饲用产朊假丝酵母优化培养研究

产朊假丝酵母作为新型饲料微生物菌种受到越来越多研究的关注。然而,关于产朊假丝酵母高效培养的研究不多。研究以OD值和活菌数作为测定指标,研究产朊假丝酵母最优培养参数,为开发饲用酵母提供数据。试验采用单因素试验与3因素3水平正交试验相结合的设计方法对产朊假丝酵母培养基成分(碳源、氮源和无机盐)进行培养和优化。通过单因素试验及正交试验,得出最优培养基为蔗糖60、酵母浸粉20及KH_2PO_4 1g/L,此时酵母细胞数达8 300万CFU/mL。与对照组相比菌数提高3倍,为饲料产品的开发奠定基础。     

利用甜高粱秸秆汁产单细胞蛋白的分批补料发酵研究

本文以甜高粱秸秆汁为主要的发酵原料,对热带假丝酵母SG-1在15-L罐上产单细胞蛋白(SCP)的分批补料发酵过程进行研究。首先对分批发酵模式下的菌体代谢过程变化进行研究。研究发现,接种后菌体快速进入繁殖阶段,但是总糖在12 h处于耗竭状态,使得菌体量和SCP产量过早的在18 h就达到峰值。基于此,在15-L罐上建立了热带假丝酵母SG-1产SCP的分批补料发酵模式。结果表明:菌体代谢因基质的补加而得到进一步的延续,放罐时(42 h)其菌体干重和SCP产量分别达19.86 g/L和9.93 g/L,显著高于分批发酵模式的10.45 g/L和4.70 g/L。     

酵母菌发酵生产饲料酵母条件的优化

试验选用5株酵母菌,分别利用4种培养基进行发酵试验,测定菌体生物量、粗蛋白含量和总蛋白得率,结果表明,糖蜜培养基为发酵饲料酵母的最佳培养基,其中产朊假丝酵母(8号菌)为发酵生产的优势菌种。     

新型γ-氨基丁酸发酵培养基配方优化

利用响应面分析法对γ-氨基丁酸(GABA)发酵培养基进行优化,通过二水平正交试验观察葡萄糖、玉米浆、豆饼粉、K_2HPO_4、吐温-80、初始pH值以及谷氨酸钠(MSG)对酵母菌发酵产生GABA的影响。结果显示,最佳培养基配方为(g/L):豆饼粉26、玉米浆10、K_2HPO_410、葡萄糖9、MSG 5、初始pH值6.8,在此优化的培养基中菌株的GABA质量浓度提高了近4倍,达到3.63 g/L。     

饲用产朊假丝酵母的发酵培养条件研究

产朊假丝酵母(Candida utilis)是优良的饲料蛋白,在发酵饲料生产中得到广泛应用。利用单因素比较试验和响应面分析方法,对产朊假丝酵母的发酵培养条件进行了优化,获得了二次回归模型,建立起产朊假丝酵母的最优发酵培养条件:葡萄糖19.86 g/l、酵母膏9.56 g/l、K2HPO41.45 g/l、MgSO41.12 g/l,pH值5.5,发酵温度28℃。试验结果表明,该菌株具有生产速度快、易于培养的特点。     

原生质育种筛选可利用泔水发酵生产菌体蛋白饲料的研究

以餐厨垃圾为发酵培养基对9株酵母进行筛选,获得1株非蛋白氮转化率较高的菌株产朊假丝酵母0233,在餐厨垃圾固体培养基中发酵24h后,非蛋白氮转化率为36.69%。对该菌株的原生质体形成与再生的条件进行研究,结果表明:原生质体形成与再生最佳条件为菌龄26h,渗稳剂为含0.1%β-巯基乙醇的0.7mmol/L山梨醇,蜗牛酶浓度2.5%,酶解70min。在此条件下,原生质体形成率为92.80%,原生质体再生率为10.6%。采用He-Ne激光(632.8nm)对产朊假丝酵母0233的原生质体进行反复诱变,得到1株在餐厨垃圾固体培养基发酵后非蛋白氮转化率有较大提高的突变株,其非蛋白氮转化率为56.69%,比出发菌株(产朊假丝酵母0233)的非蛋白氮转化率提高1.6倍。该突变株经多次传代后有较高稳定遗传性,无明显的回复突变。     

不同微生物发酵对豆粕营养品质影响的研究

试验选用3种菌株(粪肠球菌、产朊假丝酵母及枯草芽孢杆菌)对豆粕进行发酵,观察豆粕营养品质的变化,结果发现发酵饲料微生物活性越高,干物质回收率(DMR)越低;粪肠球菌发酵活性最高,为32.4亿CFU/g,产朊假丝酵母活性最低,仅为5.8亿CFU/g;干物质回收率以产朊假丝酵母最高,为94.50%,粪肠球菌最低,为90.02%。酸度和粗灰分的上升幅度以粪肠球菌最大,分别上升1.28%和0.44%,粗蛋白提高幅度以产朊假丝酵母最高,为3.95%,枯草芽孢杆菌则以小肽和总氨基酸含量变化最大,分别提高4.35%及12.57%。粗纤维含量无明显变化,说明这3株菌均不产纤维素酶。     

甘蔗糖蜜废水生产饲料蛋白质的研究

本文选用白地霉GIM2.12和GIM2.14、热带假丝酵母GIM2.6、产朊假丝酵母GIM2.84个菌种,进行甘蔗糖蜜废水生产饲料蛋白质的菌种和发酵条件优选试验。试验结果表明,热带假丝酵母是能充分利用此种糖蜜废水生产饲料蛋白质的较好菌株,其最佳培养条件为:接种量10%,初始pH4.5,培养时间48h,摇瓶装液30mL/250mL,尿素和KH2PO4的添加量分别为1.6g/L和0.8g/L。在此条件下,饲料蛋白产量可达12.5g/L,化学耗氧量(CODCr)去除率为40%。     

热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的发酵培养基优化

本试验以甜高粱秸秆汁为主要的发酵原料,应用二次正交旋转组合试验设计方法对热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的发酵培养基进行优化。结果显示,热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的较佳发酵培养基组成为:甜高粱秸秆汁220 mL/L、工业葡萄糖37.5 g/L、工业蛋白胨37.5 g/L、MgSO4.7H2O 3.75 g/L、KH2PO43.75 g/L。该优化条件下单细胞蛋白产量达15.38 g/L,比初始发酵培养基(甜高粱秸秆汁120 mL/L、工业葡萄糖20 g/L、工业蛋白胨20 g/L、MgSO4.7H2O 2.0 g/L、KH2PO42.0 g/L)单细胞蛋白产量(10.77 g/L)提高了42.80%。     

用于蛋白富集的三七渣培养基制备条件优化

利用白腐菌与产朊假丝酵母混合发酵三七渣进行蛋白富集,研究了氮源添加量、磷源添加量、水含量、原料粒径、初始pH值等因素对蛋白富集效果的影响,并采用正交试验优化了培养基制备条件。研究结果表明,利用白腐菌与产朊假丝酵母混合发酵三七渣进行蛋白富集是可行的,优化的培养基制备条件为:氮源添加量40 mg硫酸铵/g干药渣,水含量50%,原料粒径80目,pH自然,在此条件下发酵,发酵培养物中真蛋白含量可达到20.48%。     

嗜酸乳杆菌LA-G80发酵培养基的优化

嗜酸乳杆菌LA-G80分离自人体肠道菌群,具有益生功能。通过发酵培养基及培养条件优化,获得较优的培养基配方和培养条件。结果表明:嗜酸乳杆菌LA-G80的最佳发酵培养基组成为葡萄糖添加量41.5 g/L、麦芽糖20g/L、大豆低聚糖10 g/L、牛肉浸粉18.64g/L、胰蛋白胨10g/L、酵母蛋白胨15 g/L、吐温-80 1 mL/L、K_2HPO_4·7H_2O 2 g/L、NaAc·3H_2O 5 g/L、柠檬酸三铵2 g/L、MgSO_4·7H_2O 0.25 g/L、MnSO_4·4H_2O 0.05 g/L、天冬氨酸0.16 g/L、丙氨酸0.16 g/L、丝氨酸0.16 g/L、花生蛋白粉5 425 g/L、豆饼粉7 425.48 g/L;最佳培养条件为接种量2%、初始pH 6.0、恒定pH 5.5、恒温37℃;利用5 L发酵罐进行验证实验,采用优化后培养基及培养条件培养,嗜酸乳杆菌LA-G80的活菌数达42.2×10~8CFU/mL,相较MRS基础培养基提高约9倍。     

固态发酵葡萄皮渣生产生物饲料的菌种筛选

为了筛选适宜固态发酵葡萄皮渣生产生物饲料的菌种,以葡萄皮渣为主要原料,以真蛋白含量为评价指标,采用产朊假丝酵母、酿酒酵母、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌4株菌的单菌和多菌组合进行固体发酵试验筛选最佳发酵菌种,同时研究了固体培养基灭菌与不灭菌工艺对其产物真蛋白含量的影响。结果表明,葡萄皮渣固体培养基不灭菌发酵产物的真蛋白含量高于灭菌处理;4株菌中产朊假丝酵母单菌发酵后产物的真蛋白含量最高,为13.75%;产朊假丝酵母和嗜酸乳杆菌双菌组合的发酵效果优于三菌和四菌发酵,发酵后产物的真蛋白含量最高,为13.88%。由该试验结果可以确定固态发酵葡萄皮渣的最佳菌种组合为产朊假丝酵母+嗜酸乳杆菌。     

不同酵母菌种富硒能力比较与发酵条件优化

将啤酒酵母、产朊假丝酵母、克鲁斯假丝酵母和葡萄汁酵母4种酵母菌株分别接种到不同硒浓度的YEPD琼脂培养基中,观察不同酵母菌株的耐硒能力;比较4株酵母菌株在相同硒浓度下的生长情况以及有机硒的转化率,选出1株富硒能力强的酵母,并对发酵条件进行优化,确定最佳的硒添加量和添加方式。结果表明:啤酒酵母的耐硒能力和富硒能力均为最强,当硒添加量为20μg/mL时,在发酵12,18和24 h分3次添加,啤酒酵母的综合富硒效果最好,活菌数为2.74×108cfu/mL,有机硒转化率为85.5%。     

什么是“饲料酵母”?

轻工业部标准QB596—82“酵母及其检验方法”中规定,饲料酵母系由亚硫酸纸浆废液、木材水解液、糖蜜等为原料,经热带假丝酵母菌、产朊假丝酵母菌等发酵而制得的可作为家畜、家禽等优良蛋白质饲料的产品。但近年来市场上出现不少与上述定义不相符合的产品,所采用的原料和生产工艺也不相同,其产品并非纯粹的酵母菌体,而是酵母等菌体     

利用产朊假丝酵母生产铬酵母发酵工艺的研究

对利用产朊假丝酵母生产富铬酵母进行了研究。通过在培养基中添加Cr3＋的方法制备富铬酵母,测定富铬酵母生物量及铬含量。对培养条件进行了优化,确定了最优培养条件为培养温度30℃、培养基铬添加量100μg/mL、接种量体积分数为4%～6%（V/V）、培养起始pH值为5.0、培养时间20h。在该优化条件下获得的富铬酵母生物量可达1.83g/100mL,有机铬含量可达2210μg/g。试验结果可以为富铬酵母的生产开发奠定一定的技术基础。     

洋葱伯克霍尔德氏菌Lu10-1产生抗菌活性物质的发酵培养基和发酵条件优化

洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)Lu10-1是从桑叶中分离得到的一株具有抗菌及促进植物生长等多种生物学功能的内生细菌。利用基于统计学的响应面法(response surface methodology,RSM)对影响该菌产生抗细菌活性物质的发酵培养基组成和发酵培养条件进行了优化。部分重复因子试验表明,酵母浸粉和氯化钠是培养基组分中的主要影响因子,其中酵母浸粉为正效应,氯化钠为负影响;结合最陡爬坡路径逼近最大响应区域和中心组合设计及响应面分析,确定了培养基中主要配方的最佳质量浓度为蔗糖17.0 g/L、酵母浸粉5.855 g/L、氯化钠4.519 g/L、磷酸二氢钾0.2 g/L。通过PB(plackeet-burman)试验发现接种量和发酵温度是该菌株产生抗菌活性物质发酵条件中的主要影响因子,经中心组合设计法优化的最佳发酵条件为:接种量0.027 7 mL/mL,摇瓶装液量100 mL,发酵温度30.29℃,培养基初始pH6.2,培养时间42 h。     

响应面法优化贝莱斯芽孢杆菌P9菌株生孢培养基及条件的研究北大核心

研究旨在优化贝莱斯芽孢杆菌P9菌株的生孢培养基及条件。试验以贝莱斯芽孢杆菌P9的菌体浓度和生孢率为指标,通过单因素结合响应面试验对生孢培养基成分进行优化。结果显示,最佳生孢培养基成分为葡萄糖2.0 g/L、牛肉膏4.0 g/L、酵母浸粉4.0 g/L,MgCl_(2)8.0 g/L、KH_(2)PO_(4)6.0 g/L、NaCl 0.01 g/L、1 mol/L的CaCl_(2)6 mL、1 mol/L的MnCl_(2)6 mL,此条件下贝莱斯芽孢杆菌P9的生孢率可达95.37%。研究表明,此方法可为贝莱斯芽孢杆菌在动物饲料生产中应用提供一定的试验基础。     

饲料发酵耦合黄曲霉毒素B_1的生物脱除方法研究

饲料原料在贮运和加工过程中常被黄曲霉毒素污染,造成严重的经济损失和食品安全隐患。利用单因素比较法确定产朊假丝酵母(Candida utilis)JXU2066在饲料发酵过程中的脱毒控制方法。结果表明:在被黄曲霉毒素污染的玉米中添加适量的麸皮和尿素,加水至体系含水量为45%,调节pH为4~5,以固体基质含量8%的比例接入菌龄为72 h的产朊假丝酵母JXU2066,并且根据堆温翻动2次,30 d后的发酵饲料中黄曲霉毒素含量由230μg/kg降为8.7μg/kg,粗蛋白含量为15.6%,发酵饲料色泽金黄,气味芳香。利用产朊假丝酵母在固态发酵条件下实现黄曲霉毒素的生物脱除,操作简单,脱毒率高,具有良好的应用价值。     

产朊假丝酵母对奶牛体外瘤胃发酵参数及日粮营养物质消化率的影响

本研究采用体外发酵技术探讨产朊假丝酵母添加水平对奶牛瘤胃发酵参数及日粮营养物质消化率的影响。分别取添加产朊假丝酵母(0、3.3×106、1.65×107、3.3×107、1.65×108、3.3×108CFU/mL)的6个试验组日粮2 g,在体外混合30 mL瘤胃液和60 mL磷酸缓冲液,在39℃厌氧培养24 h。结果表明:产朊假丝酵母所有添加水平均对pH以及干物质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、纤维素和半纤维素的消化率没有显著影响(P>0.05);1.65×108、3.3×108CFU/mL添加水平较其他水平显著提高累积产气量(P<0.05);3.3×107、1.65×108、3.3×108CFU/mL添加水平较空白组显著提高了瘤胃氨态氮、总挥发性脂肪酸和丙酸的浓度(P<0.05),降低了乙酸及乙酸:丙酸值。试验表明,产朊假丝酵母在改善奶牛能量负平衡上具有良好的应用前景。     

葵花盘复合生物蛋白饲料的应用研究

结合我国多年来生产生物蛋白饲料的经验,以产朊假丝酵母、米曲霉和康氏木霉组成复合菌剂,对利用向日葵花盘粉进行混合发酵来生产生物蛋白饲料的工艺和应用进行了研究。试验得到其最佳工艺条件为产朊假丝酵母、米曲霉和康氏木霉,按2:2:1配比成复合菌剂,1.5%的接种量加入到葵花盘粉固体发酵培养基中,发酵基质水分含量50%,以尿素为氮源,添加量1.5%,pH自然,30℃发酵48h后,产物中粗蛋白含量最高。所得生物蛋白饲料粗蛋白、粗脂肪、灰分、粗纤维和水分含量分别为15.45%、2.01%、8.64%、9.16%和20.39%,且有酒香味,适口性好。