海南白沙和儋州油梨叶部及果实炭疽病菌的鉴定

【目的】明确海南省白沙县和儋州市油梨种植基地的油梨叶片和果实的病原菌种类，为该病害的准确鉴定和田间防治措施的制定提供理论依据。【方法】在海南省白沙县和儋州市的油梨种植基地调查炭疽病的发生情况并采集病叶和病果，通过组织分离法和单孢分离法获得纯化分离株，并对纯化菌株进行致病性测定，结合形态学和分子生物学对所得菌株进行病原菌种类鉴定。【结果】从采自白沙县的14份病叶种分离的得到3株菌株，儋州市的10份病叶中分离获得6株分离物以及自白沙市采集的5份病果中分离出的1株真菌，经致病性测定，菌株HNBSL01、HNDZL02和HNBSF03为致病菌，且均与田间症状一致。根据3种致病菌的菌落、分生孢子和附着胞的形态特征可初步判断引起油梨叶片和果实炭疽病的病原菌均为炭疽菌属（Colletotrichum sp.）；多基因（ITS-ACT-TUB2-CHS-1-GAPHD-HIS3）联合分析构建系统发育树分析结果显示，病原菌HNBSL01与暹罗炭疽菌（C. siamense）的同源性为81%、HNDZL02与果生炭疽菌（C. fructicola）的同源性为100%、HNBSF03与长直孢炭疽菌（C. g...     

一株肉桂炭疽病病原菌分离鉴定及生防菌筛选

以广西防城港人工栽培的肉桂病叶为试材,采用内生真菌分离纯化法、形态学观察、ITS测序和平板对峙等方法,研究了肉桂炭疽病病原菌的分类地位及其拮抗菌株的筛选,以期为肉桂炭疽病生防菌开发提供参考依据。结果表明：从广西防城港肉桂病叶中分离出6株真菌(B1～B6),B6明显致病。通过形态和分子生物学鉴定该菌株为炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides。平板对峙结果表明,RG256拮抗效果最佳,抑制率为77.05%±5.06%,鉴定为Gliocladiopsis sp.。综上所述,明确广西防城港肉桂炭疽病的病原真菌为炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),并筛选到对肉桂炭疽病病原真菌有拮抗作用的生防菌株,为肉桂炭疽病的绿色防治提供参考依据。     

宁夏枸杞炭疽病病原菌的分子鉴定

以枸杞为试材,对宁夏枸杞炭疽病果、病叶进行了组织分离、致病性检测和分子鉴定研究。结果表明:分离获得4株菌株,经致病性检测,有3株菌株有致病性;经形态学鉴定3株致病菌株属炭疽菌属(Colletotrichum);利用真菌保守的rDNA-ITS序列进行扩增和同源性分析,3株致病菌株与胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)的序列相似性达99.4%。     

导致南方梨早期落叶的果生炭疽菌致病力分化分析

【目的】明确我国南方梨产区造成早期落叶的果生炭疽菌(Colletotrichum fructicola)的致病力分化状况并建立其室内快速测定方法。【方法】以梨的枝条、叶片和果实为材料,采用不同方法造成伤口后接种果生炭疽菌的强致病力菌株PAFQ32,通过比较各处理的测定效果筛选其室内快速测定方法,并对供试菌株的致病力进行观测和致病类型划分,分析不同菌株致病力分化与其地理来源之间的相关性。【结果】采用梨枝条、叶片和果实对果生炭疽菌致病力的观测结果显示,梨叶片经针刺后接种菌丝块的测定效果明显优于其他处理。供试菌株致病力的测定结果表明,来源于我国南方梨产区的111个果生炭疽菌菌株其致病力可划分为强、中、弱3个类型,其中强致病力菌株17个(15.3%);中等致病力菌株89个(80.2%);弱致病力菌株5个(4.5%)。不同地理来源的果生炭疽菌菌株,其致病类型的分布比例有异。【结论】果生炭疽菌的菌丝块针刺接种梨叶片的方法,可用于其致病力的室内快速测定。来源于我国南方梨产区导致早期落叶的果生炭疽菌存在明显的致病力分化,以中等致病力菌株为优势群体。     

湖南邵阳柑桔炭疽病菌分离鉴定和药剂筛选初报

为明确邵阳地区柑桔炭疽病病原菌的种类及其致病性，以及针对性开展防治药剂筛选，对2021年9月采自湖南邵阳的柑桔炭疽病样品进行病原菌分离纯化后，进行形态学和分子生物学鉴定，采用室内离体接种方法对分离病原菌的致病性进行测定，通过切片方法观察其侵染特性，采用菌丝生长速率法测定7种不同药剂对病原菌的抑菌效果。结果表明，共分离到了11株具有相同形态特征的菌株，结合rDNA-ITS和rDNA-GAPDH序列构建系统进化树分析，鉴定病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),该菌表现出较强的致病性，多在叶片气孔处侵染为害。在7种供试药剂中，250 g/L吡唑醚菌酯抑菌乳油的抑菌效果最明显，EC₅₀值为0.756 mg/L,有柑桔炭疽病防治应用潜力。     

琯溪蜜柚炭疽病病原鉴定北大核心CSCD

【目的】确定引起琯溪蜜柚炭疽病的病原种类,为针对性地防治炭疽病提供理论依据。【方法】2014—2015年从平和县4个乡镇采集发病材料,对病原菌进行分离、纯化、致病性测定以及形态特征观测、r DNA-ITS序列分析,对病原菌的种类进行鉴定。【结果】经单孢分离后,所获得的菌株对琯溪蜜柚果实可致病,并产生典型症状,对病原菌进行显微形态观测,病原菌分生孢子及附着孢的形态为炭疽菌属真菌,以菌株GX(3)的DNA为模板,扩增得到全长为600 bp的DNA片段,并获得该菌的rDNA-ITS序列,发现其与胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides Penz的相似性高达100%。【结论】根据病害症状、病菌的形态特征及ITS序列同源性比较的结果,将琯溪蜜柚炭疽病的病原菌鉴定为胶孢炭疽菌C.gloeosporioides。     

琯溪蜜柚炭疽病病原鉴定

【目的】确定引起琯溪蜜柚炭疽病的病原种类,为针对性地防治炭疽病提供理论依据。【方法】2014—2015年从平和县4个乡镇采集发病材料,对病原菌进行分离、纯化、致病性测定以及形态特征观测、r DNA-ITS序列分析,对病原菌的种类进行鉴定。【结果】经单孢分离后,所获得的菌株对琯溪蜜柚果实可致病,并产生典型症状,对病原菌进行显微形态观测,病原菌分生孢子及附着孢的形态为炭疽菌属真菌,以菌株GX(3)的DNA为模板,扩增得到全长为600 bp的DNA片段,并获得该菌的rDNA-ITS序列,发现其与胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides Penz的相似性高达100%。【结论】根据病害症状、病菌的形态特征及ITS序列同源性比较的结果,将琯溪蜜柚炭疽病的病原菌鉴定为胶孢炭疽菌C.gloeosporioides。     

贵州省辣椒炭疽病病原鉴定及协同增效药剂筛选

以采自贵州省贵阳市和遵义市的辣椒炭疽病病样为试材,采用组织分离法分离病原菌,依照柯赫氏法则确定病原菌的致病性,根据菌株形态特征及rDNA-ITS序列分析鉴定,研究引起贵州省辣椒炭疽病的病原;采用菌丝生长抑制法,研究了致病菌株对甲基硫茼灵等11种原药和10％苯醚甲环唑等6种成品药的敏感性,从而在此基础上选择不同作用机理的药剂组合复配,测定抑制活性.结果 表明:结合形态学及分子生物学确定其为辣椒炭疽病菌,分别为尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)、斯高维尔炭疽菌(Colletotrichum scovillei)和疑似新种(Colletotrichum sp.);经敏感性测定,所选药剂对菌株均有一定程度的抑制作用;咪鲜胺、双苯菌胺、唑胺菌酯、戊唑醇等4种原药对3株辣椒炭疽病菌药效比较稳定,抑制效果较好;辣椒炭疽病菌对22.50％啶氧菌酯和10％苯醚甲环唑2种成品药剂的敏感性较高,EC50值分别为1.60 mg·L-1和2.12 mg·L-1;戊唑醇与吡唑醚菌酯3∶1和1∶1复配时,SR分别为1.7453和2.0611,1∶1时增效效果最好.啶氧菌酯与咪鲜胺1∶3、1∶1和1∶5复配时,SR分别为1.7234,1.6611和1.6585,1∶3增效效果最好.综上所述,引起贵州省辣椒炭疽病的病原菌有GY-1尖孢炭疽菌(C.acutatum);ZY-1斯高维尔炭疽菌(C.scovillei);ZY-2疑似新种(Colletotrichum sp.).     

四川成都南天竹炭疽病病原菌的初步鉴定

目前南天竹炭疽病的病原菌存在争议。近年来四川成都种植的南天竹中炭疽病发生较为严重,为弄清其病原菌,采集疑似病叶分离培养,纯化后经柯赫氏法则确定为致病菌并对其进行鉴定。依据菌落特征、分生孢子及附着胞的形态等特征,结合多基因序列分析,将致病菌确定为松针炭疽菌(Colletotrichum fioriniae)、喀斯特炭疽菌(C. karstii)和暹罗炭疽菌(C. siamense)。     

柑橘炭疽病菌的分离、鉴定及在果实上的潜伏侵染特性

【目的】明确柑橘炭疽病原菌的种类及其潜伏侵染特性,为柑橘病害防控提供理论依据。【方法】对采自湖北省3个地区的炭疽病样品进行病原菌的分离、形态学特征观察和致病性测定并采用r DNA-ITS序列分析法对代表菌株T4进行分子鉴定。此外,通过组织分离法,研究炭疽病菌在柑橘花器和发育期果实上的潜伏情况。【结果】获得的19株致病菌均为胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),但菌株间的致病力存在明显差异;T4菌株的测序结果与NCBI已登录的胶孢炭疽菌序列(FJ459917.1,FJ459916.1)比对发现,一致性达100%。柑橘炭疽病菌在花器和果实上的潜伏侵染呈一定的规律性:花器官中,花瓣的带菌率最高;果实上,果蒂和脐部带菌率最高,其次为果柄部位。【结论】研究区域的柑橘花和果实均携带胶孢炭疽病菌,该病菌具有潜伏侵染的特性。生产上要重视花期的病害防控,果实采后贮藏时需重视对果蒂部、脐部及果柄部位的消毒处理。     

甜瓜炭疽病病原菌鉴定

以南昌郊蛟桥镇甜瓜基地的甜瓜炭疽病病果为试材,采用致病性测定、形态学观察和分子生物学的方法,研究了甜瓜炭疽病病原归属。结果表明:黄瓜炭疽病病原菌形态具典型炭疽菌属类真菌Colletorichum orbiculare的特征,GPDH基因序列与NCBI-GenBank中已有的C.orbiculare序列同源性为100%,接种发病症状与自然发病症状类似,因此将该病原菌鉴定为瓜类刺盘孢(Colletorichum orbiculare)。     

枣炭疽病菌鉴定及9种杀菌剂对其菌丝生长的影响

为明确枣炭疽病的病原菌,从病样中分离病原菌并选择获得代表性的2个菌株,研究病原菌的形态学特征、rDNA-ITS序列、致病性及9种杀菌剂对其菌丝生长的影响。结果表明:引起枣炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),该病原菌主要侵染枣果实,发病初期果皮病斑为淡黄色,逐渐变成黑褐色圆形或近圆形斑,病斑中央凹陷,边缘呈黄色晕圈。吡唑醚菌酯和咪鲜胺对炭疽菌菌株YY-02和YY-05的菌丝生长抑制作用最强,其平均EC_(50)值分别为0.27,0.23μg/ml,2种药剂的毒力显著高于其他药剂;戊唑醇、苯醚甲环唑、醚菌酯、三唑酮4种药剂对胶孢炭疽菌YY-02和YY-05菌丝也具有一定的抑制作用,其平均EC_(50)值分别为2.85、2.97、3.17、5.69μg/mL。建议在枣炭疽病发病的不同时期,轮换使用吡唑醚菌酯、咪鲜胺、戊唑醇、苯醚甲环唑、醚菌酯和三唑酮等杀菌剂,以有效控制该病害。     

涟源市枣树叶斑病病原菌的鉴定

为明确湖南省涟源市白马镇枣树叶斑病的病原菌,采集枣树病叶10份,用组织分离法对病叶进行分离、纯化,采用形态学特征、rDNA-ITS及EF-1α基因进行菌株鉴定,利用分生孢子悬浮液喷洒法进行致病力测定。结果表明,从枣树叶斑病中分离得到12株分离物,经过分析和致病力测定,证实湖南省涟源市白马镇枣树叶斑病的病原菌是葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea。     

红掌炭疽病病原的分离鉴定及其核糖体DNA2ITS序列分析

 在广州、南京和扬州等地红掌病株上分离的炭疽菌中存在形态差异明显的两个群体。各选取两个代表菌株进行形态特征、致病性、寄主范围鉴定及核糖体DNA ITS序列分析。结果表明,红掌炭疽病病株上有两种致病菌：胶孢炭疽和毁灭炭疽,后者导致红掌炭疽病为首次报道。     

石棉县黄果柑果实病斑致病菌的分离鉴定

为明确近年四川省石棉县黄果柑果实田间普遍发生的果面病斑的致病菌,2016年12月在当地采病果为试验材料进行病菌分离,并对分离菌株进行形态学鉴定、分子鉴定及致病性测定。结果表明,分离共获得12株真菌,5株为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides,5株为互隔交链格孢菌Alternaria alternata,2株为果生刺盘孢菌C. fructicola。分离获得的胶孢炭疽菌株和互隔交链格孢菌株均能侵染果实和叶片形成病斑且与田间病斑基本一致,两者是生产中石棉县黄果柑果面病斑的致病菌。     

杧果炭疽菌株对台农1号的致病力分化研究

以台农1号杧叶片为材料,采用离体叶片针刺法,对2005—2013年采自海南、广西、广东、云南、四川以及美国夏威夷、泰国地区的112株杧果炭疽病菌进行致病力测定。结果表明,所有菌株均能引起台农1号叶片致病,采自不同地区、不同部位和不同品种的杧果炭疽菌致病性存在一定的差异。供试菌株中强致病性菌株有30株,占供试菌株总数的26.78%;次强致病性菌株有27株,占24.11%;中致病性菌株有35株,占31.25%;弱致病性菌株有20株,占18.86%。     

葡萄炭疽病菌T-DNA插入突变体的表型及致病性变异分析

胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides引起的葡萄炭疽病是葡萄生产中的一种重要病害。本研究对从2 100个T-DNA插入突变体库中挑选的PDA培养特征变异较大的11株突变体进行表型和致病性分析,旨在为葡萄炭疽病菌产孢与致病基因网络调控研究奠定基础。结果表明,突变体M112、M247、M1288、M1325、M1386和M1430不能产生分生孢子,其余的5株突变体产孢量降低;突变体M247、M1288和M1325丧失了致病性;突变体M112、C1094、M1386和M2013突变体致病力增强。此外,突变体C1094孢子萌发率明显降低,其余4株产孢突变体的孢子萌发率与野生型菌株WS15无明显差异。     

利用Q型聚类分析对瓜类炭疽病病原菌不同分离物的致病性分类

本试验对采用苗期和离体叶人工接种鉴定方法获得的瓜类炭疽病菌的１０个分离物对１０个鉴别品种的致病性指标──“病情指数”（ＤＩ）和“平均病斑直径”（ＡＤ）进行Ｑ型聚类。结果表明，苗期接种鉴定的ＤＩ和离体叶接种鉴定的ＡＤ分别在距离１４２７．５８５７５处和３．５１６０处将１０个分离物分成Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四大类群，Ａ、Ｂ、Ｃ三个类群在１０个鉴别寄主上的致病性反应型分别与Ｄｕｔｔａ等（１９６０）和Ｊｅｎｋｉｎ等（１９６４）描述的炭疽病病原菌的生理小种５、２和１相同，而Ｄ类群的致病反应与前人描述的该病原菌的７个生理小种均不相同，暂定名为生理小种８。     

甜柿炭疽病病原种类及生物学特性比较

【目的】明确浙江金华太秋甜柿果实炭疽病主要病原种类，探究不同病原菌生物学特性的差异，为甜柿炭疽病防治提供科学依据。【方法】2021年6—10月，通过对浙江金华永康太秋甜柿生长期果实炭疽病病样的采集和分离，致病性测定和系统发育分析，确定其主要病原菌种类；通过对不同甜柿炭疽病病原菌在不同温度、pH值、培养基类型、光照等培养条件和致死温度的测定，揭示不同种之间的差异。【结果】3种甜柿炭疽病菌（Colletotrichum horii、C. siamense和C. fructicola）为浙江金华太秋甜柿果实炭疽病主要病原菌，其中暹罗刺盘孢引起太秋甜柿炭疽病为国内首次报道。生物学特性研究表明，果生刺盘孢、哈锐炭疽菌和暹罗刺盘孢最适生长温度为30℃，最适产孢温度为35℃，哈锐炭疽菌最适产孢温度为25℃；果生刺盘孢和暹罗刺盘孢菌丝生长最佳培养基为PDA、CMA和GA，果生刺盘孢产孢最佳培养基为胡萝卜煎汁培养基，暹罗刺盘孢产孢最佳培养基为CMA培养基；哈锐炭疽菌菌丝生长最佳培养基为PDA和CA，产孢最佳培养基为OA培养基。pH值4～10均适宜甜柿炭疽病菌菌丝生长，果生刺盘孢在pH值5和9时产孢最佳，...     

山东牡丹黑斑病的病原菌鉴定与ITS序列分析

牡丹黑斑病的致病菌尚不明确。通过对泰安地区的牡丹病叶进行组织分离,利用分子生物学技术结合形态学方法对病原菌进行鉴定,并利用Mega5软件对链格孢属的22个种进行系统发育树分析,进一步明确其分类地位。结果表明：该病致病菌ITS序列与GenBank中登录的Alternaria alternata、A. tenuissima、A. metachromatica相似性均为100%,利用DNAMAN软件对核苷酸一致性进行比较,发现样品菌株与A. alternata的一致性最高,结合形态学方法鉴定该病致病菌为链格孢A. alternata（GenBank登录号为：KJ682317）。回接鉴定后分离得到的菌株,菌饼刺伤接种的病叶与无伤接种的病叶均发病,但刺伤叶片病斑扩展快。