bursaphelenchus tokyoensis)

松材线虫是危害松树的重要病原线虫,在调查松材线虫时经常发现其他种类的伞滑刃线虫,明确中国的伞滑刃线虫种类有助于松材线虫的准确鉴定。2015年在广东省的黑松(Pinus thunbergii)上分离到的一种伞滑刃线虫属线虫,除体长比东京伞滑刃线虫(Bursaphelenchus tokyoensis)短及交合伞形状不同外,其余形态特征和测量值基本与东京伞滑刃线虫一致。此外,r DNA-ITS序列与东京伞滑刃线虫的r DNA-ITS序列一致性高达98.2%,基于r DNA-ITS序列的贝叶斯系统发育树表明,该线虫与东京伞滑刃线虫以100%的置信度聚在一起,且遗传距离小。形态学和分子生物学结果确定该线虫为东京伞滑刃线虫。东京伞滑刃线虫是中国新纪录种,黑松是该线虫的新寄主,同时该线虫也是继原始报道后的再次发现。     

涕灭威对大豆田土壤线虫生物多样性的影响

利用涕灭威处理大豆田,研究土壤线虫群落结构和生物多样性的变化,共鉴定出7目12科17属的土壤线虫,其中植物寄生线虫是大豆根际土壤线虫的优势营养类群,短体属Pratylenchus,茎属Ditylenchus,小杆属Rhabditis和矛线属Dorylaimus是线虫优势属.与对照相比,除开花期因气候干旱外,涕灭威处理在大豆的各个生育期均抑制了土壤线虫总数和各营养类群的群体数量增长,尤其对植物寄生线虫抑制程度更为显著.应用多样性指数H′、成熟度指数MI、均匀度指数J′、丰富度指数SR、优势度指数1和植物寄生线虫成熟度指数PPI分析比较了处理区和对照区土壤线虫生物多样性变化规律,结果显示涕灭威处理显著降低了大豆田土壤线虫的多样性、增加了线虫的优势度指数,各生态指数较好地反映了涕灭威对大豆田土壤线虫生物多样性的干扰作用.     

水稻二化螟病原线虫N-Yz1的分离鉴定及其感染特性

【目的】二化螟是危害水稻的重要害虫,其钻蛀为害,防治困难,严重威胁水稻生产。本研究对感染二化螟昆虫病原线虫的分离筛选和感染特性进行研究,期望为水稻钻蛀害虫危害的防治提供新的途径和方法。【方法】自越冬代二化螟幼虫体内通过组织分离筛选,获得野外感染二化螟的昆虫病原线虫,室内接种实验分析分离昆虫病原线虫对二化螟的感染活性和作用特性。【结果】自然罹死二化螟幼虫体内分离获得野外感染的昆虫病原线虫N-Yz1,接种4龄二化螟幼虫导致感染并死亡,后期虫体内产生大量形态一致的侵染期线虫(IJ)。形态学观察结合r DNA-ITS序列分析,鉴定分离昆虫病原线虫隶属于斯氏线虫属,与已鉴定种小卷蛾斯氏线虫同源性达99.87%。昆虫病原线虫N-Yz1对不同龄期二化螟幼虫都有较高感染致死作用,40头(IJ)的线虫接种剂量,对低龄(2～3龄)二化螟致死速度快、致死率高,接种24h就出现感染致死个体,48h后幼虫全部死亡。高龄幼虫(4～6龄)感染致死速度较慢,死亡高峰发生在接种线虫后的48 h。N-Yz1接种剂量与二化螟死亡率呈显著正相关,剂量超过30IJs/头时,4龄二化螟感染死亡率达90%以上。N-Yz1对二化螟幼...     

胡椒科3种植物内生真菌的鉴定及多样性分析

从胡椒科的胡椒、假蒟、蒌叶3种植物叶、枝条(茎)、根、花和果实共1624个表面消毒的组织块中,分离获得1648个内生菌株,包括内生细菌81株,内生真菌1567株。其中,内生真菌分属于9目、10科、20个属,主要归属于半知菌类和子囊菌门。结果表明:刺盘孢属(Colletotrichum spp.)为5种组织中的优势属,于叶片、茎及果中最多;炭角菌(Xylaria spp.)在叶片、茎及果实中仅次于刺盘孢属的优势属;短梗霉属(Aureobasidium sp.)为花轴及根的优势属;芽枝霉属(Cladosporium sp.)只在叶片中分离到;多节孢属(Nodulisporium spp.)仅在茎部组织中分离到;青霉属(Penicillium sp.)只在根组织中分离到。3种植物的不同组织中定殖率最低的为蒌叶根,仅25.00%;最高的为假蒟叶,高达96.23%。胡椒的分离率以茎最高,为1.3681,蒌叶、假蒟均以叶最高,分别为1.1667和1.5112。5种组织中多样性指数为叶、茎最高,花轴与根相似性最小,叶片与果相似性最大;3种植物中,胡椒与假蒟的相似性大于与蒌叶的相似性。