不同地区鸭疫里氏杆菌的分离鉴定与药敏试验

为了解不同地区鸭疫里氏杆菌病的流行情况,并进一步测定这些地区鸭疫里氏杆菌对常用抗菌药物的敏感性。本试验从广东云浮、广东开平、浙江常山3个地区疑似传染性浆膜炎病鸭中进行了细菌分离,通过鉴别培养、染色镜检、生化试验等对分离菌进行鉴定。采用微量稀释法测定了分离菌株对常用药物的最小抑菌浓度。结果从3个地区共分离鉴定出16株鸭疫里氏杆菌。药敏试验结果表明,3个地区鸭疫里氏杆菌均对头孢类和氟苯尼考高度敏感,对多西环素、大观霉素比较敏感;对恩诺沙星,新霉素等其他受试药物呈不同程度的耐药。本研究为鸭疫里氏杆菌的分离鉴定与药物敏感性测定提供了系统方法,为临床选择合理药物防制鸭传染性浆膜炎提供了理论指导。     

牛源多杀性巴氏杆菌血清分型及毒力相关基因的检测研究

为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法(LPS-mPCR)、多位点序列分型法(MLST)及PCR方法检测17株Pm分离株的荚膜型、脂多糖型、MLST型及7类共25个毒力相关基因的分布情况。结果显示,13株Pm的荚膜脂多糖型为A∶L3型,ST型均为ST1型,4株Pm荚膜脂多糖型为B∶L2型,ST型均为ST44;17株Pm毒力相关基因(exbB、exbD、fimA、fur、hgbA、hsf2、nanB、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、ptfA、sodA、sodC、tonB和tbpA)的检出率高达100%,toxA基因的检出率为0。结果表明,从新疆北疆部分地区规模化牛场疑似病例中分离的Pm主要血清型为A∶L3∶ST1型。     

牛源多杀性巴氏杆菌血清分型及毒力相关基因的检测研究

为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法（LPS-mPCR）、多位点序列分型法（MLST）及PCR方法检测17株Pm分离株的荚膜型、脂多糖型、MLST型及7类共25个毒力相关基因的分布情况。结果显示,13株Pm的荚膜脂多糖型为A：L3型,ST型均为ST1型,4株Pm荚膜脂多糖型为B：L2型,ST型均为ST44;17株Pm毒力相关基因（exbB、exbD、fimA、fur、hgbA、hsf2、nanB、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、ptfA、sodA、sodC、tonB和tbpA）的检出率高达100%,toxA基因的检出率为0。结果表明,从新疆北疆部分地区规模化牛场疑似病例中分离的Pm主要血清型为A：L3：ST1型。     

秦岭地区几种珍稀动物毕氏肠微孢子虫基因分型

为了评估秦岭地区珍稀野生动物的毕氏肠微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)的人兽共患风险,本研究采用PCR技术和多位点序列分型技术对秦岭地区5种珍稀动物毕氏肠微孢子虫的感染情况及基因型/亚型进行了分析。在采集的22份新鲜粪便中检测到7个阳性分离株,其中斑羚源5个,长颈鹿源1个,麂子源1个。基于ITS位点基因分型发现所有分离株均为人兽共患基因型,包括6个已报道的基因型D和1个尚未报道的D-new。多位点序列分型技术发现秦岭地区珍稀野生动物的毕氏肠微孢子虫存在遗传多样性,7个分离株在MS1、MS3、MS4和MS7位点分别有3、1、2、2个亚型。     

内蒙古通辽市某奶牛场乳房炎无乳链球菌的分离、鉴定及药敏试验

旨在调查引起内蒙古通辽地区奶牛乳房炎发生的优势病原菌。采用常规方法对采集自该地区某奶牛场的3份临床型乳房炎患牛奶样进行优势致病菌的分离鉴定,采用纸片扩散法（K-B法）评价分离菌对兽医临床常用抗菌药物的敏感性。结果表明,从3份乳样中共分离到14株菌,经生化试验鉴定为无乳链球菌;药敏试验结果表明,分离菌对链霉素及磺胺嘧啶表现出较强的耐药性,而卡那霉素、庆大霉素及麦迪霉素对分离菌则表现出较好的抑菌效果。     

市售鲜猪肉葡萄球菌和大肠杆菌污染及其PCR快速检测

为了解市售鲜猪肉葡萄球菌和大肠杆菌污染情况,本试验从贵州省9个地区农贸市场采集鲜猪肉样本106份,3个地区屠宰场运输车辆采集棉拭子样本36份,采用传统生化法鉴定2种优势菌落;PCR法快速检测葡萄球菌和大肠杆菌。结果显示,鲜猪肉和棉拭子样本葡萄球菌的分离率为23．5％（38／162）和31．9％（23／72）,大肠杆菌的分离率为15．4％（25／162）和13．9％（10／72）;2种细菌可扩增出目的条带。结果表明,市售鲜猪肉及运输车辆葡萄球菌和大肠杆菌污染严重,本试验成功运用PCR法对这2种病原菌进行快速检测。     

沧州地区猪源肺炎克雷伯菌分离菌株、耐药性及耐药基因检测

为了分析沧州地区猪源肺炎克雷伯菌耐药性及耐药基因流行情况,试验采用细菌学常规的分离鉴定方法和16S rRNA PCR法,从沧州地区不同养殖场中采集患呼吸道疾病猪肺脏、肝脏、鼻拭子等病料组织123份,分离得到了45株致病性肺炎克雷伯菌。采用K-B药敏纸片法和PCR法分别检测45株致病性肺炎克雷伯菌的耐药性及耐药基因流行情况。结果显示,45株致病性肺炎克雷伯菌分离菌株对阿莫西林、氨苄西林、氟苯尼考等9种药物耐药性较高,耐药率在55.6%以上;对其他药物耐药率在13.3%～22.2%;分离菌株呈现多重耐药现象,耐11、10种药物分离菌株最多,分别占分离菌株的24.4%、28.9%;bla_(TEM)、ant(3″)-Ⅰa、aph(3′)-Ⅱa、sul2、sul3五种耐药基因检出率较高,检出率在80.0%以上;bla_(SHV)、floR、qnrA三种耐药基因检出率在37.8%～46.7%;bla_(CTX-M)、mcr-1、qnrS、rmtB四种耐药基因未检出。说明该地区分离的45株致病性肺炎克雷伯菌耐药性严重,呈现多重耐药现象,携带耐药基因复杂。     

海口地区猪圆环病毒3型流行株的分离鉴定及遗传变异分析

为了分析海口地区猪圆环病毒3型(PCV-3)流行株ORF2基因序列遗传特点,试验采用细胞培养法和PCR方法对采集的患病猪肺脏、淋巴结等64份病料组织进行PCV-3分离与鉴定,并对分离到的PCV-3流行株ORF2基因进行克隆与测序。结果表明:共分离得到8株PCV-3流行株,这8株PCV-3流行株的ORF2基因序列与GenBank中登录的15株PCV-3参考毒株的同源性在97.1%～99.6%之间,且与参考株KX169315.1、KJ534658.2和KJ534660.2的遗传距离最近,与其他参考株遗传距离较远。说明从海口地区分离得到的8株PCV-3流行株未出现变异情况。     

宁夏地区腹泻犊牛产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌的药敏试验及脉冲场凝胶电泳分型

为了解宁夏地区规模化牛场犊牛腹泻源产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希氏菌耐药和遗传变异情况，对分离得到的17株产ESBLs大肠埃希氏菌，采用K-B纸片法进行药物敏感性试验，采用脉冲场凝胶电泳进行分型研究。结果显示，17株分离株对试验药物多数呈耐药状态，对头孢拉定、四环素、阿莫西林3种药物完全耐药，其他药物的耐药性为70.24%～94.12%,只对阿米卡星、诺氟沙星敏感性较高。分离菌株可分为17个PFGE型，菌株间的相似度为67.5%～85.7%,无优势带型。宁夏地区犊牛腹泻源产ESBLs大肠埃希氏菌耐药性严重，遗传差异较大，但不同菌株存在着不同程度的亲缘关系。     

2018年～2021年河北省部分地区鸡源沙门菌的生物学特性及致病性研究

为调查河北地区鸡源沙门菌及其血清型的流行及分布情况,并分析其的致病性,本研究于2018年～2021年在河北省7个地区34个养鸡场共收集631份发病鸡肛拭子和62份病料样品共计693份,分别接种普通琼脂培养基分离细菌并纯化后经革兰氏染色镜检;将分离菌分别接种不同的培养基培养,并对分离菌经生化及16S r RNA基因的PCR及测序鉴定,随机选择32条测序序列经NCBI的BLAST比对,并采用DNAStar软件分析该基因的同源性。采用玻片凝集法鉴定分离菌的血清群及血清型并统计各血清群与血清型在河北不同地区的分布。结果显示,从693份病料样品中共分离到238株沙门菌,除3株未定群外,其余分离菌分属于A、B、C、D、E、F 6个血清群,其中D群最多达69.7%(166/238);238株沙门菌分属于7个不同的血清型和未定型,依次为鸡白痢沙门菌(91/38.2%)、甲型副伤寒沙门菌(43/18.0%)、鸡伤寒沙门菌(40/16.8%)、肠炎沙门菌(39/16.4%)等。血清群与血清型分布的统计结果显示,除张家口地区流行A群血清群外,其余地区流行的血清群均为D群;张家口地区流行鸡白痢沙门菌;秦皇岛地...     

致仔猪腹泻大肠杆菌血清型鉴定

为了解云南省部分地区致仔猪腹泻大肠杆菌血清型分布情况,本试验采用常规细菌分离培养法及生化试验鉴定法,得到118株大肠杆菌。分离菌株经O抗原多价血清试验,鉴定出80株阳性菌株分属于多价2、3、5、6、7、8、9、11、12、14、15、16、17。从多价血清中挑选出常见的单因子血清进行定型试验,结果:13株菌株定型,分属8个血清型,即O3、O6、O23、O38、O68、O88、O99、O101;O68血清型占定型菌株的11.54%,O99血清型占定型菌株的19.23%;O23、O68和O99为此次分离菌株的优势血清型。本试验结果为今后云南地区仔猪腹泻病的防控提供有效的数据支持。     

洛阳地区规模化猪场大肠杆菌耐药基因检测及耐药性分析

为了掌握洛阳地区规模化猪场大肠杆菌耐药基因型及大肠杆菌耐药性的情况,试验采用分离鉴定、药敏试验、PCR检测及耐药基因测序等方法对洛阳地区大肠杆菌耐药基因型及耐药性进行研究。结果表明:采集的样品中分离出17株大肠杆菌;经K-B法药敏试验分析,青霉素、氨苄西林、红霉素、多西环素等药物的耐药性强;用PCR扩增技术检测大肠杆菌基因型,检出TEM、CTX-M、tet A、erm B、aac(3)-II 5个基因型;与Gen Bank中的相关序列进行比对,与耐药基因序列的同源性在97%以上。说明洛阳地区的大肠杆菌存在多种耐药基因类型,大肠杆菌的耐药性较强并且还存在多重耐药性。     

海子地区马鼻疽的疫情监测

为了摸清海子地区马鼻疽的流行情况,笔者于2016-2017年,采用马鼻疽菌素点眼变态反应法分别对该地区3个村的马鼻疽流行情况进行了调查。结果发现:197匹马的马鼻疽检测结果均为阴性,表明海子地区没有发生马鼻疽流行。     

锦州地区副猪嗜血杆菌病流行情况调查与药敏试验

为了解辽宁省锦州地区副猪嗜血杆菌病流行情况,对37个疑似样本进行分离鉴定。采用多重PCR方法进行血清型鉴定,并对分离菌株进行药敏试验,结果分离到23株副猪嗜血杆菌,分别为血清4型11株,5型6株,1、2、14型各1株,不可分型菌株为3株,对头孢噻肟、氟苯尼考、头孢曲松、阿莫西林、阿米卡星高度敏感。     

青海西宁地区猪肉食品中致病性沙门菌耐药性分析

为了分析青海西宁地区猪肉食品中沙门菌致病性、血清型及耐药性流行情况,从青海西宁地区屠宰场、零售店、超市等采集猪肉食品样品246份进行沙门菌分离鉴定,采用人工感染小鼠试验、Kauffmann-White法、K-B药敏纸片法分别检测沙门菌的致病性、血清型及耐药性。结果显示,分离得到117株沙门菌中56株对小鼠具有致病性;分离的56株致病性沙门菌属于10种血清型,以猪霍乱沙门菌、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌3种血清为主要流行致病血清型,分别占致病菌株的26.8%、21.4%和19.6%;分离的56株致病性沙门菌分离株对氨苄西林、新霉素、阿莫西林等9种药物耐药率在50%以上,对其他药物耐药率在12.5%～35.7%。表明青海西宁地区猪肉食品中分离沙门菌血清型较为复杂,且耐药性严重。     

莱阳地区鸡场沙门菌分离鉴定与耐药性分析

为了分析莱阳地区鸡场中沙门菌的流行情况和耐药性情况,2022-2023年采集莱阳地区中56个鸡场中疑似沙门菌感染的鸡的肛拭子、粪便、肝脏、脾脏及肾脏病料组织样品213份,采用细菌分离培养、革兰氏染色、生化试验鉴定及PCR扩增鉴定等多种方法进行沙门菌分离鉴定。采用人工感染试验动物和K-B药敏纸片法对分别检测分离的沙门菌的致病性及对常用药物的耐药性。结果表明,从莱阳地区中56个鸡场中疑似沙门菌感染的鸡的肛拭子、粪便、肝脏、脾脏及肾脏病料组织样品213份中分离得到119株沙门菌,其中82株菌可以引起雏鸡的发病与死亡,对雏鸡的死亡率在40%之间;82株致病性沙门菌对磺胺间甲氧嘧啶、多西环素、新霉素等8种药物耐药率在58.5%～100.0%之间,对其他药物存在不同程度耐药性。结果表明,从莱阳地区鸡场中得到92株致病性沙门菌对常用的抗菌药产生不同的耐药性。本研究为莱阳地区鸡场中沙门菌的流行病调查及指导临床合理用药提供参考依据。     

河南信阳地区集约化鸡场大肠杆菌耐药性调查

为了调查鸡源致病性大肠杆菌的耐药性情况,采用Kirby-Bauer氏法(K-B法)测定了分离自河南省信阳地区5个集约化鸡场的62株致病性大肠杆菌对12种抗菌药物的耐药性。结果表面,分离到的致病性大肠杆菌对12种抗菌药物全部表现为不同程度的耐药性,其中对四环素(95.2%)、复方新诺明(87.1%)、强力霉素(72.6%)和氨苄西林(64.5%)耐药性较强。对氟苯尼考、阿米卡星和庆大霉素也存在一定的耐药性。同时,分离菌株都表现出多重耐药性,最少的可同时耐3种抗菌药物,约占3.2%;最多的可同时耐12种抗菌药物,约占1.6%;同时耐7种和8种抗菌药物占的比例较高,分别占21.0%和25.8%。     

四川地区猪源致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性检测

为了解四川地区猪源大肠杆菌的耐药情况,本试验对2015～2017年四川地区40个猪场的125个病猪样本进行了大肠杆菌的分离鉴定和耐药性检测。结果共分离到37株致病性大肠杆菌,采用K-B纸片法进行药敏试验,发现37株致病性大肠杆菌对恩诺沙星、四环素、阿莫西林、复方新诺明、氨苄西林、庆大霉素、强力霉素的耐药性强,耐药率高于80%,对四环素的耐药率甚至达到了100%;对阿米卡星有较高的敏感性,耐药率为13.5%;所有菌株的多重耐药率高达100%,表明四川地区猪源大肠杆菌的耐药性强、耐药谱广。     

安阳地区副猪嗜血杆菌分离株的耐药性与耐药基因检测

为了分析安阳地区副猪嗜血杆菌分离株耐药性及耐药基因携带情况,采集患病猪的肺脏、脾脏、肝脏、关节渗出液等病料组织157份,分离得到了102株副猪嗜血杆菌.采用KB药敏纸片法和PCR法分别检测副猪嗜血杆菌分离株的耐药性和耐药基因.结果显示,分离的102株副猪嗜血杆菌对青霉素、阿莫西林、庆大霉素等10种的耐药率在44.1％以...     

牛源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解青岛地区奶牛场金黄色葡萄球菌的污染状况及耐药性情况,采集该地区13个奶牛场的839份牛奶和环境样品进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定,采用琼脂稀释法对所分离菌株进行药敏试验。结果:从839份样品中共分离出44株金黄色葡萄球菌,分离率为5.24%,其中奶样的分离率最高(8.42%)。所有的分离菌株均表现出不同程度的耐药,其中对氨苄西林、甲氧苄啶、四环素、环丙沙星、青霉素和苯唑西林耐药情况最严重,耐药率分别为88.6%、86.4%、81.8%、77.3%、75%和65.9%;分离菌株多重耐药情况严重,耐受3类及3类以上药物的菌株占40.9%,有1株耐受9类不同抗菌药物。