乌鲁木齐市宠物源粪肠球菌和屎肠球菌耐药性及耐药基因检测

为了解乌鲁木齐市宠物源粪肠球菌和屎肠球菌对临床常用抗菌药物的耐药性及其耐药基因携带情况,在乌鲁木齐市多家宠物医院、警犬基地、犬养殖基地采集宠物(犬和猫)直肠粪样449份进行粪肠球菌和屎肠球菌的分离鉴定,通过琼脂稀释法测定10种抗菌药物的最小抑菌浓度,利用PCR方法检测11种耐药基因。结果分离鉴定出宠物源粪肠球菌和屎肠球菌共计123株,其中粪肠球菌81株,屎肠球菌42株。宠物源粪肠球菌和屎肠球菌对四环素和庆大霉素的耐药率较高,对阿米卡星、恩诺沙星和环丙沙星呈不同程度耐药,对阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林、万古霉素以及利奈唑胺高度敏感,仅部分屎肠球菌对亚胺培南表现耐药。检出aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、tetM、tetA和optrA耐药基因;其余被检耐药基因未检出。耐药粪肠球菌以同时携带aac(6′)/aph(2″)+aph(3′)-Ⅲ+tetM耐药基因为主;耐药屎肠球菌以携带tetM耐药基因为主。宠物源粪肠球菌与屎肠球菌对被检抗菌药物存在不同程度耐药,均对四环素类药物耐药最严重、对应耐药基因检出率也最高。建议临床治疗应根据细菌耐药性结果进行合理用药,并持续加强对宠物源肠球菌耐药性监测。     

动物源性肠球菌的分离鉴定及耐药性分析

了解肠球菌的耐药性,对控制该菌引起的感染,研制新一代抗菌药物具有重要价值。本试验从84种样品中分离鉴定出69株肠球菌,通过抗生素耐药性试验,发现肠球菌对多数抗生素表现出不同程度的耐药性,如青霉素耐药达52.2%、四环素达71.0%、万古霉素达85.5%。本文对肠球菌的分离与鉴定,药敏试验及风险分析三个方面作了分析和阐述。     

四川省凉山州健康奶牛粪便源细菌的分离及耐药性检测

为调查四川省凉山州健康奶牛肠道不同细菌的耐药情况,课题组成员从2013年起采集不同奶牛场健康奶牛粪便样本,按细菌常规分离、鉴定方法对粪便样本中的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和肠球菌进行了分离、纯化及鉴定,采用纸片扩散法测定各分离菌对不同抗菌药物的敏感性。结果表明:从198份粪便样本中共获得294株菌株,其中大肠杆菌138株、金黄色葡萄球菌51株、肠球菌105株;分离菌株中大肠杆菌、肠球菌对多数抗菌药物呈低水平耐药(耐药率低于30%);金黄色葡萄球菌则表现出较高的耐药性。说明凉山州健康奶牛胃肠道主要的共生菌(大肠杆菌、肠球菌)耐药情况不严重,但金黄色葡萄球菌的耐药状况比较严重,应加强对金黄色葡萄球菌耐药性监测,奶牛养殖业应谨慎使用抗菌药物。     

河南省某地区健康人源及动物源肠球菌种属分布及耐药性差异研究

为了解河南省某地区社区健康人源及动物(鸡、猪)源肠球菌种属分布及对多种抗菌药物的耐受情况,以及研究不同来源肠球菌的流行分布和抗菌药物耐药表型特点,本试验应用肠球菌选择性培养基对220份人源及动物源粪便样本进行肠球菌的分离培养,并对分离菌株采用16S rDNA序列分析结合API生化板条进行种属鉴定,纸片扩散法对分离肠球菌进行9种抗菌药物的敏感性检测.肠球菌分离及鉴定结果显示肠球菌总分离率、粪肠球菌分离率及屎肠球菌分离率在人源、鸡源、猪源3种来源间均差异显著(P<0.05):肠球菌总分离率为70.91%(156/220),猪源肠球菌分离率最高(86.00%),人源肠球菌分离率最低(62.63%),且人源与猪源肠球菌分离率差异显著(P<0.018);人源粪便样本中分离率最高的为屎肠球菌(31.36%),鸡源、猪源肠球菌中粪肠球菌分离率最高,分别为28.17%和32.00%.抗菌药物敏感性结果显示肠球菌对多种药物的耐药率在人源、鸡源、猪源3种来源间差异显著(P<0.05),且3种来源肠球菌的多药耐药率差异有统计学意义(P<0.05).人源肠球菌对红霉素(69.35%)、环丙沙星(37.10%)、氨苄西林(19.35%)等抗菌药物耐药率较其他来源的肠球菌要高;鸡源肠球菌对四环素(88.24%)、氟苯尼考(11.76%)、氯霉素(21.57%)等抗菌药物耐药率较其他来源的肠球菌要高;猪源肠球菌对抗菌药物耐药率总体较低,且其多药耐药率(7.84%)也低于人源(35.48%)及鸡源肠球菌(30.19%).提示,健康人及动物粪便样本中肠球菌种属分布不同及对抗菌药物耐药率有差别,并对多种常见抗菌药物耐药率较高,有关部门应加强社区人群及动物等非临床来源肠球菌耐药检查、监测,进而更好的了解中国耐药肠球菌的流行现状,更有效的控制耐药肠球菌的传播.     

北京市伴侣动物源肠球菌的抗菌药物耐受情况调查

为研究北京市伴侣动物源肠球菌对常见抗菌药物的耐受情况,于2015年5月至2016年1月以北京市某宠物医院门诊就诊犬、猫作为采样对象,采集犬、猫自然排出的粪便作为样品,共得到样本320份。采用选择性培养基进行菌株分离和VITEK-2型全自动微生物分析仪进行肠球菌的鉴定;对分离鉴定的菌株进行8类11种常见抗菌药物敏感性试验;同时进行高水平庆大霉素和高水平链霉素耐受的检测试验,对受试肠球菌的耐药性和多重耐药性进行分析。共得到菌落形态及生化特性不同的非重复的肠球菌318株,其中粪肠球菌（49.06%）和屎肠球菌（29.87%）分离率较高。受试肠球菌对高水平庆大霉素和高水平链霉素的耐药率分别为39.94%和43.40%,对四环素（78.62%）、红霉素（67.30%）和奎诺普丁-达福普汀耐药率（43.71%）较高,对替加环素全部敏感,对万古霉素和呋喃妥因非耐药率也很高（均为98.74%）。受试肠球菌对1类到7类抗菌药物有不同程度的耐药性,多重耐药现象普遍,多重耐药率高达57.23%。耐受4类抗菌药物的数量最多（n=65株）。经分析共得到44种不同的耐药谱,以耐受4类药物的红霉素-奎诺普丁-达福普汀-四环素-高水平氨基糖苷类耐药谱占比最高（45/318,14.15%）。本研究证实受试的北京市伴侣动物源肠球菌对常见抗菌药物的耐药程度较高,多重耐药情况普遍存在,应加强对其耐药性的监测工作。     

金黄色葡萄球菌氟喹诺酮的耐药抑制剂研究进展

金黄色葡萄球菌是引起人和动物感染的一种重要病原菌,它可以对氟喹诺酮等多种抗菌药物产生耐药性,严重影响临床治疗效果。NorA蛋白介导的药物主动外排成为葡萄球菌对氟喹诺酮类药物耐药的重要机制,利血平等作为NorA外排蛋白抑制剂,可有效降低其耐药性的产生。CCCP等能量抑制剂可加强细菌对氟喹诺酮类药物的摄取量。文章从葡萄球菌对氟喹诺酮类药物耐药机制、耐药抑制剂作用途径和能量抑制剂影响等方面,简要介绍金黄色葡萄球菌氟喹诺酮的耐药抑制剂研究进展。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在动物源细菌耐药性监测中的研究应用

细菌鉴定是细菌耐药性监测过程中的重要工作环节之一,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption ionization time-off flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)能够高效鉴定细菌。为了快速监测五家养殖场来源的大肠杆菌和肠球菌的临床耐药特征,本研究利用MALDI-TOF MS和微量肉汤稀释法,快速鉴定临床分离的大肠杆菌和肠球菌,并对其进行耐药表型检测。结果显示,MALDI-TOF MS实现了对临床分离菌株(31株大肠杆菌和34株肠球菌)的快速鉴定;鸡源大肠杆菌和肠球菌的耐药情况最为严重,其次为羊和牛。其中,鸡源的大肠杆菌均对四环素(100%)和氨苄西林(91.67%)耐药率最高,肠球菌对苯唑西林(62.07%)耐药率较高。研究结果表明,不同动物源细菌临床耐药性表型严重程度有所不同,与此同时,MALDI-TOF MS技术可以同时实现对动物源大肠杆菌和肠球菌的快速鉴定,值得在动物源细菌耐药性检测领域推广应用。     

生鲜牛乳中病原菌的分离鉴定与药物敏感性分析

为了检测生鲜牛乳中病原菌种类及其对药物的敏感程度,从郑州市附近奶牛场采集5个生鲜牛乳样本,通过细菌形态、培养特性、生化试验进行鉴定,采用微量液体二倍稀释法测定了24种临床常用抗菌药物对临床分离菌的抗菌活性。结果表明:5个牛奶样本分离出了赫尔曼埃希菌、铜绿假单胞菌、耶尔森菌及屎肠球菌,这些细菌仅对氟喹诺酮类(盐酸环丙沙星和恩诺沙星)、氯霉素类(氯霉素和氟苯尼考)敏感,盐酸环丙沙星的最小抑菌浓度(MIC值)低至0.5μg/m L。说明这些分离菌交叉耐药和多重耐药情况较严重,不仅对β-内酰胺类药物存在耐药性,而且对其他抗菌药物(如氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类)存在多重耐药的情况。     

河南省部分地区猪和鸡源粪肠球菌的分离鉴定与耐药性分析

为了掌握河南省猪、鸡源粪肠球菌的耐药情况,从4个不同地区的规模化养殖场猪、鸡抽取样品480份,通过对细菌的分离培养和纯化,采用PCR和BD Phoenix~(TM)-100全自动微生物鉴定系统对分离的粪肠球菌进行鉴定,并通过微量肉汤稀释法对分离菌株进行药物敏感性分析。结果显示,共分离菌株254株,分离率为52.9%。分离菌株对头孢西丁、泰妙菌素、克林霉素、磺胺异恶唑、红霉素、替米考星等耐药严重,耐药率均在90%以上,90%以上的菌株对7类及7类以上的抗菌药物耐药。表明河南省猪、鸡源粪肠球菌耐药情况严重,食用动物的环境卫生有待进一步改善,防止耐药菌的扩散和蔓延。     

细菌耐药性产生对毒力影响的研究进展

抗菌药物如氟喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、杆菌肽类和氨基糖苷类等广泛用于细菌所致疾病的治疗,然而抗菌药物的广泛应用导致药物对细菌选择性压力不断增加,细菌耐药性也日益严重。尽管细菌耐药性和毒力基因发挥的作用不同,但是细菌对抗菌药物产生耐药性会对细菌的毒力具有一定的影响。本文将对细菌对氟喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、杆菌肽类和氨基糖苷类药物耐药后对毒力的影响进行综述。     

五种动物源肠球菌耐药性监测

为了解不同动物源肠球菌耐药性,试验选用10种常用抗生素,采用统一材料、方法(KB法)和判断标准[美国临床实验室标准化协会(CLSI)2007年版]对从5种不同动物源(人、狗、鸡、牛、猪)粪便中分离得到的肠球菌进行耐药性检测。结果表明:共分离得到肠球菌646株,包括人源肠球菌146株、狗源肠球菌138株、鸡源肠球菌128株、牛源肠球菌111株、猪源肠球菌123株;各动物源肠球菌对四环素和利福平耐受性偏高,对青霉素G、万古霉素和高浓度庆大霉素耐受性偏低,其中耐万古霉素肠球菌47株,平均耐药率为7%;各动物源肠球菌的耐药性表现为鸡源肠球菌最强,猪源肠球菌、狗源肠球菌、人源肠球菌次之,牛源肠球菌最低。说明滥用抗生素已造成人和畜禽动物肠球菌较为普遍的耐药,应引起临床及畜禽业高度重视。     

猪、鸡源分离粪肠球菌的核糖体分型及耐药性分析

对上海地区1个规模化养猪场和1个规模化养鸡场分离鉴定的40株粪肠球菌,采用微量肉汤稀释法对12种抗菌药物进行药敏试验,采用Riboprinter^®微生物基因指纹鉴定系统检测分离菌株的基因指纹图谱,分别检测分离菌株中的核糖体型和耐药性。结果表明,在40株粪肠球菌中,80%以上为多重耐药菌株,有4株猪源粪肠球菌对万古霉素耐药,其中有2株表现为对万古霉素高度耐药（MIC>64 mg/L）,且对链霉素和庆大霉素同时表现为高度耐药（MIC>2 048 mg/L）。从耐药表型和核糖体分型共同分析粪肠球菌的耐药性,发现多重耐药性严重,同一核糖体型菌株的耐药表型并非完全一致。     

河南省猪源粪肠球菌的分离、鉴定与耐药性分析

旨在掌握河南省猪源粪肠球菌的耐药情况。从规模化猪场抽取样品300批,采用常规方法进行粪肠球菌分离、培养、纯化,应用全自动细菌鉴定/药敏系统和PCR技术对分离菌株进行种水平鉴定,利用微量肉汤稀释法对分离菌株进行药物敏感性分析。结果表明,有154株分离菌被鉴定为粪肠球菌,总体分离率为51.33%;分离菌株对头孢西丁、克林霉素、泰妙菌素、头孢噻呋、磺胺异噁唑、红霉素、替米考星等抗菌药物耐药严重,耐药率均在90%以上,对强力霉素(多西环素)、氟苯尼考、青霉素、复方新诺明耐药性相对较强,耐药率在60%~90%。综上提示,河南省猪源粪肠球菌耐药情况严重。     

细菌耐药性产生的原因、机制及防治措施

20世纪40年代青霉素的问世将人类带入了抗生素时代,抗感染治疗由此进入了新纪元,感染性疾病的病死率大大降低。半个世纪以来,人类一直把抗菌药物作为抗感染治疗最有力的武器。然而随着抗菌药物的广泛应用,感染性疾病的治疗又遇到了新的挑战——细菌对抗生素产生了耐药性,而此种耐药性表现为抗菌药物使用得越多耐药性亦变得越严重。目前已发现某些细菌对现有的几乎全部抗菌药物产生耐药,超级细菌的出现使人类有可能再次回到面临感染而无药可医的困境,控制细菌耐药性的增长已成为医学界乃至全人类的当务之急。正在逐渐建立自己的细菌耐药监测网络,监测细菌耐药的流行状况和规律,研究细菌产生耐药性的机制。     

猪源粪肠球菌对常用抗菌药物的耐药性分析及其酰胺醇类耐药基因的检测

通过检测猪源粪肠球菌对临床常用抗菌药物的耐药表型及其酰胺醇类耐药基因的携带率,了解猪源粪肠球菌耐药性流行特点,进而为抗菌药物的合理使用提供参考。2016—2017年间在江苏部分猪场分离的230株粪肠球菌对四环素(100%)、红霉素(98.3%)和氟苯尼考(97.0%)的耐药率最高(达95%以上),其次为庆大霉素(78.7%)、链霉素(75.2%)、麻保沙星(70.9%)、利奈唑胺(54.8%)、利福平(30.4%)、氨苄西林(1.7%)和青霉素G(0.4%),未发现万古霉素耐药菌株。多重耐药分析显示大多数菌株同时对5～8种药物耐药,有1株菌同时对10种药物耐药。进一步对223株氟苯尼考耐药菌株进行了酰胺醇类相关耐药基因fexA、fexB、floR、cfr和optrA的PCR检测,其检出率由高到低分别为fexA(91.9%,205株)、floR(66.4%,148株)、optrA(21.5%,48株)、fexB(1.8%,4株)和cfr(1.4%,3株),且大部分菌株同时携带多种耐药基因。结果表明:猪源粪肠球菌对抗菌药物的耐药情况严重,尤其对兽医专用抗菌药物氟苯尼考产生较高的耐药性值得重视,临床兽医应结合具体药敏结果合理使用抗菌药物,并加强对肠球菌耐药性的监测。     

控制细菌耐药性临床用药措施

随着抗菌药物在兽医临床上的广泛应用，细菌对药物的耐药性问题也日益严重，表现在不同年代菌株耐药率随时间的推移而呈递增趋势，不同年代菌株耐药谱向多重耐药递增的趋势。细菌耐药性的产生常常导致药物的无效治疗，文献报道大肠杆菌对“盐酸环丙沙星”的耐药性在三年时间内从10％上升到100％，药物有效率从100％下降到33．3％。解决致病菌耐药的出路，一是不断研究和生产新的抗菌药物，二是重视继续发挥已有抗菌药物的作用，     

鸡蛋药物残留研究进展

国内外鸡蛋药物残留主要包括合成抗菌药物（磺胺类药物、喹诺酮类药物和硝基咪唑类药物）、抗生素类药物（四环素类、大环内酯类、氯霉素类及其他抗生素类药物）、抗球虫药物（聚醚类药物）及农药等。这些药物都是常见的家禽用药,由于其效果好、价格低廉、抗菌谱广等被广泛应用。但药物残留直接危害人体健康,且细菌对该类药物较易产生耐药性,耐药菌株可通过食物链向人类传递,此外鸡蛋药物的残留也可导致人体内敏感细菌产生耐药性,该现象已引起了全世界的关注。目前对动物性食品药物残留进行监测是确保食品安全和人类健康的最后一道防线。因此鸡蛋常见药物残留的监测技术的研究,可确保鸡蛋食用安全性,提高鸡蛋的质量,保障人体健康,增强国际贸易竞争力。     

2022年北京市宠物源细菌耐药性监测浅析

为了解北京市宠物源细菌的抗菌药物耐药情况,2022年,笔者对北京市四个城区的四家宠物医院的犬、猫共计50份样本的肛拭子进行了研究。试验对样品中的大肠杆菌和肠球菌首先进行了分离培养和质谱鉴定,然后采用微量肉汤稀释法分析分离菌株的耐药表型。结果共分离出大肠杆菌25株、肠球菌25株（屎肠球菌14株、粪肠球菌11株）。大肠杆菌耐药率最高的2种抗菌药为四环素和氨苄西林,多重耐药菌占44%;肠球菌耐药情况较严重,粪肠球菌耐药率最高的抗菌药物为磺胺异噁唑,屎肠球菌耐药率最高的抗菌药物为磺胺异噁唑、头孢西丁和红霉素,二者多重耐药菌占分离株总数的100%。综上,北京地区宠物源大肠杆菌、肠球菌的耐药情况较为严峻,且多重耐药现象突出,需要加强对宠物抗菌药使用的监督与管理。     

林麝源屎肠球菌LS170308株多重耐药基因岛PRI1分析

屎肠球菌作为条件致病菌在临床上报道的越来越多,主要引起宿主心内膜炎、败血症等,目前关于屎肠球菌的耐药性研究已日益突出,其原因主要在于该菌对β-内酰胺类药物天然耐药及对万古霉素等糖肽类抗生素耐药性不断增强,但该菌耐药性传播机制仍在进一步研究中。本研究拟描述1株林麝源屎肠球菌多重耐药基因岛的特征,显示出该基因岛在不同属细菌中的传播。采用单分子测序技术对这株林麝心源屎肠球菌进行从头测序,同时采用分子生物学工具对该基因岛进行分析。结果显示:这株屎肠球菌染色体上携带多个耐药基因,其中携带ANT(9)、ErmA的Tn554转座酶和携带AAC(6′)-le-APH(2″)-la的一对插入元件IS256共同构成的一个多重耐药基因岛来自金黄色葡萄球菌,该基因岛对大环内酯类、林可酰胺类及氨基糖苷类抗生素具有抗性。结果表明从死亡林麝内脏组织中分离得到1株屎肠球菌,该菌株携带有一个多重耐药基因组岛PRI1,该类型基因岛目前在屎肠球菌中并未有相关报道,同时这株菌来自野生动物,可为野生动物源细菌耐药性传播提供数据支持。     

氟苯尼考残留对消费者肠道细菌耐药性的影响

随着抗菌药物氟苯尼考在兽医临床的大量应用,氟苯尼考在动物性产品中的残留时有报道。试验采用抗菌药物对肠道细菌的最小抑菌浓度测定的方法,通过体外诱导,使人体肠道内埃希大肠杆菌、粪肠球菌和产气夹膜梭菌对氟苯尼考产生耐药性,检测这些耐药细菌对其他药物的敏感性变化,来研