高铜对肉鸡肝脏线粒体抗氧化功能的影响

为了探讨高铜对肉鸡肝脏线粒体抗氧化功能的影响,试验选择1日龄健康AA肉鸡200只,随机分成4组,使用硫酸铜作为铜源并添加到玉米-豆粕型基础日粮中,对照组饲料中铜含量为11mg/kg,3个高铜组饲料中铜含量分别为110,330,550 mg/kg,试验至肉鸡50日龄时结束.结果表明:高铜110,330,550 mg/kg...     

高铜诱导肉鸡心肌氧化损伤和内质网应激

探讨高铜对肉鸡心肌氧化损伤和内质网应激的影响,将48羽1日龄白羽肉鸡随机平均分为4组,分别饲喂对照日粮(Cu 11 mg/kg,对照组)和高铜日粮(Cu 110 mg/kg,高铜I组;Cu 220 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 330 mg/kg,高铜Ⅲ组)。49日龄时进行心脏采集,制备切片观察心脏组织病理学变化,检测心肌总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽还原酶(GR)活性及丙二醛(MDA)含量的变化,实时荧光定量PCR检测内质网应激相关基因GRP78、GRP94、eIF2α、ATF6、XBP1、CHOP的mRNA转录水平,Western blot检测GRP78蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,高铜组心肌纤维间隙增宽;随着日粮中铜含量的增加,心脏组织中T-AOC、SOD、CAT和GR活力下降,MDA含量显著升高(P0.05),GRP78、GRP94、eIF2α、ATF6、XBP1和CHOP mRNA表达量升高,GRP78蛋白表达显著上调(P0.05)。结果表明,高铜可以诱导心肌氧化损伤和内质网应激。     

高铜饲料对肉鸡肝脏和肌肉组织中铜残留的影响

1945年R.Braude[1]首次报道,在饲料中添加250 mg/kg铜可明显提高生猪生性能。此后高铜添加剂的使用一直是畜牧生产上研究的热点[2-3]。动物饲料中铜添加过量、动物产品的含铜量增加都会造成食品安全问题,直接威胁人类的健康,这已经成为突出的社会问题;并且由于动物排泄物中含有大量的铜,势必造成土壤、水体的污染,导致受污染的植物和水产品问题,间接影响人类的食品安全。试验将不同     

感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达microRNA分析

为研究马传染性贫血病毒(EIAV)感染靶细胞-马单核巨噬细胞(eMDM)后细胞内microRNA (miRNA)表达的变化,本研究采用EIAV强毒株EIAVDLV34感染eMDM,并以未感染组作为对照,提取细胞内总RNA,通过高通量测序分析细胞内miRNA表达谱的变化。结果显示,与对照相比,感染EIAVDLV34后eMDM有16个miRNA发生差异表达,其中8个miRNA上调表达,8个miRNA下调表达,通过荧光定量PCR技术对这16个miRNA的表达进行了验证,结果与高通量测序一致,最后利用生物信息学方法对这16个miRNA的靶基因及其参与的生物学过程进行了分析,显示靶基因主要参与转录调控、信号转导、细胞凋亡等生物学过程。本研究为进一步分析EIAV与其宿主相互作用、致病机制以及慢病毒相关疾病的预防提供了参考依据。     

高铜对雏鸡肝脏影响的研究

为探讨日粮铜添加水平对雏鸡肝脏及相关血液生化指标的影响,将420只1日龄艾维因肉鸡随机分为7组,分别喂以对照日粮（Cu 11mg／kg）和高铜日粮（Cu 100mg／kg,高铜Ⅰ组;Cu 200mg／kg,高铜Ⅱ组;Cu 300mg／kg,高铜Ⅲ组,Cu 400mg／kg,高铜Ⅳ组;Cu 500mg／kg,高铜V组;Cu 600mg／kg,高铜Ⅵ组）6N。高铜Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组雏鸡肝脏出现不同程度的病理损害,肝细胞颗粒变性和脂肪变性;透射电镜观察,肝细胞线粒体肿胀,嵴断裂甚至溶解消失。除高铜Ⅰ组和Ⅱ组外,其余高铜组肝脏铜含量均显著高于对照组（P〈0．01）。高铜Ⅴ组和Ⅵ组丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性显著升高（P〈0．05）。结果表明,日粮铜含量200～600mg／kg可引起肝脏病理损伤。     

传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析

细胞内源性microRNA（miRNA）在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒（IBDV）的相互作用,用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞（CEF）和SPF鸡,24h后,取感染CEF和法氏囊组织,提取细胞总RNA,用Hy3/Hy5双色荧光标记,与miRNA芯片杂交,进行芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示：在IBDV弱毒感染的CEF中,有17个细胞内源性miRNA表达上调,17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中,有30个细胞内源性miRNA表达上调,18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物,用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果,2种方法的检测结果一致。结果表明,IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化,这些上调或下调的miRNA能调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常,引起细胞及组织器官发生病理学变化。     

断奶仔猪血清microRNA与小肠microRNA的表达分析

正完全消除断奶应激所引起的仔猪不良生理反应显然是不可能的。然而,全面理解断奶期间所涉及的生化分子机制将有助于减轻因应激诱发的损伤。MicroRNAs(miRNA)在调节应激信号通路和疾病中起重要作用。血浆中的miRNA首次在肿瘤患者被检测到,并且已证明血浆和血清中的miRNA水平之间无显著差异,miRNA水平不受高温、pH或反复冷冻/解冻循环等因素的影响。与其他生物体液相     

乏情和发情初产母猪卵巢microRNA差异表达分析

为了探索卵巢microRNA(miRNA)在初产母猪生殖调控中的作用,本研究利用Illumina高通量测序技术检测了乏情和发情初产母猪卵巢miRNA的表达谱,并对表达量较高且差异显著的miRNA进行生物信息学分析。结果显示,本研究构建的两个small RNA文库共鉴定出503个miRNAs,其中已知的303个,新预测的200个。在已知的miRNA中,ssc-miR-10b在两个文库中的表达量最高,其次为ssc-miR-143-3p和ssc-miR-26a;在新预测的miRNA中,chr13_2637_mature在两个文库中的表达量最高,其次为chr8_9994_mature。与发情母猪相比,共有145个miRNAs发生显著变化(read counts10,∣log2(fold-change)∣1),上调114个,下调31个。在进一步筛选的31个表达量较高且差异显著的miRNAs(read counts1 000,∣log2(fold-change)∣1)中,新预测的chr13_2585_mature上调倍数最高,且只在乏情母猪卵巢中表达。31个miRNAs共预测到7 388个靶基因,KEGG信号通路分析显示,有2 788个靶基因注释到了297个KEGG通路,前20个最富集的通路部分与生殖过程或生殖活动调控相关,表明这31个miRNAs参与了初产母猪的生殖调控。本研究结果丰富了猪miRNA数据资源,为进一步深入研究初产母猪的繁殖性能提供了理论依据。     

乏情和发情初产母猪卵巢microRNA差异表达分析

为了探索卵巢microRNA （miRNA）在初产母猪生殖调控中的作用,本研究利用Illumina高通量测序技术检测了乏情和发情初产母猪卵巢miRNA的表达谱,并对表达量较高且差异显著的miRNA进行生物信息学分析。结果显示,本研究构建的两个small RNA文库共鉴定出503个miRNAs,其中已知的303个,新预测的200个。在已知的miRNA中,ssc-miR-10b在两个文库中的表达量最高,其次为ssc-miR-143-3p和ssc-miR-26a;在新预测的miRNA中,chr13_2637_mature在两个文库中的表达量最高,其次为chr8_9994_mature。与发情母猪相比,共有145个miRNAs发生显著变化（read counts>10,∣log₂（fold-change）∣>1）,上调114个,下调31个。在进一步筛选的31个表达量较高且差异显著的miRNAs（read counts>1 000,∣log₂（fold-change）∣>1）中,新预测的chr13_2585_mature上调倍数最高,且只在乏情母猪卵巢中表达。31个miRNAs共预测到7 388个靶基因,KEGG信号通路分析显示,有2 788个靶基因注释到了297个KEGG通路,前20个最富集的通路部分与生殖过程或生殖活动调控相关,表明这31个miRNAs参与了初产母猪的生殖调控。本研究结果丰富了猪miRNA数据资源,为进一步深入研究初产母猪的繁殖性能提供了理论依据。     

高铜对肉鸡肾脏线粒体抗氧化功能的影响

本文旨在了解高铜对肉鸡肾脏线粒体抗氧化功能的影响.选用1日龄科宝肉仔鸡120只,随机分成4组,分别喂以对照日粮(Cu 11 mg/kg,对照组)和高铜日粮(Cu 110 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 220 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 330 mg/kg,高铜Ⅲ组),检测梯度剂量硫酸铜在不同的饲喂时间(12日龄、24日龄、36日龄、48日龄、60日龄)肉鸡肾脏线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)的指标.结果显示:高铜Ⅱ组与高铜Ⅲ组SOD、GSH-PX、MDA都呈现代偿性升高,然后有降低的趋势.提示日粮中铜浓度达到220 mg/kg时,肾脏线粒体功能紊乱.     

纳米硒对肉鸡肝脏谷胱甘肽过氧化物酶mRNA表达和酶活的诱导作用

为了探讨纳米硒对肉鸡肝脏细胞内谷胱甘肽过氧化物酶 (cGPx)的诱导作用 ,将 1日龄艾维茵肉雏鸡随机分为 1个对照组 (0mg/kg)和 5个剂量组 (0 .1,0 .2 ,0 .3,0 .4和 0 .5mg/kg) ,饲喂到 4 2日龄 ,断头处死。从肉鸡肝脏中提取总RNA ,RT PCR法检测肝脏中的cGPx的表达丰度 ;DTNB法测定肝组织中的cGPx酶活性。试验结果表明 ,各试验组肉鸡肝脏组织cGPxmRNA丰度与对照组相比有显著的差异 (P <0 .0 5 ) ;各试验组肉鸡肝脏组织cGPx活力与对照组相比有显著的差异 (P <0 .0 5 ) ,且二者变化规律一致。本试验结果表明 :纳米硒对肉鸡肝脏cGPxmRNA稳定性具有调控作用 ,并能提高其酶活 ,而且其Weinberg剂量 效应的最适剂量范围较宽     

恩诺沙星致猪肝脏蛋白质差异表达

采用双向电泳技术和质谱分析技术分析小型猪肝脏的蛋白质表达,以探讨恩诺沙星对猪肝脏蛋白质表达的影响。结果显示,与空白对照组相比,在低剂量组(5mg/kg)、中剂量组(25mg/kg)和高剂量组(125 mg/kg)都发现了glyoxalase domain-containing protein 4(GLOD4)的表达显著下降(P0.05),在中剂量组和高剂量组中都发现了线粒体stress-70protein(HSP70)的表达显著下降(P0.05)。结果表明,恩诺沙星会对部分猪肝脏蛋白质表达造成影响。     

宫内生长受限对胎猪肝脏microRNA表达谱的影响

本试验旨在分析宫内生长受限(IUGR)和正常胎猪肝脏microRNA(miRNA)表达的差异,以揭示IUGR对胎猪肝脏miRNA表达谱的影响。试验选用6头达兰(Dalland)母猪,在孕110 d左右致死,剖腹并取出整个子宫。在每窝中选取1头IUGR胎猪和1头正常胎猪,分别取出肝脏备用。利用双荧光标记miRNA芯片技术对IUGR和正常胎猪肝脏进行分析。结果表明:IUGR对胎猪肝脏miRNA的表达产生显著影响,共有41种miRNA存在表达差异,其中27种在IUGR胎猪肝脏中表达上调,14种表达下调。其所导致的胎猪葡萄糖吸收代谢紊乱、脂肪代谢紊乱、蛋白质合成受阻;肝脏解毒能力下降以及肝脏细胞增殖抑制,可能是造成IUGR仔猪出生后营养利用率低、患病率和死亡率高以及生长发育不良的重要原因。     

组学技术分析肉鸡胚胎发育过程中肝脏蛋白表达的变化

旨在探讨肉鸡胚胎在发育中后期肝脏蛋白水平的变化。本试验选取120枚重量为(65±0.2) g的罗氏308肉鸡种蛋,分为14胚龄(E14)和出壳1日龄(H1)两组,每组3个重复,每个重复20枚种蛋。孵化至E14胚龄和H1日龄时,采集肝脏组织样本,应用相对和绝对定量的等量异位标签(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)结合生物信息学分析技术筛选核心差异蛋白。结果显示,在E14和H1日龄之间共筛选出10个核心差异蛋白,主要促进脂肪酸降解(上调ACOX1、ACSL1、ACSL5、CPT1A和ECI2)和糖异生(上调ALDH3A2、FBP1、FBP2、GPI和PGM2,下调LDHB和ALDH9A1)。试验结果提示,胚胎发育的主要能量供给途径是脂肪酸降解,而不是糖酵解。此外,糖异生增多,促进糖原储存以应对出壳以及营养环境变化。     

组学技术分析肉鸡胚胎发育过程中肝脏蛋白表达的变化

旨在探讨肉鸡胚胎在发育中后期肝脏蛋白水平的变化。本试验选取120枚重量为（65±0.2）g的罗氏308肉鸡种蛋,分为14胚龄（E14）和出壳1日龄（H1）两组,每组3个重复,每个重复20枚种蛋。孵化至E14胚龄和H1日龄时,采集肝脏组织样本,应用相对和绝对定量的等量异位标签（isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）结合生物信息学分析技术筛选核心差异蛋白。结果显示,在E14和H1日龄之间共筛选出10个核心差异蛋白,主要促进脂肪酸降解（上调ACOX1、ACSL1、ACSL5、CPT1A和ECI2）和糖异生（上调ALDH3A2、FBP1、FBP2、GPI和PGM2,下调LDHB和ALDH9A1）。试验结果提示,胚胎发育的主要能量供给途径是脂肪酸降解,而不是糖酵解。此外,糖异生增多,促进糖原储存以应对出壳以及营养环境变化。     

高铜诱导大鼠心肌细胞线粒体自噬

旨在探讨高铜对大鼠心肌细胞线粒体自噬的影响。将32只8月龄健康大鼠随机分为4组，每组8只，饲喂不同铜含量日粮（对照组：15 mg·kg^-1；高铜Ⅰ组：30 mg·kg^-1；高铜Ⅱ组：60 mg·kg^-1；高铜Ⅲ组：120 mg·kg^-1），连续饲喂6个月后采集心。检测心组织铜含量及其病理变化；荧光定量检测线粒体自噬相关基因LC3A、LC3B、Parkin、PINK1、p62的mRNA水平；蛋白印迹检测Parkin、PINK1、LC3B/LC3A的蛋白表达水平；免疫组化和免疫荧光检测LC3B的定位及表达。结果显示，高铜各组大鼠心组织内的铜含量均高于对照组。高铜各组出现心肌纤维排列疏松、无规则的现象。与对照组相比，高铜各组LC3A、LC3B mRNA表达量增加；高铜Ⅱ组、高铜Ⅲ组p62的mRNA表达量极显著降低；高铜各组PINK1 mRNA表达量显著升高，而Parkin mRNA的表达量有上升趋势但不显著。随着日粮中铜含量的增加，PINK1、Parkin、LC3B/LC3A的蛋白的表达量显著上调。LC3B定位于细胞质中，且高铜Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组LC3B表达量均显著增加。试验结果表明，高铜可诱导大鼠心肌细胞线粒体自噬的发生。     

商品肉鸡肝脏病变的分析和防治

在肉鸡饲养过程中当我们剖解死亡病鸡时，可以发现几乎所有鸡肝脏都发生过一些病变，有些是直接导致它死亡的主要原因。屠宰以后我们也可以发现许多鸡肝脏有病理变化。经过我们对本地鸡场5000只商品肉鸡饲养过程和屠宰的综合调查，发现因疾病死亡而肝脏有病理变化占100％，无明显临床症状鸡屠宰后肝脏有一定病变占52.5％。     

鸭肠炎病毒感染鸭肝脏组织miRNA表达谱差异分析

为探究鸭感染鸭肠炎病毒（Duck enteritis virus,DEV）后肝脏miRNA表达谱的差异,试验以DEV-GZ株经腿部肌肉接种30日龄麻鸭,于感染后66、90和114 h采集鸭肝脏组织样本,提取组织总RNA,经质检合格后,采用高通量测序技术对对照组和试验组样品进行miRNA测序,筛选出DEV感染鸭肝脏组织的差异表达miRNA,对其进行生物信息学GO功能分类和KEGG信号通路分析,并随机选取部分差异表达miRNA进行实时荧光定量PCR验证。结果显示,鸭感染DEV后66、90和114 h,肝脏组织差异表达miRNAs数量分别为227、225和231个。GO功能注释显示,感染鸭肝脏差异表达miRNA在生物过程分类中主要为细胞过程、单有机体过程和代谢过程类别;在细胞成分分类中主要是细胞、细胞部分和细胞器类别;在分子功能分类中主要是绑定分子功能和催化活性功能类别。KEGG通路富集显示,差异表达miRNA主要涉及PI3K-Akt、JAK-STAT、磷脂酰肌醇信号通路系统、ECM-受体相互作用、MAPK、Wnt、Toll样受体、IL-17、脂质代谢、钙离子信号通路和cAMP等信号通路,其中感染66 h差异表达miRNA主要在生物系统及神经系统中发挥作用;感染90 h主要在内分泌系统及消化系统中发挥作用;感染114 h主要在全身生物、免疫和消化系统等中发挥作用。选取10个差异表达miRNAs进行实时荧光定量PCR验证,结果与高通量测序结果一致。表明DEV感染对鸭肝脏组织miRNA表达具有显著影响,为从宿主miRNA角度揭示DEV致病机制提供了参考依据。     

商品肉鸡肝脏病变的分析和防治

在商品肉鸡饲养过程中，可以发现几乎所有的被解剖的病死鸡肝脏都发生过这样或那样的病变，其中有的是致死的主要原因。即便是正常出栏屠宰时也可以发现许多鸡的肝脏有病理变化。经过对本地鸡场５０００只商品肉鸡饲养过程和屠宰的综合调查，发现因疾病死亡而肝脏有病理变化的占１００％，无明显临床症状鸡屠宰后肝脏有一定病变的占５２－５％，肝脏在鸡的整个生长发育过程中是重要的新陈代谢器官，它发育的好坏直接影响鸡生长发育的好坏。了解肝脏病理变化对于正确诊断疾病具有重要意义。１发病原因及综合分析１－１饲料中脂肪含量过高而引…