浙江柑橘产区柑橘黄脉病毒的发生、分布与分子特性研究

运用RT-PCR技术对采自浙江12个柑橘产地的181份柑橘样品进行检测,首次从浙江的‘佛手’柑(Citrus bergamia)和‘红美人’橘(C.reticulata)上检测出柑橘黄脉病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV),其检出率分别为68.0%和47.2%。选取4个CYVCV毒株与11个已知CYVCV毒株进行全序列分析,结果显示CYVCV序列保守性较高,所有15个CYVCV毒株的核苷酸和氨基酸序列相似性分别为96.9%~99.8%和97.9%~99.4%。虽然采自浙江的4个CYVCV毒株在进化树中聚成单独的簇,但CYVCV毒株间的亲缘关系可能不与其采样地的存在相关性。     

等渗Ca和NaCl胁迫对黄瓜叶片叶绿体超微结构及光合特性的影响

采用营养液栽培,以盐敏感型的黄瓜品种津春2号为试材,研究了等渗Ca和NaCl胁迫对黄瓜幼苗叶绿体超微结构、叶片叶绿素含量、光合特性和叶绿素荧光参数的影响。结果表明：两种盐胁迫均降低了黄瓜叶片叶绿素含量,且NaCl胁迫后下降的幅度大于Ca胁迫。Ca胁迫后,叶绿体大部分与细胞壁脱离,基粒片层数减少|等渗的NaCl胁迫后,叶绿体结构变形,基粒片层膨胀、松散,片层之间界限模糊,嗜饿颗粒明显增多。Ca胁迫后净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、PSⅡ最大潜在光化学效率（Fv/Fm）、PSⅡ实际光化学效率（ΦPSⅡ）和光化学淬灭系数（qP）下降的幅度均小于NaCl胁迫。Ca胁迫下植株的胞间CO2浓度（Ci）呈下降趋势,而NaCl胁迫下Ci呈上升趋势。综上所述,Ca胁迫主要通过气孔限制引起Pn下降|而NaCl胁迫严重破坏了叶绿体超微结构,主要通过非气孔因素限制引起Pn下降。     

银叶病对西葫芦叶片光合特性和叶绿体超微结构的影响

以西葫芦杂交种‘硕丰早玉’为材料, 烟粉虱诱导西葫芦银叶病, 研究了其对叶片净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和叶绿体超微结构的影响。结果表明, 西葫芦发生银叶病后, 叶片光合速率降低, 气孔导度降低, 胞间CO2浓度增加。与健康叶片相比, 发病叶片叶绿体膜受损, 叶绿体数量和体积均减少, 基粒数和片层数减少, 淀粉粒数量和大小减少。西葫芦发生银叶病后, 叶绿体超微结构的变化可能是导致发病叶片叶绿素含量降低和光合速率下降的重要原因。     

黄瓜无毛突变体叶片叶绿体超微结构与光合特性

 观测了无毛突变体黄瓜与有毛黄瓜坐果期叶片的叶绿体超微结构和光合特性。与有毛黄瓜相比, 无毛黄瓜光合机构的结构较简单, 叶肉细胞内叶绿体数量少, 叶绿体内基粒数和基粒片层数少。叶绿素a、b 及类胡萝卜素含量仅为有毛黄瓜的一半。无毛黄瓜光合速率明显比有毛黄瓜低, 在一天的大部分时间内低于有毛黄瓜50 %。无毛黄瓜的光合速率日变化呈单峰曲线, 峰值出现于11 时, 有毛黄瓜光合速率日变化呈双峰曲线, 两峰出现在10 时和12 时左右。无毛黄瓜的光合速率随CO₂ 浓度的增加而增加, 在1300μL·L^{- 1}CO₂ 下, 达到最大值, 但同样浓度情况下, 其光合速率明显比有毛黄瓜的低。     

弱光处理对黄瓜叶绿体超微结构的影响

弱光处理对黄瓜叶绿体超微结构的影响沈文云，马德华，侯锋，吕淑珍，霍振荣（天津市黄瓜研究所，天津３００１９２）关键词黄瓜幼苗；弱光胁迫；叶绿体超微结构ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＷｅａｋＬｉｇｈｔＴｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｔｈｅＵｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆＣｈｌ...     

柑桔碎叶病毒侵染对"纽荷尔"脐橙光合作用及酶活性的影响

为掌握柑桔碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)侵染对"纽荷尔"脐橙光合作用及酶活性的影响,探讨CTLV对寄主植株的致病机理,测定了"纽荷尔"接种感染CTLV 18个月的病株与健康植株叶片的光合色素含量、净光合速率和胞间CO2浓度、丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(...     

遮荫对生姜叶片显微结构及叶绿体超微结构的影响

生姜叶片的比叶重,厚度,细胞和叶绿体大小及其数据随生育期的进展有变小或减少的趋势,但叶绿体的比基粒片层数,淀粉粒数则呈增加趋势。遮荫可使生姜叶片的ＳＬＷ,厚度,细胞和叶绿大小及其数量呈变小或减少的趋势,而遮荫后叶绿体的基粒生层,比基粒片层,淀粉粒则呈较大幅度的增加。这些变化可能是生姜对光强度变化适应的结果。     

热胁迫对番茄叶肉细胞叶绿体超微结构的影响

 以番茄耐热品种‘02276’和感热品种‘L402’为试材, 观察其在高温下叶绿体的变化情况。结果表明, 高温胁迫破坏番茄叶肉细胞叶绿体被膜和类囊体系统正常的超微结构特征, 并且耐热性不同的番茄品种之间存在明显差异。高温胁迫下叶绿体的形态变化可以作为在细胞水平上评价番茄耐热性的重要指标。     

不同类型柑橘中黄脉病毒衣壳蛋白基因的保守性及复制水平

为研究不同柑橘品种对柑橘黄脉病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)变异的影响,将CYVCV毒株CQ01嫁接接种于4类共35个柑橘品种,对不同植株中CYVCV的衣壳蛋白(CP)基因进行分析,结果发现仅有少数位点发生了变异。运用RT-qPCR技术检测不同柑橘品种中CYVCV的相对含量,发现甜橙类品种中CYVCV的相对含量最高,墨西哥来檬中CYVCV的相对含量最低。植株中CYVCV的含量与其症状不存在明显的关联。     

日光温室亚高温对番茄光合作用及叶绿体超微结构的影响

 研究了日光温室番茄第1花序第1花开花至开花后30 d, 35℃昼间亚高温处理(以25℃为对照) 对番茄光合作用及叶片超微结构的影响。结果表明, 35℃昼间亚高温条件下, 番茄叶片净光合速率降低, 气孔限制值减小, 叶绿素含量下降, 叶片气孔数目明显增多, 气孔腔开放程度变大, 叶绿体膜受到伤害, 基粒数减少, 基粒片层结构状态变差, 脂滴增多而淀粉粒数目先减少后增多。35 ℃昼间亚高温对番茄叶片光合作用的影响可能与气孔因素无关。     

葡萄叶片衰老过程中不同光质对其光合和叶绿体超微结构的影响

以栽植于日光温室中适宜延迟栽培的‘贝达’砧‘意大利’葡萄为试材,自2013年8月1日始至落叶(2014年1月31日)止每天分别进行红光和蓝光不同光质延长光照至24:00补光处理,以不补光作为对照,研究不同光质补光处理对葡萄叶片衰老过程中叶片的外观形态特征、叶绿素含量、净光合速率、F_v/F_m、可溶性蛋白质含量和叶绿体超微结构的影响,为叶片抗衰老技术的研发提供理论依据。研究结果表明:补充红光显著提高了叶片的叶绿素含量、净光合速率、F_v/F_m值和可溶性蛋白质含量,叶绿体基粒片层排列整齐有序,明显减缓了叶绿体超微结构的解体,显著延缓叶片衰老;补充蓝光处理前期显著降低了叶片的叶绿素含量、净光合速率、F_v/F_m值和可溶性蛋白质含量,破坏了叶绿体的超微结构,加速了植株的衰老进程;但在叶片衰老后期,叶绿素含量、净光合速率、F_v/F_m值和可溶性蛋白质含量逐渐高于对照,并且叶绿体的基粒片层比对照排列整齐有序,在一定程度上延缓了叶片衰老。补充蓝光处理的叶片可溶性蛋白质含量一直显著高于补充红光和对照。综上,补充红光处理有效延缓了叶片衰老进程,延长了叶片的生理功能期。     

中国柑橘叶斑驳病毒和碎叶病毒发生状况及其分子特性研究

柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus,CLBV)和柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)均可侵染柑橘的不同种。为明确CLBV及CTLV在中国柑橘上的发生状况和分子特性,采用RT-PCR技术对来源于中国7个省的342份和346份柑橘样品进行检测,检出率分别为9.6%和11.0%。对14个CLBV分离物和15个CTLV分离物的外壳蛋白(Coat protein,CP)基因部分序列分析显示,CLBV分离物间cp核苷酸和编码氨基酸序列相似性分别为82.1%~100%和88.1%~100%,CTLV分离物的cp核苷酸和编码氨基酸序列相似性分别为89.5%~100%和92.5%~100%。测定的14个CLBV分离物在系统进化树中聚为2个组;而CTLV分离物分组不明显,该病毒的系统进化与寄主来源无明显关系。     

盐胁迫对黄瓜不同耐盐品种叶绿素含量和叶绿体超微结构的影响

用浓度为225 mmol·L^-1的NaCl溶液对黄瓜不同耐盐品种进行处理,研究NaCl胁迫对黄瓜不同耐盐品种叶绿素含量及叶绿体超微结构的影响。结果表明,在一定盐浓度下,耐盐品种在盐胁迫初期变化不明显,随着盐胁迫时间的延长,耐盐品种和盐敏感品种叶绿素含量降低显著,但耐盐品种比盐敏感品种降低幅度小;同时盐胁迫对叶绿体的膜系统产生伤害,叶绿体老化加快,片层逐渐解体,外形轮廓发生变化,内部片层排列方向发生改变,并发生轻微膨胀,基粒片层数目减少,内部结构趋向简单,以至瓦解,耐盐品种的变化程度小于盐敏感品种。     

硅对盐胁迫下库拉索芦荟叶绿素荧光参数和叶绿体超微结构的影响

 以7叶龄幼苗为试材, 研究了可溶性硅( Si) 对盐(NaCl) 胁迫下库拉索芦荟(Aloe vera L. )叶绿素荧光参数和叶绿体超微结构的影响。结果表明, 随处理时间延长, 芦荟对NaCl (100 mmol/L) 胁迫的响应愈加明显, 胁迫30 d的伤害明显重于10 d, 但NaCl胁迫下加Si (2.0 mmol/L) 与不加Si相比, 叶绿素(Chl1) 总含量下降幅度小, Chl1a含量显著提高, 叶绿素初始荧光( Fo) 值的上升与可变荧光( Fv)值的下降受到抑制, 光系统Ⅱ ( PSⅡ) 潜在活性( Fv/Fo) 显著增强, 同时, 加Si有利于保持盐胁迫下芦荟叶绿体的形态, 保护类囊体的超微结构, 说明施Si缓解盐胁迫对光合细胞器的伤害, 可改善盐胁迫下芦荟的光合作用。     

氨基酸硒和6-BA对葡萄叶片衰老和叶绿体超微结构的影响

以日光温室延迟栽培的‘意大利’‘无核白鸡心’2个叶片衰老速度不同的葡萄品种(贝达砧)为试材,分别进行叶面喷施氨基酸硒和6-BA处理,以喷清水为对照,研究喷施氨基酸硒和6-BA对叶片衰老过程中叶片外观形态特征、净光合速率、Fv/Fm值、叶绿素含量和叶绿体超微结构的影响,为叶片抗衰老技术的研发提供理论依据。结果表明:与对照相比,叶面喷施氨基酸硒和6-BA处理极显著提高了叶片叶绿素含量、净光合速率和Fv/Fm值,维持了叶绿体基粒片层和叶绿体膜结构完整度,明显减缓了叶绿体超微结构解体,显著延缓了叶片衰老,完全落叶时间推迟10～15 d,其中叶面喷施6-BA效果更佳;2个品种比较,‘意大利’叶片衰老速度慢于‘无核白鸡心’。综上,叶面喷施氨基酸硒和6-BA有效延缓了叶片衰老进程,延长了叶片生理功能期,可应用于葡萄实际生产中。     

8种柑橘类植物对柑橘碎叶病毒分子组成的影响

探究不同柑橘类型对柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)变异的影响,为研究寄主-CTLV的互作关系提供基础。将CTLV分离株HH和XLB分别嫁接接种于8种柑橘类植物,对CTLV分离株和获得的亚分离株样品进行CP基因的限制性长度多态性(RFLP)和单链构象多态性(SSCP)分析,以及序列比较。结果表明HH和XLB与其各自在不同柑橘植株上的亚分离株的CP/Hinf I RFLP酶切图谱无明显差异;混合侵染的CTLV分离株HH和其亚分离株之间的SSCP谱型存在差异,株系构成单一的CTLV分离株XLB与其亚分离株间的SSCP谱型差异不明显。通过序列分析进一步证实CTLV在不同寄主上其CP基因有几个核苷酸位点发生了变异。CTLV可能受寄主植物的影响发生了变异。     

CclSAUR49对柑橘生长及类柠檬苦素代谢的影响

SAUR(Small auxin up-regulated RNA)为植物特有的早期生长素响应基因。为了研究柑橘中CclSAUR49参与调节其类柠檬苦素代谢的功能,用湖北早实枳（Poncirus trifoliata Raf.）的上胚轴进行遗传转化,获得6株Ccl SAUR49的过量表达植株（OE1～OE6）和2株Ccl SAUR49的干扰表达植株（Ri1和Ri2）,观察比较转基因和野生型植株的生长表现,利用电镜扫描和半薄切片分别观察叶片的表皮显微结构和组织结构,并检测了叶片中的生长素和类柠檬苦素含量。6个过量表达植株的形态表现存在差异,其中OE2与野生型相比枝梢增长了23.21%,节间数量增多,叶片长度增加了17.97%;2个干扰表达植株（Ri1和Ri2）枝梢生长量减少23.95%和46.82%;2/3过量表达植株的叶片主叶脉直径增大,而Ri2的减小。6株过量表达植株叶片中Ccl SAUR49的表达水平显著上调,是野生型的2.47～73.29倍,2株干扰表达植株叶片中Ccl SAUR49的表达都受到明显抑制,表达水平为野生型的22.66%和47.22%。转基因植株叶片中CclSAUR...     

茄子叶色黄化突变体chl234的特性及其叶绿体超微结构

以茄子叶色黄化突变体chl234及其叶色正常的野生型为试材，比较发现：chl234从子叶期开始出现黄化现象，整个生育期真叶呈黄色，子叶变小，始花期延长，而始花节位、生长势、果实大小和种子大小与野生型无显著差异；在苗期、门茄开花期和四门斗开花期叶绿素含量显著降低；在苗期叶片净光合速率、气孔导度和蒸腾速率显著低于野生型，胞间CO₂浓度显著高于野生型；在四门斗开花期净光合速率、蒸腾速率和胞间CO₂浓度与野生型无显著差异，气孔导度显著低于野生型；chl234叶绿体内部基粒片层垛叠数较少，基粒排列不整齐。利用6个遗传分析群体对chl234叶色黄化性状进行遗传分析，结果表明该叶色黄化性状受隐性细胞核单基因控制。     

柑橘衰退病毒侵染对寄主植物同工酶及酸性病程相关蛋白表达的影响

以柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)不同致病力株系接种寄主植物,比较分析了寄主植物体内过氧化物酶(peroxidase,POD)和多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性变化特点。结果表明,该病毒侵染对这2种酶活性的影响因寄主品种和CTV株系而异,CTV强毒和弱毒株系侵染均导致墨西哥莱檬植株中POD活性明显降低;在甜橙上,CTV强毒株系接种植株中POD活性则显著性提高,而弱毒株系接种对POD的活性无明显影响;在对该病毒具有较高抗性的枳壳中,接种CTV不同株系对POD活性均无明显影响。而在接种强毒株系N25的墨西哥莱檬中PPO活性有所增强,在枳壳上则表现为接种植株的PPO活性降低,在甜橙上PPO活性无明显的变化。POD、PPO和酯酶(esterase,EST)同工酶酶谱分析的结果显示,CTV弱毒株系接种枳壳后诱导产生了2条新的EST同工酶谱带,而在其他CTV接种植株上均未诱导表达新的POD、PPO及EST酶谱。酸性病程相关蛋白分析结果显示,CTV强毒株系在甜橙上诱导产生有6条明显的酸性病程相关蛋白条带。     

柑橘品种对不同基因型柑橘衰退病毒的抑制及变异的影响

为研究不同柑橘品种对柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）不同基因型的抑制效果,将T36、T30、VT和T3等基因型CTV的毒源分别接种于‘赛蒙斯’甜橙、‘邓肯’葡萄柚、‘墨西哥莱檬’和‘强徳勒柚’,运用RT-qPCR技术检测被接种植株中CTV复制水平的差异。结果表明,‘墨西哥莱檬’最适于CTV各基因型的复制。‘邓肯’葡萄柚中VT、T3和T36基因型的复制水平最低。4种柑橘品种对T36基因型CTV都有明显的抑制作用。通过对CTV的CP基因进行分析发现,VT基因型CTV在‘赛蒙斯’甜橙中发生了较大变异。