新西兰兔精液冷冻保护剂的筛选

本试验的目的是分析在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中分别添加不同浓度的海藻糖、透明质酸、维生素E(Ve)、超氧化物歧化酶(SOD)对兔精液冷冻保存效果的影响,以冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率等作为质量评定指标,筛选出效果较好的新西兰兔精液的冷冻保护剂种类及浓度。结果表明,精液冷冻保存稀释液中添加3种浓度的海藻糖均未提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加0.5%和1%的透明质酸提高了兔精液冷冻后的精子活率(P0.05),但各组间质膜完整率和顶体完整率无显著差异;添加2 g/L Ve提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加4 000 IU的SOD提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05)。结果证实,在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中添加适宜浓度的Ve和SOD可提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。     

冷冻稀释液和抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响

为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明：两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG...     

生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻效果的影响

为了研究冷冻稀释液中添加不同浓度的抗氧化剂生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响,试验分别在冷冻稀释液中添加0,0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL的生物类黄酮和0,2,4,6,8 mg/mL的维生素C以及二者最佳配伍浓度的混合物,分别检测各试验组精液冷冻解冻后的活率、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活率等指标。结果表明:除了添加4,6 mg/mL维生素C顶体完整率与对照组相比差异不显著(P>0.05)外,添加0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL生物类黄酮或2,4,6,8 mg/mL维生素C精子活率、质膜完整率与对照组相比差异均显著(P<0.05),其中添加0.8 mg/mL生物类黄酮和6 mg/mL维生素C效果最好,但随着添加浓度的增加冷冻效果逐渐降低。说明在猪精液冷冻稀释液中联合添加生物类黄酮和维生素C,解冻后精液质量显著高于对照组(P<0.05)。     

传统稀释液配方中添加不同保护剂对藏羊精液冷冻效果的影响

为探索在传统稀释液配方中添加保护剂对藏羊精子的冷冻保存效果,在传统稀释液配方(果糖-蔗糖-柠檬酸钠-甘油)中,由Tris(三羟甲基氨基甲烷)代替柠檬酸钠,乙二醇代替甘油,在果糖-蔗糖-Tris-乙二醇基础上添加维生素B12、维生素E、维生素C、复合维生素B等,以增强精子缓冲力,减少毒性,提高精子活力、顶体完整率及受精力。结果表明:精液冷冻保存稀释液中添加Tris比添加柠檬酸钠有更好的冷冻保存效果,能有效改善冻后精子活力和顶体完整率;精液冷冻保存稀释液中添加维生素B12对精子有良好的保护作用;用等体积乙二醇代替甘油作为防冻剂,对精子冷冻时的保护作用不亚于甘油;藏羊细管冷冻精液的制作中,用果糖-蔗糖-Tris-乙二醇-维生素B12组合稀释液配方进行2次稀释,8 min冷冻,其冷冻效果最佳,顶体完整率最高。     

稀释液中添加精氨酸和牛血清白蛋白对驴冻精品质的影响研究

为了探究在驴精液冷冻稀释液中添加不同浓度的精氨酸和牛血清白蛋白(BSA)对德州驴冷冻精液品质的影响,并找出两种试剂混合最佳添加浓度,试验用分别添加不同浓度的精氨酸(0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mg/mL)和BSA(1,2,3,4,5 mg/mL)的常规驴精液冷冻稀释液对德州驴精液进行稀释,稀释后的精液液氮冷冻保存30 d后解冻,检测精液的精子活率、顶体完整率及质膜完整率,找出最佳浓度;然后选择精氨酸和BSA最佳浓度及其左右相邻浓度,两两组合成9个浓度组合对德州驴精液进行稀释,然后根据上述步骤找出最佳浓度组合。结果表明：单独添加精氨酸时,浓度为1.5 mg/mL时精液的精子活率、顶体完整率及质膜完整率较优于其他浓度,其中顶体完整率与未添加精氨酸相比显著提高(P<0.05)。单独添加BSA时,浓度为3 mg/mL时精液的精子活率、质膜完整率较优于其他浓度,但对顶体完整率无显著改善作用,其中精子活率、顶体完整率与未添加BSA相比极显著提高(P<0.01);精氨酸和BSA联合添加时(除1.5 mg/mL×3 mg/mL、1.5 mg/mL×4 mg/mL、2.0 mg/...     

版纳微型猪近交系精子冷冻保存研究

在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。     

辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响

旨在探讨辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响。利用添加不同浓度辅酶Q10(4、40、400?滋g/mL)的精液冷冻稀释液对绒山羊精液样本进行冷冻保存,待冷冻精液解冻后,采用流式细胞仪和计算机辅助精液分析系统(CASAS)分别检测不同精液样本的精子活率、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位和细胞内ROS水平。结果表明,当冷冻稀释液中添加浓度为40μg/mL辅酶Q10时,经历冷冻—解冻过程的绒山羊精液样本的精子活率、质膜完整率、顶体完整率均显著高于对照组(P<0.05);在冷冻稀释液中添加浓度为40μg/mL或400μg/mL的辅酶Q10均能显著提高线粒体膜电位并降低细胞内ROS水平(P<0.05)。综上所述,在冷冻稀释液中添加40μg/mL的辅酶Q10能够显著提高绒山羊精子抗氧化能力和冷冻保存效果。     

鸵鸟卵黄对猪精子冷冻后质量的影响

为了提高猪冷冻精液品质和精子抵抗低温打击的能力,本研究以5%、10%、15%、20%和25%等不同浓度的鸵鸟卵黄作为冷冻保护剂,以20%的鸡蛋卵黄和20%的鸽蛋卵黄为对照,将冷冻-解冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率作为评价指标,分析鸵鸟卵黄对猪精子的抗冷冻保护作用。结果表明：稀释液中添加20%鸽蛋卵黄时,精子活率、顶体完整率和质膜完整性分别为52.11%、55.62%和54.94%,显著高于其他组（P〈0.05）。虽然稀释液中添加15%鸵鸟卵黄时,冷冻-解冻后精子活率、顶体完整率和质膜完整率显著高于5%、10%、20%和25%鸵鸟卵黄组,但仍然显著低于稀释液中添加20%鸽蛋卵黄处理组。本研究表明,鸵鸟卵黄在冷冻过程中对猪精子具有一定的保护作用,但相对于鸽子蛋和鸡蛋卵黄效果并不理想。     

水苏糖对猪精液冷冻保存效果的影响

为了提高猪精液冷冻保存效果．试验采用在传统的ZO稀释液基础上分别添加1％、2％、4％、8％的水苏糖的方法．研究不同浓度水苏糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明,水苏糖相对于ZO稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果,其最佳添加浓度为4％,冷冻一解冻后猪精子活力、活率、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高,水苏糖可以明显抑制精子获能,获能处理前精子获能率仅为32．4％,而获能处理后降为28．6％。有利于抑制精子获能,精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为3％,说明水苏糖与甘油共同作用能在冷冻一解冻过程更加有效地保护精子。     

不同冷冻保护液和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响

在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳.     

褪黑素对绒山羊精液冷冻保存效果的影响

为了研究褪黑素对绒山羊精液冷冻保存效果的影响,在冷冻稀释液中外源补充不同浓度(0.125,0.250,0.500,1.000 mg/mL)的褪黑素进行冷冻试验,冷冻解冻采用计算机辅助精液分析系统(CASAS)和流式细胞仪分别检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率以及精子细胞中活性氧(ROS)的含量。结果表明:在冷冻稀释液中添加褪黑素能够显著降低精子细胞中ROS的含量,而且在冷冻稀释液中添加浓度为0.500 mg/mL的试验组绒山羊精子活率(53.3%)、质膜完整率(44.6%)、顶体完整率(77.9%)均显著高于空白对照组(47.8%、36.3%和53.2%)(P0.05)。说明在绒山羊精液冷冻稀释液中添加0.500 mg/mL褪黑素能够显著提高绒山羊精子抗氧化能力和冷冻保存效果。     

水牛冷冻精液稀释液中添加复合V_B对精子品质的影响

在水牛冷冻稀释液中添加不同浓度的复合VB,检测其对水牛冷冻精液质量的影响。结果显示,在精液冷冻稀释液中添加3mL/100mL复合VB,可提高水牛精液冷冻复苏后的活力和顶体完整率,对精子的质膜完整性和DNA完整性影响不显著。结果表明,在冷冻稀释液中添加一定浓度的复合VB能够提高水牛冷冻精液质量。     

香菇多糖对牛精液冷冻保存效果的研究

为了研究香菇多糖对牛精液冷冻保存效果的影响,在牛精液冷冻稀释液中添加不同质量浓度(1、5、25、125、625mg/L)的香菇多糖,冻融后检测牛精子活率、动力学参数以及顶体完整率、质膜完整率等。结果表明,25 mg/L组的冷冻保存效果最好,精子活率、质膜完整率、顶体完整率分别达到42.04%、43.57%和63.87%,显著高于对照组(P0.05)。而过高浓度的香菇多糖(125、625mg/L)则显著降低了冻融精子的质量。牛精液冷冻稀释液中添加香菇多糖具有显著的保护作用,其最佳添加浓度为25mg/L。     

不同甘油浓度下稀释液中添加棉子糖对绒山羊冷冻精液品质的影响

在甘油浓度为3%和6%的冷冻精液稀释液中添加不同浓度的棉子糖,旨在优化绒山羊冷冻稀释液配方。结果表明:甘油浓度为3%时,山羊精液稀释液的抗冻保护效果较好,在此基础上添加10 mmol/L棉子糖,精子活率、顶体完整率、生存指数、质膜完整率均高于其他实验组(P<0.05),并且畸形率显著降低(P<0.05);在脂质过氧化反应和抗氧化酶活性方面,该实验组CAT活性高于其他实验组(P<0.05),而MDA浓度低于其他实验组(P<0.05)。     

几种因素对鸵鸟冷冻精液精子活力影响的研究

对每组20份精子样品,采取不同冷冻程序,分析了各单因子如:稀释液种类、稀释液中甘油浓度、稀释方法、4℃低温平衡时间、冷冻面与液氮面距离及热平衡时间对鸵鸟冷冻精液的精子解冻复苏活率的影响。结果表明:以含甘油浓度2.8%的(MEM·蛋黄)稀释液,采用两步稀释,低温平衡2.5h,冷冻面与液氮面距离1.5cm进行2min热平衡,鸵鸟精液的冷冻效果较好。     

L-肉碱对猪精液冷冻保存效果的研究

本试验用5%二甲基甲酰胺(DMF)替代甘油作为冷冻保护剂,研究不同浓度(0、0.02、0.04、0.06、0.08 mg/mL)L-肉碱对猪精液冻后常规指标(精子活率、线粒体活性、顶体完整性、质膜完整性)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化酶(T-AOC)活性以及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:添加0.04和0.06 mg/mL的L-肉碱可有效改善猪精液冷冻后效果。0.04 mg/mL组可显著提高精子冻后活率和线粒体活性(P<0.05);0.06 mg/mL组可显著提高顶体完整性和质膜完整性(P<0.05)。添加0.06 mg/mL L-肉碱可显著提高冷冻后精子内T-AOC酶活性并且抑制MDA的产生(P<0.05),但CAT活性与0.04 mg/mL组差异不显著。在冷冻稀释液中添加0.06 mg/mL L-肉碱可以提高猪精液冷冻保存效果。     

不同冷冻保护剂对犬精子冻存的影响

本试验通过对比冷冻保护剂和冷冻程序,优化犬精液冷冻保存方法,比较了不同甘油、乙二醇浓度、不同平衡时间对犬精子冷冻复苏率及精子顶体完整率的影响。结果发现,甘油作为冷冻保护剂时,其对精液冷冻保存后的效果明显优于乙二醇,当甘油浓度为4%时,平均冷冻复苏率最高;冷冻平衡时间为1 h最佳。因此,犬精液在冷冻保存时,甘油浓度为4%,平衡60 min,可获得平均39.21%±0.013%的冷冻复苏率,且比较稳定。     

五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。     

陕北白绒山羊精液冷冻稀释液配方优化

为筛选陕北白绒山羊精液冷冻保存稀释液中最适的甘油及卵黄浓度,试验以三羟甲基氨基甲烷(Tris)6.057 0 g,蔗糖5.134 6 g,果糖1.500 0 g,柠檬酸钠3.318 6 g,青霉素10万IU,双蒸水200 m L配制成基础液,采用双因素正交试验研究不同浓度甘油、卵黄对精液冷冻保存的影响;采用一步稀释法冷冻保存陕北白绒山羊精液,复苏后检测活率、畸形率等确定精液冷冻稀释液最佳配方。结果表明:最佳冷冻稀释液配方为基础液80.5%+甘油6%+卵黄13.5%,精液冷冻、复苏后精子活率达到(37.2±0.5)%,精子畸形率为(11.2±0.5)%,质膜完整率为(64.2±0.5)%,均优于其他组,冷冻效果达到最佳,是保存山羊精液的冷冻稀释液最佳配方。     

维生素B12对牛冷冻精液品质的影响

人工授精是发挥优秀公畜遗传潜力的重要现代动物生物技术,而冷冻精液正是为了提供人工授精所需精子产品的一种精子库。由卵黄、蔗糖、柠檬酸钠、甘油和抑菌物质所组成的稀释液对精子起到一定的保护作用。但是,在精子的冷冻原解冻过程中,容易发生过氧化反应,导致精液品质下降。本研究在用卵黄、蔗糖、柠檬酸钠、甘油和抑菌物质配制好的精液稀释液里面分别添加0.00%(对照)、0.25%、0.50%、0.75%、1.00%的VB12进行试验,解冻后评定精子运动特性、精子活力、顶体完整率、质膜完整性等指标。结果表明：稀释液中添加0.50%维生素B12效果最好,其精子活力、顶体完整率、质膜完整性等明显高于其他组(P<0.01)。