新对虾等位酶的遗传控制

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对新对虾（Metapenaeus.spp）的养殖群体进行了7种等位酶的电泳检测和谱带遗传分析，确定了17个等位酶位点和22个等位基因，其中有4个位点是多态的，它是Esr-1、Sod-1、Me-4、Aat-1(P0.95f标准）。有一个等位基因的位点有Est-2、Lhd-1、Ldh-2、Sdh-1、Me-1、Me-2、Me-3、Me-5、Aat-2、Mdh-1、Mdh-2、Mdh-3、Mdh-4；有二个等位基因的位点有Sod-1、Me-4、Aat-1；有三个等位基因的位点有Est-1。本研究揭示了新对虾群体等位酶位点及其等位基因带谱的变异式样，为新对虾的遗传育种及遗传结构的研究提供了一批等位酶位点及其等位基因的参考图谱。     

斑节对虾的遗传育种研究

斑节对虾(Penaeus monodon)俗称草虾,是世界三大养殖虾类之一。广泛分布于印度洋和西太平洋,也是我国本土优质对虾资源之一,但尚未形成遗传稳定的养殖品系,养殖种苗除少数来自海捕外,绝大多数通过人工繁殖获得。供人工繁殖的亲虾主要来自两方面:一是捕捞野生怀卵虾,二是通过摘除眼柄和人工诱导野生雌虾性成熟和产卵,但二者均依赖野生资源。斑节对虾养殖的迅速发展对野生资源造成了极大的压力,过度开发势必引起种质的退化;同时,长期依赖野生亲体培育苗种产生了一些弊端,如亲体携带病毒,养殖对象生长减慢,抗病力下降等。因此,为保护野生资源和阻止野生虾类遗传多样性的丧失,尽快形成遗传稳定的养殖品系显得尤为迫切。     

斑节对虾养殖群体遗传多样性的同工酶和RAPD分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和RAPD方法对厦门养殖斑节对虾（Penaeus monodon Fabricius）群体的遗传多样性进行分析。9种同工酶共检测到21个座位，其中多态座位13个，多态座位比例为61．90％，预期杂合度0．151，观察杂合度0．120，Hardy—Weinberg遗传偏离指数（d）为-0．208，存在杂合子缺失。经x^2拟合度检验，多数座位偏离Hardy—Weinberg平衡，表明群体未达到随机交配。14个10bp引物共获得了83个标记，单个引物获得的标记数为2～11个，平均每个引物扩增出5．93个座位，其中多态标记数68个，多态位点比例为81．93％，杂合度为0．246，基因多样性为0．260，Shannon’S信息指数为0．397。两种方法均表明该斑节对虾养殖群体的遗传多样性水平较高，但可能已有近交衰退发生。     

金马牌对虾饲料养殖斑节对虾试验报告

斑节对虾(Penaeus monodon Fabricius)俗称草虾、花虾、虎虾,属热带性大型虾类,我国主要产于海南、广东和广西沿岸,浙江、福建也有少量分布。其个体大、生长快,肉质鲜美、离水耐干性强,便于活运,是养殖的优良品种。东南亚的泰国、菲律宾和印尼等国,人工育苗和养殖斑节对虾都有较长的历史,发展很快。我国台湾省于1968年首次人工育苗成功,二十几年来发展迅猛,积累了丰富的经验;广东、福建经过多年试验,1992年进行大规模的人工苗种和养殖生产,草虾养殖业正在积极的开发发展中。1992年4—8月,受福建省水产饲料研究会的委托,在我所鼓浪屿实验场2.5亩的池塘中,用华大饲料有限公司生产的金马牌对虾饲料,进行养殖斑节对虾验证试验。经过116天的试养,收获斑节对虾580公斤,平均亩产232公斤,成活率为74.2%,个体规格为每公斤64尾,饲料系数1.98。该项试验结果,已于1992年8月17日通过专家验收确认。     

海南三亚斑节对虾野生种群mtDNA 16S rRNA基因和控制区序列的多态性

采用聚合酶链式反应(PCR)技术对海南三亚野生斑节对虾(Penaeus monodon)20个个体的mtDNA 16S rRNA基因和控制区序列进行扩增,PCR产物经纯化后进行测序,得到16S rRNA基因的495 bp的核苷酸序列和控制区序列470 bp的核苷酸片段.用Clustal X软件对16S rRNA和控制区序列进行了比对,通过ARLEQUIN 2000软件对所得线粒体16S rRNA基因片段和控制区序列进行了比较分析.16S rRNA序列检测出17个多态位点,8种单倍型;控制区序列检测出100个多态位点,17种单倍型.该种群16S rRNA序列基因多样度(H)和碱基多样度(π)分别为0.700和0.0045;控制区序列的H和π分别为0.984和0.0480.研究结果表明16S rRNA序列不适应斑节对虾的种群遗传多样性分析;控制区序列适应斑节对虾种群遗传多样性研究.     

斑节对虾杆状病毒的超微结构

应用超薄切片技术，研究斑节对虾卵细胞和各变态期病毒及其包涵体的分布和超微结构。在糠虾前期各期未找到病毒，而糠虾后期各期的肝和中肠上皮细胞核中则有典型的病毒及其包涵体存在。这提示着ＭＢＶ可能不经由卵细胞传播给子代。病毒粒子单个散在于核质和包涵体基质中，一端钝圆，另一端稍尖，形似葵花子，而不是如文献所言的长圆柱体，长度２７０－３００ｎｍ，直径平均７５ｎｍ，由囊膜、衣壳和核心三部分组成，囊膜上无纤突。这     

养殖斑节对虾效益好

<正> 笔者在滦南县南堡国营养虾二场进行了两年的养殖生产实践,摸索出了一些斑节对虾的养殖经验和体会,也获得了很好的经济效益。具体做法如下: 1.虾池条件 斑节对虾喜欢池底沙性土壤,习于卧底潜伏。因此选择泥沙池底为宜。南堡国营养虾二     

斑节对虾高产养成试验

自中国对虾低盐度育苗和养成获得成功后,上海地区的对虾养殖面积已达1300多ha,年产量约3500 t。但由于养殖品种单一,中国对虾对饲料的要求较高,天然饵料资源有限,且日趋紧张,故很难进一步发展。鉴此,有必要引进生长快、偏植物食性的斑节对虾。根据上海市科委下达的“斑节对虾养殖技术研究”的课题要求,作者于1988～1990年分别在奉贤县本所河蟹人工育苗场和上海市养殖总场奉贤海水场进行了养成试验。     

斑节对虾7个全同胞家系间亲缘关系的微卫星分析

为了斑节对虾（Penaeus monodon）后续育种工作的需要,研究了斑节对虾7个全同胞家系的亲缘关系。从95对微卫星引物中筛选出16对,16个微卫星位点共发现79个等位基因（A）。每个位点的A为2～10个,平均4.9375,有效等位基因（Ne）1.7575～5.3980,平均3.3878,平均杂合度观测值（Ho）0.6679,平均杂合度期望值（He）0.6698。平均多态信息含量（PIC）0.6110。7个家系总近交系数（FIT）0.0099,家系内近交系数（FIS）-0.3725,家系间基因分化系数（FST）0.2709。根据遗传距离采用UPGMA法对7个家系进行聚类,F2和F6家系之间的遗传距离最小聚为一类,与F7家系遗传距离最远。结果表明,家系间基因交流较低,遗传分化程度较高,且很少发生近交,F7家系可以优先考虑与其他家系进行杂交选育。     

池塘养殖斑节对虾的生长特性

对池塘养殖的斑节对虾的生长特性进行研究。不同生长发育阶段的1500尾斑节对虾的体长、体重生长参数进行测量和分析。结果表明,(1)池塘养殖斑节对虾体长和体重呈幂函数关系,♂∶W=2·0×10-5×L~(2.9498);♀:W=2·0×10-5×L~(2·9633);(2)同大多数对虾种类一样,斑节对虾也表现出雌、雄生长的差异。养殖前期,雌、雄虾的体长、体重生长差异不明显,雄虾略高于雌虾,在59·6d后,雌虾体长生长速度高于雄虾;雄虾体重的生长拐点出现在144·5d左右,雌虾体重的生长拐点出现在195·3d左右;(3)采用von Bertallanffy生长方程,拟合出池塘养殖斑节对虾体长、体重生长方程为:♂∶Lt=178.9(1-e-0·0093(t-28·2)),Wt=87·97(1-e~(-0·0093(t-28·2)))2·9498;♀∶Lt=233·7(1-e~(-0·0065(t-28·2))),Wt=208·96(1-e~(-0·0065(t-28·2)))2·9633。     

斑节对虾杆状病毒在感染对虾中肠腺中的分布

利用组织切片法研究了斑节对虾杆状病毒（MBV）在养殖早期班节对虾及养成期斑节对虾中肠腺各部位的分布特点。斑节对虾的中肠腺可分为头部、亚头部、中部、亚尾部和尾部等5个部分，其上皮细胞包括E细胞、F细胞、B细胞和R细胞等4种类型。头部和尾部均以E细胞为主、亚头部、中部和亚尾部均以R细胞为主。在感染度较轻的样本中，MBV一般只感染F细胞、R细胞和B细胞。感染度较重时，E细胞也同时受累。在养殖早期虾和养成期虾中，MBV相对感染度在中肠腺各部分的分布均以中部最高，而且以中部的中间最高，离中部越远，相对感染度越低。     

斑节对虾组织蛋白酶L基因的克隆及其表达分析

通过克隆得到斑节对虾（Penaeus monodon）组织蛋白酶L基因（PmCatL）cDNA全长。该基因序列全长1 850bp,包括1 026 bp的开放阅读框,编码341个氨基酸。预测的PmCatL蛋白由信号肽(Met¹-Ala¹⁸)、前体域(Val¹⁹-Gln¹²³)和成熟域(Leu¹²⁴-Val³⁴¹)三部分构成,存在3个半胱氨酸蛋白酶活性位点(Cys¹⁴⁸、His²⁸⁷、Asn³⁰⁸)和1个潜在的糖基化位点(Asn⁹⁹)。具有组织蛋白酶L的E⁴⁵X₃RX₃FX₂NX₃IX₃N⁶⁴和G¹⁸⁷CXGG¹⁹²保守序列。同源性分析显示,PmCatL氨基酸序列与其他物种相似性为36%⁷5%。进化树显示PmCatL和罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）亲缘关系最近,并与其他无脊椎动物的组织蛋白酶L聚成一支。表达结果表明,PmCatL基因在肝胰腺、淋巴、肌肉、性腺等被测组织中均有表达,其中淋巴和肝胰腺的表达量较高;PmCatL基因在斑节对虾仔虾时期表达量较高,可能与斑节对虾在这一时期的生长发育相关;PmCatL在卵巢发育的Ⅳ期表达量最高,可能在斑节对虾的卵巢发育中发挥重要作用。 

     

斑节对虾的饥饿试验和补偿生长

研究了（25．0±1．5）℃下斑节对虾（Pertaeus mondon）[初始体质量（1．60±0．01）g]饥饿0d、2d、4d、6d和8d后再饱食投喂18d、16d、14d和12d的补偿生长和体组成变化。结果显示,饥饿2d的斑节对虾体质量上升,脂肪质量分数下降,而水分、灰分质量分数增加,但蛋白质质量分数没有明显改变。随着饥饿时间的延长,斑节对虾的体质量及蛋白质、脂肪等质量分数持续下降,水分和灰分质量分数持续上升。试验结束时饥饿2d和饥饿4d试验组斑节对虾的体质量略小于对照组,虾体的营养组成也均接近或达到对照组水平,而饥饿6d和饥饿8d试验组的斑节对虾的体质量则远低于对照组,且虾的身体营养组成与对照组具有显著性差异（P〈0．05）。在恢复生长过程中所有饥饿处理组的食物转化率（FCE）均高于对照组,各饥饿处理组的饲料系数（FCR）均低于对照组。研究结果表明,饥饿2d和4d的斑节对虾在恢复正常投喂之后具有部分补偿生长效应,这主要是由于恢复摄食后食物转化率提高的结果。     

Estimates of heritability and genetic correlations for growth‐related traits in the tiger prawn Penaeus monodon

Heritabilities and genetic and phenotypic correlations were estimated for body weight (BW), body length (BL), carapace length (CL), carapace width (CW) and carapace height (CH) of the Penaeus monodon from measurements on progeny at 6 months of age resulting from a nested mating design. Estimation was made on data from 41 full‐sib and 10 half‐sib families. The estimated heritabilities for these traits were 0.13–0.24, and the significantly phenotypic and genetic correlations were 0.81–0.94 and 0.88–1.00, respectively. The present results indicate that genetic improvement through selective breeding conducted on P. monodon might be feasible and would be an efficient method to obtain a positive response to selection.     

斑节对虾relish基因的克隆及免疫刺激对其mRNA表达水平的影响

relish是Rel/NF-κB家族的重要成员之一。本研究在构建的斑节对虾(Penaeus monodon)肝胰腺转录组文库中克隆得到PmRelish基因,其全长5 112 bp,包括3 561 bp的ORF,推测编码1个含1 186个氨基酸的蛋白。PmRelish的蛋白具有Rel/NF-κB蛋白家族的典型结构特征,包括N端的RHD结构域,核定位信号,C端的6个锚蛋白重复序列以及死亡结构域,表明该蛋白是NF-κB1亚型。该基因在所检测组织中呈组成型表达,并在血细胞表达量最高。使用定量PCR检测PmRelish基因在不同免疫刺激条件下在肝胰腺中的mRNA表达情况,结果显示,肝胰腺PmRelish基因是诱导型表达,并被创伤弧菌、金黄色葡萄球菌和白斑综合征病毒(WSSV)调控表达,其中被创伤弧菌上调表达最显著。进一步证明了病毒核酸类似物Poly(I:C)、R484可激活PmRelish的表达。上述研究结果说明Relish是斑节对虾的重要免疫因子,可能通过直接或间接作用参与对细菌和病毒的免疫反应。     

斑节对虾池塘淡化养殖试验

投放平均体长0.8cm的斑节对虾苗种，经120d养殖，平均体长11.6cm，平均产量为1808－2860kg/hm^2，出池规格19.2g，成活率40％－56％，投入产出比1：1．55－2．10，为生产单位推广养殖提供可行的技术措施。     

cDNA cloning and expression analysis of glutaredoxin 3 in black tiger shrimp Penaeus monodon

Aquaculture International - Glutathione (Grx) is a glutathione-dependent oxidoreductase belonging to the thioredoxin (Trx) superfamily. It maintains redox homeostasis in organisms and plays a...     

Limited evidence for genetic variation for resistance to the white spot syndrome virus in Indian populations of Penaeus monodon

There has been a highly detrimental impact of the white spot syndrome virus (WSSV) on black tiger shrimp (Penaeus monodon) aquaculture in India. Currently, no cost‐effective measures are available for controlling the disease. One alternative is to improve WSSV resistance through a selective breeding programme for disease‐resistant shrimp, provided that genetic variation exists for this trait. The aim of this study was to evaluate the evidence for genetic variation in resistance to WSSV in P. monodon sourced from Indian populations. Post‐larval shrimp (n=1950) from 54 full‐sibling families were challenged with WSSV using WSSV‐infected mince meat. The heritability was estimated using four different statistical models fitted to the resulting time to death data, including two linear models and two Weibull proportional hazard frailty models. None of the estimated heritabilities were significantly different from zero. We suggest three possible explanations for these results: there actually is very little variation between P. monodon in WSSV resistance and all individuals are highly susceptible to the disease; there is genetic variation in resistance to WSSV in P. monodon but we did not find it in our experiment because the level of challenge in the experiment was too high to allow genetic differences to be expressed; the variation is due to mutations conferring resistance, which are at a low frequency in the population, and we did not sample a broad enough genetic base to capture these mutations.