哺乳动物腔前卵泡卵母细胞的体外培养

阐明哺乳动物卵泡体内发生的一般模式，回顾腔前卵泡体外培养的研究历史，着重论述腔前卵泡的获取及鉴定标准，常用的培养体系和影响腔前卵泡体外发育的多种因素。     

哺乳动物腔前卵泡的研究进展

哺乳动物的卵巢中,含有数万个卵泡．其中绝大部分为原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡等腔前卵泡。然而能发育到成熟并排卵的卵泡为数甚少,约99．9％的卵泡在腔前卵泡阶段闭锁、退化,这无疑是动物遗传和育种资源的极大损失。目前,卵母细咆是休外受精胚胎移植、性别控制、胚胎分割、动物克隆和转基凶等胚胎生物技术研究和开发必不可少的材料,卵母细胞来源匮乏成为制约这些技术研究进展的主要因素,因此卵巢腔前卵泡的开发无疑是解决这一难题的有效途径。本文介绍了腔前卵泡研究的历史和现状以及最新的研究情况．目的是为有关的研究工作提供有益的启示和参考。     

哺乳动物腔前卵泡体外培养及研究进展

哺乳动物卵巢内的原始卵泡库是雌性生殖资源的储存库,但大部分卵泡在腔前阶段已退化闭锁了,这无疑是对这一资源的巨大浪费。因此,越来越多的学者致力于腔前卵泡的开发和利用,建立了一系列的培养体系,尤其在小鼠上做的比较成功,已经得到了少量后代。文章主要就卵泡的发生发育过程,腔前卵泡的分离方法,培养基的选择,不同直径腔前卵泡培养体系的建立,影响腔前卵泡发育的因素及研究进展进行了阐述,为进一步完善腔前卵泡培养体系,揭示其发育机理提供参考。     

哺乳动物腔前卵泡的分离与培养

哺乳动物卵巢中绝大多数卵母细胞以无腔形式存在，有腔卵泡所占比例很少。通过建立腔前卵泡的培养体系，获取大量的具有成熟和受精能力的卵母细胞，将极大地促进体外受精、核移植等胚胎工程技术的发展，并有利于研究卵泡和卵母细胞的发育规律。     

哺乳动物腔前卵泡体外培养研究进展

哺乳动物腔前卵泡的体外培养可充分挖掘优良母畜潜在的遗传和繁殖潜力,为体外胚胎生产提供大量的卵母细胞来源,因而正日益受到人们的重视。本文就哺乳动物腔前卵泡的体外发育中的培养系统、培养方法,培养形式以及影响其体外发育的因素等几个方面进行了阐述。     

哺乳动物腔前卵泡培养方法研究进展

目前，各种动物腔前卵泡的研究已经取得了一定进展。但体外培养获得的卵母细胞质量与体内相比还有一定的差距。有效的腔前卵泡培养方法是腔前卵泡研究取得成功的关键。腔前卵泡的培养方法有普通培养法、二维培养法、三维培养法以及培养板倒置培养；另外依据卵泡培养密度又可分为单个卵泡和多个卵泡培养法。研究者可以根据不同的需要选择合适的培养方法。     

哺乳动物腔前卵泡研究进展及其在珍稀濒危野生动物上的应用

回顾哺乳动物（牛、羊、猪、小鼠、大鼠、兔以及仓鼠等）腔前卵泡的研究历史和现状并探讨腔前卵泡研究在珍稀濒危野生动物（猫科动物、犬科动物和灵长类动物等）上应用的可能性。     

哺乳动物腔前卵泡的分离

随着胚胎移植、体外受精、性别鉴定、动物克隆、基因转移等技术的发展,卵母细胞来源匮乏成为制约这些技术研究进展的主要因素;开辟胚胎移     

哺乳动物腔前卵泡的分离与培养

哺乳动物卵巢中绝大多数卵母细胞以无腔形式存在，有腔卵泡所占比例很少。通过建立腔前卵泡的培养体系，获取大量的具有成熟和受精能力的卵母细胞，将极大地促进体外受精、核移植等胚胎工程技术的发展，并有利于研究卵泡和卵母细胞的发育规律。     

山羊腔前卵泡卵母细胞体外发育与体外成熟的研究

通过比较3种培养基、5个培养系统和4种培养方法对卵母细胞生长率的影响,结果发现,就卵母细胞生长率而言。以MEM HEPES培养液＋5％FCS＋40μg/mlFSH 20ng/ml IGF-1 2mmol/L cAMP 2mmol/L次黄嘌呤培养系统为佳。在腔前卵泡体外培养过程中,12个卵泡经腔期发育,约占同等培养条件下卵泡九的2％（12／603）。培养卵泡经腔期发育并未改善其卵母细胞的成熟率（0／12）。腔前卵泡卵母细胞经过不同时间的体外培养,发现经12和14d培养结不的卵母细胞中,有81％（47／58）生发泡明显迁移至质膜下;培养14d的卵母细胞中,约16．4％（9／55）产生pbI但不排出,因而在胞质中见到极体;;培养16d得到1枚排出pbI的孤雌激活卵;同时发现培养16－18d卵母细胞退化率明显增高（P＜0．01）。推测山羊腔前卵泡卵母细胞体外培养的适宜时间为16d。     

哺乳动物腔前卵泡研究进展及其在珍稀濒危野生动物上的应用

回顾哺乳动物(牛、羊、猪、小鼠、大鼠、兔以及仓鼠等)腔前卵泡的研究历史和现状并探讨腔前卵泡研究在珍稀濒危野生动物(猫科动物、犬科动物和灵长类动物等)上应用的可能性.     

哺乳动物小腔卵泡的体外发育

随着胚胎工程技术和辅助生殖技术的发展,对胚胎数量、质量要求都在增加。超数排卵、卵母细胞体外成熟等增加了卵母细胞利用率,但卵巢内大腔卵泡非常有限。因此小腔卵泡作为一种巨大的卵母细胞来源越来越受到众多学者关注。研究小腔卵泡卵母细胞体外成熟和体外受精发育机制,有利于提高小腔卵泡卵母细胞的发育力。     

哺乳动物卵泡发育过程中的超微结构研究进展

通过对体内发育与体外培养卵泡及其卵母细胞超微结构进行比较。从微细结构上客观评定体外培养卵泡的形态，活力，代谢状况及功能完整性，界定体外生长卵泡所处发育阶段。从而为确立和完善腔前卵泡体外培养体系提供可靠的理论依据。     

体外培养牛腔前卵泡卵母细胞微绒毛的超微结构观察

牛腔前卵泡在无血清下体外培养 1 5d。超微结构研究显示 :培养前腔前卵泡卵母细胞微绒毛短小 ,分布均匀 ;培养 6d时 ,微绒毛略变粗长 ,但数量减少 ;培养 1 5d时 ,微绒毛增多 ,变长 ,斜向或垂直插入已经形成的透明带中。微绒毛的存在和变化表明腔前卵泡在该无血清体系中发育正常。     

猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟研究

本实验通过与2～6mm猪卵泡卵母细胞相对比，研究了猪2mm以下卵泡卵母细胞的体外成熟。结果如下(1)由2mm以下卵泡获得的小(直径100.29±7.9μm)、中(109.36±3.71μm)和大(118.90±2.46μm)3类卵母细胞培养48h的成熟率分别为0、22.31％和45.45％。(2)2mm以下卵泡卵母细胞的成熟率(52.63％)显著低于2～6mm卵泡卵母细胞的成熟率(80.39％)。(3)以含PFF的培养液培养2mm以下卵泡卵母细胞其成熟率(53.54％)显著高于不含PFF的对照组(22.77％)。(4)在培养的前24h加入PMSG、后24h去除PMSG，其成熟率(41.86％)与含PMSG的培养液连续培养48h的成熟率(50.0％)无显著差异，而显著高于前24h不加PMSG，后24h加入PMSG培养的成熟率(5.41％)；也显著高于以下不含PMSG的培养液连续培养48h的成熟率(3.3％)。     

牛有腔卵泡卵母细胞体外成熟的研究

试验从屠宰场收集了 4 8头青年黄牛、34头青年水牛的卵巢共 16 4个 ,共回收可用卵母细胞 86 4枚。水牛平均每个卵巢可回收 3.2 2枚可用卵母细胞 ,相当于黄牛 (6 .72枚 )的一半。试验结果表明 :水牛卵巢生长卵泡少 ,卵母细胞产量少、质量差 ;3种采集黄牛卵泡卵母细胞的方法 ,用抽吸加切割法平均从每个卵巢回收的可用卵数 (7.71枚 )都极显著高于抽吸法 (6 .19枚 )和切割法 (6 .4 4枚 ) (P <0 .0 1) ,但是该法手续繁杂 ,适于一次且只能收集少量卵巢时使用 ;在黄牛和水牛卵母细胞成熟培养液中用 0 .3%PVP代替 10 %FBS ,牛卵母细胞的体外成熟率无显著差异 (P >0 .0 5 )。     

小鼠腔前卵泡体外培养研究进展

哺乳动物卵巢中有数量丰富的腔前卵泡,小鼠腔前卵泡卵母细胞从开始尝试分离至今已经获得试管后代,为在动物生产中的应用奠定了良好的理论基础和技术路线。文章简要地综述了小鼠腔前卵泡体外培养的方法,主要讨论了血清、生殖激素等培养液添加成分对小鼠腔前卵泡培养的影响及小鼠腔前卵泡体外培养技术的发展前景。     

山羊卵母细胞冷冻保存的研究进展

卵母细胞的冷冻保存在胚胎工程技术方面有重要意义。主要概述了山羊卵泡卵母细胞和腔前卵泡冷冻保存的研究进展,以期为后续研究工作提供参考。     

哺乳动物卵母细胞发育机理的研究进展

卵母细胞的成熟过程是一个复杂的减数分裂过程，许多分子参与了这个过程的调控，本文就卵母细胞成熟抑制因子（OMI）、成熟促进因子（MPF）、生长分化因子（GDF）、微管辅助蛋白（MAP）、激素、Ca^2 及钙调素等对卵母细胞发育调控机理作一综述。     

猪腔前卵泡体外培养研究进展

哺乳动物卵巢中有数量丰富的腔前卵泡,腔前卵泡体外发育的研究,对于揭示卵子发生和卵泡发育的内在规律有重要意义,并可以最大限度利用卵巢资源促进动物繁殖,保护濒临灭绝物种及人类生殖健康。猪腔前卵泡自开始研究以来,已取得了很大的进展。作者简要阐述了猪腔前卵泡培养方法、培养条件的研究进展及其体外培养技术存在的问题和发展前景。