新城疫单抗酶联试剂盒对鸡群中强毒感染的监测试验

用新城疫（ＮＤ）单抗酶联试剂盒检测从疑有新城疫病毒强毒感染的鸡群中采集泄殖腔棉试样品６８份，检出阳性２０份。随机对其中１５份样品进行病毒分离，结果阳性符合率为１００％（１５／１５）。结果表明，该试剂盒特异性强，灵敏度高，诊断快速，易于基层推广应用。为ＮＤ的确诊和免疫鸡群中ＮＤＶ强毒感染的监测提供了新方法。     

应用单抗ELISA试剂盒检测免疫鸡群新城疫强毒感染

新城疫（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅ,ＮＤ）是鸡的一种烈性病毒性传染病〔４〕。尽管国内外已知的新城疫病毒（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ,ＮＤＶ）毒株达数百种之多,毒力差异很大,但是其血清型只有一个。由于疫苗的广泛使用,从现场免疫鸡群...     

应用新城疫单抗酶联试剂盒快速诊断绿孔雀新城疫

应用新城疫单抗酶联试剂对一群发生疑似新城疫的绿孔雀进行快速诊断，采用肛门泄殖腔棉拭取样方法对病孔雀取样，应用双单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验检出多数病死孔雀新城疫强毒抗原阳性，诊断该群绿孔雀发生了新城疫，用流行病学调查，临床症状观察，病理剖检，病毒分离，鉴定和毒力试验的经典诊断方法及新城疫疫苗紧急防疫效果观察验证表明，新城疫单抗酶联试剂盒诊断孔雀新城疫简便，快速，准确。     

应用新城疫单抗酶联试剂盒快速诊断绿孔雀新城疫

应用新城疫单抗酶联试剂对一群发生疑似新城疫的绿孔雀群进行快速诊断,采用肛门泄殖腔棉拭取样方法对病孔雀取样,应用双单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验检出多数病死孔雀新城疫强毒抗原阳性,诊断该群绿孔雀发生了新城疫。用流行病学调查、临床症状观察、病理剖检、病毒分离、鉴定和毒力试验的经典诊断方法及新城疫疫苗紧急防疫效果观察验证表明,新城疫单抗酶联试剂盒诊断孔雀新城疫简便、快速、准确。     

应用单抗EL试剂盒检测免疫鸡群新城疫强毒感染

A ELISA kit based on monoclonal antibodies was used to detect the infections of virulent Newcastle disease virus (NDV) in the experimentally immunized SPF chicken flocks. When cloacal samples from chickens infected with different pathotypes of NDV were assayed, only infections with virulent strains could be detected during the days 3～16 post-challenge, while infections with commonly used mesogenic and lentogenic vaccine strains, it couldn′t be detected. The results in this presentation indicated that the ELISA kit could be used for detecting and monitoring virulent NDV infection in chicken flocks.     

应用新城疫诊断试剂盒快速诊断非典型鸡新城疫的研究

应用新城疫单抗酶联诊断试剂盒对３群发生疑似新城疫的鸡群进行了快速诊断。采用肛门泄殖腔棉拭取样方法取样，分别取６０、３５和３８份样品，应用双单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验检测出新城疫强毒抗原阳性分别为５、３和２份样品，诊断该３群发生非典型鸡新城疫。用病毒分离、鉴定和毒力试验的经典诊断方法验证表明，新城疫单抗酶联试剂盒诊断非典型新城疫简便、快速、准确     

免疫鸡群中新城疫强毒感染流行趋势的探讨

采用运用ND单抗酶联免疫试剂盒作为ND流行病学调查手段,对本地区部分免疫鸡群中ND强毒感染进行监测,结合测定个体HI抗体,探讨免疫鸡群中ND强毒感染流行原因和趋势,为制定合理的ND控制计划,尤其在改进免疫程序、降低群体感染水平方面提供依据。     

应用新城疫诊断试剂盒快速诊断非典型鸡新城疫的研究

应用新城疫单抗酶联诊断试剂盒对３群发生疑似新城疫的鸡群进行了快速诊断。采用肛门泄殖腔棉拭取样方法取样，分别取６９．３５和３８份样品，应用双单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验检测出新城疫强毒抗原阳性分别为５、３和２份样品，诊断该３群发生非典型鸡新城疫。用病毒分离、鉴定和毒力试验的经典诊断方面验证表明，新城疫单抗酶联诊断非典型新城疫简便、快速、准确。     

免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒强毒株，中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４￣６ｄ和１１￣１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒     

免疫鸡群感染新城疫的诊断及其对策

本文报道免疫鸡群感染新城疫后,产蛋下降24%和HI 抗体水平上升4倍以上,并继发感染大肠杆菌而死亡。对此鸡群进行接种NDI 系苗表明,接种组产蛋率很快由56%恢复到70%,而对照组无恢复现象,这为免疫水平不高(抗体效价相似文献   

单克隆抗体夹心ELISA试验检测鸡新城疫病毒抗原的研究

从10株抗鸡新城疫病毒(NDV)特异性单克隆抗体(MAbs) 中筛选出2株MAbs—M22和F23,分别用作包被抗体和酶标抗体而建立的MAbs—夹心ELISA试验,对提纯NDV的最小检出量为25ng/ml病毒蛋白.NDV鸡阳性血清对本试验的特异性阻断作用和与其他禽类病毒交叉反应的阴性结果,证明本试验对NDV的特异性。从临床疑为鸡新城疫的724只病鸡的口腔棉试样品中共检出阳性502只,其中200个样品与病毒分离试验结果完全一致,两者均查出阳性鸡176只。     

沙门氏菌快速检测试剂盒的研制及其应用

在建立直接ＥＬＩＳＡ方法基础上，首次研制出检测沙门氏菌的单抗快速检测试剂盒。对现场分离菌株进行的双盲考核试验共做２８０个菌株，两种方法的总符合率为９４．６％。以２０％的脱脂乳为冻干保护剂，经冻干后，其效价和物理性状最佳，试剂盒批内和批间重复试验的变异系数小于１０％，试剂盒的稳定性较好。采用本试剂盒检测了３０５９份人的粪样，检测出１６６份阳性样品，比市站多检出７２份阳性样品。在对６１９份肉样、６８８份鱼粉、６００份奶样、６２０份蛋样检测中，比常规国标方法多检出１００株沙门氏菌。因此，以直接ＥＬＩＳＡ为基础构建的快速检测试剂盒在沙门氏菌检验中，具有重要实用价值。     

免疫鸡群感染新城疫强毒后群体带毒情况和对生产指标的影响

应用新城疫病毒单抗ＰＥＧ夹心ＥＬＩＳＡ试剂盒对一新城疫强毒感染鸡群连续监测,检测泄殖腔拭子带毒情况和ＨＩ抗体效价,结果在鸡群发病后３０７ｄ仍可以测出强毒。且随着时间的推移和鸡群ＨＩ抗体水平的下降,强毒感染率呈上升趋势,表明免疫鸡群感染新城疫强毒后,强毒可在群内循环传播和长期维持。采用疫苗免疫把强毒感染率控制在一定水平而不致暴发新城疫,则鸡群可以保持较好的生产性能。而当强毒感染率上升较大时,则生产性能下降明显,死淘率也上升。     

免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫（ＮＤ）基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒（ＮＤＶ）强毒株、中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４～６ｄ和１１～１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒可以检测免疫鸡群中ＮＤＶ强毒感染，为ＮＤ的监测提供了新手段。     

一步法复合RT-PCR鉴别ND强毒与AI病毒的研究

根据新城疫病毒（NDV）融合蛋白和禽流感病毒（AIV）核蛋白的核酸序列设计2对引物,对NDV和AIV的特异扩增片段分别为156bp和219bp,建立了同时检测强毒力NDV和AIV核酸的一步法复合RT—PCR。试验中未能检出弱毒力NDV,IBV,IBDV,REV,REOV及SPF鸡肌肉组织的RNA,从不同年代分离的16个NDV强毒株全为阳性而NDV弱毒株全为阴性。经验证,复合引物与单一引物的扩增效率一致,能够检出NDV和H;亚型AIV的最低病毒量分别为10^3.7EID。和10^3.9EID50。试验结果表明,此次建立的一步法复合RT—PCR特异、敏感,适用于强毒力NDV和AIV．感染的快速鉴别。     

Clone30与Lasota疫苗对雏鸡免疫后HI抗体消长规律的试验

以血凝抑制试验方法,对同日龄雏鸡群,在同样饲养管理条件下,分别以Clone 30,Lasota两种新城疫弱毒疫苗,采用不同免疫途径,比较其免疫后的血清中HI抗体滴度的消长规律。结果表明,两种疫苗免疫后HI抗体消长规律基本相同。     

实验性鸡大肠杆菌病的免疫组化检测

用致病性大肠杆菌 O1 8分离株和 /或低致病性禽流感病毒 (Mildly pathogenic avian influenza virus,MPAIV)接种 1 0～ 1 2日龄 SPF鸡 ,细菌接种后 1～ 96h对试验鸡的气管、肺、气囊、胸腺、法氏囊、脾脏、肝脏和肾脏的石蜡切片进行间接酶标抗体染色 ,发现大肠杆菌接种组、混合接种组的气管、肺在接种后 1 h可检测到细菌抗原 ,混合接种组检测到的细菌更多 ,存在时间更长。结果表明 :气管、肺和气囊是鸡大肠杆菌定居的场所 ;MPAIV可延长细菌在气管、肺和气囊中定居的时间 ,使鸡大肠杆菌病进一步加重