柔嫩艾美耳球虫研究概况

本文简要介绍柔嫩艾美耳球虫生活史、生物学特性、卵囊形状、以及卵囊产量的影响因素，对柔嫩艾美耳球虫日龄与粪便卵囊产量进行科学的分析，旨在为疾病的治疗和预防提供依据。     

柔嫩艾美耳球虫毒害艾美耳球虫变位艾美耳球虫交叉免疫试验

柔嫩艾美耳球虫毒害艾美耳球虫变位艾美耳球虫交叉免疫试验黄兵，赵其平，何林华，吴薛忠，陈兆国，史天卫（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所，２００２３２）鸡感染球虫后会产生一种抵抗再次感染的免疫反应，这种免疫反应具有种的特异性，即感染某种球虫不能保护抵抗另...     

杀球灵对柔嫩艾美耳球虫作用的研究

本文报道了杀球灵(Diclazuril)对鸡柔嫩艾美耳球虫E.tenella的杀灭作用、作用峰期及停药后作用持续时间。以1ppm的推荐剂量混于饲料,分别于感染前2天、感染当天、感染后1天开始饲喂,对经口一次人工感染8×10~4/只柔嫩艾美耳球虫卵囊的鸡有显著的保护作用。试验鸡不出现血便、盲肠组织学检查及粘膜刮取物镜检均不见合子及卵囊,感染后2天给药则其抗球虫作用显著降低。故可认为杀球灵作用峰期是子孢子和第一代裂殖体阶段。停药后其抗球虫作用很快减弱或消失。     

壳寡糖对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡免疫增强效果的评价

为研究壳寡糖对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡免疫效果的影响,本研究先通过笼养试验筛选壳寡糖的有效剂量,再在平养试验中考察免疫期间鸡只体重、攻虫后的抗球虫指数(Anticoccidial index, ACI)以及血清抗体、细胞因子水平等指标。结果显示,笼养试验中5.0 mg和7.5 mg壳寡糖组的免疫增强效果均优于2.5 mg壳寡糖组。平养试验中5.0 mg和7.5 mg壳寡糖组免疫期间雏鸡体重和ACI均高于无佐剂免疫组,且7.5 mg壳寡糖组的ACI稍高于5.0 mg组;在免疫期间壳寡糖可明显促进鸡只CD8分子的增殖,而在免疫初期对CD4分子的增殖具有抑制作用,可明显刺激鸡只TNF-α的产生,而对IgM、IgG抗体以及TGF-β1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10等细胞因子均无显著性影响(P<0.05)。     

柔嫩艾美耳球虫对鸡的免疫预防研究

由于耐药虫株的产生、耐药周期的日益缩短和研制新药费用的增加,药物防治球虫病这一传统方法面临着严峻的挑战,而免疫预防则有着巨大的潜力和应用前景。本试验研究了柔嫩艾美耳球虫活卵囊在不同剂量和方法免疫雏鸡后,对大剂量卵囊攻击的保护性。     

柔嫩艾美耳球虫低温保存方法的研究

在对球虫的研究、疫苗生产和球虫病的诊断中离不开球虫的保存和保种,目前常规的保存方法是将球虫的孢子化卵囊保存在2.5%重铬酸钾中,置于4℃,一般保存期不超过1年.1年内必须进行鸡体传代,以保持球虫活力,这不仅浪费大量的人力和物力,而且增加了虫种被污染的机会.     

柔嫩艾美耳球虫病毒的鉴定

鸡球虫病是由艾美耳属（Eimeria）的一种单细胞寄生性原虫引起的严重危害养禽业发展的重要疾病之一,遍及世界各地。感染鸡的艾美耳属球虫中,国外已报道在巨型艾美耳球虫（E.maxima）,堆型艾美耳球虫（E.acervu-lina）,毒害艾美耳球虫（E.necatrix）和布氏艾美耳球虫（E.brunetti）中发现了病毒粒子或病毒RNA。但是作为危害最严重的柔嫩艾美耳球虫是否有病毒感染,国内外迄今尚无报道。本研究首次在柔嫩艾美耳球虫中发现病毒并对其进行了鉴定。通过核酸分析、RNA依赖的RNA聚合酶（RDRP）活性和电镜形态观察对病毒进行鉴定。核酸酶的敏感性试验结果表明在柔嫩艾美耳球虫总核酸电泳图谱上观察到的大小分别为1.4、2.4和3.6kb的3条病毒带均不能被DNA酶（100mg/L）降解,但可被RNA酶（1.0mg/L）降解,表明这些核酸为RNA。另外,这些核酸不能被高盐浓度（0.3mol/L NaCl）RNase A（10mg/L）降解,但可被低盐浓度（0.015mol/L NaCl）RNase A（10mg/L）降解,并且采用α-32P标记的UTP掺入法测得该病毒样核酸具有RNA依赖RNA聚合酶（RDRP）活性,表明这些核酸为双链RNA（dsRNA）。利用蔗糖梯度离心和透射电镜技术对柔嫩艾美耳球虫病毒进行了分离和鉴定。电镜负染观察到柔嫩艾美耳球虫病毒粒子外观呈球形,二十面体,无囊膜,直径38nm。     

柔嫩艾美耳球虫的抗原分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳，免疫印渍技术，用抗柔嫩艾美耳球虫抗体分析了第二代型殖子、子孢子和未孢子化卵囊的蛋白质。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳银染表明第二代裂殖子主要蛋白质为：１７．６ＫＤ，２９．９ＫＤ，３８．９ＫＤ和５３．７ＫＤ，但用抗Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ抗体免疫印渍法检测出的主要抗原为：７８．０ＫＤ，８３．２ＫＤ和９５．５ＫＤ，这说明并不是含量高的蛋白质就是产生抗体的抗原；子孢子蛋白质含     

柔嫩艾美耳球虫YL株抗药性研究

用柔嫩艾美耳球虫杨凌株 ( YL t)对 1 4日龄雏鸡进行感染 ,检测了该虫株对 4种常用抗球虫药 (马杜拉霉素、地克珠利、克球粉和氯苯胍 )的敏感性。以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标 ,进行综合评定 ,其抗药程度分为无抗药性、轻度抗药性、中度抗药性和完全抗药性 4个等级。结果表明 ,该虫株对马杜拉霉素有轻度抗药性 ,对地克株利有完全抗药性 ,对克球粉和氯苯胍无抗药性。     

柔嫩艾美耳球虫莆田株抗药性研究

为掌握鸡场球虫抗药程度,以便制定合理用药方案,采集福建省莆田市某鸡场盲肠球虫,进行柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离和纯化;采用鸡体试验法,设立5个用药组、1个感染不用药对照组和1个不感染不用药对照组,以病变记分减少率(Reduction of lesion sores,RLS)、抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)、相对盲肠卵囊产量(Relative at oocyst production,ROP)和最适抗球虫活性百分率(Percent of optimum anticoccidial activity,POAA)4项为指标,检测该球虫对癸氧喹酯、尼卡巴嗪、地克珠利、二硝托胺和氯苯胍等5种常用抗球虫药的抗药性。结果表明:该虫株对癸氧喹酯敏感,对地克珠利、二硝托胺和氯苯胍具有完全抗药性,对尼卡巴嗪为中度抗药性,说明目前莆田市球虫抗药性非常严重,癸氧喹酯可用于抗球虫病,其他药物应慎用或暂停使用。     

柔嫩艾美耳球虫交叉抗药性试验

以雏鸡为试验对象,以抗球虫指数(ACI)为判断指标,检测5 mg/kg马杜霉素,70 mg/kg盐霉素,1 mg/kg 地克珠利对抗盐霉素株、抗地克珠利株和实验室保存的敏感株的控制效果。结果表明,马杜霉素对3 个虫株都有很好的抑杀效果,地克珠利也可有效地控制抗盐霉素株,同时,盐霉素也可有效地控制抗地克珠利株,说明盐霉素和地克珠利2种药物之间没有交叉抗药性。     

纳米氧化锌抑制柔嫩艾美耳球虫感染的作用研究

为探究纳米氧化锌(ZNP)对鸡球虫病的疗效。将180只13日龄的雏鸡随机分为对照组(Con),模型组(Mod),ZNP低剂量组(ZNP-10,10 mg/kg)、ZNP高剂量组(ZNP-20,20 mg/kg),地克珠利组(Dic, 1 mg/kg),ZNP药物对照组(Dcp, 20 mg/kg)。试验以6×10⁴个/mL柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊经口感染15日龄雏鸡(1 mL/只)建立鸡柔嫩艾美耳球虫感染动物模型,并在13日龄开始灌胃给药,每日1次,连续8 d。试验结束时,采集盲肠组织,进行病变评分;采用RT-qPCR及ELISA的方法检测盲肠扁桃体中炎性因子的表达量。结果显示,Mod组出现大量血便,剖检可见盲肠芯,盲肠组织切片中可见虫体,出血明显;ZNP-20组改善了球虫感染的特征病变,抗球虫指数(Anticoccidial index, ACI)达到159;相较于Mod组,ZNP能够降低IL-1β和TNF-α mRNA水平,提高GM-CSF、TGF-β、sIgA、IgM和IgG的蛋白表达(P<0.01)。结果表明,20 mg/kg ...     

穿心莲片对鸡柔嫩艾美耳球虫感染的防治作用

穿心莲作为清热解毒类中药,具有抑制炎症、抗感染等药理活性,其对鸡球虫感染所致肠道炎症的作用尚不清楚。本文以柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)接种制作雏鸡球虫感染模型,在接种前1d至接种后6d连续口服给予不同剂量的穿心莲片剂(50mg,100mg,200mg)。试验结果表明,200mg组中感染鸡的血便排出推迟了1d,且明显降低了血便记分和粪便卵囊排出量,盲肠病变记分也相应降低。对E.tenella感染引起的增重以及中枢免疫器官(胸腺、法氏囊)指数的下降有回升作用,且表现出一定的剂量效应。不同剂量组的抗球虫指数均低于160。这说明穿心莲片能减轻雏鸡E.tenella的感染程度,但未达到中效抗球虫药的疗效。     

柔嫩艾美耳球虫泛素蛋白功能初步研究

泛素是真核生物中普遍存在的一种小分子蛋白,广泛参与细胞内蛋白质的平衡代谢过程,对维持细胞内环境的稳态具有重要作用.为研究泛素在柔嫩艾美耳球虫中的功能,本研究利用PCR方法克隆了柔嫩艾美耳球虫泛素(EtUb)基因,将其亚克隆至原核表达载体pET28a(+),转入大肠杆菌BL21,诱导表达制备rEtUb蛋白,用纯化的重组蛋...     

柔嫩艾美耳球虫早熟株免疫剂量研究

为了确定柔嫩艾美耳球虫（Eimenatenella）早熟株合适的免疫剂量,本文设立7个早熟株免疫攻虫组、1个不免疫攻虫组和1个不免疫不攻虫组,免疫组的免疫剂量为孢子化卵囊100、200、400、600、800、1000和2000个／羽,经嗉囊感染,7日龄首次免疫,14日龄以同等剂量进行第二次免疫,21日龄以8×10^4个／羽的同源母株进行攻虫,28日龄结束试验,以存活率、增重、肠道病变记分、血便数量、卵囊减少率为观测指标。对免疫保护效果较好的3个免疫剂量进行重复试验,同时设置商品化球虫疫苗对照组,免疫方法、试验周期、试验指标同第一批试验。结果显示：攻虫后,不免疫攻虫组出现5％死亡,而各免疫组来出现死亡;各免疫组卵囊减少率在61．57％～69．52％;200～2000免疫组的增重与不免疫不攻虫组差异不具备显著统计学意义（P〉0．05）;600～2000免疫组的肠道病变记分和血便数量均明显少于不免疫攻虫组（P〈0．05）。用600、800和1000进行重复试验,三个免疫组攻虫期间均来出现死亡,而不免疫组和疫苗对照组均出现5％死亡;三个免疫组的增重均明显高于不免疫攻虫组和疫苗对照组（P〈0．05）;早熟株免疫组的肠道病变记分和血便数量明显低于不免疫攻虫组（P〈0．05）,而疫苗对照组与不免疫攻虫组的相当（P〉0．05）;卵囊减少率在66.30％-78．75％,高于疫苗对照组的51．82％。结果表明,该柔嫩艾美耳球虫早熟株保持了良好的免疫原性,不同免疫剂量均能诱发鸡产生免疫保护力,其中600、800和1000个／羽的免疫效果均优于疫苗对照组,可考虑以600个／羽作为该早熟株在疫苗制备中的推荐免疫剂量。     

柔嫩艾美耳球虫保护性抗原应用研究进展

鸡球虫病是一种重要的鸡寄生虫病,长期以来药物防治成为抗球虫病的主要手段,但由于药物的残留和耐药性等问题,使得鸡球虫病的免疫学研究受到广泛关注。本文对柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段重要的免疫保护性抗原研究进行了综述,旨在为鸡球虫病的免疫防治提供新思路和参考。     

柔嫩艾美耳球虫侵入相关抗原研究进展

鸡球虫作为胞内寄生原虫给禽类养殖业的发展带来严重危害。论文详细介绍了柔嫩艾美耳球虫微线蛋白、棒状体蛋白、表面抗原、折光体蛋白及热休克蛋白等侵入相关抗原,并对其侵入宿主细胞的相关机制进行了阐述。同时,概述了宿主感染虫体后所发生的细胞及体液免疫应答,并对未来鸡球虫病的相关研究做了展望。     

鸡柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法的建立

为了建立一种能够快速实现对鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和巨型艾美耳球虫(E.maxima)同时进行检测的双重PCR方法,基于2种艾美耳球虫各自的ITS-1基因筛选2对特异性引物,对制备的阳性DNA样品进行PCR扩增,凝胶电泳检测结果显示,分别在约450bp和150bp处出现目的条带。对PCR反应中的退火温度、MgCl2浓度、DNA模板量等进行优化。结果表明,当退火温度为59℃、MgCl2浓度为2.5mmol/L、DNA模板量为2μL时,双重PCR扩增结果最佳。特异性检测结果显示,所建立的双重PCR对环形泰勒虫、羊巴贝斯虫、隐孢子虫和蓝氏贾第虫的扩增结果均呈阴性,表明建立的方法具有较高的特异性。成功建立了柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法,为临床中鸡球虫病的快速诊断提供了一种可靠的检测方法。